罗非鱼谷胱甘肽过氧化物酶1基因的克隆与分析

合集下载

尼罗罗非鱼γ-干扰素基因的克隆、结构分析及组织表达

摘要：．ｙ－干扰素（ｉｎｔｅｆｒｅｒｏｎ，ＩＦＮ）是调控天然免疫与细胞免疫的一种重要细胞因子，在抵抗病毒入侵和细菌感染
中发挥重要作用。该研究从尼罗罗非鱼（Ｏｒｅｏｃｈｒｏｍｉｓｎｉｌｏｔｉｃｕｓ）脾脏组织中扩增到．干扰素基因的ｃＤＮＡ，大小为
Ｃｌｏｎｉｎｇ，ｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｇａｍｍａ
（ＩＦＮ－｝，）ｇｅｎｅｉｎＯｒｅｏｃｈｒｏｍｉｓｎｉｌｏｔｉｃｕｓ
ＹＵＪｉａｘｉｎ，ＷＵＦａｎｇ，ＳＵＮＣｈｅｎｇｆｅｉ，ＤＯＮＧＪｕｎｊｉａｎ，ＴＩＡＮＹｕａｎｙｕａｎ，ＹＥＸｉｎｇ，
（１．ＫｅｙＬａｂ．ｏｆＴｒｏｐｉｃａｌ＆ＳｕｂｔｒｏｐｉｃａｌＦｉｓｈｅｒｉｅｓＲｅｓｏｕｒｃｅＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ＆Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ；ＰｅａｒｌＲｉｖｅｒ
第１３卷第１期２０１７年２月
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５—０７８０．２０１７．０１．０１１

鱼类谷胱甘肽转移酶基因cDNA克隆及其序列分析

Ｃｈｎｉａ
Ａｂｓｒｃｓｔａｔ：ＵｓｎｉｇＲＴ— ＣＲＰｍｅｈｄｈｌｔｔｉｎｒｎｆｒｓｉｃｔｏ。ｔｅｇｕａｈｏｅｔａｓｅａｅＰＤＮＡｓｗｅｅｃｏｅｒｍＣｐｉｕａｐｏｒｌｎｄｆｏｙｒｎｓｃｒｉ．ｎｙ —
ｂｅｗｅｎｆｓｎｄｍａｍａＳ３％ｂｔｅｎｆｓｄｍｐｈｂｉ，ａｄｔｅｈａｍｌ，３ｉｅｗｅｈａｉｎａｉａｎｌｎ５％ｂＴｈｅｅｗｅｎｆｈｉｎｒｈｒｐｏｅｐｅｔｖｌ
类群：哺乳类组成类群一（ｏｔｒｐ１０；鱼类组成类群二（ｏｔｒｐ９）ｂｏｓａ０）ｔｂｏｓａ３。通过比较鱼类与哺乳类ＧＳｉｔＴＰＮ末端
和Ｃ末端功能域的氨基酸组成差异，探讨了淡水鱼类ＧＳｓ担较强的微囊藻毒素去毒能力的可能分子机制。Ｔ承
．
ｓｑｅｃｉｌｒｙｗａｉｍｏｇｆｓｅ，ｄｔｅａｅａｅｖｌｅｏｅ４ｃｐｉｉｓｗａｂｕ５ｅｕｎｅｓｍｉａｉｓｂｇａｎｈｓａｈｖｒｇａｕｆｔｙｒｎｄｓａｏｔ８％．ｈｌｇｎｔｅｓｔｉｎｈＰｙｏｅｅｉｔｅｗａｃｒ
摘要：采用Ｒ－ＣＲ方法，从鲢、鲤、鲫３种鱼类肝脏总ＲＡ中克隆出了谷胱甘肽转移酶Ｐ型（ＴＰ）ＤＮＡＴＰＮｉＧＳｉｃ序列，推导了其编码的氨基酸序列。３种鱼类ＧＳｉＯＲＴＰ的Ｆ全长６７ｂ，编码２８个氨基酸。译起始密码均２ｐ０翻为ＡＧＴ，终止密码子均为ＴＧＡ。鱼类与哺乳动物、两栖类爪蟾以及节肢动物丝虫之间ＧＳｉＴＰ氨基酸序列相似度平均值分别为５％、３％、ｌ％左右。５种鱼类之间的氨基酸序列相似度较大，其中鲤科鱼类之间平均为８％０３５５左右。我们以ＧＴＰ为分子标记，用最大简约数法（）ＳｉＭＰ构建了ｌ３个物种的系统进化树，识别出两个大的单系

日本鳗鲡谷胱甘肽过氧化物酶_1_和_4_的克隆、分析和组织表达分布

1 材料与方法
1.1 材料 1.1.1 实验动物日本鳗鲡，体质量 250 ～ 300 g，每 80 尾养殖于 4 m3 水体中。 1.1.2 菌株、试剂 Trizol 购自 Invitrogen 公司，cDNA 第一链合成试剂盒、Taq 酶、TdT 酶、pMD18-T 载体、 SYBR green premix 购自 TaKaRa 公司，凝胶回收试剂盒、PCR 纯化试剂盒购自 Axygen 公司，TOP10 工程菌为本实验室保存。 1.2 方法 1.2.1 cDNA 第一链的合成用0.02 ％的H2O2 浸泡日本鳗鲡，诱导 GPx 表达。4 h 后取日本鳗鲡肝脏组织，参照Trizol说明书提取RNA，参照PrimeScript cDNA第一链合成试剂盒说明书，反转录 cDNA 第一链。 1.2.2 GPx1、GPx4 基因中间片段的克隆根据已知的脊椎动物GPx1、GPx4基因，使用Oligo 6.0软件设计兼并引物GPX1F/GPX1R以及GPX4F/GPX4R（表1），以 cDNA 第一链为模板，合成鳗鲡 GPx1、GPx4 的中间片段，PCR反应程序为：94 ℃ 2 min；94 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72℃ 30 s，35个循环；72℃ 5 min。PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，割胶回收目的片段，与 pMD18-T 载体连接，转化到 Top10 菌株中，送上海生工公司测序。 1.2.3 GPx1、GPx4 基因的 3′RACE 根据克隆到的中间片段设计正向引物 GPX1F1、GPX1F2，GPX4F1、 GPX4F2，与反向引物 RAP、AP（表 1）。以 cDNA 第一链为模板，先分别用 GPX1F1/RAP 和 GPX4F1/RAP 进行第
ROS 浓度过高会造成氧化应激，损伤机体组织细胞 [1]。谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase，

罗非鱼SIRT1基因的克隆及其表达规律分析

罗非鱼SIRT1基因的克隆及其表达规律分析陈亨德; 褚武英; 李玉珑; 许友卿; 丁兆坤; 钟艺文; 王利香; 安晓玲【期刊名称】《《江苏农业科学》》【年(卷),期】2019(047)021【总页数】4页(P103-106)【关键词】罗非鱼; SIRT1基因; 实时定量PCR; 饥饿; 系统进化树【作者】陈亨德; 褚武英; 李玉珑; 许友卿; 丁兆坤; 钟艺文; 王利香; 安晓玲【作者单位】广西大学水产科学研究所广西南宁530004; 长沙学院湖南长沙410000【正文语种】中文【中图分类】S917.4罗非鱼是联合国粮食及农业组织(FAO)向全世界推广的优质养殖鱼类品系，目前全球有近百个国家和地区进行罗非鱼的规模化人工养殖，罗非鱼同时也是我国农业农村部主要推广的重要淡水养殖品种，我国罗非鱼养殖产量在世界上高居榜首。

尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)是罗非鱼类中的主要养殖品种，该鱼的养殖性能极其优越，具有生长快、食性广、抗病强、肉质鲜美、富含谷氨酸和甘氨酸等特点[1]，深受许多美食爱好者的喜爱。

沉默信息调节因子2同源蛋白1(silent mating type information regulation 2 homolog1，简称SIRT1)是一种依赖于烟酰胺腺嘌呤二核甘酸(NAD+)的组蛋白去乙酰化酶[2]，于1999年从人类中发现[3]。

SIRT1能够广泛表达于成熟组织，在胚胎早期和生殖细胞中含量也较高[4]。

哺乳动物中Sirtuins家族共有7名成员(SIRT1～SIRT7)[3]，其中SIRT1与沉默信息调节因子2的同源性最高[5]，是Sirtuins家族中目前研究得最为广泛的1名成员。

SIRT1在机体内可通过对几种控制代谢转录因子的去乙酰化作用来调节其活性，广泛参与机体的糖代谢和脂肪代谢通路，还参与基因转录、细胞衰老的调节过程[6]。

SIRT1还可抑制成脂肪分化因子PPARγ的转录因子活性，减少脂肪的合成与堆积[7]。

大连海洋大学水产养殖饲料课期末2013复习题养殖10-2整理

复习题一、名词解释1.必需氨基酸：指动物自身不能合成或合成的量不能满足动物的需要，必须由饲粮提供的氨基酸。

2.非必需氨基酸：指水产动物体内能利用其他物质合成足量的AA，不从饵料中供给，也不会出现缺乏症。

3.代谢氮：鱼、虾类在摄取无蛋白质饲料时，其排出的粪和尿中亦有含氮物质等代谢产物，从粪中排出的氮叫代谢氮(medogenous nitrogen)，主要是肠黏膜脱落细胞、黏液和消化液所含有的氮；4.内源氮：鱼、虾类在摄取无蛋白质饲料时，其排出的粪和尿中亦有含氮物质等代谢产物，从尿排出及鳃分泌出的氮叫内源氮。

5.氨基酸平衡：所谓氨基酸平衡是指配合饲料中各种必需氨基酸的含量及其比例等于鱼、虾类对必需氨基酸的需要量。

6.限制性氨基酸（LAA）：与动物需要量相比，饲料（粮）中含量不足的EAA。

7.蛋白质生物学价值：指动物利用的氮占吸收氮的百分比。

8.蛋白质效率比（PER）：动物食入单位蛋白质或氮的体增重。

9.必需脂肪酸（EFA）：不饱和脂肪酸中的一些脂肪酸，具有2个或2个以上的双键；在动物体内不能合成，必须由饲料供给，这样的多不饱和脂肪酸。

10.ADE：表观消化率（ I－EAD（%）= ————×100%I式中：AD——表观消化率I——饲料或某一成份的总摄入量E——粪便或某一成分的总排出量11.TDE：表观消化率将粪中非饲料来源的物质（内源物质）扣除后，算得的消化率叫作真消化率。

12.AME：尿中能量来自饲料养分吸收后在体内代谢分解的产物的代谢能（AME = ADE - (UE + ZE)= (GE -FE ) - (UE + ZE)= GE - (FE + UE + ZE)13.TME：尿中能量来自于体内蛋白质动员分解的产物的代谢能（TME = TDE - [ ( UE - UeE) + ZE ]= [ GE - (FE - FmE) ] - UE – ZE + UeE= GE - (FE + UE + ZE) + ( FmE + UeE )= AME + ( FmE + UeE )14.热增耗(体增热)（HI）：绝食动物投喂饲料后，产热量增加，增加的那部分热量损失掉了，这个部分热量就叫热增耗。

谷胱甘肽过氧化物酶基因的表达调控机制研究

谷胱甘肽过氧化物酶基因的表达调控机制研究谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase，GPx）是一种重要的抗氧化酶，能够将细胞内的过氧化氢等有害物质还原为无害水和氧气。

它对于维持生物体内的氧化还原平衡、预防氧化应激、维护基因稳定性和细胞生存等方面具有重要的生物学意义。

作为GPx基因的编码蛋白，GPx酶在人体内分布广泛，包括肝、肾、肌肉、大脑、血液中的各种细胞类型，甚至在母乳中都可以检测到其存在。

因此，GPx在人体免疫和保健方面的研究备受重视，特别是近年来与一些慢性疾病的关联研究更是揭示出了该酶的潜在价值和作用机制。

GPx基因的表达调控机制是研究GPx在细胞内作用中必须探索的问题，在这个过程中有许多相关因素和调控途径需要研究和探明。

一、转录水平上的调控GPx的表达调控主要是在转录水平上进行的，这与其启动子序列的结构和某些转录因子的作用有关。

GPx基因家族的启动子序列在某些生物中具有近似的特征，包括富含GC盒、反向重复序列和近似于肝X受体作用元件（LXRE）等。

因此，这些序列元件的变化和与其相关的转录因子的活性变化可能是GPx表达调控的主要限制因素。

研究表明ATF4、Nrf2等调控物质具有重要作用，而在饥饿等情况下ATF4可以与GPx启动子结合并协同作用，增加GPx的表达；在产生氧化应激时，细胞内Nrf2介导的线粒体逆向转录因子（mtTFA）可以直接与GPx启动子结合，增加GPx的表达。

此外，各种物质对GPx基因表达调控的研究也在不断深入，进一步解释了基因表达的复杂机制。

二、翻译和修饰水平上的调控翻译和修饰水平上的调控是GPx表达过程中的另一个重要环节。

其中，翻译后修饰、蛋白降解和代谢等机制都是影响GPx表达和功能的重要因素。

翻译后修饰方面，氧化磷酸化和氨基酸甲基化等修饰方式对GPx功能具有显著影响。

氧化磷酸化是调节GPx活性最为重要的修饰方式之一，研究显示，氧化磷酸化可以使GPx的催化反应更为高效，增强其对细胞内有害物质的清除能力；此外，氨基酸甲基化等修饰方式也可能通过对蛋白空间结构的改变而影响GPx的功能。

谷胱甘肽过氧化物酶

本科生毕业论文（设计）题姓学专班学目: 名: 院: 业: 级: 号:谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）对灵芝生长发育中的活性氧物质（ROS）的改变及理化性的质影响于南生命科学学院生物科学生物科学 101 班 13210101 师亮职称: 讲师指导教师:2013 年 5 月 20 日南京农业大学教务处制1目录摘要 .......................................................................................................... 错误！未定义书签。

关键词 ...................................................................................................... 错误！未定义书签。

Abstract ................................................................................................... 错误！未定义书签。

Key words ................................................................................................ 错误！未定义书签。

引言 .......................................................................................................... 错误！未定义书签。

1 材料与方法 ........................................................................................ 错误！未定义书签。

尼罗罗非鱼Dmrt1基因克隆及在不同组织中的表达

尼罗罗非鱼Ｄｍｒｔ１基因克隆及在不同组织中的表达摘要：Dmrt1基因是Dmrt基因家族的一个重要成员，在动物性别决定过程中发挥重要作用。

参照小鼠Dmrt1基因DM保守区及有关文献，设计了1对简并引物，扩增了尼罗罗非鱼的Dmrt1基因，并对扩增产物进行了亚克隆与测序。

结果在雌雄尼罗罗非鱼个体中各获得1个预期的基因片段，长度为140bp，序列无性别差异。

序列同源性分析表明，尼罗罗非鱼Dmrtl基因DM盒区核苷酸序列与人和鼠相应基因的同源性为78%；编码的氨基酸序列与人和鼠相应基因编码序列的同源性为89%，充分显示了Dmrt1基因在进化上的高度保守性。

进一步根据获得的Dmrt1序列，设计1对特异引物，采用RT-PCR技术对尼罗罗非鱼不同组织Dmrt1基因的表达进行了研究。

结果发现，Dmrt1只在精巢中特异表达，在卵巢、眼、肠、鳃及心脏组织中无表达，提示该基因在性别分化和功能维持上可能具有重要作用。

关键词：尼罗罗非鱼；Dmrt1；RT-PCRCloning of Dmrt1 Gene and Its Expression in Different Tissues of Oreochromis niloticusAbstract：The Dmrt1 gene plays important roles in sex determination. The 140bp DM -box of Dmrt1 gene in Oreochromis niloticus was amplified by using degenerated PCR，and then subcloned and sequenced.The sequences from male and female O. niloticus were compeletely pared with the human and mouse Dmrt1 gene，the sequences of Dmrt1 shared 77%nucleotide homology and 89% amino acid indentity. The results indicated that Dmrt1 genes were highly conservative in phylogeny. According the sequence of Dmrt1，specific primers were designed for RT-PCR in different tissues in adult O. niloticus. Dmrt1 expression was only detectable in testis，and no expression was detected by RT - PCR in the following tissues：ovary，eye，intestine，gill and heart.Key words：Oreochromis niloticus；Dmrt1；RT-PCRDmrt是一种目前已知最保守的性别分化相关基因，该家族成员与果蝇的性别决定基因Doublesex (dsx)和线虫性别决定基因(Mab-3)一样，编码的蛋白质都包含一个具有DNA结合能力的保守基序，即DM(doublesex and mab-3)结构域，并以锌指结构与特异DNA序列相结合，在性别决定和分化发育中起调控作用[1，2]。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

ｎｏｃｓ谷胱甘肽过氧化物酶１（ｌｔｈｎｅｏｉｓｌＰ１基因完整的编码序列（ｏｐｔｃｄｎｅｉｔｕ）ｌｉｇａｉｅｐｒｄｅ，Ｇｘ）ｕｔｏｘａｃｍｌｅｏｉｇｓ— ｅ
ｑｅｃ，ＣＳ。Ｇｘ基因全长９４ｂ，５ｕＲ５ｐＤ７ｐＴ５ｐｏＡ２ｐｕｎｅＤ）Ｐｌ８ｐＴ６ｂ，ＣＳ５６ｂ，３ＵＲ３２ｂ，Ｐｌ０ｂ；第７１８ｙ９ —８５位碱基（位于３ＵＲ）形成１Ｔ个硒半胱氨酸插入序列（ｅｎｃｓｉｅｉｓｒｏｅｕｎｅＥＩ）ｓｌｏｙｔｎｅｉｓｑｅｃ，ＳＣＳ，协助１４～１６位ｅｅｎｔｎ７７密码子ＴＡ（ＧＧＵＡ）编码１个硒半胱氨酸（ｅ）ＰｌＳｃ。Ｇｘ包含１１氨基酸，分子量２．Ｄ，等电点８０，无９个１８ｋａ．４信号肽和潜在的Ｎ糖基化位点。蛋白结构分析表明该基因编码蛋白为非跨膜蛋白。序列比对显示，Ｇｘ．Ｐｌ单体具
Ｍｏｅｕａｌｎｎｇａｄｃａａｔｒｚｔｏｎｌｓｓｏｌｔｔｉｎｅｌｃｌｒｃｏｉｎｈｒｃｅｉａｉｎａａｙｉｆｇｕａｈｏ
ｐｒｘｄｓｒｍｌｔａｉＯｅｃｒｍｉｎｌｔｕ）ｅｏｉａｅ１ｆｏＮｉｌｐａ（ｒｏｈｏｓｉｉｓｅｉｏｃ
有Ｓｃｒ、Ｇｎ和Ａｎ构成的催化四联体。罗非鱼Ｇｘｅ、ＴｐｌｓＰｌ与其他脊椎动物Ｇｘ比较，核苷酸序列相似性为Ｐｌ相４．％一８２，氨基酸序列相似性为５．％～８．％。进化分析显示，处在分类学上不同纲的脊椎动物Ｇｘ３２５．％８１０６Ｐ１
Ｊｎｕ．，２１００
罗非鱼谷胱甘肽过氧化物酶１基因的克隆与分析
曹艳林，柯浩，刘振兴张建腓，，林敏
（．广东省农业科学院兽医研究所，广东省兽医公共卫生公共实验室，广东广州５０４；１１６０
Ａｓａｔｈｏｐｅｏｉｇｓｑｅｃｆｌｔｈｏｅｐｒｉａｅ１（Ｐ１ｆＮｌｔａｉＯｅｃｒｓｉｔｕ）ｗｓｃｎｄｂｂｔｃ：ＴｅｃｍｌｔｃｄｎｅｕｎｅｏｕａｉｅｏｄｓＧｘ）ｏｉｉｐａ（ｒｈｏｌｉｓａｌｅｙｒｅｇｔｎｘｅｌｏｍｉｎｏｃｏｒｉａｏｉｃｔｎｏＮｎｓ（ＡＥ．ＴｅＧｘｏｔｎ８ｐｉｃｄｎ５ｐｕｔｎｌｅｇｎａ７ｐｃｄｎ — ａｄ，１ａｏｃＡｅｄＲＣ）ｈＰｌｃｎａｓ４ｂ，ｎｌｉａ６ｂｎａｓｔｒｉ，６ｂｉｓｐ￣ｆｉｆＤｉｉ９ｕｇ５ｒａｄｅｏ５ｏｇｅｑｅｅＣＳ，５ｐ３ｎａｓｔｇｎａｄａ０ｂｏＡｔｌｌｏｙｔｎＳｃａｎｏｅｙｈｎｓａｓｐＣ－ｕｎｅ（Ｄ）ａ３２ｂｕｔｎｌｅｒｉｎｐＰｌｉｒａｄｅｏ２ｙａ．Ａｓｅｃｓｉｅ（ｅ）ｗｓｃｄｄｂｅｕｕｕｌｔＯｅｎｅｅｔｏｄｎＴＡ，ｉｅｓｌｎｃｓｉｅｉｅｉｅｕｎｅ（ＥＩ）ｌｃｔｔＴ．ＴｅＧｘａｒｉｅｏｅｃｄ９ｍｎｏ，ＧｗｔｔｅｏｙｔｎｎｒｏｓｑｅｃＳＣＳｏａｅａ３ＵＲｈＰｌｗｓｐｅｃｄｔｎｏｅ１１ａｉｏｈｈｅｅｓｔｎｄｄｔ
Ｃｎｉ，ＫＥＨａＬＵＺｅｘｎＺＡＯＹａｌｎｏ，Ｉｈｎｉｇ，ＨＡＮＧＪａｆｉ，ＬＮＭｉｉｎｅＩｎ
（．ｕｎｄｎｕｌａ．ｔｉｒｕｌｅｌ，ＩｓｔｅｔｉｒＭｅｉｎ，ＧａｇｏｇＡａｅｙｏｇｉｌｒｌ１ＧａｇｏｇＰｂＬｂｏＶｅｎｙＰｂｃＨａｔｎｔｕＶｅｎｙｄｉｃｉｆｅｒａｉｈｉｔｏｅｒａｃｅｕｎｄｎｃｄｍｆｆＡｒｕｔａｃｕＳｉｃｓｕｎｚｏ１６０Ｃｉ；２ｏｅｅｏｉｃｎｅ，ｏｔＣｉｇｉｌｒｌＵｉｒｔ，ｕｎｚｏ１６２ｈ）ｃｎｅ，Ｇａｇｈｕ５０，ｈｎｅ４ａ．ＣｌｇｆＳｉｃｓＳｕｈｎＡｒｕｕａｎｅｉＧａｇｈｕ５０４，ＣｉｌｆＬｅｅｈａｃｔｖｓｙａｎ
分别占据了不同分支。利用Ｓｉ — ｄｌｗｓＭｏｅ预测了罗非鱼ＧｘｓＰｌ的３Ｄ结构，序列分析显示，Ｇｘ可以形成１个同源Ｐｌ
四聚体。关键词：罗非鱼；谷胱甘肽过氧化物酶１；基因克隆中图分类号：Ｑ７５８文献标志码：Ａ文章编号：１７２２６３— ２７一（００００５ｏ２１）３— ０２一６
第６卷第３期
２０年６月０１ｄｉ０３６／．ｓ．６３— ２７２１．３００ｏ：１．９９ｊｉｎ１７２２．０００．１ｓ
南方水产
ＳｔｏｕｈＣｈｉａＦｉｈｒｅｃｅｃｎｓｅｓＳｉｎｅｉ
Ｖｏ．１６，Ｎｏ，广东广州５０２１６）４摘要：采用ｃＮＤＡ末端快速扩增（ａｉｍｌｉａｏｆＤＡｅｄ，ＲＣｒｐｄａｐｉｃｔｎｏＮｎｓＡＥ）技术，克隆了罗非鱼（ｒｃｒｓｆｉｃＯｅｈｏｏｍｉ