比格犬三联高免血清制作与犬细小病毒抗体的检测
犬细小病毒核酸疫苗制备及免疫试验

中 圈分 类 号 : 8 2 4 ¥ 5 . 5 . ¥ 5 . l8 2 6 9 2
文 献 标 识码 : A
文覃 铺 号 : 0 75 3 ( 0 6 0 — 0 80 1 0 — 0毒 的 攻击 , P 而接种 空载体 制人和动物传染性疾病的潜力。核酸疫苗巳实验性
质 粒 和 生 理 盐 水 的 对 照 犬 则 全 部 发 病 。证 明 地用于鼠 , 以抗各种病毒和人 的肿瘤相关抗原 , 如流
所构建的核酸疫苗 (I S 1 能使 犬免 受犬 感病毒、 pRE VP ) 人类免疫缺陷病毒 I 狂犬病毒、 型、 乙型肝
的真核表达栽体 pR S进行连接 , IE 转化 到感受 核酸疫苗(u1c c ac e, A s ̄ n c iai vci sN V ) e d n 态细胞 J o Ml9中, 筛选 了真 核 重 组表 达 质粒 能引起机体保护性免疫反应的病原体抗原的编码基
pF P并 行 序 测 。 只 月 因 质 妻 载 上 后 的 粒 I ̄ 1 进 了 列 定 对6 9 克 到 冀 粒 孳 体 , 芝 组 质 RV , _
细小病毒强毒 的感染 。 关键词 : 核酸疫苗 ; 犬细小病毒 ; 疫 免
犬细小病毒 ( aieproi sC V) 17 C n av v u , P 于 98 n r
炎病毒、 牛疱疹病毒一 型、 I 人癌胚抗原以及淋巴细 胞性脉络丛脑膜炎病毒・
传统的灭活和致弱的活病 毒( V) P ML C V疫苗
收稿 日期 :0 51—5 2 0 —11 基金项 目: 全军 医学科研。 十五” 计划青年基金 资助 项 目(1 2 ) O QO7 作者筒介 : 邱 I 1 7 - )女 。 i( 9 1 。 云南 宣威 人 , 剐研 究员, 博士 。 主要从 事动物病毒 学厦 分子 生物学研 究.
国产犬用三联苗免疫效果的的检验

学 技 术 研 究 所 生 产 ) 。 胚 91 — 1日龄 S F鸡 胚 。 P
全部溶解后 ,颈部 皮下接种犬 5只 ,每 只犬 接种一支疫苗 (mL 。再观察 2 d 逐 日记录接种犬 的注射部位 、 5 ) 1, 精神 、 食 欲 、 温及 粪便性状 。 体 24 免 疫效 力试验 取疫苗 3瓶 , . 每瓶用 5 L生理盐水稀释 m 后 混合 , 肉接种犬 1 肌 5只( 为 3组 , 分 每组 5只 )每只犬接 , 称取 08 . g氯 化钠 ,加入 蒸馏 水至 5 种疫苗 l 。免后 2 d 分别用 R V、P C V强毒分别攻 mL 1, D C V、A
试 验 研 究
国产 犬 用三联 苗免 疫效 果 的 的检验
王 亭 王 时 ,
( . 江省伊春市伊春 区畜牧兽 医局 ,伊 春 1 3 0 ; 1黑龙 0 0 5 2中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 ,哈尔滨 1 0 0 ) . 0 1 5
关键词 : 犬瘟热; 犬细 ,病毒; 3 - 犬传 染性肝 炎
3 结 果
1 .. R K 猫 肾传代细胞系 ) MD K( 。 .22 6 C F ( 和 C 犬 肾传代细胞系) 营养液 : M培养基 lg加双蒸水至 10 mL用蔡 氏滤器过 ME O, 00 , 滤。分装于 5 0 0 mL盐水瓶 中, 每瓶 40 。置 4c 5 mL 保存备用 。 1 . C FC F M C . 3 E 、R K、 D K细胞维持液 , 6 血清含量为 l 其余 %, 成分 同营养液。 1 . 02 %胰 蛋 白酶 .4 . 6 5 胰蛋白 0 5 . g加 P S液至 10 。 2 B 0 mL
21 无 菌 检 验 取 成 品苗 5 , 加 生 理盐 水 5 L溶 解 。取 . 瓶 每瓶 m
犬细小病毒单克隆抗体的制备及其与免疫血清在血凝抑制中的比较

犬细小病毒单克隆抗体的制备及其与免疫血清在血凝抑制中的
比较
符兆英;朱关福
【期刊名称】《微生物学通报》
【年(卷),期】1994(021)002
【摘要】将用犬细小病毒免疫的BALB/c小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞在聚乙二醇作用下融合,经筛选、克隆、得到6株稳定分泌犬细小病毒单克隆抗体的杂交瘤。
用杂交瘤腹水作血凝抑制试验,检测分别含有犬细胞病毒,猫泛白细胞减少症病毒和水貂肠炎病毒的标本,及CPV感染粪便标本,并与免疫血清作对比。
结果表明,用单克隆抗体作血凝抑制试验,比用免疫血清作具有特异性高、操作作简便省时等优点,而二者敏感性一致。
【总页数】5页(P88-92)
【作者】符兆英;朱关福
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R392-33
【相关文献】
1.人穿孔素C肽段的单克隆抗体和免疫血清的制备和鉴定 [J], 李芳秋;周向阳;秦卫松;武建国
2.犬细小病毒单克隆抗体的制备及其在胶体金免疫层析试纸研发中的应用 [J], 马
辉;权国辉;乔宏兴;郑鸣;赵绪永;王永芬;边传周
3.犬细小病毒单克隆抗体在犬细小病毒病治疗中的应用 [J], 旺恭富;杨沈;殷玉武
4.犬细小病毒基因疫苗单克隆抗体的制备 [J], 邱薇;胡挺松;王文博;余静;陈刚;张富强;郑颖;范泉水
5.犬细小病毒单克隆抗体在犬细小病毒病治疗中的应用 [J], 汪恭富;杨沈;朱燕;葛继霞;王存刚;梁军;殷玉武
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比格犬三联高免血清制作与犬细小病毒抗体的检测

比格犬三联高免血清制作与犬细小病毒抗体的检测作者:黄丽萍刘新文来源:《现代农业科技》2011年第09期摘要以犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)和犬传染性肝炎病毒(ICHV)的灭活强毒接种于7只基础免疫后的比格犬,接种10 d后检测犬体内血清的CPV抗体效价。
对抗体效价大于或等于1∶1 280的犬,放血分离血清而得三联高免血清。
试验结果为:把效价为1∶320的抗原用于试验的7只犬中,1~6号犬的血清效价均等于或大于1∶1 280,达到高免血清效价要求。
而7号犬的血清效价为1∶640,小于1∶1 280,不符合试验要求。
关键词比格犬;三联高免血清;细小病毒强毒;抗体水平检测中图分类号S858.292.5;S852.5;Q95-33文献标识码A文章编号 1007-5739(2011)09-0352-03犬细小病毒、犬瘟热和犬传染性肝炎是对犬危害较大的3种最常见的传染性疾病,而制作三联高免血清就是为了治疗、预防和控制这3种疾病的发生和流行。
其中犬细小病毒(CPV)病是近年来发现的烈性传染病,以急性出血性肠炎和非化脓性心肌炎为临床特征[1-4]。
Eugster 等(1977年)首先报道此病。
1978年,美国、欧洲和澳大利亚几乎同时分离获得犬细小病毒,之后此病多次发生于世界许多国家和地区。
我国梁士哲等(1982年)、朱雄正等(1983年)最早报道此病,目前已广泛流行于华东、华南、华北、东北、西南等地区,是危害我国养犬业最为严重的疾病。
本文对所制作的三联高免血清的CPV抗体进行检测,目的在于检查实验犬场免疫程序的合理性及所用疫苗的效力,为固定免疫程序、有效降低犬细小病毒等传染病的发病率,最终为预防和控制这几种传染病提供科学依据。
1材料与方法1.1三联高免血清的制作与使用1.1.1试验材料。
供试动物:广东省中山市某实验犬场健康纯种比格犬,1雄6雌,共7只,均为6~7岁龄,并按1~7号的顺序编号。
该实验犬场已确诊患细小病毒或以细小病毒病为主合并感染的1~3月龄病犬15只,其中10只(4雄6雌)处于疾病初中期,5只(3雄2雌)处于疾病后期。
比格犬三联高免血清制作与犬细小病毒抗体的检测

比格犬三联高免血清制作与犬细小病毒抗体的检测摘要以犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)和犬传染性肝炎病毒(ICHV)的灭活强毒接种于7只基础免疫后的比格犬,接种10 d后检测犬体内血清的CPV 抗体效价。
对抗体效价大于或等于1∶1 280的犬,放血分离血清而得三联高免血清。
试验结果为:把效价为1∶320的抗原用于试验的7只犬中,1~6号犬的血清效价均等于或大于1∶1 280,达到高免血清效价要求。
而7号犬的血清效价为1∶640,小于1∶1 280,不符合试验要求。
关键词比格犬;三联高免血清;细小病毒强毒;抗体水平检测犬细小病毒、犬瘟热和犬传染性肝炎是对犬危害较大的3种最常见的传染性疾病,而制作三联高免血清就是为了治疗、预防和控制这3种疾病的发生和流行。
其中犬细小病毒(CPV)病是近年来发现的烈性传染病,以急性出血性肠炎和非化脓性心肌炎为临床特征[1-4]。
Eugster等(1977年)首先报道此病。
1978年,美国、欧洲和澳大利亚几乎同时分离获得犬细小病毒,之后此病多次发生于世界许多国家和地区。
我国梁士哲等(1982年)、朱雄正等(1983年)最早报道此病,目前已广泛流行于华东、华南、华北、东北、西南等地区,是危害我国养犬业最为严重的疾病。
本文对所制作的三联高免血清的CPV抗体进行检测,目的在于检查实验犬场免疫程序的合理性及所用疫苗的效力,为固定免疫程序、有效降低犬细小病毒等传染病的发病率,最终为预防和控制这几种传染病提供科学依据。
1材料与方法1.1三联高免血清的制作与使用1.1.1试验材料。
供试动物:广东省中山市某实验犬场健康纯种比格犬,1雄6雌,共7只,均为6~7岁龄,并按1~7号的顺序编号。
该实验犬场已确诊患细小病毒或以细小病毒病为主合并感染的1~3月龄病犬15只,其中10只(4雄6雌)处于疾病初中期,5只(3雄2雌)处于疾病后期。
供试药物:灭活的犬细小病毒、犬瘟热病毒和犬传染性肝炎病毒,由北京军事医学科学院提供;双抗[青霉素(80万U/瓶)和链霉素(100万U/瓶)],购自石家庄制药有限公司;犬瘟热、犬传染性肝炎、犬细小病毒病、犬副流感、腺病毒乙型感染、钩端螺旋体病的六联苗,美国富道动物保健集团出品。
一种犬三联抗体检测试剂盒的制作方法

一种犬三联抗体检测试剂盒的制作方法一、引言犬三联抗体检测试剂盒是一种用于检测犬体内抗体水平的工具,通过检测犬血液中的特定抗体,可以判断犬是否感染某些疾病或接种疫苗后是否产生免疫反应。
本文将介绍一种制作犬三联抗体检测试剂盒的方法。
二、材料准备制作犬三联抗体检测试剂盒所需材料包括:1. 犬血清样本:需要从不同犬只中收集一定量的血液样本,用于后续的实验操作。
2. 抗原:根据需要检测的抗原种类选择相应的抗原,可以是病原微生物、疫苗等。
3. 抗体:选择与目标抗原相匹配的抗体,用于检测犬血液中的特定抗体。
4. 辅助试剂:如酶标记的二抗、底物、缓冲液等,用于辅助检测过程。
5. 检测板:选择适合的微孔板,用于将试样和试剂加入其中。
6. 试剂盒:包括各种试剂和辅助材料,用于制作检测试剂盒。
三、制作过程1. 抗原包被:将选定的抗原溶液加入微孔板中的每个孔中,使其充分吸附在孔壁上,形成抗原包被层。
孔的数量应根据实验需求而定。
2. 阻断:在抗原包被之后,加入适量的阻断剂,如牛血清蛋白等,以防止非特异性吸附。
3. 血清样本加入:将收集到的犬血清样本加入微孔板中的相应孔中,使其与抗原发生反应。
4. 抗体加入:将与目标抗原相匹配的抗体加入微孔板中的相应孔中,与犬血清样本中的特定抗体结合。
5. 洗涤:用洗涤缓冲液反复洗涤微孔板,去除非特异性吸附的物质,以减少干扰。
6. 二抗加入:加入适量的酶标记的二抗,与孔中的抗体结合,形成复合物。
7. 洗涤:再次用洗涤缓冲液洗涤微孔板,去除未结合的二抗。
8. 底物加入:加入适量的底物,使其与酶标记的二抗发生反应,产生显色或荧光信号。
9. 反应停止:加入适量的停止液,停止底物的反应,防止信号进一步增强。
10. 读取结果:使用酶标仪或荧光仪等设备读取微孔板中的吸光度或荧光强度,根据结果判断犬血液中的特定抗体水平。
四、结论通过以上制作方法,可以制作出一种犬三联抗体检测试剂盒。
该测试剂盒可以用于检测犬血液中的特定抗体水平,从而判断犬是否感染某些疾病或接种疫苗后是否产生免疫反应。
犬瘟热、犬细小病毒二重实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

犬瘟热、犬细小病毒二重实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用犬瘟热(Canine Distemper,CD)和犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)是近几年来常见的犬类传染病,二者对犬只的健康构成了严重威胁。
能够准确、快速地检测和诊断这两种病毒感染对于犬只的治疗和控制措施至关重要。
因此,本研究针对犬瘟热和犬细小病毒的检测方法进行了研究和建立。
首先,我们收集并准备了一定数量的狗狗样本,包括鼻拭子、咽拭子等。
然后,我们进行了犬瘟热和犬细小病毒的核酸提取并合并提取物,以便于后续的实验检测。
接下来,我们设计了特异性良好的引物和探针,以便在PCR反应中识别和扩增目标病毒的核酸序列。
在选择PCR方法时,我们考虑到了实时荧光定量PCR的优势。
实时荧光定量PCR(Real-time FluorescentQuantitative PCR)不仅可以定量分析目标病毒的核酸水平,还能在PCR反应过程中实时监测扩增曲线,并且具有高灵敏度和特异性。
因此,我们选择了实时荧光定量PCR作为我们的检测方法。
接下来,我们在合适的实验条件下对PCR体系进行了优化,并进行了反应体系中酶的最佳浓度、模板DNA的最佳用量、引物和探针的最佳浓度等因素的优化试验。
通过不断调整和优化,我们建立了比较稳定和可靠的实时荧光定量PCR检测方法。
为了验证我们建立的检测方法的准确性和可靠性,我们选取了已知感染犬细小病毒和犬瘟热的样本进行了实验检测。
结果显示,我们的实时荧光定量PCR方法可以成功地检测到目标病毒的核酸序列,并且与其他常用检测方法的结果相一致。
在进一步的应用中,我们还测试了一些实际临床样本。
结果显示,我们的实时荧光定量PCR方法不仅可以对犬瘟热和犬细小病毒进行可靠的检测,而且具有高灵敏度和特异性。
因此,我们的方法可以应用于疫情监测、疫苗评估和临床诊断等方面。
总结起来,我们成功地建立了一种犬瘟热和犬细小病毒的实时荧光定量PCR检测方法。
狗狗细小测试需要那些-小奶狗要接受8项测试

狗狗细小测试需要那些-小奶狗要接受8项测试测细小的试纸怎么看测试小试纸看测试线看测试线是阳性还是阴性。
一般试卷上有两行的时候,说明狗狗患了细小。
阳性C线和T线均出现,试纸条上有两条线,表明感染了细小病毒或犬瘟热病毒。
阴性有C线,没有T线,说明没有感染试纸无效如果没有C线,如果有或者没有T线,说明试纸坏了。
小试卷的使用如下1、将收集的犬粪便分泌物用棉签放入装有新稀释液的样本管中,搅拌均匀。
用吸管吸取上清液。
2、将四滴提取物滴入试纸条的样品孔中,等待5-10分钟,观察测试结果。
3、测试结果显示一条红线为负,两条红线为正。
消极表示小狗没有生病,可以放心阳性表示小狗生病,需要进一步治疗。
使用小试纸时为了不影响试纸的准确性,请在使用试纸前24小时不要打针吃药。
如果狗狗刚打完疫苗,建议在疫苗打完一周后再做检测。
大多数疫苗是弱阳性病毒,注射疫苗后可能呈弱阳性。
狗小的时候,要及时给狗治病。
小奶狗要接受8项测试奶萌的小狗狗,要经过哪些测试,才能被选为导盲犬训练生?1分意味着狗狗是内向敏感的类型,而7分正相反,代表狗狗非常的外向活泼...而导盲犬需要的奶狗,要是理想的4分选手!1、随行测试,测试狗狗顺从度和忠诚度。
测试人员在前面,边走边呼唤狗狗...2、召回测试,测试狗狗在注意力被分散,召回它时的反应如何!贪玩的狗狗估计会被这个测试给淘汰!3、约束测试,评估狗狗被抱起来时的反应...太紧张或太兴奋估计都不行!4、声音测试,看狗狗是否害怕不熟悉的声音...想成为导盲犬,就一定要稳!5、抚摸测试,被抚摸时它是否会觉得舒服...6、松鼠测试,测试狗狗的注意力和服从度...看到松鼠经过,没有表现攻击性,以及测试人员一召就回,小家伙表现特别棒!7、隧道测试,8、坡道测试,看狗狗面对陌生地势以及遇到障碍物时的反应!这个全程都特别专注的,为我们做测试展示的小家伙,表现得也是很棒了!当然这些测试,只是选出适合导盲犬训练的尖子生,接下来才是重头戏:在8项测试里,表现的很好的狗狗,将进行导盲犬训练,小家伙们从此就要走向另外一条,完全不同于宠物狗的道路了...了解导盲犬的诞生过程,有助于我们普通人理解为什么导盲犬需要尊重和包容:为了帮助人类,它们要拼上所有的天赋和努力!狗狗细小测试纸怎么看最佳答案:C是对照线:不管狗狗是不是感染的细小病毒,都会出现一条红色的线。
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于 疾病 后 期 的 5只犬 为 另 一组 。 时颈 部 皮下 注射 自制 三 同
联 血清 8 1 / , ~ 0mL只 密切 注意病 犬 的变化 , 以检 测此 三联 高 免 血清 的治疗效 果 。
1 . 犬 细 小 病 毒 抗 体 效 价 的 检 测 2
先 报道 此病 。9 8年 , 国 、 洲和 澳 大利 亚 几乎 同时 分离 17 美 欧
使 用 时 取 甲 液 7 0mL 乙 液 2 0rL 生 理 盐 水 1 0 2 + 8 + n 0mL配 0
1 三 联 高 免 血 清 的 制 作 与 使 用 . 1
成 2 0 LP S 以每 45 g 装 , 菌后 备用 。 0 0m B , . 4k 分 灭 主要 仪器 :
1 mi 压灭 菌后 , 0 4o保 存 备用 ;. o / H值 为 5 n高 置 ~ C 01 5m LLp
区, 是危 害 我 国 养 犬业 最 为 严 重 的疾 病 。 文对 所 制 作 的 本
三联 高免 血清 的 C V抗 体 进行 检测 , P 目的在 于检 查实 验犬
场 免疫程 序 的合理性 及 所用疫 苗 的效 力 , 固定 免疫 程序 、 为
犬细 小病 毒 、 犬瘟 热 和犬 传染 性 肝 炎 是对 犬 危 害较 大
灭 菌安 瓶 分 装血 清 , 1mL血清 中加 入 5 0 1 0 在 0 ~ 0U的双 0
的 3种最 常 见 的传 染性 疾病 。 而制 作三 联 高免 血 清就 是 为
了 治疗 、 预防 和控 制这 3种疾病 的发 生 和流行 。 中犬细 小 其 病毒 ( P 病 是近年 来发现 的 烈性传染 病 , C V) 以急性 出血 性肠
炎 和 非 化 脓 性 心 肌 炎 为 临 床 特 征 l1 use 等 (9 7年 ) 1 。 gt -E 4 r 17 首
抗 后 , 血清 置于一 O℃冷 冻备 用 。 是治疗 试验 。 病犬 隔 把 l 三 把 离 饲养 并 分成 2组 , 于疾 病 初 中期 的 1 处 0只 犬 为一 组 ; 处
有效降 低犬 细小 病 毒等 传染 病 的发 病 率 , 终为 预 防 和控 最 制这 几 种传染 病提供 科学依 据 。
1 材 料 与 方 法 来自7 . 2的缓 冲液 (B ) P S 的配制 , 甲液用 N 2 P 41HO5 .g a O・2 2 3 加 H 7
水至 1 0 0 0mL 乙液 用 N H P 4 H 02 . 加水至 1 0 mL 。 a 2O " 2 3 2 4g O0 ,
个 孔 )水 浴锅 , ; 由北 京市 医 疗器 械 设 备厂 制造 ; 移液 器 , 由
上海求 精玻璃 仪器厂 制造 。
病 为 主合 并 感染 的 1 3月龄 病 犬 1 ~ 5只 , 中 1 其 0只 ( 4雄 6 雌 ) 于疾 病初 中期 , ( 处 5只 3雄 2雌 ) 于疾 病后 期 。 试药 处 供 物 : 活 的犬细 小 病毒 、 灭 犬瘟 热 病毒 和 犬传 染性 肝 炎病 毒 .
1 . 试验材 料 。 试动物 : .1 1 供 广东 省 中山市 某 实验 犬场 健康
纯 种 比格犬 , 雄 6雌 , 7只 , 为 6 7岁 龄 , 按 1 7号 1 共 均 ~ 并 ~ 的顺 序编 号 。 实验 犬 场 已确 诊患 细 小病 毒 或 以细 小病 毒 该
L 0 24 G1— .A型高速 离心机 和低 速离 心机 ; V型反 应板 ( 2 6 1x
获得 犬 细小 病 毒 , 后 此病 多次 发 生于 世 界许 多 国家 和 地 之 区 。 国梁 士 哲等 (9 2年 ) 朱 雄 正等 (9 3年 ) 早报 道 我 18 、 18 最
此病, 目前 已广 泛流 行 于华 东 、 南 、 华 华北 、 东北 、 南 等地 西
121 试验 材 料 。 剂 : . . 试 白猪猪 血 , 自中 山市 肉联 厂 ; P 采 CV 抗 原 , 自北 京军事 医学 科学 院 ; 细胞保 存液 ( 氏液 ) 购 红 阿 的 配置, 葡萄 糖 20 十 .5 枸橼酸钠 08 枸橼 酸 00 5g 氯化 钠 g . 0 . + 5 04 , .2g 加蒸 馏水 至 10mL, 后过滤 , 0 然 以每 45 g分 装 , . k 4 经
动物科学
现代 农业科 技
2 1 年 第 9期 01
比格犬 三联 高免血清制作与犬细小病毒抗体的检测
黄丽萍 刘新 文
(广 东 省 中 山市 农 产 品 质量 监 督 检 验所 , 广东 中山 5 8 0 ; 中 山 市 南 区畜 牧 兽 医 站 ) 2 4 0
摘要 以犬 细小病 毒 ( P ) 犬瘟 热病 毒 ( D ) 犬传染 性肝 炎病 毒 ( H ) 灭 活强毒 接 种 于 7只基 础 免 疫后 的 比格 犬 , 种 1 d CV、 C V和 I V的 C 接 0 后检 测犬体 内血 清的 C V抗体 效价 。 P 对抗 体效 价 大于或 等 于 112 0的犬 , 血 分 离血 清而得 三联 高免 血 清。 : 8 放 试验 结果 为 : 效价 为 l 2 把 :0 3 的抗 原 用 于试 验 的 7只 犬 中, ~ l 6号 犬的 血清 效 价均 等 于或 大于 112 0, 到 高 免血 清效 价要 求。 7号 犬 的血 清 效 价 为 l60. : 8 达 而 :4 小于 ll 8 不 符 合 试 验 要 求 。 : 2 0, 关键词 比格 犬 : 三联 高免血 清 ; 细小病毒 强毒 ; 抗体 水平检 测 中 图分 类号 ¥ 5 . 2 ;8 25 Q 5 3 文献 标识码 A 8 8 9 . ¥ 5 .; 9 — 3 2 5 文 章编 号 l O — 7 9 2 l )9 0 5 — 3 O 7 5 3 (O 10 ~ 3 2 0