复苏周期单囊胚移植与双囊胚、双卵裂胚移植的临床结局比较

复苏周期单囊胚移植与双囊胚、双卵裂胚移植的临床结局比较[摘要]目的探?复苏周期单囊胚移植与双囊胚、双卵裂胚移植的不同临床结局。

方法回顾性分析2016年1～12月在本中心第一次行FET，年龄≤38岁的320例患者的临床结局。

其中单囊胚组98例，双囊胚组90例，双卵裂胚组132例，比较各组患者的临床妊娠率、胚胎着床率和多胎率。

结果单囊胚组和双卵裂胚组患者的临床妊娠率均低于双囊胚组，差异有统计学意义（P<0.05）。

单囊胚组和双囊胚组患者的胚胎着床率均显著高于双卵裂胚组，差异有统计学意义（P<0.01）。

单囊胚组患者的多胎率显著低于双囊胚组及双卵裂胚组，差异有统计学意义（P<0.05）。

结论对年龄≤38岁的患者，建议其第一次冻融移植周期行单囊胚移植，在显著降低多胎率的同时能够获得与双卵裂胚相似甚至更好的临床结局；不建议移植双囊胚，以避免过高的多胎率。

[关键词]复苏周期；单囊胚移植；双囊胚移植；双卵裂胚移植；多胎率[中图分类号] R492.6 [文献标识码] A [文章编号]1674-4721（2017）09（b）-0090-03Comparison of clinical outcomes of single blastocysttransplantation，double blastocyst transplantation and double cleavage embryo transplantation in resuscitation cycle YU Qiu-feng JIA Xiao-liCenter of Reproductive Medicine，Maternal and Child Health Care Family Planning Service Center in Shaoguan City，Guangdong Province，Shaoguan 512026，China[Abstract]Objective To discuss the different clinical outcomes of single blastocyst transplantation，double blastocyst and double cleavage embryo transplantation.Methods The clinical outcomes of 320 patients with first implementation of FET and the age of no more than 38 years old from January to December 2016 in our center were retrospectively analyzed.All patients were divided into single blastocyst transplantation group （n=98），double blastocyst transplantation group （n=90）and double cleavage embryo transplantation group（n=132）.The clinical pregnancy rate，embryo implantation rate and multiple pregnancy rate among three groups were compared.Results The clinical pregnancy rate of the single blastocyst transplantation group and the double cleavage transplantation group were lower than the double blastocyst transplantation group，and the differences were statistically significant （P [Key words]Resuscitation cycle；Singleblastocyst transplantation；Double blastocyst transplantation；Double cleavage embryo transplantation；Multiple pregnancy rate人类辅助生殖技术历经30多年的发展，为世界众多不孕不育家庭带去了福音。

然而，使用辅助生殖技术所带来的居高不下的多胎妊娠率成为近几年各中心关注的焦点。

多胎妊娠被视为人类辅助生殖技术中的一种并发症而非成功的助孕结局[1]，因多胎妊娠属于高危妊娠范畴，其围生儿死亡率和畸形率与单胎妊娠相比显著增加[2]。

选择一个高种植潜能的胚胎进行移植被认为是降低多胎率的一项有效策略[3]。

近些年伴随胚胎冷冻解冻技术的不断成熟、序贯培养液以及三气培养箱的应用，越来越多医学中心将全部胚胎或移植后剩余胚胎行囊胚培养后进行冷冻。

本研究分别比较了本中心的320例患者第一次冻融单囊胚、双囊胚、双卵裂胚移植的临床结局，以期为临床医生选择移植策略提供参考依据，现报道如下。

1资料与方法1.1一般资料回顾性分析2016年1～12月在本中心第一次行FET，年龄≤38岁的320例患者的临床结局。

排除子宫内膜异位症及内膜厚度0.05），具有可比性。

1.2方法1.2.1胚胎培养及评分卵裂胚及囊胚均采用序贯培养液（Vitrolife，瑞典）培养。

D3天参照Peter卵裂期评分标准[4]并结合中心实际作修改：胚胎发育速度，卵裂球大小均匀，碎片≤5%为1级胚胎；胚胎发育速度正常，卵裂球大小均匀或大致均匀，碎片>5%～20%为2级胚胎；卵裂球大小不均匀，碎片>20%～50%为3级胚胎；卵裂球大小不均匀，碎片>50%为4级胚胎。

其中1、2级胚胎为优质胚胎，1、2、3级胚胎为可用胚胎。

除少部分无优质胚胎且不愿意培养囊胚者，原则上只冷冻优质胚胎。

D5或D6天根据Gardner等[5]囊胚分级系统对囊胚进行评估：处于3～6期的囊胚内细胞数目多，排列紧密为A级；细胞数目少，排列松散为B级；细胞数目很少为C级。

3～6期的囊胚滋养层上皮细胞层由较多的细胞组成，结构致密为A级；上皮细胞层由不多的细胞组成，结构松散为B级；上皮细胞层由稀疏的细胞组成为C级。

3期以上，内细胞团或滋养层评级B以上为可移植或冷冻囊胚。

1.2.2胚胎冷?鼋舛臣耙浦?1.2.2.1胚胎冷冻使用冷冻液（Vitrolife，瑞典），按使用说明书结合本中心的实际情况冷冻卵裂胚或囊胚。

冷冻卵裂胚是于37℃下在1号液中放置5～10 min，转移至2号液放置2 min后转移至3号液，并于30 s内装入载杆并投入液氮中；冷冻囊胚前先用激光放液，然后于37℃下在1号液中放置10～20 min，转移至2号液放置2 min后转移至3号液并于45 s内装入载杆并投入液氮中。

1.2.2.2胚胎解冻使用解冻液（Vitrolife，瑞典），按使用说明书结合本中心的实际情况解冻卵裂胚或囊胚。

卵裂胚解冻在37℃条件下迅速放入1号液，30 s内迅速转移至2号液1 min，然后转移至3号液2 min，再转入4号液5 min，最后转移至预先平衡好的培养皿过夜培养；囊胚解冻在37℃条件下迅速放入1号液2 min，然后将胚胎转移至2号液放置3 min，再转入3号液10 min，最后转移至预先平衡好的培养皿等待移植。

1.2.2.3胚胎移植自然周期或激素替代周期内膜准备。

所有卵裂胚解冻后均过夜培养后移植，囊胚当天解冻及移植。

1.3观察指标及评价标准比较各组患者的临床妊娠率、胚胎着床率和多胎率，临床妊娠判断标准为移植后28 d B超下见孕囊和胎心1.4统计学方法采用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用方差分析；计数资料采用率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果单囊胚组和双卵裂胚组患者的临床妊娠率均低于双囊胚组，差异有统计学意义（P0.05）。

单囊胚组患者的胚胎着床率与双囊胚组比较，差异无统计学意义（P>0.05），但单囊胚组和双囊胚组患者的胚胎着床率均显著高于双卵裂胚组，差异有统计学意义（P<0.01）。

单囊胚组患者的多胎率显著低于双囊胚组及双卵裂胚组，差异有统计学意义（P<0.05）（表1）。

3讨论相关研究证实[6]，新鲜周期中选择性地单囊胚移植，能够在维持累计妊娠率的同时降低多胎妊娠的风险。

囊胚移植能提高患者临床妊娠率和胚胎着床率[7]，而冻融囊胚相比新鲜囊胚更具优势，冻融胚胎移植通常采取接近自然周期的移植策略，可以有效减少子宫内膜容受性的影响[8]，而良好的种植环境是胚胎种植成功和临床妊娠的关键[9]。

囊胚是卵裂期胚胎之后的一个重要发育阶段，形态上经历了细胞融合、囊胚腔出现及囊胚腔扩张的变化，基因调控上经历了由母型调节向胚胎型调节的转化。

在这过程中，发育潜能差及染色体异常的胚胎大多数发生发育阻滞，质量好的胚胎才能发育至囊胚期。

另外有文献报道称[10]，囊胚移植更符合自然的生理现象。

因为自然生理状态下，早期胚胎在输卵管中发育，直到接近囊胚期才进入子宫腔[11-12]。

利用囊胚培养技术，待胚胎形成囊胚后再植入子宫腔，使子宫内膜与胚胎发育趋于同步，同时缩短了胚胎移植入子宫腔后进一步发育及着床的时间间隔，且子宫收缩逐渐减少，可减少胚胎排出体外的机会，降低了异位妊娠等并发症的发生率。

本研究结果提示，单囊胚冻融移植可以获得与双卵裂胚冻融移植相似的临床妊娠率，而双囊胚冻融移植虽然较单囊胚移植有更高的临床妊娠率，但多胎率（50.0%）是双卵裂胚组的（21.9%）的2倍有余，接近单囊胚移植（5.2%）的10倍，单囊胚组患者的多胎率显著低于双囊胚组及双卵裂胚组，差异有统计学意义（P0.05），多胎率（5.2%）低于双卵裂胚组（21.9%），差异有统计学意义（P0.05），这与陈攀宇等[15]的研究结果不同，分析原因是本研究单囊胚移植的标准为3期以上、内细胞团或滋养层评级其中一项为B级以上，而该研究的单囊胚移植标准为3期以上、内细胞团与滋养层评分同时满足B 级。

综上所述，对于年龄≤38岁的患者，第一次冻融移植应该建议行单囊胚移植，其能获得与移植双卵裂胚相似的临床妊娠率，提高胚胎着床率，有效降低多胎率，不建议行双囊胚移植以避免过高的多胎率，但这个结论仍需更多数据支持。

[参考文献][1]Ethicslaw ETFO.Ethical issues related to multiple pregnancies in medically assisted procreation[J].Hum Reprod，2003，18（9）：1976-1979.[2]董耘，高颖.多胎减胎术的应用进展[J].现代妇产科进展，2013，22（5）：422-424.[3]Kang SM，Lee SW，Yoon SH，et parison of clinical outcomes between single and double vitrified-ward blasto-cyst embryo transfer according to the day of vitrification[J].Fertil Steril，J assist Reprod Genet，2013，30（6）：779-785.[4]Brinsden PR.A textbook of in vitro fertilization and assisted reproduction[M].NewYork：The part heno Publishing Group Inc，1999：196.[5]Gardner D，Lane MJ，Schlenker T，et al.Blastocyst score affects implantation and pregnancy outcome：towards a single blastocyst transfer[J].Fertil Steril，2000，73（6）：1155-1158.[6]Ishihara O，Araki R，Kuwahara A，et al.Impact of frozenthawed single-blastocyst transfer on maternal and neonatal outcome：an analysis of 277 042 single-embryo transfer cycles from 2008 to 2010 in Japan[J].Fertil Steril，2014，101（5）：128-133.[7]Goto S，Kadowaki T，Tanaka S，et al.Prediction of pregnancy rate by blastocyst morphologi-cal score and age，based on 1488 single frozen-thawed blastocyst transfercycles[J].Fertil Steril，2011，95（3）：948-952.[8]马龙，钱晓乔，蔡令波，等.全胚冷冻再行解冻胚胎移植周期的临床结局分析[J].生殖与避孕，2012，32（4）：237-240.[9]赵静，张?i秋，张军强，等.玻璃化冷冻囊胚复苏移植与新鲜囊胚移植的临床结局比较[J].南京医科大学学报（自然科学版），2014，37（1）：41-43.[10]郝桂琴，李蓉，耿岚，等.胚胎移植与囊胚移植的临床结局分析[J].中国组织工程研究与临床康复，2011，15（31）：5739-5742.[11]Thoms MR，Sparks AE，Ryan GL，et al.Clinical predictors of human blastocyst formation and pregnancy after extended embryo culture and transfer[J].Fertil steril，2010，94（2）：543-548.[12]Saki G，Rahim F，Moradi L.The study of developmental capacity of vitrified mouse blastocsts in different straws after transfer to mouse pseudo pregnant[J].Pak J Biol Sci，2008，11（14）：1809-1814.[13]Yanaihara A，Yorimitsu T，Motoyama H，et al.Clinical outcome of frozen blastocyst transfer；single vs.double transfer[J].J Assist Reprod Genet，2008，25（11-12）：531-534.[14]张波，冯贵雪，周虹，等.选择性单囊胚移植在降低多胎率中的应用[J].国际生殖健康/计划生育杂志，2012，32（1）：38-41.[15]陈攀宇，方丛，贾磊，等.复苏周期D5单囊胚移植与双囊胚移植对妊娠结局的影响[J].生殖医学杂志，2016，25（12）：1049-1053.（收稿日期：2017-07-12 本文编辑：孟庆卿）。