维生素B12生产工艺进展17页PPT
维生素B12
• 此外，胰液的重碳酸盐也可促进其在空肠 的吸收。吸收后的维生素Ｂ12依靠血浆中运 载蛋白的运输进入造血组织。人体维生素 Ｂ12的储量为1～10mg，肝脏是维生素Ｂ12 储藏的主要部位。维生素Ｂ12主要通过胆汁 排泄，并在回肠被再吸收，这种极少损失 的肝肠循环方式使维生素Ｂ12能得到完全的 保留，因此，即使是严格的素食者也要经 过许多年才会发生维生素Ｂ12缺乏。
维生素B12
维生素Ｂ12简介
• 又称钴胺素或氰钴素。一种由含钴的卟啉类化合 物组成的B族维生素。最初发现服用全肝可控制 恶性贫血症状，经20年研究，到1948年才从肝 脏中分离出一种具有控制恶性贫血效果的红色晶 体物质，定名为维生素B12。1963年确定其结构 式。1973年完成人工合成。
• 维生素Ｂ12是Ｂ族维生素中迄今为止发现最晚的 一种。维生素Ｂ12是一种含有3价钴的多环系化合 物，4个还原的吡咯环连在一起变成为1个咕啉大 环（与卟啉相似），是维生素Ｂ12分子的核心。 所以含这种环的化合物都被成为类咕啉。维生素 Ｂ12为浅红色的针状结晶，易溶于水和乙醇，在 pH值4.5～5.0弱酸条件下最稳定，强酸（pH＜2） 或碱性溶液中分解，遇热可有一定程度破坏，但 短时间的高温消毒损失小，遇强光或此外线易被 破坏。普通烹调过程损失量约30%。
放线菌发酵
• 其中主要是链霉菌属中的灰色链霉菌和橄 榄色链霉菌来发酵产维生素Bl2，而始终未 能使得维生素B12的产生处于主导地位，应 选出链霉素发酵支路的关键酶，并将其抑 制，这样便可大大提高维生索B12的获得率， 使得大量产生维生素B12成为可能。
下水道废水中提取
• 采用生物活性污泥法处理的废水中，通常含不少维生素 B12，干的活性污泥可先用水浸提，然后过滤掉固形颗粒， 之后可分离、纯化B12。 • 特点： • l、无需前培养，这样大大减少了前期投入； • 2、能耗大，尤其是浓缩这一关键性步骤将造成大 • 的能量损耗； • 3、用此方法得到的B12浓度虽并不低，但受活性污 • 泥这一来源的影响， • 由此获得的B12并不能直接进入食品或药品级产 • 晶，而通常只局限于饲料添加剂。
制药工艺学十八维生素的生产工艺精品PPT课件
概述
生产方法
（1）化学合成法 烟酸、烟酰胺、叶酸、维生素B1、B6、D、E、K等。
（2）发酵法 B12、B2，维生素C和生物素，维生素原等。
（3）生物提取法 从猪心中提取辅酶Q10，从槐花米中提取芦丁，从提取链霉素后的废液中 Nhomakorabea取B12等。
生产工艺
主要维生素的生产有三种方法。
1.微生物发酵和微藻类的生物转化法（统称 生物合成法）发展非常快。
第四篇 药物制备工艺学
第十八章 维生素发酵生产工艺
18.1 概 述
定义：维生素是一类生物生长发育起调节作 用的、化学结构不同的、小分子有机化合物， 人体内不能合成，必须从食物等中摄取。
概述
维生素有以下特点： （1）维生素是天然食物中的一种成分，是一种活性物质，对 机体代谢起调节和整合作用。 （2）维生素需求量很小。 （3）大多数维生素在体内不能合成，要从外界摄取。 （4）绝大多数维生素是通过辅酶或辅基的的形式参与体内酶 促反应体系。 （5）人体内维生素缺乏时，会发生一类特殊的疾病，称“维 生素缺乏症”。维生素并不是补品，人体每日需要量是一定的， 多摄入并不一定好，使用不当，反而会导致疾病。
泛酸 吡哆醇，吡哆醛，吡哆胺 叶酸，黄嘌呤，赤嘌呤，蝶酸等 钴胺素，氰钴氨素，羟钴胺素等 乳清酸 L－肉碱 抗坏血酸 生物素 抗毛发脱落及脂肪代谢混乱
抗癞皮病 抗皮炎 抗恶性贫血 抗恶性贫血 抗早衰 营养强化剂 抗坏血病
概述
维生素与辅酶、辅基的关系
长期以来，人们就认识到食物中缺乏某种维生素，会 导致某种疾病，维生素在机体的代谢中起着十分重要的作用，后 来陆续发现大部分维生素或者其本身就是辅酶、辅基，或者是辅 酶、辅基的组成部分。例如维生素B1（硫胺素），它在体内的辅 酶形式是硫胺素焦磷酸（TPP），是α—酮酸氧化脱羧酶的辅酶， 又如泛酸，其辅酶形式是COA，是转乙酰基酶的辅酶。
维生素B12幻灯-1122
VB12是人体必需的维生素，且很难从食物 中吸收，稀少且珍贵。目前人用VB12价格 44980元/公斤。
VB12对人体的重要作用
对血液及神经系统的重要作用
1、促进红细胞的发育和成熟，使肌体造血机能处于正常状态，预防恶性 贫血，维护神经系统健康 。
2、是神经系统功能健全不可缺少的维生素，参与神经组织中一种脂蛋白 的形成，营养神经，缓解神经疼痛。以急性神经痛最为显著。治疗轻 中度神经痛，缓解神经水肿炎症，效果良好，因局部吸收及转化问题 ，近患处效果佳。
二号工程新园区背景
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大客户销售模式
• 预防和缓解眼疲劳，预防近视、远视、预 防干眼病。
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销售价格
• 环孢素滴眼液 3ml:30mg 零售价99元/支 • 那他霉素滴眼液
5ml:250mg 零售价210元/支 10ml:500mg 零售价400元/支 • 维生素B12滴眼液 10ml:2mg 29.8元/支
• 维生素B12滴眼液：营养视神经、缓解眼疲劳等不适症状。
二、华北牌维生素B12滴眼液
了解一下维生素B12
维生素B12是相当特别的维生素 ，只有紫菜及海藻类蕴涵。而 且其形态无法被人体吸收。此 外，维生素B12也是唯一含必须 矿物质的维生素，因含钴而呈 红色，又称红色维生素，是少 数有色的维生素
第九章维生素和核酸类药物
双丙酮-2-酮基-L-古洛糖酸
图8-1 莱氏法合成维生素C的工艺路线
• 工艺流程如下： （1）菌种的获得 以D-葡萄糖为原料，加氢催化生成D-山梨醇，再 加入醋酸菌如Acetobacter suboxyclans、A．raucons、A．aceti、 A．Xylinoides等将山梨醇氧化成山梨糖，常使用的是A．suboxyclan 和A．melangenum，这是该工艺过程中关键的一步。 （2） 第一步发酵 a. 发酵的条件是温度为26～30℃，最适pH值为4.4～6.8。 b．培养基的成分： 0.5％酵母浸膏为主要营养源，山梨醇浓度为19.8％，通气量比1:1.8， 30℃培养30～40h，收率可达97.6％。可采用流加山梨醇的方式发酵； 有机氮提供氮源。 发酵结束后经低温灭菌，得到无菌的发酵液用于第二步发酵。
3. 新二步发酵法
• 该法在工艺程序、原料方面都有所简化， 收率高，应用前途广，但存在中间产物不 稳定，生产效率较低、成本高等问题。实 现工业化生产还需进一步完善。工艺路线 如图8-3。
欧文菌 D-葡萄糖
棒杆菌
2，5-二酮-D-葡萄糖酸
2-酮-L-古龙酸
维生素C
图8-3 新二步发酵法生产维生素C的工艺路线
（3） 第二步发酵
• 将氧化葡萄杆菌或假单胞杆菌经过二级种子扩大培养转移至含有上述 发酵液的培养基中，于发酵罐28～34℃培养60～72h，发酵液转化， 精制，获得维生素C。 • 注意在发酵过程需采用阳离子交换树脂将山梨醇中的金属离子去掉， 因为Ni2+，Cu2+阻止菌的发育，Fe抑制发酵。 • 该法生产的维生素C产品质量好、收率高，达60％，而且生产原料易 获得，中间产物化学性质稳定，一直是国外生产维生素C的重要方法。 此法也存在着很多缺陷，如生产工序繁多、劳动强度大、大量有机溶 剂的使用易造成环境污染等。
维生素B12
五、维生素B12
何计国
Nutrition
维生素B12又称钴胺素或氰钴素。是一种 由含钴的卟啉类化合物组成的B族维生素。
20世纪30年代，美国内科医生卡斯尔（W.B. Castle）发现在正常人胃部可分离出一种“内因 子”，但却无法在恶性贫血患者的胃分泌物中发 现，而这类恶性贫血的患者食用动物的肝脏之后， 能改善病情，卡斯尔医生便假设能预防恶性贫血 的“外因子”存在于动物的肝脏当中。1948年1949年，两位化学家在美国分离出这个抗贫血的 因子，并确定此因子为维生素B12。是迄今为止 发现最晚的一种B族维生素。
何计国
Nutrition
（三）缺乏症
吸收障碍 内因子缺乏 摄入不足 膳食缺乏见于素食者 , 由于不吃肉 食而可发生维生素 B12 缺乏 。
食品学院
何计国
Nutrition
1、恶性贫血 2、恶心，食欲不振，体重减轻 3、唇、舌及牙龈发白，牙龈出血 4、头痛，记忆力减退，痴呆 5、脊髓变性，神经和周围神经退化 6、儿童缺乏维生素B12的早期表现为精 神情绪异常、表情呆滞、少哭少闹、反 应迟钝、爱睡觉等症状，最后会引起贫 血。
Nutrition
4、作为蛋氨酸合成酶的辅酶参与同型半胱氨酸 甲基化转变为蛋氨酸。甲基 B12作为蛋氨酸合成 酶的辅酶 , 从 5- 甲基四氢叶酸获得甲基后转而供 给同型半胱氨酸，并在蛋氨酸合成酶的作用下合 成蛋氨酸。
5、促进红细胞的发育和成熟，使肌体造血机能处 于正常状态。 6、参与神经组织中脂蛋白的形成，维护神经系 统健康，是神经系统功能健全不可缺少的维生素。
食品学院
何计国
Nutrition
（五）参考摄入量
成人 2.4μg/day 孕妇2.6μg/day 乳母2.8μg/day
维生素B12的教学PPT
03
维生素B12缺乏的症状和影响
维生素B12缺乏的症状
消化系统症状
可能出现食欲不振、腹胀、腹泻 、便秘等症状。
精神症状
可能出现抑郁、焦虑、易怒等症 状。
01
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贫血
由于红细胞生成减少，可能出现 贫血症状，如乏力、头晕等。
03
04
神经系统症状
可能出现记忆力减退、反应迟钝 、手足麻木、无力等症状。
维生素B12缺乏对神经系统的影响
维生素B12是红细胞形成的必需 营养素，有助于维持红细胞的正 常形态和功能，预防贫血和相关 疾病。
02
缺乏维生素B12可能导致巨幼细 胞性贫血，表现为贫血、乏力、 头晕等症状，严重时可能导致神 经系统受损。
维持神经系统健康
维生素B12是神经系统正常运作的重 要物质，参与神经递质的合成和代谢 ，有助于维持神经元的正常功能。
维生素B12的检测方法
血液检测
通过抽取静脉血液样本，检测血 清或血浆中的维生素B12水平。
尿液检测
检测尿液中维生素B12的排泄量， 但这种方法不如血液检测准确。
微生物培养
利用某些细菌对维生素B12的依赖 性进行检测，但这种方法较为繁琐。
维生素B12缺乏的诊断标准
血清维生素B12水平低于200 pg/mL：一般认 为这是维生素B12缺乏的阈值。
缺乏维生素B12可能导致神经系统病 变，如记忆力减退、情绪异常、肢体 麻木等症状，严重时可能导致痴呆和 神经性疾病。
参与蛋白质代谢
维生素B12在蛋白质代谢中发挥重要作用，参与氨基酸的合成和分解，影响身体 的生长和发育。
缺乏维生素B12可能导致蛋白质代谢紊乱，影响身体的正常生理功能，如影响伤 口愈合、免疫功能等。
维生素生产工艺 ppt课件
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19
3、二步发酵法反应步骤
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20
4、二步发酵法生产维生素C的工艺流程
二步发酵法的整个工艺流程可分为发酵、提取、转化和精制四部分。
斜面活化
三角瓶转代
克氏瓶扩培种液
黑醋菌种液
混合菌种液
4L
4L
一步一级种子罐
二步一级种子罐
32℃±1 发酵率≧50％
一步二级种子罐
29℃±1 产酸≧3mg/ml
维生素B1
＋
维生素B2
＋
维生素B3
＋
维生素B5
＋
维生素B6
＋
维生素B8
＋
维生素B9
＋
维生素B12
维生素B13
维生素C
＋
＋
＋
（＋）
（＋）
＋ ＋ ＋
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世界产量 /（吨/年）
2000 2000 8500
1600 3
300 10 100 70000
10
三、维生素C生产工艺
维生素1.C维的生合素成C方的法合主成要方有法莱氏化学合成法 和微生物发酵合成法两种。
1985年转让给世界上生产维生素最大企业－瑞士霍夫曼•罗氏 制药公司。——我国医药工业史上首次出口技术。
二步发酵法生产工艺有酸转化工艺和碱转化工艺两种。
酸转化设备简单、流程短，但制得的维生素C破坏严重、
质量差，设备腐蚀严重，三废多，因此逐渐淘汰。
碱转化虽然流程较长、投资大，但产品质量好，故目前
绝大部分工厂均采用碱转化工艺。
1、莱氏化学合成法
1933年德国Reichstein等人首先用化学合成法制取维生素C获得成
功。
至今许多国家仍采用此方法或采用改进的莱氏法进行工业生产。
【doc】维生素B12的研究及其进展
维生素B12的研究及其进展《中国食品添加剂》ChinaFoodAddit∞20o2No.3维生素B12的研究及其进展罗棉(中国进出口商品检验技术研究所食品检验中心,北京100025)郝常明(中国食品发酵工业研究所生物技术及调味品中心,北京100027)摘要:本文对维生紊B12的生理特性,产生菌,生物合成途径,以及发酵生产和测定方法进行了详尽的阐述并对目前维生紊B12发酵生产面临的问题及前景作了分析和预测.关键词:维生紊B1z.合成途径,发酵.测定方法ResearchAdvanceinVitaminB12andItsApplicationLl-0Yi(ChinaImport&ExportCommodityInspectionTechnology InstituteFoodInspectionReseachCenter,Beijing100025)HaoChangming(NationalResearchInstituteofFc.:x:landFermentationBi0一tech andSeasoningCenter,Beijing100027)Al~traet:Thispaperreviewedthecharacteristics,mieroorg~producing,biosyntheticpathw ay,fermentationondde—terminationofvitaminglZ,alsoaedthosepmbiemsfacingthefermentationofvit~ninB12and predicttheprospectinthefutureKeyq:Vitamingxz,Syntheticway,Fermentation,Detemamation三价钴位于类似卟啉的咕啉环平面的中心.【]见1维生素B】2概述图1.维生素B12又称钴胺素,B族维生素之一,主要自然界中的维生素B2有五种左右的类似物,存在于动物性食品,如内脏,肝,肾和猪心等,瘦肉,主要是分子中与Co连接的基团不同,分别为一鱼,牛乳以及蛋黄也存在维生素B】2;植物中不含维CN,一OH,一CH3,一NO2和H2O,它们具有相同生素B12,放线菌,人和动物的肠道菌能合成维生素的生理活性.维生素B12~2辅酶形式参与各种代谢B2,结构上是一类含钴的复杂有机化合物,所含的过程,促进甲基的形成和转移,参与某些化合物的异构化作用,维持SH基的还原状态,促进DNA和15《中国食品添加剂》ChinaFoodAdditives2002No.3HH(长NH2CO—CH2一CH』I二cI一CH一一一\lI…\u一2--CH,..f一22._2叫一"\.ICHCHICH一0,c一.c促Cb.蛋白质的合成,促进细胞的成熟,维持神经组织的正常功能,缺乏维生素B12时会发生恶性贫血,神经系统的损害等,临床上可用于治疗恶性贫血,肝脏疾病,神经炎,神经痛等,在饲料工业上,也可用于促进猪,鸡等牲畜的生长.2国内外的研究进展维生素B】2作为一种人体和动物必需的维生素,其独特的功能性及其复杂的结构和产生条件决定了其较为苛刻的生产条件,正是这种不易获得性使其价格非常昂贵,目前国际市场的报价为:97%的维生素B】2的价格为4,5000RMB/Kg.多年来,人们一直在尝试通过化学合成的途径来降低维生素B12的成本,但由于其庞大而复杂的结构,虽在近些年已获得成功,但同时使化学家们陷入了新的困境:副产物太多,难以提纯.于是,人们又重新审视维生素1312的生产方法,再次将重点转向发酵法生产,能产生维生素B12的菌种较多,但由于其作为次级代谢产物,始终在发酵水平没有新的突破,在国内,仅近年才出现了两个生产厂家,但其年产量总共不足两吨,与庞大的国内需求市场微不足道,目前国内市场上食用及药用维生素B12的90%以上依靠进rJ,因此,在国内实现维生素B12的低成本化,将会有巨大的市场潜力.目前对于维生素B】2发酵生产的报道较少,仅限一些不多的专利, 而国内目前尚未见到专门论述有关维生素B12生产16的报道.3维生素]312的物理和化学性质]维生素B12为深红色结晶体,熔点甚高(320℃时不熔),无臭无味,溶于水,乙醇和丙酮,不溶于氯仿,丙酮和乙醚,结构性质相当稳定;在中性溶液中耐热,酸,碱,日光,氧化剂和还原剂均能使其破坏.4维生素Bl2的产生菌产生维生素B12的主要为放线菌和细菌.放线菌中链霉菌属的主要有:Atbidoflavus,Antibioti—c1)~s,Aureofaciens,Cotombiensis,G血w,Oti一73ace1)~s,Roseochromogenus;细菌主要包括有: Aerobacteraerogenes;Bacillusmegatherium;B. subtilis;Ctostridiumbutyricum;CA.cochtearium;Ct.riabettiferum;Ct.tetaromorphum;Escherichiacoli;theFlavobaceriumspeciesacetyticum,acidi—ficum,aquatile,arborescens,de1)oFans;L.casei; Propionibacteriumfreudenreichii等;另外,米根霉的一些种也可合成维生素马2.5维生素B12的生物合成途径【.][]见图2.6维生素Bl2发酵生产《中国食品添加剂》ChinaFoodAdditives2oo2No.3Priorn.-.2_.~,…~.l,,C㈨obinamidAddmo,e~inoo-cbi).,r嘶M—NFe++?c0syIProDan.l厂'Y. lF日ctor————j—————j———.主——lHeine+Adsvl(一)抗生素废液中提取早在1952年美国T.R.Wood等人就发现,当用加有钴化合物的培养基培养灰色链霉菌时,可大大提高维生素B】2在整个培养液中的浓度,但是对于钴化合物的浓度要求要适量,过高的浓度会对菌体细胞产生毒性;另有研究表明,添加适量的氰化合物也同样可促进抗生素废液中B】2类似物的含量,但需严格掌握其用量.(二)放线菌发酵自从人们发现可从抗生素废液中提取得到维生素B12后,许多科学家将目光转向了采用放线菌, 其中主要是链霉菌属中的灰色链霉菌和橄榄色链霉菌来发酵产维生素Bl2,而于链霉素的生成,而始终未能使得维生素B12的产生处于主导地位,因此, 我们应选出链霉素发酵支路的关键酶,并将其抑制,这样便可大大提高维生素Bl2的得率,使得大量产生维生素Bl2成为可能.(三)下水道废液中提取采用生物活性污泥法处理的废水中,通常含有多的B】2,干的活性污泥可先用水浸提,然后过滤掉固形颗粒,之后可分离,纯化B12,由此得到的B12有如下特点:1,无需前培养,这样大大减少了前期投入;2能耗大,尤其是浓缩这一关键性步骤将造成大的能量损耗;3,用此法得到的B12的浓度虽并不低,但受活性污泥这一来源的影响,由此获得的B】2并不能直接进入食品或药品级产品,而通常只局限于饲料掭加剂.(四)丙酸菌发酵_6J丙酸菌,例如R叻苁础…freudenreid~ii和Propiordbacten'w~na%rmcodi常用作B12的产生菌,这类细菌常采用厌氧发酵,采用丙酸菌发酵的特点:1,在于培养基在发酵过程中,产生丙酸菌而使得培养基PH下降,从而可避免杂菌的污染;2,因为是厌氧发酵,勿需设计供氧系统和搅拌系统,可减少设备投入和节约能耗;3,随着发酵过程丙酸钙的产生,而丙酸钙通常是用作防霉和防腐添加剂的,从而可进一步减少染菌的可能性.研究表明,可采用如下几种方法来增加B12的产量:1,在培养基中添加4.5rng/L左右的O0口2?廿bO可成倍地增加Bl2的产量;2,添加增稠剂,可增加Bl2的产量,这是由于一方面细胞悬浮于培养基中,没有任何干扰,从而增长细胞的生长速度,更为重要的是通常高浓度的钴化合物对于菌体细胞本身是有害的,而在加入增稠剂后,丙酸菌对钴化合物的耐受性增大,可达20ppm,这样,既能避免对菌体的毒害,又可以最大限度地提高Bl2的产量;3,加入前体物质.已知的可促进B】2产生的前体物质有四种:(1)正丙烯二氨;(2)苯并咪唑;(3)1,2一二甲基一5一二氨基苯;(4)5,6一二甲基苯并咪唑.其中,(2)和(4)可促进真正B】2的生成,而(1)和(3)可增加B12类似物的含量.4,当以甘氨酸作为补充氮源时,可增加其产量.(五)由巨大芽孢杆菌生产B】2【J以巨大芽孢杆菌为例,将培养基用氨水调至pH7.0,发酵液需要连续不停地搅拌和大量通气,温度需控制在30℃左右,每隔一定时间需用5%的氨水来调pI-I,同时需定期补充碳,氮源,以期达到最高产量.(六)采用转基因的E.Coli.发酵生产_8J目前,人们对于Bl2的控制基因已经非常清楚,17《中国食品添加剂》ChinaFoodAdditives2002No,3因此,这就使得将其转入大肠杆菌,以期大量生产,但该方法真正用于大生产还有待时El,即使用于生7维生素B】2的提取产,也会不可避免地存在这样的问题,如导入的质对于维生素B12提取,不断有新的方法提出,主粒不能稳定地遗传下去,会随发酵条件的变化而脱要有两种,一种为溶剂提取法,另一种为离子交换落等,因此,就近些年,维生素B12的生产仍需按传树脂法.统发酵来完成(一)有机溶剂提取研究表明,采用两相混合溶剂,可简单地纯化和提取出来,常用的溶剂为苯甲醇和水的混合溶液,基本过程如下:发酵液一吸附(活性碳)一洗脱(吡啶)一浓缩一层析(AbO3)一洗脱(甲醇)一收集红色液—浓缩一结晶(二)离子交换树脂法提取随着离子交换柱在工业上的广泛应用,人们尝试用阴阳离子交换树脂来进行维生素B12的提取,并取得了较好的效果,过程如下所示:发酵液一阳离子树J]R(LonacC一24O)一阴离子树脂(LonacAC一300) 一蒸馏水冲洗一收集红色液体部分一浓缩一冷冻干燥8维生素Bl2的测定方法(一)比色测定法本法是药物样品中维生素B1测定的常用方法.其原理是样品经浓硫酸和高氯酸钾消化后,样液中的钴与M一二一(a一吡啶酮)一a一毗啶联腙生成钴的红色化合物,可以进行比色测定,再从钴的含量换算成维生素B12的含量.(二)离子交换测定法药物中的维生素B12可从弱酸性阳离子交换树脂中得到,分离洗脱下来.例如,桔子酱中的维生素B12通过Florisi土为吸咐剂进行层析分离后,在530nm波长处测定其含量.(三)原子吸收法维生素BI2的分子中含有钴原子,占维生素BI2的4,35%,采用原子吸收分光光度法可以测定其中的钴含量,再换算成维生素B12含量.在测定药品中维生素B12时,可以直接将药品的溶液吸人原子分光光度计中测定.但用于测定食品中的维生素B12时,先将样品预先处理,样品用提取剂提取,于滤液中加入5.0gEDTA,用NI-hOH调节至pH7.0,再加入5g活性炭,振摇,用无灰滤纸过滤,维生素B12被吸附在活性炭上,将活性炭连同滤纸一起在600℃下灰化完全,用5mol/L的硝酸将残渣溶解,然后用原子吸收分光光度法测定钴的含量,本法与微生物法结果一致.18(四)微生物法原理同微生物学浊度法,试验菌种采用乳酸酐菌Leichmannii(ATCC7830),灵敏度>20ng/Kg.9目前维生素B12发酵生产面临的问题及今后的发展方向针对目前国内维生素B12的发展状况,提出如下的发展方向:(1)搞好维生素B12发酵菌株的选育工作,同时可借助于紫外线诱变,原生质体融合等生物技术工程手段,提高单株的产量;(2)进行高密度培养,首先增加生物量,以期提高单位发酵效率;(3)由于目前关于维生素B12的代谢途径和基因表达序列已基本研究清楚]…,因此,可采用基因工程手段,使该基因片段能在宿主细胞中多次表达,并使其能稳定遗传,将会是维生素B12发酵的一大革命;(4)研制新型的诱导剂,以进一步提高其产量;(5)研制高效专用的生物反应器,采用连续流加培养;(6)采用固定化技术,将菌种包埋或吸附于载体上,实现连续化生产.(下转30页)《中国食品添加剂》ChinaFoodAdditives2002No.3 注a:除原面粉外,均为平均值注b:G--Gocd.P—P..r,卜F从表5中可以看出,对于米糠不溶性纤维,随掭加比例的增大,面包的体积和比容均呈较为明显的减少趋势,感官特性尤其是口感变差,焙烤品质逐渐劣变.其原因主要在于添加膳食纤维后混合面团中面筋含量减少,致使面团在发酵,醒发及烘烤过程中持气能力降低,但是,焙烤结果与上述混合面团粉质特性测定试验结果相吻合的是,对添加不溶性纤维的面包来说,添加量在3%范围内的影响很小,也就是说,对于在这个添加量范围内,不进行进一步的品质改良,焙烤出的面包还是可以接受的,只不过口感和比容稍有影响.为了使面包体积因米糠纤维的添加而受负面影响,可适当添加品质改良剂,如活性面筋粉,氧化剂(溴酸钾和维生素C等)及乳化剂(sSL,CSL和SMP等)等,以使米糠高纤维面包体积接近或恢复到原来未添加纤维时的面包体积.对于口感问题,就得寻找有效的物理,化学或生物方法对米糠纤维进行改性,这也是今后米糠纤维应用研究的一个重要方向.3小结(1)面团中米糠不溶性纤维的添加量会使其吸水率增大,形成时间延长,稳定性降低,粉质特性发生劣变,但同时发现在3%的添加范围内劣变程度不明显.(2)面包焙烤结果同混合面团粉质特性测定试验结果相吻合,在3%添加范围内,尽管对其比容和口感稍有影响,但通过感官评价后确定不需要改良仍然可以接受.参考文献1胡国华,黄绍华,米糠半纤维隶B的分离与鉴定,中国食品舔加剂,1998,3:42.胡国华,黄绍华,两种脱脂米糠膳食纤维的制备和性能研究,上海师范太学,2000,2:653胡国华,黄绍华,米糠膳食纤维对胆酸钠吸附作用的研究, 中国食品舔加帮.2001.2:104胡国华,黄绍华,米糠膳食纤维对亚硝酸根离子吸附作用的研究,粮食与油脂,2呻l,12:25.胡国华,黄绍华,米糠半纤维隶的研究及应用,粮食与饲斟工业,1998,2:426.吴盂编着,面包生产技术,1986,轻工业出版社,北京,194 (上接18页)参考文献1l~:IgkinDc,KarnperJ,MacKayMPick~orthJ1956.Swac—turev~taminBI2Nature17:64—662RiekesEL,BrinkNG,K0n】L盥yFR.WoodTR,Fo[kersK. 1948Crysts[1inevitaminB12Science107:3963BattersbyAR.1986+Biosynthesisn{~taminB12AecCbe~n Res19:147—524Esche【mfA1998vitaminB12experinlentsLTlgtheor嘻inditsrno[eeularstructureAr培ewChemlntEdEngl275—395BobikTA,AilonM,R.thJR1992.Asingleregulatorygene integratescⅫ1"olof~taminBtzsynthesisandpropanodiol30degrMationJINete~ol174:2253—666Ad_啪M.BobikTARhJRl993Twogbbalr瞎山叩sys—tern(CrpandArc)eontm[the∞/pm~anedionlre~nllenofSakr啪画whi~mJBactetiol175:7200—87BrevRN,BannerC印,W0JB1986cloningofmultiple叭皓.dwithecl~amin(恤n曲)biosynthesisinBausmeg~teriumJBactefiot167:623—3118Br~d/eeerB1991Ce~nintransportjnEsehenchi~coilBio-{actors3:11—199.ScottAt.1990Mechanisticandevdu6on町va目估ofviromin B12biosynthesisAccChemRes23:308—1710ScottAI1993.}l口wruⅡmthesi粥vh血B,——astr~'ev thelast时billknye骚即0e32:l223—43.。