紫外分光光度法测定人参及三七中总皂苷含量
总皂苷的测定方法
总皂苷的测定方法（分光光度法）本方法适用于保健食品中总皂苷的测定。
本方法人参皂苷Re的最低检出量为2μg/mL。
1. 方法提要样品中总皂苷经提取、PT-大孔吸附树脂柱预分离后，在酸性条件下，香草醛与人参皂苷生成有色化合物，以人参皂苷Re为对照品，于560nm处比色测定。
2. 仪器（1）722分光光度计。
（2）PT-大孔吸附树脂柱（河北省津杨滤材厂）。
（3）超声波振荡器。
3. 试剂（1）甲醇（分析纯）。
（2）乙醇（分析纯）。
（3）人参皂苷Re标准品（中国药品生物制品检定所）。
（4）5%香草醛溶液：称取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100mL。
（5）高氯酸（分析纯）。
（6）冰乙酸（分析纯）。
（7）人参皂苷Re标准溶液：精确称取人参皂苷Re标准品20.0mg，用甲醇溶解并定容至10mL，即每1mL含人参皂苷Re2.0mg。
（8）重蒸水。
4. 测定步骤（1）样品处理：a. 固体样品：称取1.0g左右样品于100mL烧杯中，加入20~40mL85%乙醇，超声波振荡30min，再定容至50mL，摇匀，放置，吸取上清液1.0mL挥干后以水溶解残渣，进行柱分离。
b. 液体样品：含乙醇的酒类样品：准确吸取1.0mL样品放于蒸发皿中，蒸干，用水溶解残渣，用此液进行柱层析；非乙醇类液体样品：准确吸取1.0mL样品（如浓度高或颜色深，需稀释一定体积后再取1.0mL）直接进行柱分离。
（2）柱层析：以PT-大孔吸附树脂柱进行层析分离，准确吸取上述已处理好的样品溶液1.0mL上柱，用15mL水洗柱，以洗去糖分等水溶性杂质，弃去洗脱液，再用20mL85%乙醇洗脱总皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中，于水浴上蒸干，以此作显色用。
（3）显色：在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL 5%香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣溶解，再加0.8mL高氯酸，混匀后移入10mL比色管中，塞紧盖子于60℃以下水浴上加温15min取出，冷却后准确加入冰乙酸5.0mL，摇匀后以1.0cm比色皿、于560nm处与人人参皂苷Re标准管同时比色。
人参片的鉴定实验报告
人参片的鉴定实验报告实验目的：本实验旨在通过对人参片的鉴定，了解其化学成分和药理作用，以及评价其质量。
实验原理：人参片是以生晒、砂炒或红参为原料，经过处理和加工而制得的片状制剂。
人参片含有多种活性成分，如人参皂苷、人参多糖、挥发油和人参酮等。
其中，人参皂苷是药理活性最为明显的成分，具有兴奋中枢神经、增强机体免疫功能、抗氧化、改善记忆力和抗肿瘤等作用。
实验步骤：1. 人参片外观检查：观察人参片的形状、颜色和气味，记录其外观特征。
2. 酸不溶性灰分测定：取一定量的人参片，将其加热至灰烬并在550℃±25℃下灼烧2小时，冷却后称重，计算酸不溶性灰分的含量。
3. 总皂苷含量测定：按照适当的方法，提取人参片中的总皂苷，并用紫外分光光度法测定总皂苷的含量。
4. 薄层色谱鉴别：取一定量的人参片，进行薄层色谱检测，比较色谱图与标准品的相似度。
5. 老年式药材指纹图谱鉴别：采用高效液相色谱和质谱技术，建立人参片的指纹图谱，并与标准品进行比对。
6. 药理效应观察：利用适当的方法，评价人参片的药理效应，如中枢兴奋作用、免疫调节作用和抗氧化能力等。
实验结果及分析：根据人参片的外观特征和气味，清晰地观察到片状、棕黄色且具有独特的人参味道。
经过酸不溶性灰分测定，测得其酸不溶性灰分的含量为X%。
通过紫外分光光度法测定，得到人参片中的总皂苷含量为X mg/g。
经过薄层色谱和老年式药材指纹图谱鉴别，证实人参片的组成与标准品相似度高。
在药理效应观察中发现，人参片具有明显的中枢兴奋作用、免疫调节作用和抗氧化能力。
结论：通过本实验的鉴定，可以得出以下结论：1. 根据外观特征和气味，判断人参片为片状、棕黄色且具有人参味道。
2. 经过酸不溶性灰分测定，确定人参片的酸不溶性灰分含量。
3. 利用紫外分光光度法测定了人参片中的总皂苷含量。
4. 通过薄层色谱和老年式药材指纹图谱鉴别，验证了人参片的质量。
5. 在药理效应观察中，人参片表现出中枢兴奋作用、免疫调节作用和抗氧化能力等。
血塞通泡腾片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量测定
血塞通泡腾片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量测定何三民;余志怡;戴德雄【摘要】目的建立血塞通泡腾片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量测定方法.方法色谱柱为Kromateck C18柱(250 mm×4.6mm,5μm),检测波长203 nm,检测温度35℃.结果人参皂苷Rb1进样量线性范围为1.584～7.920μg,人参皂苷Rg1为1.616～8.080 μg,三七皂苷R1为0.416～2.080μg;6批样品的总皂苷含量平均值为33.18 mg/片.结论所用方法简便、灵敏、专属性强、重复性好,可作为血塞通泡腾片的质量控制方法.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2011(020)011【总页数】2页(P30-31)【关键词】血塞通泡腾片;三七皂苷R1;人参皂苷Rg1;人参皂苷Rb1;高效液相色谱法【作者】何三民;余志怡;戴德雄【作者单位】浙江省金华市中心医院,浙江,金华,321000;浙江省金华市中心医院,浙江,金华,321000;浙江维康药业有限公司,浙江,丽水,323000【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0血塞通泡腾片为三七总皂苷加辅料制成的泡腾片，具有活血祛瘀、通脉活络之功效，用于脑路瘀阻、中风偏瘫、心脉瘀阻、胸痹心痛，脑血管病后遗症、冠心病心绞痛属上述证候者，临床效果显著。
三七叶总皂苷中含人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和三七皂苷R1，原颗粒剂采用紫外分光光度法测定人参总皂苷[1]，测定方法的准确性差。
为了有效控制该产品的质量，笔者参考相关文献建立了高效液相色谱法[2-4]，用于测定血塞通泡腾片中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量，方法简便、准确、重复性好，可作为该制剂的质量控制方法。
1 仪器与试药Agilent 1100型液相色谱仪，浙江大学N 2000色谱工作站;岛津UV-1240型紫外分光光度计;Sartorius BP 211D型电子天平;JL-180 DTH型超声波清洗器。
三七皂苷含量标准
三七皂苷含量标准三七，又称田七、人参三七，是五加科人参属植物，具有丰富的药用价值。
三七皂苷是三七的主要活性成分，具有抗炎、镇痛、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，三七皂苷含量的测定对于评价三七质量具有重要意义。
本文主要对三七皂苷含量的测定方法及其标准进行研究。
一、三七皂苷含量的测定方法1. 液相色谱法（HPLC）液相色谱法是目前最常用的三七皂苷含量测定方法。
该方法具有灵敏度高、分离效果好、重复性好等优点。
常用的检测器有紫外检测器（UV）和蒸发光散射检测器（ELSD）。
根据三七皂苷的化学性质，可以选择适当的色谱柱和流动相进行分离和检测。
2. 薄层色谱法（TLC）薄层色谱法是一种常用的定性分析方法，也可以用于三七皂苷含量的初步测定。
该方法操作简单，但灵敏度和分离效果相对较低。
常用的显色剂有碘化铋钾、香草醛-硫酸等。
3. 毛细管电泳法（HPCE）毛细管电泳法是一种新型的分离分析方法，具有分离效果好、操作简单、运行成本低等优点。
该方法可以用于三七皂苷组分的分离和含量测定，但目前仍处于研究阶段。
二、三七皂苷含量标准三七皂苷含量标准是评价三七质量的重要依据。
目前，国内外尚无统一的三七皂苷含量标准。
不同国家和地区根据当地的气候、土壤、生长条件等因素，制定了相应的质量标准。
例如，中国药典规定三七中人参皂苷Rb1、Rg1和Re的含量分别不低于0.8%、0.5%和0.3%。
三、三七皂苷含量标准的影响因素1. 品种差异：不同品种的三七，其皂苷含量存在显著差异。
例如，云南三七的皂苷含量通常高于云南三七。
因此，在制定三七皂苷含量标准时，需要考虑到品种的差异。
2. 生长环境：生长环境对三七皂苷含量也有显著影响。
例如，土壤肥力、光照时间、降水量等因素都会影响三七的生长和皂苷含量。
因此，在制定三七皂苷含量标准时，需要考虑到生长环境的差异。
3. 采收时间：三七的生长周期较长，不同时间段采收的三七，其皂苷含量存在显著差异。
一般来说，种植后2-3年的三七，其皂苷含量高。
三七总皂苷的制备及其药理作用的研究进展
三七是伞形科中最有价值的中药材之一。它能缓解疲劳、止血、消肿、止痛。明朝著名药剂师李世珍将三七皂苷称为“金不换”。三七的含量是判断三七质量的主要依据。萃取方法包括有机溶剂萃取、酶法萃取、超声波萃取、微波萃取、酸水解、大孔吸附树脂萃取等，但乙醇回流法被广泛应用。目前，对三七总皂苷的组成进行了色谱鉴定和分析。三七皂苷主要由人参皂苷Rb2、Rc、Rd、Rh2、Re、Rgl和70多种苷类组成。采用香草醛-高氯酸法、紫外分光光度法和色谱法测定三七总皂苷的含量。
Panax notoginseng, the main pharmacoactive substance of ginseng is Damadine type ginsenoside. According to the structure of saponins, these saponins can be divided into propanaxadiol and propanaxetriol. The proportion of proginsenoside in total ginsenoside was higher than that in Panax notoginseng. In addition, ginsenosides also contain Panax notoginseng saponins: Panax notoginseng saponins R1. As we all know, the traditional usage of Panax notoginseng and ginseng is very different. Therefore, the pharmacodynamics difference between Panax notoginseng and Panax notoginseng is determined by the specific saponins or components of Panax notoginseng saponins. The preparation and pharmacological action of Panax notoginseng saponins were studied in this paper.
分光光度法测定总皂苷含量-实验流程图-李熙灿-XicanLi
【简介】皂苷广泛存在于中药及其他植物中，而且化学结构大同小异的皂苷往往同时存在。
为了测定这些 皂苷的总含量，便建立了总皂苷的检测方法。
总皂苷的检测多使用分光光度法，并以某种标准品绘制 工作曲线，依该曲线所建立的回归方程，计算其含量。
【检测方法与实验流程图】【文献】 Jian Lin, Xican Li, Lu Han, Fei Li, Wenbiao Lu, Ye Bai, Dongfeng Chen Folium Sennae Protects against Hydroxyl Radical-induced DNA Damage via Antioxidant Mechanism: An in vitro Study. Botanical studies. 2014; 55:16.【溶液配制】1. 香草醛-冰醋酸溶液（测试液）配制：精密称取25mg 香草醛，加冰醋酸定容至5mL 。
即制成5mg/mL 香草醛-冰醋酸测试液。
2. 样品液配制：将待检测的样品用甲醇溶解， 配成约5mg/mL 的样品液。
具体浓度视样品的溶解度而定， 但是必须有精确的数据。
3.齐墩果酸标准品溶液配制： 精密称取齐墩果酸1mg ，加甲醇定容至5mL ，配成0.2mg/mL 齐墩果酸标 准品溶液。
（也可以使用其他的皂苷物质，如人参皂苷 Rg3。
但必须是纯的化合物）4. 高氯酸：分析纯试剂。
5. 冰醋酸：即纯的无水乙酸（分析纯）【标准曲线绘制】（齐墩果酸）取上述齐墩果酸溶液 x g L （x=0，40，80，120，160，200），依“实验流程图”，在70C 水浴15mim 后呈桃红色。
以第一份溶液（x=0）作为空白对照，测 A 540nm 值。
以“产物混合物”时的齐墩果酸的质量， 为横坐标，A 540nm 值为纵坐标，绘制标准曲线。
以此标准曲线计算，得线性回归方程。
【样品液的测定】将上述“实验流程图”中的“齐墩果酸标准品溶液”换成样品液，进行实验，并测定其此 A 540nm 代入线性回归方程，即可计算出其总皂苷的含量（以齐墩果酸计） 分光光度法测定总皂苷含量：实验流程图2017.10 A 540nm 值。
分光光度法测定三七伤药胶囊中三七总皂苷的含量
分光光度法测定三七伤药胶囊中三七总皂苷的含量
李文仕
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2010(023)001
【摘要】目的:建立三七伤药胶囊中三七总皂苷含量测定的方法.方法:采用比色法,通过对实验条件、线性、空白、精密度、稳定性、重复性、回收率进行考察,从而建立三七伤药胶囊中三七总皂苷的含量测定方法.结果:建立了以水饱和正丁醇为溶剂,超声处理20分钟,碱洗,甲醇转溶,显色,用紫外-可见分光光度仪在550 nm处测定三七伤药胶囊中三七总皂苷含量的方法.结论:本方法简便,准确,灵敏度高,重复性好,可作为该制剂中三七总皂苷含量测定的方法.
【总页数】3页(P5-7)
【作者】李文仕
【作者单位】广西百色食品药品检验所,百色,533000
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.HPLC法测定腰痹通胶囊中三七总皂苷的含量 [J], 姚青;高晓艳;凌娅;
2.高效液相色谱法测定三七伤药胶囊中芍药苷含量 [J], 韦志疆
3.薄层色谱扫描法测定三七伤药胶囊中人参皂苷Rb1、Rg1的含量 [J], 郑耀东
4.三七总皂苷含量的紫外分光光度法测定 [J], 刘旭;付青姐;李明春;徐江平
5.心痛宁胶囊中三七总皂苷的含量测定方法研究 [J], 崔洋
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紫外分光光度法测定参芪三七胶囊中总皂苷含量
紫外分光光度法测定参芪三七胶囊中总皂苷含量岳展鹏;王贤英【摘要】Objective To determine the content of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules. Methods The content of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules was determined by an ultraviolet-visible speetrophotometer at 542 nm with perchloric acid as the ehromogenie reagent. Results The total saponins was linear in the range of 6. 87-41. 22 μg/mL, Y=0. 015 54 X+0. 002 9, r=0. 999 6 ( n=6 ) , and the average recovery rate was 98. 32%, RSD=1. 08% ( n=9 ) . Conclusion The determination method of total saponins is simple, fast, accurate with high sensitivity as well as good repeatability, which can be applied for qualitative discrimination of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules.%目的：建立测定参芪三七胶囊中总皂苷含量的紫外分光光度法。
方法采用紫外分光光度仪，于542 nm波长处，以高氯酸显色法测定总皂苷含量。
结果总皂苷质量浓度在6.87~41.22μg/mL范围内与峰面积线性关系良好，Y=0.01554 X+0.0029，r=0.9996( n=6)，平均回收率为98.32%，RSD为1.08%( n=9)。
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线性范围
反应温度和反应时间的影响
将人参总皂苷2浓
?
仪器和试剂
° 2∞
硫酸在设定的温度下反应 定时取样 测定 型和
⁄ ≅
型紫外 可
∀ 人参总
处的吸光度 ∀ 至吸光度不再升高 即可认为 反 应 已 达 完全 ∀ 结果在
2 3
见分光光度计 超声波清洗器 ⁄ 大孔吸附树脂 天津 骨胶厂 ∀ 装入玻璃层析柱 皂苷和人参 皂 苷 所 对照品 中国药品生物制品检定
3 3 3 4
蒸干 以浓硫酸溶解残渣并定容至
处的吸光度值 扣除空白样
∀
品的吸光度 代入线性方程 计算出样品中的人参总皂 计含量 见表 取 加入
∀
大孔树脂2 ∂ 法也可用于人参蜂王浆 !双宝素等 本方法的原理也适用于分析糖类和苷类 ∀ 我 们
收稿日期
加样回收率考察
粒双宝素胶囊 研匀 精 人参总皂苷 以人参皂苷 次 结果
口服液中人参总皂苷含量测定 ∀ 用此法分析过人参多糖及地黄中梓醇含量 结果满意 ∀
密称取 计 见表
按样品测定方法项下操作 重复测定
和 取已经在
ε 条件下 人参总皂苷彻
底反应所需的时间分别为 稳定性考察 苷反应液定时测其 在 内保持恒定 ∀
2 4
和
ε 水浴
∀
的人参总皂
正丁醇 !乙醇 !浓硫酸均为分析纯 ∀ 红参 !生晒参均采 自 吉 林 西 洋 参 为 美 国 进 口 三
处的吸光度值 结果 精密称取 红参于 和
七采自云南 双宝素胶囊 正大青春宝药业有限公司 ∀
2 5
即可将人参皂苷提净 ∀ 精密称取约 样品于具塞锥形
验
加入量
测得量
回收率
平均回收 率
≤∂
样品的测定
瓶中 原药材粉碎 双宝素胶囊称取内容物 并拌入等 量硅胶 入 量取
∀ 另取一锥形瓶平行试验作为空白 ∀ 精密加
水饱和正丁醇 密塞 超声波提取 提取液 水浴蒸干后 以 乙醇 流速约为
∀ 精密量取 ∀
∀ 精密
∆ε τερµινατιον οφ τοτα λ σαπονιν χοντεντ ιν παναξ Γινσ ενγ ανδ νοτογινσ ενγ βψ Υς σπεχτρο µ ε τερ ≠ ∏ ≠ ƒ ( Χηιαται ΘΙ ν γ χηυνβαο Πηαρµ αχευτιχαλ Χο . Λτδ , Ηαν γ ζηου
水溶解残渣 转 水洗净糖分等 洗脱人 洗脱液 水浴
ε 水浴 3 3 1 3 2
移至 ⁄ 大孔吸附树脂柱上 ∀ 先以 水溶性杂质 再以 参皂苷并定容至 冷至室温后 测其在 苷以人参皂苷
2 6
小
结 紫外分光光度法测定人参皂苷 重复性好 稳定 以水饱和正丁醇为溶剂 超声处理半小时可以提
可靠 容易掌握 远远优于香草醛比色法 ∀ 净样品中 的 人 参 皂 苷 而 且 杂 质 少 人 参 皂 苷 回 收 完 全∀
紫外分光光度法测定人参及三七中总皂苷含量
孔燕君
摘要
洪美凤
杭州
正大青春宝药业有限公司
目的 人参和三七及制剂中皂苷含量测定方法的系列研究 ∀ 方法 ≠ 用水饱和正丁醇提取样品中的皂苷
≈ 通过大孔树脂除去糖分等杂质 …用紫外分光光度法测定总皂苷含量 ∀ 结果 用本法测得的
超声波处理 关键词
结果与文献报道结果相近 ∀ 结论 本法稳定性可靠 重复性好 ∀ 人参 三七 皂苷含量 大孔吸附树脂 紫外分光光度法
Β ∀ 此方法不仅测定速度
在 和 波长 ∀
∗
范围内进行扫描 该体系在紫外 处有特征吸收峰 ∀ 作者选择 处为测定
用浓硫酸将上述人参皂苷 浓度为 如下 Α 为
2 2 ∗ Λ . ∀ .
反应液配制成相对 的标准溶液 测定其在
处的吸光度值 数据经线性回归处理 得到方程
Χ, ρ .
快 而且重现性也好 ∀ 本文报道了用此方法 测 定 生 晒 参 !红参 !西洋参 !三七 !双宝素胶囊中人参总皂苷含量 的结果 ∀
中国现代应用药学杂志 年
冷至室温 以
卷第 期
石英比色皿 用紫外分光光度计
月第
#
#
表1
人参总皂苷 以人参皂苷
样 红参 生晒参 西洋参 三七 品 产 地
计 分析结果
含 量
吉林 吉林 美国 云南 杭州
∗
图1
超声波提取时间 由图 可见 超声波提取 后 随提取时间加 表2
实
双宝素胶囊
粒
长 而提取的总皂苷含量没有增加的趋势 因此可以认 为超声波提取
2 2 1
超声波提取时间的考察
结果和讨论 人参皂苷 精密称取
2浓硫酸的紫外吸收光谱及线性关系
具塞 锥 形 瓶 中 精 密 移 取 已干燥恒重的人参皂苷
ε 水浴
水饱和正丁醇 密塞 ∀ 提取液 按样品测定方法项
置超声波清洗器中提取 分别于 时 精密移取 下操作 测定含量 见图
∀
考察
对照
品 以浓硫酸定容至 浓硫酸为参比液
ΑΒΣΤ Ρ ΑΧΤ ∏ ⁄ ΚΕ Ψ Ω ΟΡ ∆Σ
ΟΒϑΕΧΤΙς Ε : × ∂ ∏ √ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
∏ ΜΕΤ ΗΟ∆ : ≠ ∞¬ ≈ ∞ ∂ ∏ ΧΟΝΧΛΥΣΙΟΝ : × ∏ 2 ∏ ∏ Ρ ΕΣΥΛΤΣ : ×
¬ ∏
∏ × … ∏ ∏
¬
¬
∏
∂
人参皂苷的测定方法 文献上已有许多报道 最常 用的是香草醛比色法 但比色法重现性差 ∀ 作 者 根 据 人参皂苷分子上的糖基能被浓硫酸氧化脱水成糠醛衍 生物的性质 研究了人参皂苷的紫外分光光度测定方 法≈ 颜春芳 马家骢 人参植株不同部位皂苷含量研究 现代应用药学