眼针疗法对急性局灶性脑缺血再灌注大鼠模型血清中TNF-α含量的影响

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眼针对大鼠脑缺血再灌注损伤不同时间点海马组织TNF-α表达的影响

眼针对大鼠脑缺血再灌注损伤不同时间点海马组织TNF-α表达的影响

眼针对大鼠脑缺血再灌注损伤不同时间点海马组织TNF-α表达的影响关洪全高原王素娟王哲马贤德赵金茹王守岩柴继严王健(辽宁中医药大学,辽宁沈阳110847)〔摘要〕目的观察眼针对大鼠脑缺血再灌注后肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达的影响,以探讨眼针对缺血再灌注大鼠脑海马区细胞的保护作用及其作用机制。

方法健康SD 大鼠,雌雄不拘,设正常对照组、假手术组、模型组、眼针组;采用改良的线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,选取眼穴肝区、肾区、上焦区、下焦区,平刺,进针3mm ,留针20min ;分别于脑缺血再灌注后3、24、72h 处死动物并取材;应用蛋白质印迹法(Western 印迹)检测海马组织中TNF-α蛋白的表达。

结果眼针组海马组织TNF-α在脑缺血再灌注后3、24、72h 均较模型组明显降低,差异显著。

结论眼针疗法可以降低脑缺血再灌注模型大鼠海马组织TNF-α的表达,进而抑制由脑缺血再灌注诱导的炎症反应,发挥脑保护作用。

〔关键词〕眼针;缺血再灌注;肿瘤坏死因子-α;海马〔中图分类号〕R74〔文献标识码〕A〔文章编号〕1005-9202(2012)17-3705-03;doi :10.3969/j.issn.1005-9202.2012.17.043The effect of eye acupuncture therapy on the expression of TNF-αof hippocampus at different time points in rats with cerebral is-chemia reperfusion GUAN Hong-Quan ,GAO Yuan ,WANG Su-Juan ,et al .Liaoning University of Traditional Chinese Medicine ,Shenyang 110847,Liaoning ,China【Abstract 】Objective To investigate TNF-αexpression at different time points in the brain of rats with cerebral ischemia-reperfu-sion (IR )injury ,in order to discuss the mechanism of eye-acupuncture therapy and observe the intervention effects on the hippocampus.Methods Healthy SD rats ,male and female ,were randomly divided into normal ,sham-operated control ,model and eye-acupuncturegroups.Sham-operated control ,model and eye-acupuncture groups were divided into 3,24and 72h subgroups.The rat model of cerebral IRwas established by suture method.Eye acupoint liver area ,kidney area ,upper jiao area and lower jiao area were selected and acupunctured horizontally ,inserting needle in 3mm deep ,retaining needle for 20min.All the animals were executed respectively at 3,24,72h after reperfusion and draw materials.The method of immunohistochemistry and Western blot technology were taken to detect the changes of hippo-campus TNF-αexpression in rats after the eye-acupuncture therapy.Results Compared with that of model group ,TNF-αexpression in thehippocampus of rats of the eye-acupuncture group was significantly decreased obviously at 3,24,72h after reperfusion.Conclusions Theeye-acupuncture therapy could down-regulate hippocampus TNF-αexpression in rats with cerebral IR injury ,suppress inflammatory responseinduced by cerebral IR and play a role in protecting brain.【Key words 】Eye acupuncture ;Ischemia-reperfusion ;Tumor necrosis factor-α;Hippocampus基金项目:国家重点基础研究发展计划项目(No.2007CB512702)通讯作者:王健(1948-),男,主任医师,主要从事中西医结合治疗缺血性脑血管病研究。

电针对脑缺血再灌注大鼠模型血清中TNF-α含量的影响

电针对脑缺血再灌注大鼠模型血清中TNF-α含量的影响
西咪替 丁片的含量为 :P (7 7 O9)% (= ) = 9. + . 6 4 k 2
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参考 文献
【】 国 家药 典委 员会 . 1 中国 药典 i] s. . 京 : 二部 北 中国 医药科 技 出版 社
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眼针疗法对脑缺血再灌注大鼠脑源性神经营养因子表达的影响

眼针疗法对脑缺血再灌注大鼠脑源性神经营养因子表达的影响

眼针疗法对脑缺血再灌注大鼠脑源性神经营养因子表达的影响高原;王哲;王健;于丹;王守岩;孙宏伟;张立德;关洪全【摘要】Objective:To observe the effects of eye acupuncture on brain-deprived neurotrophic factor (BDNF)expression in the cerebral cortex of rats after ischemia-reperfusion injury,in order to investigate the therapeutic function of eye acupuncture against cerebral ischemia-reperfusion injury. Methods:Rats established by suture method were randomly divided into the control group ,the sham operation group, the model group and the eye acupuncture group. After reperfusion 24h,the neurophysical behaviours were accessed by ZeaLonga neurophysical impairment marks ; the expression of ischemic cerebral cortex BDNF mRNA was measured by RT-PCR method; the expression of ischemic cerebral cortex BDNF protein was detected by immunohistochemistry and Western blot technology. Results:After reperfusion 24h,compared with the model group,the neurologic impairment marks of the eyeacupuncture group were decreased obviously; The expressions of BDNF mRNA and protein in rat cerebral cortex after the eye acupuncture therapy were obviously decreased. Conclusion:The eye acupuncture therapy can induce the expression of BDNF in rat cerebral cortex with ischemia-reperfusion injury. It is beneficial for protection of brain neurons.%目的观察眼针疗法对脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨眼针在脑缺血再灌注损伤中的治疗作用.方法线栓法制备SD大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)再灌注模型.将SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、眼针组.于再灌注24h后采用ZeaLonga评分法进行大鼠神经功能评分;采用实时定量PCR方法检测缺血脑皮质BDNF mRNA的表达;采用免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法检测缺血脑皮质BDNF的表达.结果缺血再灌注24h后,眼针组大鼠神经行为评分显著低于模型组;眼针组大鼠脑皮质BDNF mRNA的表达和蛋白的表达较模型组均有明显减少.结论眼针疗法能诱导大鼠缺血再灌注后脑皮质BDNF表达水平,有利于缺血再灌注损伤后神经元损伤的保护.【期刊名称】《中国中医急症》【年(卷),期】2011(020)006【总页数】3页(P904-905,919)【关键词】缺血再灌注;脑源性神经营养子;眼针疗法;脑皮质【作者】高原;王哲;王健;于丹;王守岩;孙宏伟;张立德;关洪全【作者单位】辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847【正文语种】中文【中图分类】R245脑梗死占脑血管病发病率80%左右,病死率、复发率和致残率均高。

眼针疗法对大鼠脑缺血再灌注后海马组织脑源性神经营养因子表达的影响

眼针疗法对大鼠脑缺血再灌注后海马组织脑源性神经营养因子表达的影响

组 、模 型组 、眼针组 4组 。于再灌 注 7 采用 Z a o g 2 h后 e L n a评分 法进行 大鼠神 经功能缺损评分 , 采用 实时定量 P R C 方法检 测缺 血海 马组 织 B N R A的表 达, 用蛋 白免疫 印迹 法检 测缺血 海马组织 B N D Fm N 采 D F的表 达。结果 白的表 达较模 型组 均明显减 少 ( P<0 0) . 1 。结论 过促进神 经元的修复发挥 脑保护 的作 用。 关键 词:缺血再 灌注;脑 源性神 经营养 因子 ;眼针疗法 ;海 马; 大鼠
i pa r e m a ks The xp e s o o i c m i hi oc m i m nt r . e r s i n f s he c pp am pus BDNF m RNA w a m e s e by s a ur d
RT- PCR,and t x e s on o s he i pp a pus BD NF p ot i he e pr s i f i c m c hi oc m r e n was de e t d b e t r bl t c e y W s e n ot
D : 1 .3 6 / . s . 0 5 5 0 . 0 1 1 , 1 0I 0 9 9 3 i n 1 0 — 4 2 1 . 0 4 S 3 0
缺血再灌
注 7 2h后, 眼针组 大鼠神经功 能缺损评 分显著低 于模 型组 ( P<0 0) 眼针 组 大鼠海马组织 B N R A的表达和蛋 .5, D Fm N 眼针疗法 能提 高 大鼠缺血再 灌注后海 马组织 B N D F表 达水平, 通
Hip c mp sw t sh mi-e e fs nI j r G OY a, N h, N i , A G S o. h p o a u i Ic e ar p ru i nu y A un WA GZ eWA G Yn W N huy , h o g a

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑皮层组织TNFR1表达的影响_侯长余

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑皮层组织TNFR1表达的影响_侯长余

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑皮层组织TNFR1表达的影响侯长余,赵丹玉,王哲,赵金茹,王德山(辽宁中医药大学基础医学院,辽宁沈阳110847)摘要:目的:观察眼针对脑缺血再灌注损伤(CIRI )模型大鼠脑皮层组织TNFR1表达的变化,探讨眼针治疗CIRI的作用机制。

方法:健康雄性SPF 级Wistar 雄性大鼠60只,随机分为正常组、假手术组、模型组和眼针组。

模型组和眼针组采用改良的线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MACO )再灌注动物模型。

分别以免疫组化和RT -PCR 方法观察缺血侧脑皮层TNF -α、TNFR1蛋白表达,TNFR1mRNA 表达的变化。

结果:与正常组及假手术组比较,模型组大鼠缺血侧脑皮层TNF -α、TNFR1的蛋白及基因均显示出明显的高表达(P <0.01),而眼针组同模型组相比,TNF -α、TNFR1表达均下调(P <0.05)。

结论:眼针抑制CIRI 大鼠TNF -α、TNFR1的高表达,可能是眼针治疗CIRI 的作用机制之一。

关键词:眼针;脑缺血再灌注;TNF -α;TNFR1中图分类号:R -33文献标识码:B 文章编号:1000-1719(2011)04-0747-03Influences of Eye Acupunctureon the Expression of TNFR 1in Rat ’sBrain After Acute Cerebral Ischemia /Reperfusion HOU Chang-yu ,ZHAO Dan-yu ,WANG Zhe ,ZHAO Jin-ru ,WANG De-shan(College of Basic Medical ,Liaoning University of Traditional Chinese Medicine ,Shenyang 110847,Liaoning ,China )Abstract :Objective :To evaluate the effect of eye acupuncture resisting acute focal cerebral ischem /reperfusion (CIRI )inju-ry in rats ,and to explore the mechanism through signal t ransduction pathway.Methods :Adult male SPF Wistar male rats were ran-domly divided into normal group ,sham operation group ,CIRI model group and the eye acupuncture group.There were 15rats in every group.The model of middle cerebral artery occlusion (MACO )was established by using improved suture method.Immuno-histochemical method was performed to examine the protein expression of TNF -αand TNFR1in the ischemic brain cortex ;RT -PCR methods was performed to examine the mRNA expression of TNFR1the ischemic brain cortex.Results :The protein expres-sion of TNF -αand TNFR1in CIRI model group were increased significantly (P <0.01)compared with those in normal group and sham operation group ,and which were decreased significantly (P <0.05or P <0.01)in eye acupuncture group ;RT -PCR results showed that compared with the normal group and sham operation group ,mRNA expression of TNFR1in model group ische-mic brain cortex was significantly increased (P <0.01),which was significantly lower expression in eye acupuncture group (P <0.01).Conclusion :Eye acupuncture therapy shows protective effects on CIRI partly through intervening TNF -α/TNFR1signal transduction pathway.eye acupuncture therapy reduce the incidence of apoptosis ,and play a neuroprotective role ,which may be eye acupuncture therapy for CIRI's part of the treatment mechanism.Key words :Eye acupuncture ;cerebral ischemia and reperfusion ;TNF -α;TNFR1收稿日期:2010-09-25基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)(2007CB512700);辽宁省教育厅课题(L2010349)作者简介:侯长余(1974-),男,博士研究生,研究方向:中医药对消化道神经内分泌影响机制的研究。

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠HIF1表达的影响宓丹

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠HIF1表达的影响宓丹

·研究报告·缺血性脑血管病是最常见的脑血管病,其发病率和致残率极高。

缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是低氧应答状态中一种重要的转录因子。

HIF-1α及其下游靶基因的表达在血管再生、糖代谢、细胞增殖和分化等方面发挥着重要作用[1]。

眼针疗法是彭静山教授提出的治疗脑病的有效方法。

本研究旨在通过观察眼针疗法对脑缺血再灌注损伤模型大鼠HIF-1α表达的影响,探讨该疗法治疗脑梗死的作用机制,为临床实践提供理论依据。

1材料与方法1.1动物与分组健康SPF级SD大鼠80只,雌雄不拘,体质量(280±20)g,由上海西普尔必凯实验动物有限公司提供,许可证号:SCXK(沪)2008-0016。

大鼠按随机数字表法分为空白组、假手术组、模型组、眼针组。

除空白组8只外,其余3组根据缺血及再灌注时间不同分为缺血2h后再灌注3、24、72h,每组每时间点8只。

1.2模型制备参照文献[2],模型组、眼针组及假手术组采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型。

模型成功标准:大鼠清醒后出现左侧霍纳症(左侧眼脸变小),左侧肢体屈伸不利或瘫痪。

另假手术组与模型、眼针组不同之处在于钓鱼线插入深度为0.5~1cm。

空白组未做任何处理。

神经系统损伤症状参照ZeaLonga5分制评分标准[3]:无症状为0分;不能完全伸展对侧前爪为1分;向对侧转圈为2分;向对侧倾倒为3分;不能自发行走,意识丧失为4分。

评分为1~3分者纳入下一步实验组,其余未达标准者排除。

1.3眼针取穴及刺法眼针组:取31号13mm针,于大鼠眼眶周围2mm处针刺,参照人体取穴方法[4],取肝区、上焦区、下焦区、肾区。

手法:取平刺进针3mm。

留针20min,期间捻转行针3次,1min/次。

眼针组于缺血2h再灌注即刻针刺1次,以后每12小时针刺1眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠HIF-1α表达的影响*宓丹1,3王建2△郗欧3(1.辽宁中医药大学,辽宁沈阳110032;2.辽宁中医药大学附属医院,辽宁沈阳110032;3.辽宁中医药大学附属第二医院,辽宁沈阳110034)中图分类号:R285.5文献标志码:A文章编号:1004-745X(2013)02-0173-03【摘要】目的通过观察眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠血清HIF-1α表达的影响,探讨眼针治疗脑缺血再灌注损伤的机制。

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑皮层组织IKKβNF-κB表达的影响

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑皮层组织IKKβNF-κB表达的影响

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑皮层组织IKK β/NF-κB 表达的影响赵丹玉王艳杰苗兰英曹阳王德山(辽宁中医药大学基础医学院,辽宁沈阳110847)〔摘要〕目的观察眼针对脑缺血再灌注损伤(CIRI )模型大鼠脑皮层组织中I κB 激酶β(IKK β)及核因子-κB (NF-κB )表达,探讨眼针治疗脑损伤的作用机制。

方法健康雄性SPF 级Wistar 雄性大鼠60只,随机分为正常组、假手术组、CIRI 模型组和眼针组。

CIRI 模型组和眼针组采用改良的线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MACO )再灌注动物模型。

Western blot 检测大鼠缺血侧脑皮层IKK β、NF-κB 蛋白表达的变化。

结果与正常组及假手术组比较,模型组大鼠缺血侧脑皮层组织IKK β及NF-κB 蛋白水平均显示出高表达(P <0.01),眼针组同模型组相比,IKK β及NF-κB 蛋白表达则下调(P <0.01)。

结论眼针抑制脑皮层组织中IKK β及NF-κB 的表达,可能是眼针治疗CIRI 的主要作用机制之一。

〔关键词〕眼针;脑缺血再灌注;IKK β;NF-κB〔中图分类号〕R285.16〔文献标识码〕A〔文章编号〕1005-9202(2012)20-4419-03;doi :10.3969/j.issn.1005-9202.2012.20.030Influences of eye acupuncture on the expressions of IKK βand NF-κB in rat brain after acute cerebral ischemia /reperfusionZHAO Dan-Yu ,WANG Yan-Jie ,MIAO Lan-Ying ,et al .College of Basic Medical ,Liaoning University of Traditional Chinese Medicine ,Shenyang 110847,Liaoning ,China【Abstract 】Objective To evaluate the expressions of IKK βand NF-κB in cerebral ischemia-reperfusion injury (CIRI )in rat brain cortex and eye acupuncture therapy on it.Methods Healthy male Wistar rats were randomly divided into normal ,sham ,CIRI model andeye acupuncture groups.Model of middle cerebral artery occlusion (MACO )was established by improved suture method.Western blot meth-ods was performed to examine the protein expressions of IKK βand NF-κB in the ischemic brain cortex.Results Expressions of IKK βandNF-κB in CIRI model group were increased significantly (P <0.01)compared with those of normal group and sham group ,and which were decreased significantly (P <0.01)in eye acupuncture group.Conclusions Eye acupuncture therapy could reduce the expressions of IKK βand NF-κB in CIRI ,which may be one of mechanisms of eye acupuncture therapy for CIRI.【Key words 】Eye acupuncture ;Cerebral ischemia and reperfusion ;IKK β;NF-κB基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2007CB512700);辽宁省教育厅课题(No.L2010349)通讯作者:王德山(1951-),男,硕士,教授,主要从事中医药对消化道神经内分泌影响机制的研究。

穴位埋药对脑缺血再灌注大鼠海马细胞因子TNF-α含量的影响

穴位埋药对脑缺血再灌注大鼠海马细胞因子TNF-α含量的影响

穴位埋药对脑缺血再灌注大鼠海马细胞因子TNF-α含量的影响[摘要] 目的比较胶原川芎嗪缓释剂穴位埋药与腹腔注射川芎嗪对脑缺血再灌注后大鼠海马炎性细胞因子TNF-α含量的影响,以期为针灸临床治疗提供更有效的方法。

方法将sD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组(24h组、72h组、120h组)、穴位埋药组(24h组、72h组、120h组)、腹腔注射组(24h组、72h组、120h组)。

采用改良线栓法制备局灶型脑缺血(MCAO)再灌模型,以胶原川芎嗪制备的缓释剂(药线)在大椎、双侧内关穴位埋药。

用放射免疫法观察各组大鼠海马组织中TNF-α含量的变化。

结果脑缺血再灌注模型24h组大鼠海马组织TNF-α含量即明显升高达到峰值,之后逐渐下降,与正常组,假手术组比较有显著性差异(P<0.01);治疗各组大鼠缺血侧海马组织TNF-α含量均有所降低,与模型组同时相比较有显著意义(P<0.01),并随时间的推移逐渐趋于正常。

穴位埋药组治疗效果明显优于腹腔注射组(P<0.01)。

结论穴位埋药可降低脑缺血再灌模型大鼠海马组织TNF-α的水平,减少炎症反应引起继发的脑神经元损伤,疗效优于腹腔注射组。

[关键词]脑缺血再灌注;穴位埋药;腹腔注射;海马;TNF-α缓释剂具有长效作用和恒释作用,近年来它的发展及应用越来越受到人们的重视,但鲜见其应用于脑病的治疗。

我们采用现代工艺制备胶原川芎嗪缓释剂,观察大鼠脑缺血再灌注损伤后海马组织TNF-α含量的变化及穴位埋药与腹腔注射的影响,探讨穴位埋药对脑缺血再灌注损伤的保护作用。

1 材料与方法1.1实验动物及分组清洁级健康SD大鼠52只,雌雄不限,体重为(200+20)g,由湖北中医学院实验动物中心提供。

于实验前一周一次性购进,饲养于安静、温暖且避强光的环境中,室温(22±2)℃,自由饮水饮食。

随机分为5组:正常组4只,假手术组12只,模型组12只,穴位埋药组12只,腹腔注射组12只。

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J ห้องสมุดไป่ตู้.0 0 uy2 1
眼针 疗 法对 急性局 灶性脑缺 血再 灌 注大 鼠模 型 血清中T F 量 的影响 N 一含
任 平 , 贤德 , 马 关洪全
( 宁 中 医药大 学 , 宁 辽 辽
沈阳
103 102)
【 要 】 目的 : 讨 眼 针 疗 法对 急性 局 灶 性 脑 缺 血 再 灌 注 大 鼠模 型 ( C ) 清 中T F o 量 的 影 响 。 法 : 成 年 健 康 摘 探 MA O  ̄ N —[ 含 方 取
Ey c u t e he a o c e f c l e e r l s he i o e o e um l v l f e a up nc ur t r py f a ut o a c r b a ic m a m d l f s r e es o
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法 ) 测 各 组 大 鼠血 清 中肿 瘤 坏 死 因子 ( N — 的 含 量 。 果 : 针 治 疗 组 血 清 中T F 量 明 显 低 于 脑 缺 血 模 型 组 。 检 T F ) 结 眼 N—含 结论 : 眼 针 治 疗 可 以 降低 急性 局 灶性 脑 缺 血 再 灌 注 大 鼠模 型 血 清 中T F 仅 N 一 浓度 , 而减 少T F 对血 管 内皮 细 胞 刺 激 , 制 炎 症 反 进 N— 抑
Re P g M a n n, Xind , Gu n a e a Ho g a n qu n
L a n n n v ri f T a i o a h n s dcn ,S e y n 0 2 io i g U ie st o r d t n l C i e e Me ii e h n a g J 0 3 y i 1
t e a u u cu e g o p eu T - t w r s n f a t o r t a h c r b a s h mi ro p o cu in h e e e e p n - h c p n tr u ,s r m NF c e e i i c n l lwe h n t e e e r l ic e a r g i y g u .C n l so :T y a u u e t r a e u e t e c t o a ee r i h mi d l f s r m o c n r t n o NF a.t ee y r d cn NF o a — u e c n r d c h a u e f c l c rb a s e a mo e o e u c n e tai s f T - l c o h r b e u ig T — n vs c lr e d t ei el t l t,i h bt n a u a n oh l c l si ae n i i f mma in is e d ma e n o g l t n c u s . l a s mu il t ,t u a g a d c a u ai o c r o s o
雄性Wia大鼠9 只 , sr t 0 并随机分 为3 : 手术组( O )缺血再灌 注模 型组(0 )眼针治疗组 (0 )各组按 脑缺血再灌 注 组 假 3只 、 3只 、 3只 。 后 3 、4 、2 个时 间点再分 为3 , 2 h7 3 h h 组 每组l只。 0 采用线栓法制备 大鼠脑缺血再灌注( C 模型。 用酶联免疫吸 附法( Ls MA O) 应 E IA
应 、 织损伤和凝血的发 生。 组
【 键 词 】 眼 针 ; 缺 血 再 灌 注 ;N —I大 鼠 模 型 关 脑 TF o ;
f 中图分类号】 R 8 . 【 2 55 文献标识码】 A 【 文章编号] 17 — 5 X 2 1 )7 0 9 — 2 6 2 9 1 (0 0 0 — 0 6 0
第 l 卷 第 7期 6
V0 .6 1 1 No7 .
中 莲 为 导般
Gud n o ra fTrdt n l h n s d cn n a ma y iig J un lo a io a C ie e Me iie a d Ph r c i
2 1 年 7月 00
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