蒸发光散射检测器_ELSD_应用概况
简述蒸发光散射检测器的特点及应用
简述蒸发光散射检测器的特点及应用蒸发光散射检测器（Evaporative Light Scattering Detector，ELSD）是一种常用于分析化学和生物化学领域的检测器。
它通过蒸发溶剂中的溶质，利用光散射的原理对样品进行检测和分析。
蒸发光散射检测器具有以下特点和应用：1. 特点：(1) 无需特定波长的光源：蒸发光散射检测器是一种全波长通用的检测器，不需要特定波长的光源。
这使得它可以适用于各种溶剂和样品类型，无需进行光源的更换和调整。
(2) 灵敏度高：蒸发光散射检测器对于非挥发性和热稳定性差的样品具有很高的灵敏度。
相比于传统的紫外-可见吸收检测器，ELSD 可以检测到低至纳克级的溶质浓度。
(3) 宽线性范围：蒸发光散射检测器具有宽广的线性响应范围，能够准确测量不同浓度范围内的溶质浓度。
这使得ELSD在溶质浓度变化范围大的样品分析中具有较好的适用性。
(4) 适用性强：蒸发光散射检测器适用于各种溶剂类型和化合物的检测，包括有机化合物、无机离子、脂质、多糖等。
同时，ELSD也适用于样品分离技术，如高效液相色谱（HPLC）、超临界流体色谱（SFC）等。
(5) 无需色谱柱：蒸发光散射检测器可以直接检测样品中的溶质，无需色谱柱进行分离。
这使得ELSD在色谱分析中可以避免色谱柱带来的分离效率、分离时间和样品损失等问题。
2. 应用：(1) 药物分析：蒸发光散射检测器在药物分析领域中得到广泛应用。
通过对样品中的药物成分进行测量，可以用于药物研发、药效学评价等方面。
ELSD可以检测到非极性和极性药物成分，具有很高的灵敏度和选择性。
(2) 食品安全：蒸发光散射检测器在食品安全领域中被广泛应用。
通过对食品中的添加剂、农药残留、重金属等进行分析，可以快速准确地判断食品的安全性和质量。
ELSD可以检测到低浓度的残留物，具有较好的检测效果。
(3) 环境分析：蒸发光散射检测器在环境分析领域中也具有重要的应用。
通过对环境样品中的污染物、有机物、无机离子等进行测量，可以评估环境质量和污染程度。
ELSD各产品简介解读
美国格瑞斯Alltech 3300ELSD蒸发光散射检测器Alltech ELSD 3300 是Grace公司所生产的用于高效液相色谱系统的蒸发光散射检测器，能分析任何挥发性低于流动相的化合物。
ELSD 的分析应用领域包括：碳水化合物，药物，脂类，甘油三脂，未衍生的脂肪酸和氨基酸，聚合物，表面活化剂，营养滋补品，及组合分子库等。
ELSD 3300 提供当今最先进的蒸发光散射检测技术。
它能提供纳克级范围的灵敏度。
直接基于Windows的软件界面可提供一系列直观的菜单选?项来执行检测器的操作，包括用于简化方法开发过程的方法优化向导、多种语言和诊断测试及故障排除功能。
ELSD 3300还有紧凑、易于摆放的特征，能将其很容易的放置在有限的试验室空间。
报价：150000元奥泰的市场占有率比较高，不错，有800、2000、2000ES、3000的，还有惠泽的和英国PL 的经济些灵敏噪音低，有极好的基线稳定性检测限可低至纳克级简单一步一步的方法指导可以帮您"傻瓜式"的建立检测器设置参数可以很方便的取出需要清洁或维护的部件小巧小巧的体积设计占有最小的空间位置ELSD的检测过程3300ELSD技术指标光源配有平行光路校正的激光二极管，650nm，30mV输出，IIIB级别检测器元件硅光电二极管加热温度范围室温~120℃，步进1℃雾化气体首选氮气；校正至4.0L/min输入压力60-80psig典型的操作范围 1.0-2.0L/min气流控制数字式质量流量控制通入流动相流速不大于3.0mL/min模拟输出满量程为1V或10mV通讯输入端：TTL/接触关闭为自动归零、关闭气体、启动和待命输出端：接触关闭为错误条件和常规事件下关闭泵数据端口：USB,RS232，以太网（Ethernet）用户界面全色、基于Microsoft Windows ?的图式LCD（液晶显示器），带有数字键盘电源120/240V,50/60Hz尺寸29.5cm高×26.2cm宽×49.5cm深重量16KgIEC/FDA分级级别1激光产品，符合21 CFR Subpart J生产标准满足所有适用安全性和EMC标准，经CE,UL和CSA认证操作控制安装驱动后可由Agilent Chemstation和EZChrom Elite/EZ Start控制SEDEX 85 LT-ELSD低温型蒸发光散射检测器产品详细信息SEDEX 85 LT-ELSD低温型蒸发光散射检测器技术参数光源：LED（470nm）检测元件：高灵敏度光电倍增管,数字信号处理检测限：100pg（十二醇聚氧乙烯醚 C12EO8 micro-H PLC）典型定量检测量：0.5 - 5ug蒸发温度：室温到100ºC，调节精度1ºC蒸发温度：两种基本设定，即可满足绝大多数要求流动相流量：100uL/min-5mL/min可选喷雾头种类：4种（HPLC，CC，Micro，UPLC）气体消耗量：<3.0L/min气体要求：>5L/min的氮气或空气，2 - 4.5Bar基线噪音：水相低于1毫伏/小时，非水相低于3毫伏/小时（GAIN）信号输出：0 - 1VGAIN值：1 - 12（2'' 2048）数据传输：100Hz计算机接口：RS-232软件控制：可选，控制所有参数，可编程Agilent驱动软件：可选触发信号控制：零点，自动关机，定时关机GLP规范：审核、密码、管理模式操作参数显示：内置微处理器，通过面板控制，LCD显示安全保护：全内置，无需额外辅助保护载气流速调节：无需，已最优化设计维护：自动清洗功能，可视，方便操作分析技术：HPLC，LC/MS，制备色谱检测样品范围：半挥发性物质、不挥发性物质、热不稳定化合物典型应用：高灵敏度，方法开发和优化体积和重量：250 x 480 x 550 mm，18.5 Kg （40lbs）电源：230V/50Hz 1.7A特点：改进的光学设计，大大提供灵敏度。
蒸发光 散射检测法
蒸发光散射检测法
蒸发光散射检测法（evaporative（light（scattering（detection，简称蒸发光散射检测法（ evaporative（light（scattering（detection，简称ELSD）是一种常用的液相色谱检测器。
它基于溶质在热气流中挥发，产生气溶胶，进而被激光源照射后产生散射光的原理进行检测。
ELSD的工作原理是：当流动相通过检测器时，部分溶剂会在高温下挥发，形成气溶胶。
这些气溶胶颗粒在激光束的照射下会产生散射光，其强度与气溶胶颗粒的数量成正比。
因此，通过测量散射光的强度，就可以得到样品中溶质的含量。
ELSD具有灵敏度高、响应速度快、线性范围宽、重复性好等优点。
它可以用于没有紫外吸收或紫外吸收较弱的物质的检测，如糖类、氨基酸、生物碱等。
此外，由于ELSD不依赖于样品的光学性质，因此对样品的前处理要求较低，适用于复杂的样品基质。
然而，ELSD也有一些局限性。
例如，它不能用于检测挥发性物质，因为这些物质在热气流中会完全挥发掉。
此外，ELSD的灵敏度受到温度和流速的影响，需要严格控制实验条件。
蒸发光散射检测器ELSD 简介
两种类型ELSD
A型-所有液滴进入漂移管及流动池(又称为 “无气溶胶分流 No Aerosol Splitting”) B型-部分液滴分流排掉；只有一部分进入 漂移管及流动池(“气溶胶分流Aerosol Splitting”)
A型ELSD-不分流操作
所有样品从喷雾器 进入漂移管及流动 池 需要较高温度才能 完全蒸发流动相； A型ELSD只有不分 流一种操作模式
# 9202
1. 2. 3. 4.
羟基苯甲酸甲酯 羟基苯甲酸乙酯 羟基苯甲酸丙酯 羟基苯甲酸丁酯
Alltech Econosphere®, C18, 5µ m, 150 x 4.6 mm Methanol:Water (90:10) 0.8mL/min
Impactor ‘Off’
Column: Mobile Phase: Flowrate:
5.5-7.5 and 9.3-11.3
挥发性的流动相改性剂#2
Volatile Mobile Phase Modifiers
pKa pKb pH Range BP MP
Ion-Pair Reagents Pentafluoropropionic Acid五氟丙酸 Heptafluorobutyric Acid七氟丁酸 ~0.6 ~0.6 ~0.6 ~0.6
Mobile Phase: Acetonitrile:Water (75:25) Column Temp: 30°C
碳水化合物的梯度洗脱
# 7576 (Isocratic)
Carbohydrates
1. 2. 3. 4. 5. 果糖 葡萄糖 蔗糖 麦芽糖 乳糖
Column: Flowrate: Mobile Phase: Detector:
ELSD(蒸发光散射检测器)
蒸发光散射检测器(ELSD)简介前期，在「talk」和「Applications」上介绍了蒸发光散射检测器，许多读者来信要求「进一步介绍ELSD」。
这次，就ELSD进行谈话。
■使用ELSD？ELSD（Evaporative Light Scattering Detector）是柱洗脱液进行喷雾，流动相溶剂蒸发，留下的不挥发成分用光照射，检测它的散射光的检测器。
也就是说，与流动相在一起但未蒸发的物质基本上都可检测，因此称为「Universal Deteetor」。
实际上，这种ELSD，早在20多年前已经出现，但由于存在灵敏度和稳定性等难点，未能广泛普及。
近年来，特别是由于药品部门的需求提高，经过多次改良，性能也显著提高，再次受到注目。
■ELSD的原理图1表示的是岛津ELSD-LT的检测原理。
ELSD的检测过程分①柱洗脱液的喷雾，②流动相的蒸发和③不挥发成分散射光的检测三步。
柱洗脱液在喷雾器中用氮或空气进行喷雾。
然后进入称为漂移管的温度调节管中，流动相蒸发去除，只将不挥发成分送入检测器。
在检测器用光照射这些成分，它的散射光用光电倍增管进行检测。
图2是检测部的构造图。
■ELSD vs RID没有UV吸收，也都能检测……这句话，想起示差折光检测器（RID）。
RID是利用试样成分与流动相的折射率的差进行检测，而通常由于它们的折射率多少都有些差，基本上什么都能检测。
然而，如果检测原理完全不同的ELSD与RID相比较，会是怎样呢？[ELSD的优点]首先是灵敏度。
利用糖类分析进行比较时，ELSD高5-10倍S/N。
其次，使用RID时易产生烦恼的基线漂移。
由于RID是检测流动相与试样的极小的折射率差，流动相的折射率必须经常固定，处于稳定状态。
但是由于折射率受微小的温度变化和流量变化的影响，即使最新的装置在高灵敏度分析时也很难取得笔直的基线。
何况，梯度洗脱还有许多意想不到的情况。
而ELSD就没有这些烦恼的事情。
特别是适用于梯度洗脱，这点是没有UV吸收的多成分分析中强有力的检测手段。
主要品牌蒸发光散射检测器参数对比和设计原理
主要品牌蒸发光散射检测器（ELSD）参数对比和设计原理蒸发光散射检测器(ELSD检测器)是一种通用型的色谱检测器，可检测挥发性低于流动相的任何样品，蒸发光散射检测器ELSD工作时在辅助气体作用下，将流动相雾化，形成的液雾通过加热而蒸发，此时溶解在流动相中不易挥发的样品即形成微颗粒物，这些微颗粒物由辅助气体推动进入光束通道，造成光束散射。
通过测定散射光的强度即可预测样品颗粒的数量，从而测定样品纯度。
蒸发光散射检测器灵敏度比示差折光检测器高，对温度变化不敏感，基线稳定，适合与梯度洗脱液相色谱联用。
蒸发光散射检测器已被广泛应用于中药成分分析、碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸、药物以及聚合物等的检测。
蒸发光散射检测器技术的主要优点：·可检测挥发性低于流动相的任何样品；·流动相低温雾化和蒸发，对热不稳定和挥发性化合物亦有较高灵敏度；·广泛的梯度和溶剂兼容性，无溶剂峰干扰；·辅助载气提高了检测灵敏度，保持检测池内的清洁，避免污染；·高精度雾化和蒸发温度控制，保证高精度检测；·可与任何HPLC系统连接。
二、主要品牌蒸发光散射检测器ELSD基本结构依据ELSD的设计原理，ELSD的结构由三大部分组成：即雾化处理结构，蒸发结构和散射光检测结构。
第一步：雾化处理结构，流动相与辅助气混合，在辅助气的压力作用下从一小孔中喷出而形成浓雾，整个装置称为喷嘴或称雾化器。
流动相雾化后形成的液雾（雾珠）由于均匀性及一致性差，因此必须进行处理，否则影响其有效蒸发，此过程称为分流。
低温分流技术设计，实现了低温挥发，特别有利于半挥性化合物的测定及高水相流动相的应用。
第二步：蒸发结构，经过第一部处理的雾珠进一步流向经加热处理的区域，此时雾珠在热的作用下不断挥发形成气体，挥发性差的样品从流动相雾珠中析出而形成颗粒物。
这一装置称为蒸发区或漂移管。
漂移管也有两种设计方式，即螺线管式和直管式设计。
高效液相色谱蒸发光散射检测器
01
02
03
色谱柱选择
根据目标化合物的性质选 择合适的色谱柱，如C18、 C8、氨基柱等。
流动相选择
根据目标化合物的极性和 溶解度选择合适的流动相， 如水、甲醇、乙腈等。
洗脱程序优化
通过调整洗脱程序中的梯 度、流速等参数，实现目 标化合物的有效分离和检 测。
数据采集、处理及分析方法
01
02
03
04
研究生物大分子、细胞和组织的相互作用， 揭示生命活动的奥秘。
政策法规影响及市场机遇挑战
1 2 3
政策法规推动
各国政府加强对食品药品安全和环境保护的监管， 推动高效液相色谱蒸发光散射检测器的需求增长。
市场机遇
随着全球经济的复苏和科技创新的加速，高效液 相色谱蒸发光散射检测器市场将迎来新的发展机 遇。
高效液相色谱蒸发光散射检测器
目录
• 引言 • 蒸发光散射检测器结构与工作原理 • 高效液相色谱蒸发光散射检测器实验方法 • 结果讨论与实际应用案例 • 仪器维护与故障排除指南 • 发展趋势与未来展望
01 引言
高效液相色谱技术概述
高效液相色谱（HPLC）是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的分离分析技术。 HPLC基于样品中各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同，实现组分的分离。
常见故障类型及诊断方法
压力异常
可能原因包括堵塞、泄漏、气泡等，应检查 相应部件并采取相应措施。
灵敏度下降
可能原因包括检测器污染、光源衰减等，应 清洗检测器或更换光源。
基线不稳
可能原因包括光源老化、流动相污染等，应 更换相应部件或清洗流路。
色谱峰异常
可能原因包括色谱柱老化、样品污染等，应 更换色谱柱或重新处理样品。
ELSD各产品简介要点
美国格瑞斯Alltech 3300ELSD蒸发光散射检测器Alltech ELSD 3300 是Grace公司所生产的用于高效液相色谱系统的蒸发光散射检测器，能分析任何挥发性低于流动相的化合物。
ELSD 的分析应用领域包括：碳水化合物，药物，脂类，甘油三脂，未衍生的脂肪酸和氨基酸，聚合物，表面活化剂，营养滋补品，及组合分子库等。
ELSD 3300 提供当今最先进的蒸发光散射检测技术。
它能提供纳克级范围的灵敏度。
直接基于Windows的软件界面可提供一系列直观的菜单选?项来执行检测器的操作，包括用于简化方法开发过程的方法优化向导、多种语言和诊断测试及故障排除功能。
ELSD 3300还有紧凑、易于摆放的特征，能将其很容易的放置在有限的试验室空间。
报价：150000元奥泰的市场占有率比较高，不错，有800、2000、2000ES、3000的，还有惠泽的和英国PL 的经济些灵敏噪音低，有极好的基线稳定性检测限可低至纳克级简单一步一步的方法指导可以帮您"傻瓜式"的建立检测器设置参数可以很方便的取出需要清洁或维护的部件小巧小巧的体积设计占有最小的空间位置ELSD的检测过程3300ELSD技术指标光源配有平行光路校正的激光二极管，650nm，30mV输出，IIIB级别检测器元件硅光电二极管加热温度范围室温~120℃，步进1℃雾化气体首选氮气；校正至4.0L/min输入压力60-80psig典型的操作范围 1.0-2.0L/min气流控制数字式质量流量控制通入流动相流速不大于3.0mL/min模拟输出满量程为1V或10mV通讯输入端：TTL/接触关闭为自动归零、关闭气体、启动和待命输出端：接触关闭为错误条件和常规事件下关闭泵数据端口：USB,RS232，以太网（Ethernet）用户界面全色、基于Microsoft Windows ?的图式LCD（液晶显示器），带有数字键盘电源120/240V,50/60Hz尺寸29.5cm高×26.2cm宽×49.5cm深重量16KgIEC/FDA分级级别1激光产品，符合21 CFR Subpart J生产标准满足所有适用安全性和EMC标准，经CE,UL和CSA认证操作控制安装驱动后可由Agilent Chemstation和EZChrom Elite/EZ Start控制SEDEX 85 LT-ELSD低温型蒸发光散射检测器产品详细信息SEDEX 85 LT-ELSD低温型蒸发光散射检测器技术参数光源：LED（470nm）检测元件：高灵敏度光电倍增管,数字信号处理检测限：100pg（十二醇聚氧乙烯醚 C12EO8 micro-H PLC）典型定量检测量：0.5 - 5ug蒸发温度：室温到100ºC，调节精度1ºC蒸发温度：两种基本设定，即可满足绝大多数要求流动相流量：100uL/min-5mL/min可选喷雾头种类：4种（HPLC，CC，Micro，UPLC）气体消耗量：<3.0L/min气体要求：>5L/min的氮气或空气，2 - 4.5Bar基线噪音：水相低于1毫伏/小时，非水相低于3毫伏/小时（GAIN）信号输出：0 - 1VGAIN值：1 - 12（2'' 2048）数据传输：100Hz计算机接口：RS-232软件控制：可选，控制所有参数，可编程Agilent驱动软件：可选触发信号控制：零点，自动关机，定时关机GLP规范：审核、密码、管理模式操作参数显示：内置微处理器，通过面板控制，LCD显示安全保护：全内置，无需额外辅助保护载气流速调节：无需，已最优化设计维护：自动清洗功能，可视，方便操作分析技术：HPLC，LC/MS，制备色谱检测样品范围：半挥发性物质、不挥发性物质、热不稳定化合物典型应用：高灵敏度，方法开发和优化体积和重量：250 x 480 x 550 mm，18.5 Kg （40lbs）电源：230V/50Hz 1.7A特点：改进的光学设计，大大提供灵敏度。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
中华中医药学刊蒸发光散射检测器(E LS D )应用概况张悦晗,甄汉深,成 莉(广西中医学院,广西南宁530001) 摘 要:目的:介绍蒸发光散射检测器(E LS D )的仪器构造,特点,工作原理,应用等。
总结其在中药成分分析中的优势和应用情况。
方法:对有关高效液相色谱蒸发光散射检测器法测定中药成分的文章进行综述。
结果:蒸发光散射器在测定没有紫外吸收或仅在紫外末端有吸收的成分上有较大的优势和较广泛的应用。
结论:蒸发光散射检测器在中药成分分析中有广泛的应用前景。
关键词:蒸发光散射检测器;高效液相色谱法;工作原理;应用中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1673-7717(2007)04-0831-03The App li ca ti o n o f I n tr o duced Evapo ra tive L i gh t -Sca tte ring D e tec t o r (ELSD )ZHANG Yue 2han,Z HE N Han 2shen,CHE NG L i(Guangxi Traditi onal Chinese M edical University,nanning 530001,Guangxi,China ) Ab s trac t:O bjective:I ntr oduced evaporative light -scattering detect or (E LS D )instru ment structure,characteristic,p rinci p le of work,app licati on and s o on .Analyze in Chinese native medicine ingredient analysis superi ority and app lica 2ti on situati on .M ethods:E LS D deter m inati on Chinese native medicine ingredient article t o the related highly effective liq 2uid chr omat ography t o carry on the su mmary .R esu lts:E LS D or only has the abs or p ti on in the deter m inati on not ultravi olet abs or p ti on in the ultravi olet ter m inal on the ingredient t o have the big superi ority and the wides p read app licati on .Conclusion:E LS D have the wides p read app licati on p r os pect in the Chinese native medicine ingredient analysis. Ke y wo rd s:E LS D;HP LC;p rinci p le of work;app licati on 收稿日期:2006-11-13作者简介:张悦晗(1980-),女,江西南昌人,2004级硕士研究生,主要从事药物质量与成分分析的研究。
目前,高效液相色谱仪日益普及,所分析的样品范围也越来越广。
检测器作为高效液相色谱仪的重要组成部分,其发展在某种意义上决定着HP LC 技术的进步。
高效液相色谱检测器中除了最常用的紫外检测器之外,还有二极管阵列检测器(di ode -array detect or ),荧光检测器,示差折光检测器,蒸发光散射检测器(evaporative light -scattering de 2tect or ),化学荧光检测器,质谱检测器,电化学检测器(elec 2tr oche m ical detect or ),拉曼光谱检测器,核磁共振检测器等。
检测器的研究其共同方向均朝着灵敏度高,重现性好,响应快,线形范围宽,适用范围广,对流动相流量和温度波动不敏感,死体积小等方面发展。
近年E LS D 在国内外广泛的应用于类酯、表面活性剂、糖、氨基酸、季铵盐、高聚物以及甾体化合物等的检测。
现就HP LE -E LS D 的应用进展作一概述。
1 仪器的首次出现1966年,Ford 等第一次介绍了E LS D,当时它的名字叫蒸发分析器(evaporative analyzer ),E LS D 在发展过程中还用过不同名字,散射测浊器(nephel ometer ),质量检测器(mass detect or ),光散射检测器(light scattering detect or )。
首台蒸发光散射检测器(evaporative light -scattering detec 2t or;E LS D )是由澳大利亚的Uni on Carbide 实验室研制开发的,并在20世纪80年代初转化为商品[1]。
2 仪 器2.1 组成及工作原理 总体上讲,蒸发光散射检测器(E LS D )由3部分组成。
即雾化器,加热漂移管和光散射池。
雾化器与分析柱出口直接相连,柱洗脱液进入雾化器针管,在针管的末端,洗脱液和充入的气体(通常为氮气)混合形成均匀的微小液滴,可通过调节气体和流动相的流速来调节雾化器产生的液滴的大小。
漂移管的作用在于使气溶胶中的易挥发组分挥发,流动相中的不挥发成分经过漂移管进入光散射池。
在光散射池中,样品颗粒散射光源发出的光被检测器检测产生电信号。
2.2 检测步骤 蒸发光散射检测器(E LS D )是强有力的检测工具,能检测挥发性比流动相低的任何样品。
E LS D 的检测依次分为3个步骤:①雾化:从色谱柱中洗脱出来的组分和惰性气体混合,产生出包含流动相和样品的气溶胶。
②蒸发:作为气溶胶的流动相在通过加热的漂移管时被蒸发掉。
③检测:留下来的不挥发性样品颗粒和流动相蒸气通过一个光散射池,暴露在光照之下,用光传感器测定样品的散射光产生电信号,信号与样品的质量成比例关系。
2.3 光源 光源部分,A lltech2000型E LS D 为激光二极管,其强度在30000h 工作寿命中是稳定的,也有的光源使用钨灯。
在使用寿命期间光源强度的降低能引起检测灵敏度的逐渐下降。
激光二极管和卤素灯比较来说,激光的长寿命使得避免经常更换灯源,也能有较好的重现性。
2.4 影响检测的因素 影响E LS D 响应的因素可分为4138中华中医药学刊个方面:①载气气压,雾化器的设计,流动相的组成和流速都将影响雾化过程。
②被分析物的浓度和体积质量等决定了进入光散射池的气溶胶中的颗粒的直径。
③被分析物的折射指数,光源发出的光的强度和波长,光电倍增管的位置等将影响散射光强度。
④光电倍增管的灵敏度和入射光的强度决定了检测的效率反映为实验者所观测的峰面积。
2.5 与紫外检测器(UV)示差折光检测器(R I)的比较 紫外检测器因其高灵敏度和稳定性,在HP LC中应用最广泛。
但它所能检测的物质必须具有吸收紫外光的生色团,而相应的流动相在检测波长下则应当是无紫外吸收的。
这一特性一定程度上限制了其能检测的物质范围和一些良好溶剂的使用。
示差折光检测器是一种通用的检测器,它是基于色谱柱流出物光折射率的变化来连续测定样品浓度。
但它对工作环境要求很苛刻,要求恒温,恒流速,且无法采用梯度洗脱,检测灵敏度也不够高。
E LS D的出现,一定程度上弥补了HP LC传统检测器的不足,特别是无紫外或紫外末端吸收的大分子有机化合物的检测,显示出极大的优越性。
其响应值不依赖于样品的光学性质,不论它具有何种官能团。
对所有样品的检测几乎具有相同的响应因子,对未知物和纯度的测定要比UV检测更容易更准确。
因为E LS D的检测是流动相被蒸发之后进行的,在梯度洗脱过程中基线较稳定,没有在R I和低波长UV检测中来自溶剂峰的干扰。
3 E LS D的应用中药的化学成分复杂,有一部分成分不存在紫外吸收或仅在紫外末端有吸收。
加上色谱分离的困难以及流动相带来的干扰,使用传统的紫外检测器对其进行定性定量分析十分困难。
E LS D在一定程度上弥补了这方面的不足,被广泛的应用于皂苷类成分、糖类成分、萜类成分、部分生物碱类成分以及其他一些成分的分析,取得了满意的结果。
3.1 皂苷类成分的分析 皂苷类成分大多没有紫外吸收,或仅在紫外末端有吸收,容易受到试剂的干扰,使用紫外检测法存在一定的不足。
就目前情况看,E LS D应用于皂苷类成分的分析的例子比较多[2]。
①黄芪甲苷:由于制剂中化学成分复杂,薄层色谱分离困难,而黄芪甲苷仅在200n m左右有弱的末端吸收;紫外检测器检测杂质干扰大,样品分离度差[3]。
王桂有等[4]采用Hypersil C18色谱柱,流动相:乙腈∶水(38∶62),流速:0.85mL/m in,黄芪甲苷在1.704～3.408μg范围内呈线性,平均回收率为100.71%,RS D为1.79%。
李涛等[5]以HP LC-E LS D法测定桃芪生血胶囊中黄芪甲苷的含量。
采用C18柱,流动相为甲醇-水(80∶20)。
黄芪甲苷含量测定的线性范围为1.272～5.088μg(r=0.9996,n=6),平均加样回收率为95.87%,RS D为1.3%。
兰燕宇等[6]建立高效液相色谱法测定强身颗粒中黄芪甲苷含量的方法。
采用C18柱,以乙腈∶水(36∶64)为流动相,流速0.5mL/m in,柱温30℃,蒸发光散射检测器检测。
黄芪甲苷进样浓度在0.05012～0.5012g/L范围内峰面积的自然对数和进样浓度的自然对数的线性关系良好,r=0.9999(n=5)。
结果证明本方法操作简便、准确、重现性好,适用于黄芪甲苷的质量控制。
②王树春等[7]采用ODS C18柱,E LS D载气流速1.6L/m in,流动相为甲醇∶水(75∶25)建立了天冬中无共轭体系的天冬皂苷甲的含量测定方法。
3.2 糖类成分的分析 糖类成分多不存在紫外吸收,定量分析主要采用分光光度法,其缺点是只能测定总糖含量,灵敏度和准确度较差。
近来有采用HP LC-E LS D方法对糖类成分进行分析的报道。
梁乾德等[8]对四物汤煎液进行稀释,醇沉等处理后,建立液相色谱-蒸发光散射(HP LC-E LS D)测定其中D-果糖、D-葡萄糖和蔗糖含量的方法,取得了良好的结果。
3.3 生物碱类成分的分析 薛燕等[9]利用HP LC-E LS D很好地测定浙贝母药材中的主要生物碱贝母素甲、贝母素乙,用于浙贝母药材的质量控制。