脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖和分泌细胞外基质的研究

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LPS诱导HSC增殖与提高其胶原表达水平的细胞模型研究

４复孔，ＴＭＴ法测定细胞增殖率。每组实验动物５只。ＭＴ＂Ｉ法测定细胞增殖率参照徐承熊方法目。
常不能全面反映ＨＣ的活化效应。Ｓ本研究试用脂多糖（ｐｐｌ１ｏｏ — ｉｙｓｃａｉｅＬｓ刺激大鼠ＨＣ探索建立了ＬＳ刺激ＨＳｃｈｒ，Ｐ）ｄＳ，ＰＣ增殖并
活化效应。
【关键词】肝星状细胞；脂多糖；胶原【中图分类号１Ｒ２．【３９２文献标识码】Ａ【文章编号】１７ — ７１２０）５２ — ２６３９０（０８３ — ９０
ＤｅｅｏｍｅｔｏｌｕａｏｅｆＨＳＣｔｖｔｏｔｍｕａｅｙＬＰＳｖｌｐｎｆＣｅｌｌｒＭｄｌｏＡｃｉａｉｎＳｉｌｔｄｂ
２８１第６第５０年２４３０月卷期
・基础研究・
ＬＳＰ诱导ＨＣＳ增殖与其胶原提高表达水平的细胞模型研究
杨德民ｔ王健
（．１吉林省吉林中西医结合医院，长春１２１；．中医药大学，３０１２北京北京１０２）００９【摘要】目的建立较为全面反映肝星状细胞活化效应的细胞模型。方法应用脂多糖刺激体外培养的大鼠ＨＳ。ＭＩＣＴ＂法测定ＨＣ增殖率。免疫组化法显示ＨＣ表达Ｉ、ＳＳ Ⅲ型胶原水平，并进行图像分析。结果ＬＳ明显刺激ＨＣ的增殖和提高其ＰＳＩ、 Ⅲ型胶原表达水平，与对照组比较有非常显著性差异（Ｏ０ｏ结论ＬＳ诱导ＨＳＰ＜．１ＰＣ活化模型能够相对全面反映ＨＣＳ

脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺炎模型筛选

脂多糖（LPS）诱导的小鼠肺炎模型筛选服务
脂多糖(LPS)是内毒素的主要成分，来源于革兰氏阴性菌细胞壁的外膜，在污染的空气、职业性粉尘(谷物粉等)、香烟中到处都有LPS，职业性和环境性的吸人一定浓度的上述物质后可引起或加重一系列临床病症，如哮喘、支气管肺炎等。

LPS引起支气管肺炎后经及时有效治疗可痊愈，否则，病程迁延，气道炎症反复发作可变成慢性支气管炎，如继续接触高浓度的脂多糖，病情将进行性加重，最终发展成为肺心病。

研究发现，LPS在体内外引起多种细胞高表达趋化因子和致炎因子，在肺组织中引起中性粒细胞聚集增多的主要细胞因子是IL-1β和TNF-α。

服务项目：
正常组肺组织基本正常。

（×200）
模型组血管周围水肿明显，局部肺泡壁明显充血。

（×200）
受试药物肺泡壁基本正常，无明显充血、无炎细胞浸润，肺泡腔清晰。

（×200）。

苦参碱对脂多糖诱导的大鼠系膜细胞增殖和分泌细胞外基质的影响

苦参碱对脂多糖诱导的大鼠系膜细胞增殖和分泌细胞外基质的影响张莉;金玉;张宏文;李宇宁【期刊名称】《临床儿科杂志》【年(卷),期】2007(25)7【摘要】目的了解不同浓度苦参碱(Matrine,Ma)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠系膜细胞(MC)增殖及分泌细胞外基质(ECM)的影响,探讨Ma有无抗肾小球硬化的药理作用.方法采用体外培养MC,分为空白组、LPS组及Ma处理组(LPS 10μg/ml+Ma 20、40、80、160、320、640μg/ml),继续培养24、48、72h,以四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测MC的增殖情况,以台盘蓝法检测Ma对MC的细胞毒性作用,以放射免疫分析法(RIA)检测MC分泌型胶原(C0l-Ⅳ)与层粘连蛋白(LN)的情况.结果经Ma处理24、48、72h后,LPS组MC增殖较空白组显著增加(P＜0.01),Ma组与LPS组比较,MC增殖呈显著抑制(P均＜0.01),呈时间-剂量依赖效应(r=O.826,P＜0.01).Ma在20～640μg/ml浓度间对MC无明显细胞毒作用.Ma处理48h后,LPS组Col-Ⅳ与LN的分泌较空白组显著增加(P均＜0.01);Ma组对Col-Ⅳ与LN分泌的抑制作用较LPS组显著(P均＜0.01),并呈剂量依赖效应(r=-0.794,-0.85l,P均＜0.01).结论 Ma可明显抑制LPS诱导的MC增殖和分泌细胞外基质,无明显细胞毒作用,并呈剂量依赖效应,初步认为Ma在细胞水平上有抗肾小球硬化的药理作用.【总页数】4页(P594-597)【作者】张莉;金玉;张宏文;李宇宁【作者单位】兰州大学第一附属医院儿科,甘肃兰州,730000;兰州大学第一附属医院儿科,甘肃兰州,730000;兰州大学第一附属医院儿科,甘肃兰州,730000;兰州大学第一附属医院儿科,甘肃兰州,730000【正文语种】中文【中图分类】R965.1【相关文献】1.解聚复肾宁对大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质分泌的影响 [J], 李慧;曹文富;汤为学;陈平2.益气化瘀法对大鼠系膜细胞增殖及细胞外基质分泌的影响 [J], 袁斌;汪受传;任现志;翟文生;孔飞3.血管紧张素-(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠系膜细胞增殖与细胞外基质分泌的影响 [J], 刘建;马莲环;王明勇;贺红焰4.罗格列酮对ox-LDL诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及分泌细胞外基质的影响[J], 杜月光;柴可夫;赵天喜5.脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖和分泌细胞外基质的研究 [J], 于力;郝志宏;王丽娜;翁志媛;赵丹;张又祥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

紫草化学成分、药理作用及产品应用研究进展

紫草化学成分、药理作用及产品应用研究进展南京野生植物综合利用研究院摘要紫草为我国传统中药材，用药历史悠久。

现代研究显示，紫草主要含有萘醌类、多糖类、单萜苯酚及苯醌类和酯类等多种化学成分，其药理作用主要有抗炎、抗肿瘤、抑菌、保肝护肝和免疫调节等。

目前紫草的应用集药品、纺织品和药妆于一体，具有广泛的开发前景。

本研究对紫草的化学成分、药理作用及产品应用作一概述，以期为紫草的深入研究和合理开发利用提供参考。

关键词紫草；化学成分；药理作用紫草是紫草科植物新疆紫草Arnebia euchroma(Royle)Johnst.或内蒙紫草Arnebia guttata Bunge的干燥根[1]，通常为不规则的圆柱形，多扭曲，主要产于新疆、西藏、甘肃等地。

紫草始载于《神农本草经》：“主心腹邪气，五疸，补中益气，利九窍，通水道”[2]。

紫草性味甘、寒，归心、肝经，具有清热凉血、活血解毒和透疹消斑的功效，常用于治疗血热毒盛、斑疹紫黑、麻疹不透、疮疡、湿疹和烫伤等病症[1,3]。

紫草中的化学成分主要包括萘醌类、多糖类、单萜苯酚及苯醌类和酯类等。

现代药理和临床研究的成果显示，紫草具有抗炎、抗肿瘤、抑菌、保肝护肝和免疫调节等功效。

目前，对紫草产品的开发如药品、纺织品和药妆等也较为广泛。

因此，本研究对近年来紫草化学成分、药理作用及产品应用三个方面进行综述，旨在为紫草的进一步开发利用和研究提供理论依据。

1 化学成分中草药的化学成分与其药效有着密切的关系，对其品种鉴定、质量及资源发掘等也有重要意义。

目前，已从紫草中分离鉴定出多种萘醌、多糖、酚酸和酯类等化学成分[5-14]。

1.1 萘醌类色素脂溶性的萘醌类色素是紫草的主要活性成分之一，具有抗炎、抗肿瘤、抑菌等作用，临床应用广泛，母核通常为5, 8-二羟基萘醌，并具备异己烯边链。

迄今为止已从新疆紫草根中分离出数10种萘醌化合物，因其旋光性不同分为R-型和S-型[3]，其中R-型命名为紫草素，见表1；S-型则被命名为阿卡宁[4]，见表2。

糖皮质激素对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞增殖和细胞因子的影响

㊃论著㊃D O I :10.3760/c m a .j .i s s n .1673-436X.2015.12.008作者单位:100853北京,解放军医学院(王雯);100142北京,空军总医院呼吸内科(王东㊁方明明㊁张波)通信作者:张波,E m a i l :z h a n gb o h u x i @s i n a .c o m 糖皮质激素对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞增殖和细胞因子的影响王雯王东方明明张波ʌ摘要ɔ 目的探讨脂多糖(L P S )和长期大剂量应用地塞米松对小鼠巨噬细胞R AW 264.7增殖活化及细胞因子表达的影响㊂方法不同剂量地塞米松(10㊁50㊁100㊁150m g/L )作用于小鼠巨噬细胞R AW 264.724h 后,1m g /LL P S 再作用于细胞24h ,应用C C K -8检测R AW 264.7细胞增殖情况,E L I S A 检测炎症因子I L -6和趋化因子I L -8的表达水平㊂结果 1m g /LL P S 促进R AW 264.7细胞增殖并激活细胞产生大量I L -6和I L -8,不同剂量地塞米松干预细胞24h 后,R AW 264.7细胞增殖情况受到抑制,呈浓度依赖性㊂炎症因子I L -6和趋化因子I L -8表达水平也随地塞米松浓度增加而降低㊂结论小剂量L P S 促进巨噬细胞增殖并活化产生大量细胞因子㊂而长期大剂量应用地塞米松抑制巨噬细胞的生长增殖,同时抑制炎症因子及趋化因子的表达,降低机体清除病原体的能力,造成了免疫抑制患者发生难以控制的感染㊂ʌ关键词ɔ 脂多糖;巨噬细胞;地塞米松;炎症因子;趋化因子E f f e c t o f d e x a m e t h a s o n e o nL P S -i n d u c e d c e l l p r o l i f e r a t i o na n d c y t o k i n e s i nR A W 264.7m a c r o p h a g e W a n g W e n *,W a n g D o n g ,F a n g M i n g m i n g ,Z h a n g B o .*M e d i c a lS c h o o lo f C h i n e s eP L A ,B e i j i n g 100853,C h i n aC o r r e s p o n d i n g a u t h o r :Z h a n g B o ,E m a i l :z h a n gb o h u x i @s i n a .c o m ʌA b s t r a c t ɔ O b je c t i v e T o e x p l o r e t h e ef f e c t o f d e x a m e t h a s o n e o n l i p o p o l y s a c c h a r i d e (L P S )-i n d u c e d c e l l p r o l i f e r a t i o na n dc y t o k i n e si n R AW 264.7m a c r o p h ag e .M e th o d s R AW 264.7m a c r o p h a g e s w e r e s ti m u l a t e dw i t h10,50,100o r150m g /Ld e x a m e t h a s o n ef o r24h o u r sb e f o r es t i m u l a t i o n w i t h1m g /L L P S ,t h e c e l l g r o w t h r a t ew a s d e t e c t e db y C C K -8.I n t e r l e u k i n -6(I L -6)a n d I L -8l e v e l sw e r em e a s u r e db y E L I S A.R e s u l t s I n v i t r ot r e a t m e n to f R AW 264.7m a c r o p h a ge s w i t h d e x a m e t h a s o n ei n h i b i t e d L P S -i n d u c e dc e l l p r o l if e r a t i o n a n d s u p p r e s s e d t h e p r o d u c t i o n o f I L -6a n d I L -8i n a d o s e -d e p e n d e n t .C o n c l u s i o n s H igh d o s e o f d e x a m e t h a s o n e b l o c k s t h e L P S -i n d u c e d R AW 264.7m a c r o p h a g e s c e l l p r o l i f e r a t i o na n d d e c r e a s e st h e p r o d u c t i o n o fi n f l a mm a t o r y c y t o k i n e sa n d c h e m o k i n e s .H i gh d o s eo f g l u c o c o r t i c o i d s l e a d s t ou n c o n t r o l l e d i n f e c t i o nb y s u p p r e s s i n g i mm u n e s ys t e m.ʌK e y wo r d s ɔ L i p o p o l y s a c c h a r i d e ;M a c r o p h a g e ;D e x a m e t h a s o n e ;C y t o k i n e s ;C h e m o k i n e s 糖皮质激素是应用最为广泛的治疗炎症和自身免疫性疾病的免疫抑制剂之一㊂临床上发现,糖皮质激素的长期大剂量应用能够导致免疫抑制患者并发感染的几率明显增加[1]㊂巨噬细胞构成机体防御病原微生物感染的第一道防线,在免疫应答中发挥重要作用㊂巨噬细胞通过识别㊁吞噬及抗原递呈清除抗原性异物,同时通过分泌肿瘤坏死因子α(T N F -α)㊁I L -6等炎症因子及I L -8等趋化因子,促进急性期免疫反应,加速对病原体的清除[2]㊂大量研究表明地塞米松与其受体作用影响巨噬细胞功能,从而影响机体的免疫应答[3],然而长期大剂量应用糖皮质激素导致患者易发生感染的原因尚不清楚㊂本研究拟通过对小鼠巨噬细胞R AW 264.7增殖情况及炎症因子㊁趋化因子水平的检测,探讨长期大剂量地塞米松对炎症水平的影响,从而进一步揭示糖皮质激素与感染之间的联系㊂1 材料与方法1.1 仪器与试剂小鼠单核巨噬细胞R AW 264.7购自南京凯基生物公司细胞库;脂多糖(L P S )购自㊃119㊃国际呼吸杂志2015年6月第35卷第12期 I n t JR e s pi r ,J u n e 2015,V o l .35,N o .12S i g m a公司;地塞米松购自容生制药有限公司;C C K-8检测试剂盒购自碧云天生物公司;I L-6和I L-8E L I S A试剂盒购自凯基生物公司㊂主要仪器:台式冷冻离心机(湘仪);MMK3酶标仪(T h e r m o)㊂1.2 R AW264.7细胞培养及干预 R AW264.7细胞采用含10%灭活胎牛血清的R P M I1640培养基,在37ħ㊁5%C O2培养箱中培养㊂隔天传代,取4~5代生长状态良好的细胞,以5ˑ105个/m l的密度接种于6孔板中㊂实验分为3组:实验组加入不同浓度地塞米松,分别为10㊁50㊁100㊁150m g/L培养24h后,加入1m g/LL P S继续培养24h;阴性对照组加入等量1640培养基培养24h后,加入1m g/LL P S继续培养24h;空白对照组仅加入等量1640培养基㊂1.3 C C K-8细胞增殖实验 R AW264.7细胞接种于96孔板中,每孔加入0.1m l含0.5ˑ104~1ˑ104的细胞悬液㊂边缘孔用1640培养基填充,在37ħ㊁5%C O2培养箱中培养12h至细胞贴壁㊂根据实验分组向每孔中依次加入地塞米松及L P S或等量1640培养基,每个浓度设8个复孔,24h后全部弃培养基㊂每孔加入20μlC C K-8溶液,培养箱内继续孵育1h后,用酶标仪在450n m测定吸光度㊂1.4炎症因子检测酶联免疫法E L I S A测定细胞上清中I L-6和I L-8水平,按照试剂盒操作说明书进行㊂1.5统计学处理所有数据以x-ʃs表示,用S P S S 17.0进行方差分析及均数间的多重比较,P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1不同剂量地塞米松对R AW264.7细胞增殖的影响以空白对照组的O D值为参照,阴性对照组O D值最高,促进R AW264.7细胞增殖㊂不同剂量地塞米松干预R AW264.7细胞24h后,O D值明显下降且呈浓度依赖性,差异具有统计学意义(P< 0.05)㊂见表1㊂表1 C C K-8细胞增殖实验结果(x-ʃs,n=8)组别O D值空白对照组0.49ʃ0.02阴性对照组0.76ʃ0.01a实验组10m g/L0.68ʃ0.02a b50m g/L0.63ʃ0.02a b c100m g/L0.59ʃ0.02a b c150m g/L0.56ʃ0.02a b c d 注:与空白对照组比较,a P<0.05;与阴性对照组比较,b P< 0.05;与10m g/L组比较,c P<0.05;与100m g/L组比较,d P<0.052.2 E L I S A检测I L-6㊁I L-8水平阴性对照组I L-6和I L-8水平最高,随着地塞米松剂量增加,I L-6和I L-8表达水平明显下降且呈浓度依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05)㊂见表2㊂表2各组I L-6和I L-8细胞因子水平(x-ʃs,n=4)组别I L-6(m g/L)I L-8(m g/L)空白对照组16.57ʃ2.7826.20ʃ1.42阴性对照组311.41ʃ12.25a198.67ʃ2.45a实验组10m g/L200.64ʃ6.50a b167.21ʃ3.88a b50m g/L160.40ʃ5.55a b c121.82ʃ4.83a b c100m g/L131.63ʃ4.50a b c94.87ʃ3.68a b c150m g/L51.42ʃ3.33a b c d46.03ʃ0.87a b c d注:与空白对照组比较,a P<0.05;与阴性对照组比较,b P< 0.05;与10m g/L组比较,c P<0.05;与100m g/L组比较,d P< 0.053讨论糖皮质激素作为抗炎及免疫抑制药物在临床上应用广泛㊂长期大剂量应用糖皮质激素会造成患者免疫力低下,增加感染的发生几率,而且感染发生后难以控制,病情发展迅速,患者病死率高,现已成为威胁免疫抑制患者生存的主要危险因素之一[4]㊂糖皮质激素抑制免疫应答的机制极为复杂[5]㊂以往的研究认为,糖皮质激素能够抑制巨噬细胞吞噬㊁加工及抗原呈递的功能[6-7]㊂但是目前的研究尚不能合理解释免疫抑制患者易发生严重感染的原因㊂机体针对感染的免疫分为天然免疫和获得性免疫㊂巨噬细胞在天然免疫应答中发挥重要作用[8]㊂机体在受到细菌及其产物如L P S感染后,通过激活巨噬细胞,产生大量炎症介质如T N F-α㊁I L-1和I L-6参与局部炎症反应,并产生I L-8等趋化因子,将多形核白细胞(P MN)等具有更强大吞噬功能的细胞招募到炎症部位清除病原体[9]㊂本研究采用不同剂量地塞米松长时间刺激小鼠巨噬细胞R AW264.7,模拟免疫抑制细胞模型,再用细菌致病性产物L P S(1m g/L)刺激,应用C C K-8和E L I S A研究地塞米松和L P S对小鼠巨噬细胞增殖及细胞因子水平的影响㊂从细胞增殖实验的结果来看,L P S能够明显促进小鼠巨噬细胞R AW264.7的增殖,上调机体识别㊁吞噬及清除病原体的能力㊂而地塞米松对巨噬细胞产生直接毒性作用, R AW264.7细胞经地塞米松作用后细胞生长受到抑制甚至死亡,并呈浓度依赖性㊂显微镜下可以观察到随着地塞米松浓度的增加,小鼠巨噬细胞的形态发生变化,胞内颗粒增加且伪足增多㊂地塞米松能够抑制巨噬细胞的生长增殖,并诱导其死亡[10]㊂㊃219㊃国际呼吸杂志2015年6月第35卷第12期I n t JR e s p i r,J u n e2015,V o l.35,N o.12此外,研究表明地塞米松下调L P S激活巨噬细胞产生的I L-6炎症因子㊂I L-6是一种具有广泛生物学活性的细胞因子,在机体免疫应答及炎症反应中发挥重要作用㊂I L-6可诱导B细胞和细胞毒T 淋巴细胞增殖和分化,调节免疫反应[11]㊂此外, I L-6也是急性期炎症因子,诱导肝脏产生多种急性期蛋白,同时作为内源性致热源,参与炎症反应[12]㊂A n d r i j e v i c等[13]和M c H u g h等[14]认为I L-6与患者肺部感染的轻重程度及预后有关,是造成呼吸道炎症的重要因素之一㊂也有一些学者认为I L-6是T N F-α和I L-1的反调控/抗炎因子,具有抑制炎症反应的作用[15]㊂I L-6与多种呼吸系统疾病的发生㊁发展密切相关,地塞米松通过下调I L-6的表达,降低急性期炎症因子水平及可能存在的局部内源性负反馈机制,造成了病原体的不易被清除㊂I L-8是由单核巨噬细胞释放的趋化性细胞因子,可诱导中性粒细胞㊁嗜酸粒细胞㊁P MN等迁徙和活化[16]㊂I L-8是P MN的强趋化剂,其通过受体与G蛋白耦联,促进细胞内游离C a2+浓度一过性升高,引起P MN脱颗粒,释放蛋白水解酶和花生四烯酸等炎性介质,促进炎症反应[17]㊂大量研究表明趋化因子I L-8促进炎症细胞激活㊁迁移至感染部位,调控急慢性炎症反应,在机体免疫应答中发挥重要作用[18]㊂本研究结果表明长期大剂量应用地塞米松下调趋化因子I L-8的表达,减弱招募中性粒细胞和P MN的能力,使得细胞性防御反应受阻,局部病原体清除率降低,造成感染难以控制㊂因此,结合细胞增殖实验及细胞因子水平的检测,我们认为长期大剂量应用糖皮质激素能够抑制巨噬细胞的增殖,并下调炎症因子I L-6和趋化因子I L-8的表达,减弱局部保护性炎症反应,这可能是免疫抑制患者易发生难以控制感染的机制之一㊂目前,我们的实验尚处在体外实验阶段,仍有很大局限性㊂糖皮质激素调控机体免疫应答的确切机制需要动物实验和临床试验的进一步研究㊂参考文献[1]S a f d a r A,R o d r i g u e z G H.A e r o s o l i z e da m p h o t e r i c i n Bl i p i dc o m p l e xa sad j u n c t i v et re a t m e n tf o r f u ng a l l u n g i n f e c t i o ni np a t i e n t s w i t h c a n c e r-r e l a t e d i mm u n o s u p p r e s s i o n a n dr e c i p i e n t so f h e m a t o p o i e t i c s t e m c e l lt r a n s p l a n t a t i o n[J].P h a r m a c o t h e r a p y,2013,33(10):1035-1043.[2] L iH S,W a t o w i c hS S.I n n a t ei mm u n er e g u l a t i o nb y S T A T-m e d i a t e d t r a n s c r i p t i o n a l m e c h a n i s m s[J].I mm u n o l R e v,2014,261(1):84-101.[3] B a r t n e c k M,P e t e r s F M,W a r z e c h a K T,e t a l.L i p o s o m a le n c a p s u l a t i o n of d e x a m e t h a s o n e m o d u l a t e s c y t o t o x i c i t y,i n f l a mm a t o r y c y t o k i n er e s p o n s e,a n d m i g r a t o r yp r o p e r t i e so fp r i m a r y h u m a nm a c r o p h a g e s[J].N a n o m e d i c i n e,2014,10(6): 1209-1220.[4] C h e nD,T a n H,P a n P,e ta l.R e v i e w o f2c a s e so fs e v e r ei n f e c t i o nw i t h p u l m o n a r y S t r o n g y l o i d e s s t e r c o r a l i s[J].Z h o n gN a nD aX u eX u eB a oY i X u eB a n,2014,39(4):428-432.[5] V a r g a G,E h r c h e n J,B r o c k h a u s e n A,e t a l.I mm u n es u p p r e s s i o nv i a g l u c o c o r t i c o i d-s t i m u l a t e d m o n o c y t e s:an o v e lm e c h a n i s mt oc o p ew i t h i n f l a mm a t i o n[J].J I mm u n o l,2014, 193(3):1090-1099.[6] Z h e n g G,Z h o n g S,G e n g Y,e ta l.D e x a m e t h a s o n e p r o m o t e st o l e r a n c ei n v i v ob y e n r i c h i n g C D11c l o C D40l ot o l e r o g e n i cm a c r o p h 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福辛普利对大鼠肾小球系膜细胞增殖及转化生长因子β1表达的影响

生长因子ｐ蛋白分泌和ｍＲＮ表达均低于ＬＳ组（ＡＰＰ＜Ｏ０）结论．１。脂多糖可诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖。福辛普利可抑制脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖。福辛普利能够从蛋白水平和ｍＲＮ水平Ａ
组）脂多糖刺激组（Ｐ、ＬＳ组）福辛普利高、、剂量组（别为Ｆ组、ＯＳ２组和Ｆ组）分别于、中低分ＯＳ１ＦＯＳ３，２４ｈ和４８ｈ两个时间点甲基噻唑基四唑（ｔｙｔｉｏｙｅｒｚｌｍ，ｍｅｈｌｈａｌｌｔｏｉＭＴＴ）ｚｔａｕ比色法测定各组细胞增殖情况；６ｈ１，４ｈ后酶联免疫测定（ｎｙ —ｎｅｎｎｓｒｅｔａｓｙＥＩＡ）测定细胞培养上清于，２ｈ２ｅｚｍｅｌｋｄｉｍｕｏｏｂｎ —ｓａ，ＬＳ法ｉｒ
—
‘２１‘
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・
论著・
福辛普利对大鼠肾小球系膜细胞增殖及转化生长因子ｐ表达的影响１
郝志宏于力王丽娜翁志媛张蕾张又祥
【要】目的观察新型血管紧张素转化酶抑制剂（ｎｉｔｎｉｎｃｎｅｔｇｅｚｍｅｉｈｂｔｒ摘ａｇｏｅｓ —ｏｖｒｉｎｙｎｉｉ，ｏｎｏＡＣＩ—— 福辛普利（ｓｏｒ，ＯＳ对脂多糖（ｐｐ１ｓｃｈｒｅＬＳ诱导的大鼠肾小球系膜细胞Ｅ）ｆｉｐｉＦ）ｏｎｌ１ｏｏｙａｃａｉ，Ｐ）６月第４卷第３期ＣｉｓＧｎ电子２）８年（ｈｎＪＯｂ／ｙｅ＆ＰｄａｒＥｌｃｒｎｃＶｅｓｏＪｎ０，１４，３ｅｉｔ（ｅｔｏｉｒｉｎ），ｕｅ２０８Ｖｏ．Ｎｏ．

银杏内酯B对大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1及细胞外基质分泌的影响

１１材料与试剂Ｓ．Ｄ大鼠，广州医学院实验动物中
心提供，ＲＩ６０粉剂、牛血清、蛋白酶：ＩＣＰＭ４１胎胰ＧＢＯ
公司；多糖（ｉｏ０ｙａｃａｉｅＬＳ） Ⅳ 型胶原酶、脂Ｌｐｐｌｓｃｈｒ，Ｐ、ｄ
养大鼠肾小球系膜细胞，为对照组、Ｐ分ＬＳ刺激组、杏内酯Ｂ高、、剂量组，别于６ｌ、４ｈ后ＥＩＡ法测银中低分、２２ＬＳ定细胞培养上清液中ＴＦ一［、ＦＧ３１Ｎ、Ｌ、ｏⅣ 蛋白含量，光半定量ＲＮＣｌ荧Ｔ—ＰＲ法检测ＴＦ—Ｂ基因表达的变ＣＧｌ
杏内酯Ｂ能够抑制ＬＳ刺激引起的系膜细胞分泌细胞外基质的增加，种抑制作用可能通过ＴＦ一１调节。Ｐ这Ｇ３１
【关键词】细胞外基质；系膜细胞；Ｇ３；杏内酯ＢＴＦ一［银１
银杏内酯Ｂ是一种作用很强的血小板活化因子（ｌｅｔｃｉｔｇｆｔ，Ａ）抗剂。ｐａｌｔａｎｃｒＰＦ拮ｔｅａｖｉａｏ肾脏局部产
Ｌ一氨酰胺、酮酸钠：ｉａ公司；杏内酯Ｂ提丙Ｓｇｍ银：供；ＬＳＥＩＡ检测试剂盒，国ＴＩ司；ｒｏＧＢＯ公美Ｐ公ＴｉｌＩＣｚ司；ａＮ聚合酶、 —ＭＶ逆转录酶、ｌｏｔ１、ＴｑＤＡＭＬＯｉ８ｇ

2009年中药单味药及其有效成分对肾脏影响的药理学实验研究概述

２００９，１０（３）：２１１—２１３．
１５．吕海琳，刘丽秋．雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠肾脏中ＣＴ．ＧＦ表达的影响．中国中西医结合肾病杂志，２００９，１０（４）：
３１２—３１４．
１６．孙健，李英，腊岩，等．银杏叶提取物对实验性糖尿病大鼠肾组织ＨＧＦ／ｅ—ｍｅｔ表达的影响．中国中西医结合肾病杂志，２００９，ｌＯ（１０）１８７７—８８１．１７．白玉新，傅亮，高进．黄芪对缺血性急性肾功能衰竭的保护作用．中国实验方剂学杂志，２００９，１５（７）：７４—７６．１８．陈涛，尹鸿萍，手莹，等．虫草多糖含药血清对ＴＧＦ一岛诱导的肾小球系膜细胞增殖及Ⅳ型胶原表达的影响．中国生化药物杂志，２００９，３０（３）：１５０—１５３．
１４９０．
５．杨梅，张岩，陈必成，等．灯盏花素对单侧输尿管梗阻大鼠肾问质纤维化的保护作用．解放军医学杂志，２００９，３４（１０）：
１２０６—１２１０．
６．左川，谢席胜，邓尧，等．黄芪对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子岛表达的影响．中国中药杂志，２００９，３４（２）：
１９３—１９８．
２１．倪晴帆，胡家才．大黄对尿酸性肾病大鼠肾组织ｂＦＧＦ及００Ｘ一２的影响．武汉大学学报（医学版），２００９，３０（２）：１９１
２４３７．
２２．陈刚，吴小候，唐眶雄．川芎嗪延缓大鼠慢性移植肾肾病作用及机制的研究．重庆医科大学学报，２００９，３４（９）：１１８４一
１１８６．
２３．仲芳，陈慧，韩琳．姜黄素对内毒素所致肾脏炎症的抑制作用．中国中西医结合肾病杂志，２００９，ｌＯ（１０）１９４８—９５１．２４．刘青，李锋，任秦有，等．大黄总蒽醌含药血清对ＮＲＫ细胞ＡＯＳｒ２与ＡＱＰ４表达的调节效应．中国中西医结合肾病杂志，２００９，１０（９）：８１２—８１５．２５．刘伏友，夏运成，孙岩，等．去甲斑蝥素对ＴＧＦ－岛诱导的人近端肾小管细胞卜皮问质转分化以及转录因子Ｓｎａｉｌｌ表达的影响．中国中西医结合肾病杂志，２００９，１０（１１）：９５２—

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ＬＩＲＡ表达，ＬＳ组在各时点ＬＩＲＡ表达量与对照组间差别均有显著性意义（＜．１。结论Ｎ３ｍＮＰＮ３ｍＮ２Ｐ００）
要作用。，
从蛋白和
ｍＮＲＡ两个水平同时观察到ＥＭ成分（Ｆ、ＬＣ如ＮＮ和ＣｌｏⅣ）的增加，说明在系膜增殖性肾炎中ＥＭ明显增加并起主Ｃ
ＥＭ蛋白含量；荧光半定量反转录ＰＲ（Ｔ—ＰＲ）法检测ＥＭ中层黏连蛋白（Ｎ）ｐｍＮＣＣＲＣＣＬＲＡ表达的变化。结果
（）ＬＳ组和对照组Ｇ１ＰＭＣ增殖情况间差别有显著性意义（Ｐ＜ｏ０）（）正常培养的大鼠Ｇ ’５；２ＭＣ可分泌一定量的ＥＭ，ＬＳ组在各时点分泌ＥＭ量与对照组间差别有显著性意义（＜．１；（）正常培养的大鼠ＧＣＰＣＰ００）３ＭＣ有微量
ｉｄｃｄ（Ｐ）ｇｕ．ＧｒｌｅａｏａｅｃｄｂＴ＂（ｅｈｌｈａｏｌｅａｏｕｎｕｅＬＳｒｐＭＣｐｏｆｔｎｗｓｔｔｙＭＩｍｔｙｔｉｌｔｚｌｍ）ｉｃｒｏｔｎｍｔｏｔ４ｎｏｉｒｉｄｅｅｚｙｔｒｉｎｏｒｉｅｄａ２ｈａｄｐａｏｈ
（ＬＳ．Ｔｅｃａｇｓｆａｉｉ（Ｎ）ＢＲＡｅｐｅｓｎｗｒｄｔｔｙｓｍ —ｑａｔａｖａ — ｉｅＲＥＩＡ）ｈｈｎｅｍｎＬｏｌｎ２ＮｘｒｓｉｅｅｅｃｄｂｅｉｕｎｉｔｅｒｌｔＴ—ＰＲＲ－ｍｏｅｅｔｉｅｍＣ．ｅｓｉ（）ＴｅｅｗｓｓｎｆａｔｉｅｅｃｅａｇｌｅｒｌｅｔｎｂｔｅｎｔｅＬＳａｄｃｎｒｌｒｕ（＜００）ｕｔｓ１ｈｒａｉｉｃｎｆｒｎｅｉｍｓｎｉｌｐｏｉｒｉｅｅＰｎｏｔｏｐＰｇｉｄｆｎａｃｌｆａｏｗｈｏｇ．５．（）ＭｅａｇａｃｌａｅｒｅｓｍＣｒｔｎｏｌｕｕｅｅｉｍＭｅａｇｌｅｅｒｔｕｈｍｒＣｒ－２ｓｉｓｎｓｃｔｏｅＥＭｐｏｅｓｎｎｒｌｃｌｒｄｍｄ．ｎｌｅｃｅｉｉｍａｙｔｕｓｎｉｌｓｃｅｍｃｏｅＥＭｐｏａｃｅｄｔｉｉＬＳｇｏｐｔａａｉｏｔｌｏｐｉｉｉｃｎｄｆｒｎｅ（＜．１，（）ＭｓｎｉｌｅａｘｒｓＬ［ｅＰｕｎｔｔｎｃｎｒｕ，ｗｔａｓｎｆａｔｉｅｅｃＰ００）３ｎｎｒｈｈｏｇｒｈｇｉｆｅａｇｌｃｎｅｐｅｓＮ３ａｃｌ２维普资讯・来自１９・４９・
论著・
脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖和分泌细胞外基质的研究
于力，郝志宏，王丽娜，翁志媛，赵丹，张又祥
【摘要】目的观察脂多糖（Ｐ）对大鼠肾小球系膜细胞（ＭＣ）增殖及分泌细胞外基质（ＣＬＳＧＥＭ）的作用。方法建立体外培养的大鼠Ｇ，鉴定后用于实验。实验分为两组：对照组和ＬＳ诱导组。甲基噻唑基四唑（ｒＭＣＰＭＴ）比色法测定２４４ｈ和８ｈ两个时点两组系膜细胞的增殖情况；ＥＩＡ法测定６ｈ２ｈ和２ＬＳ、１４ｈ系膜细胞培养上清液中
ｌａｘ（ＣａｍｔｒｒＥＭ）ｏｒｔｌｒｌｅａｇａｃｌ．ＭｅｈｄＴｅｃｌｒｄｏｅａｓｎｉｌｅｓ（ＭＣｆａｉｖｒｉｆａｇｍｅａｍｓｎｉｅｓｏｕｒｌｌｔｏｓｈｕｔｅｍｍｌｍｅａｇｌＧ）ｏｔｎｉｏｕｒａｃｌｒｔ
【关键词】肾小球肾炎，膜增生性；细胞外基质；系膜细胞；脂多糖【中图分类号】Ｒ６２６【９．文献标识码】Ａ【文章编号】１０９７（０７８—１９００７— ５２２０）１４９— ３
ＥｆｅｔｎｏｉｅａｉｎａｆｃｓｏＰｒｌｆｒｔｏｎｄｅｒｔｏｏｒｃｌｕａａｒｘｆＲａｏｅｕｌｅａｉｌＣｅｌＩｕｃｄｂｙＬｉｐｏｙａｃＳｃｅｉｎｆＥｘｔａｅｌｌｒＭｔｉｏｔＧｌｍｒａｒＭｓｎｇａｌｎｄｅｐｏｌｓ－
４ｈＴｅｃｎｅｔｆＥＭｒｔｉｅｒｔｎａｈ１ｈａｄ４ｈｗｒｅｅｔｄｂｈｎｙ８．ｈｏｔｎｓｏＣｐｏｅｎｓｃｅｉｔ６，２ｎ８ｅｅｄｔｃｅｙｔｅｅｚｍｅ—ｌｋｄｉｏｉｅｍｍｕｏｏｂｎｎｎｓｒｅｔ—ａｓｙｓａ
ｃａｉｅＹｉＡｈｈｒＵＬ，ＯＺｉ— ｈｎ，ＡＧＬｄＨｏｇＷＮｉ— ｎ，ｔａ．ｐｒｎｏｅｉｔｃ，ｕｎｚｏｉｔＰｏｌｓＨｓｉ１ａｅ１ａｔｔｆＰｄａｒｓＧａｇｈｕＦｒｅｐｅｏｔ．Ｄｅｍｅｉｓｐａ
Ｇｕｇｈｕ５１８Ｃｈｉａａｎｚｏ０１０，ｎ
【ｂｔａｔ０ｂｅｔｅＴｂｅｖｅｅｅｔｏＬｐｐｌａｃａｉｅ（Ｐ）ｏｒｌｅａｏｎｃｅｏｆｘａｅｕＡｓｒｃ】ｊｃｉｏｏｓｒｅｈｆｃｆｉｏｓｃｈｒｖｔｓｏｙｄＬＳｎｐｏｆｒｉａｄｓｒｉｏｔｃｌ－ｉｔｎｅｔｎｅｒｌ
ｗｒｓｂｉｈｄ，ａｄｕｅｏｘｅｍｅｔａｔｒｉｅｔｃｔｎＴｏｇｏｐｉｉｅｎｔｅｅｐｒｍｅｔｒｏｔｏｇｏｐａｄＬＳｅｅｅｔｌｅａｓｎｓｄｆｒｅｐｒｎｆｎｉａｉ．ｗｒｕｓｄｖｄｄｉｘｅｉｅｄｉｆｏｈｉｎｅｃｎｒｌｒｕｎＰｗｅ