树舌多糖抗肿瘤机制的研究

细胞增殖失控 ,起到抗肿瘤作用 。 TNF - α对多数肿瘤细胞具有特异性杀伤作用 ,包括对肿
瘤细胞的细胞溶解和抗增殖作用 。其作用机制 :一是 TNF - α 通过与靶细胞膜上特异受体结合并内在化 ,作用于溶酶体 ,使 溶酶体通透性增强并受损 ,导致靶细胞病理性坏死 ;同时 TNF - α与靶细胞膜上特异受体结合后 ,引起细胞内一系列信号 的变化 ,最终导致细胞凋亡 。二是介导免疫反应 ,从而监视和 杀灭肿瘤细胞 。实验表明 :树舌多糖组小鼠 HepA 瘤细胞 TNF - α表达增强 ,与实验对照组比较差异有显著性 ( P < 0. 01) 。 树舌多糖通过增强小鼠 HepA 瘤细胞 TNF - α表达活性 ,使肿 瘤细胞病理性坏死或凋亡 。
抑瘤率 ( %) 50. 4
树舌多糖组瘤重减轻 ,与实验对照组比较差异有显著性 ( P < 0. 01) 。
表 2 树舌多糖对小鼠 HepA 瘤细胞 Rb 基因表达的影响
组别
例数
阳性面积比
树舌多糖组
15
实验对照组
15
11. 930 ±3. 761 3 4. 682 ±0. 764
注 : 3 与实验对照组比较 , P < 0. 05 。
树舌多糖组 p16 基因表达活性增强 ,与实验对照组比较 差异有显著性 ( P < 0. 01) 。
表 4 树舌多糖对小鼠 HepA 瘤细胞 TNF - α表达的影响
组别 树舌多糖组 实验对照组
例数 15 15
阳性面积比 13. 668 ±3. 179 3
4. 185 ±1. 167
注 : 3 与实验对照组比较 , P < 0. 01 。
作者单位 :广东医学院附属医院 邮 编 524001 收稿日期 2004 - 03 - 04
有高血压病史 68 例 ,糖尿病病史 35 例 ,高血脂病史 48 例 ,但 无心脏病史及 ECG 异常史 。所有患者均排除肿瘤 、感染 、电 解质紊乱及自身免疫疾病 。 1. 2 检查方法 采用日本三荣株式会社的 KARTIZER - 3321 型 12 导联 ECG机和日本光电的 6511 型号单导联 ECG机进行 检查 ,患者均在入院 24h 能行常规 ECG检查 ,病程中发现 ECG 异常者给予复查 ECG 1～2 次 ,4 周内复查 ECG。 1. 3 统计学处理 采用 χ2 或校正 χ2 检验 。 2 结果 2. 1 入院时 EKC 改变 脑梗死患者 148 例 (70. 5 %) EKG 异 常 ,其中 ST - T 改变 71 例 ,窦性心律失常 40 例 ,异位心律失 常 22 例 ,传导异常 15 例 。 2. 2 梗死部位与 ECC 改变 本组 ECG 改变者 148 例 ,其中 脑干梗死占 79. 3 %(23/ 29) ,小脑梗死占 60. 0 %(6/ 10) ,丘脑 -
【关键词】 急性脑梗死 心电图 回顾性研究
急性脑梗死常引起心电活动异常 ,继发性心肌缺血及心 律失常的心电图 ( ECG) 改变 ,且病情危重者 、病死率高 ,预后 差 ,越来越受到神经内科工作者的重视 。为探讨急性脑梗死 患者的 ECG改变的临床意义 ,我们对 210 例住院急性脑梗死 患者 ECG进行分析 ,并结合文献探讨其发病机理 。现将结果 报道如下 。 1 资料和方法 1. 1 一般资料 210 患者脑梗死诊断符合中华神经学会制定 的脑血管病诊断标准[1] ,男 121 例 ,女 89 例 ,年龄 40～81 岁 , 平均 (52. 6 ±16. 1) 岁 。均在发病 24h 内来诊 ,经 CT 或 MR 扫 描证 实 为 脑 梗 死 并 定 位 。210 例 急 性 脑 梗 死 患 者 中 ,
G1 期抑制细胞的增殖 ,使细胞脱离细胞周期并进入分化途 径 。Rb 基因的抗肿瘤作用还与细胞转录因子 ( E2F) 有关 。 E2F 是一类激活转录作用的活性蛋白 ,在 G0 、G1 期活性型 Rb 蛋白可与 E2F 结合形成复合物 ,抑制 E2F 的转录活性 ,使细胞 周期停滞在 G1 期的静止状态 ,抑制肿瘤细胞的增殖 。实验表 明 :树舌多糖组作用于小鼠 HepA 瘤细胞后 ,Rb 基因的表达活 性增强 ( P < 0. 05) ,即树舌多糖通过增强 Rb 基因的表达使 细胞停滞在 G1 期的静止状态 ,而抑制肿瘤细胞生长 。
p16 基因编码的 p16 蛋白是一种 CDK4 特异性相关蛋白 , 与 CDK4 形成特异性复合物抑制 D 型周期素依赖 CDK4 激酶 活性 。p16 蛋白通过抑制 cyclinD/ CDK4 活动 ,参与并调节细 胞从 G0 期进入 G1 期 。周期素 D1 作用于 G1 期 ,这是细胞周 期活动的重要阶段 。p16 蛋白与 CDK4 特异性结合而使 CDK4 失活 ,反向调节细胞周期活动 。实验表明 :树舌多糖组作用于 小鼠 HepA 瘤细胞后 ,p16 基因的表达活性增强 ( P < 0. 01) , 树舌多糖增强抑癌基因 p16 表达 ,而使 CDK4 失活 ,反向调节 细胞周期活动 ,促使细胞从 G0 期进入 G1 期 ,抑制肿瘤细胞的 生长 。
树舌多糖通过增强抑癌基因 - Rb 基因 、p16 基因及 TNF - α的表达活性 ,即在基因表达水平上抑制肿瘤的生长 。
参 考 文 献 [1 ] 阎水忠 ,赵晓航 ,吴昊. 细胞凋亡与癌基因 [J ] . 生物化学与生物
物理进展 ,1994 ,21 (3) :222 [2 ] 吴波 ,梁谋 ,佟丽 ,等. 茯苓多糖抗肿瘤作用与作用机理的实验研
实验结果见表 1～4 。
作者单位 :齐齐哈尔医学院 邮 编 161042 收稿日期 2004 - 02 - 01
表 1 树舌多糖的抑瘤作用
组别 树舌多糖组 实验对照组
例数 15 15
瘤重 (g) 0. 764 ±0. 287 3
2. 57 ±0. 639
注 : 3 与实验对照组比较 , P < 0. 01 。
树舌多糖组 Rb 基因表达活性增强 ,与实验对照组比较 差异有显著性 ( P < 0. 05) 。
表 3 树舌多糖对小鼠 HepA 瘤细胞 p16 基因表达的影响
组别
例数
阳性面积比
Байду номын сангаас
树舌多糖组
15
实验对照组
15
10. 758 ±1. 382 3 4. 779 ±0. 794
注 : 3 与实验对照组比较 , P < 0. 01 。
树舌多糖组小鼠 HepA 瘤细胞 TNF - α表达增强 ,与实验 对照组比较差异有显著性 ( P < 0. 01) 。 3 讨论
Rb 基因为抑癌基因 ,其编码的蛋白质为 Rb (p105) 蛋白 , 是分布于细胞核内的能与 DNA 结合的一种核结合蛋白 ,有磷 酸化或高磷酸化和非磷酸化或低磷酸化两种形式 。非磷酸化 或低磷酸化形式称活性型 ,能促进细胞分化 ,抑制细胞增殖 。 在细胞 G1 期初始阶段 ,Rb 蛋白均为非磷酸化或低磷酸化形 式 ;而在 G1 期后 , Rb 蛋白则为磷酸化或高磷酸化形式 。Rb 蛋白的磷酸化程度受依赖细胞周期蛋白的蛋白激酶 (CDK,cy2 clin - dependent kinase) 家族的调节 。Rb 蛋白非磷酸化或低磷 酸化形式在细胞周期控制系统中可能起关键性的作用 ,即在
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Journal of Qiqihar Medical College , 2004 , Vol. 25 , No. 5
·经验交流·
210 例急性脑梗死患者心电图变化分析
吴梅丽 王义刚
【摘要】 目的 分析急性脑梗死患者心电图 ( ECG) 改变的特点及预后的关系 。方法 回顾性分析 210 例急性脑梗死患者的 ECG 资料 。结果 210 例急性脑梗死患者中 148 例 (70. 5 %) 出现 ECG 异常 。 ECG异常主要表现为 ST - T 改变 、窦性心律失常 、异位心律失常 、传导异常等改变 。ECG 异常与病情轻 重及预后有明显关系 ( P < 0. 05) 。结论 急性脑梗死患者的 ECG监察对判断病情 、指导治疗和估计预 后均有重要意义 。
齐齐哈尔医学院学报 2004 年第 25 卷第 5 期
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树舌多糖抗肿瘤机制的研究
王淑英 张春晶 赵守琪 吴 琦 潘洪明
【摘要】 采用免疫组化方法研究树舌多糖对小鼠 HepA 瘤细胞 Rb 基因 、p16 基因和 TNF - α表达的 影响 ,阐明中药多糖的抗肿瘤作用机制 。实验表明 :树舌多糖组瘤重减轻 ,与实验对照组比较差异有显 著性 ( P < 0. 01) ;树舌多糖组小鼠 HepA 瘤细胞 Rb 基因表达活性增强 ,与实验对照组比较差异有显著 性 ( P < 0. 05) ;树舌多糖组 p16 基因表达活性增强 ,与实验对照组比较差异有显著性 ( P < 0. 01) ;树舌 多糖组 TNF - α表达增强 ,与实验对照组比较差异有显著性 ( P < 0. 01) 。结论 :树舌多糖通过增强抑癌 基因 - Rb 基因 、p16 基因及 TNF - α的表达活性 ,即在基因表达水平上抑制肿瘤的生长 。
Rb 蛋白 、p16 蛋白 、cyclinD1 、CDK4 和 E2F 共同组成了一 个对细胞周期的反馈调节系统 ,维持细胞分化生长的正常进 行 。树舌多糖作用后 ,小鼠 HepA 瘤细胞 Rb 基因 、p16 基因表 达活性增强 ,共同作用启动细胞周期的负反馈系统 ,细胞周期 的负调节增强 ,从而阻止细胞无限制从 G1 期进入 S 期 ,抑制
【关键词】 HepA 树舌多糖 Rb 基因 p16 基因 TNF - α
抗肿瘤研究内容之一是寻找高效低毒的抗肿瘤药物及抗 肿瘤辅助药物 。树舌多糖具有肯定的抗肿瘤和增强机体免疫 功能等作用 ,且无毒性 。目前对树舌多糖抗肿瘤作用机制的 研究有关增强机体免疫功能的报道较多 ,而癌基因和抑癌基 因表达活性改变的报道很少 。本文通过研究树舌多糖抑瘤 率 、对小鼠腹水型肿瘤 ( HepA) 瘤细胞 Rb 基因 、p16 基因及肿 瘤坏死因子 (TNF - α) 表达的影响 ,进一步阐明树舌多糖的抗 肿瘤作用机制 。 1 材料与方法 1. 1 实验动物 由黑龙江中医药大学动物实验中心提供的 健康昆明种小鼠 ,体重 (20 ±2) g ,雌雄各半 。将小鼠接种瘤株 后 ,随机分成三组 :树舌多糖组和实验对照组 ,每组 15 只 。 1. 2 仪器与试剂 浓缩的 Rb 抗体 、p16 抗体及 TNF - α抗 体 、链霉菌抗生素蛋白过氧化酶免疫组化染色超敏试剂盒 、 DAB 染色剂购于福建迈新生物技术公司 。树舌多糖由黑龙江 中医药大学提供 。尼康照相机 、超薄切片机及 OL YMPUS 显微 镜均产自日本 。SPSS 多媒体彩色病理图文分析系统由同济 医科大学生产 。 1. 3 实验方法 1. 3. 1 本实验对象为小鼠 HepA ,此瘤株为腹水可移植型 ,由 黑龙江省肿瘤研究所引进 。在无菌条件下取父代带瘤小鼠的 肿瘤细胞 1 :3 稀释 ,树舌多糖组及实验对照组以 0. 2 ml/ 只接 种小鼠右前肢腋窝外皮下 。小鼠接种瘤株 12 小时后用药 。 树舌多糖组按 50 mg/ kg 体重 ,肌肉注射 ; 实验对照组用同等 重量生理盐水肌肉注射 ,每日 1 次 ,连续给药 7 天 。待实验对 照组瘤重约大于 1. 0 g 后 ,禁食 12 小时后处死 ,取材称瘤重 。 称重后将标本用 10 %甲醛固定液固定 ,常规酒精脱水 ,透明 侵蜡后石蜡包埋 ,而后切片 ,切片厚 3～4μm。 1. 3. 2 阳性结果判定和统计学分析 : Rb 基因定位于细胞核 , 呈棕色颗粒状 ;p16 基因定位于细胞核或浆 ,呈棕色颗粒状 ; TNF - α定位于细胞胞浆 ,呈棕色颗粒状 。S - P 免疫组化方法 染色后观察 Rb 基因 、p16 基因及 TNF - α阳性表达结果 。利 用 SPSS 多媒体彩色病理图文分析系统统计阳性细胞面积占 统计场面积比值即阳性面积比 ,并做方差分析 。 2 结果