麻痹性贝类毒素的生物法与酶联免疫法测定比较
水产品中麻痹性贝类毒素(PSP)检测论文
水产品中麻痹性贝类毒素（PSP）检测探析[摘要]目的：使用美国abraxis麻痹性贝类毒素试剂盒对40个北海海域的文蛤样品进行psp检测。
方法：使用酶联免疫试剂盒对文蛤麻痹性贝类毒素进行检测，检测限为0.02ng/g，灵敏度为为0.015 ng/g。
通过建立psp纯溶液的标准曲线测定，待测水产品的psp浓度。
结果：建立标准曲线后，最终测得水产品样品psp的平均含量为1.7ng/g结论：应用elisa法检测麻痹性贝类毒素，具有简便、快捷、成本低廉等特点，适用于快速检测的样品。
可以应用于水产品质量的快速检测以及对贝类进行质量监控。
麻痹性贝类毒素（psp）指存在于贝类体内，摄食后可以产生麻痹作用的一种海洋生物毒性物质。
psp的化学结构主要是石房蛤毒索（saxitoxin），是目前世界上一类分布最广、食物中毒频率最高、危害度最大的毒素。
关键词：水产品；麻痹性毒素；检测中图分类号：s9 文献标识码：a 文章编号：1009-914x（2013）02-01-011 资料与方法1.1 样品随机选取40个北海海域的文蛤样品，用于后续psp检测使用。
1.2 试剂美国abraxis贝类毒素试剂盒，甲醇。
1.3仪器酶标比色仪（bio一tek）、均质器、微量进样器、离心机、电子天平。
1.4方法1.4.1测定原理用特异性抗体同石房蛤毒素进行结合。
样本中的石房蛤毒素可与石房蛤毒素一酶的结合物进行竞争，与微孔板上的兔抗一石房蛤毒素抗体发生特异性结合。
石房蛤毒素抗体和微孔底部的二抗发生结合，洗板后加入底物，此时会产生蓝色物质。
颜色的深度同样本中的石房蛤毒素浓度成反比。
在规定时间内终止颜色反应，用酶标仪进行读值。
每个孔内的样本浓度通过做出标准曲线来读取。
1.3.2样品前处理除去样品的贝壳，用蒸馏水洗净后放入均质器中。
称取15g均质后的样品，加入15ml0.1 mol/l的盐酸溶液，并煮沸5min。
煮沸过程中需要不断搅拌。
冷却均质后，以3500r/min 的速度进行10分钟离心。
贝类中麻痹性贝类毒素的测定 标准文本(食品安全国家标准)
食品安全国家标准贝类中麻痹性贝类毒素的测定1 范围本标准适用于贝类及其制品中麻痹性贝类毒素的测定。
第一法为小鼠生物法，适用于麻痹性贝类毒素的总量测定；第二法为酶联免疫吸附法，适用于麻痹性贝类毒素的筛查检测；第三法为高效液相色谱法，适用于麻痹性贝类毒素总量(STXeq)，以及GTX4、GTX1、dcGTX3、B1、dcGTX2、GTX3、GTX2、neoSTX、dcSTX、STX等组分含量的常规检测；第四法为液相色谱-串联质谱测定法，适用于GTX1、GTX 4、GTX2、GTX 3、dcGTX2、dcGTX 3、neoSTX、STX、dcSTX、GTX5等10种麻痹性贝类毒素组分含量的测定及确证。
第一法小鼠生物法2 原理方法采用小鼠生物法对PSP予以定量。
根据小鼠腹腔注射贝类提取液后的死亡时间，查出鼠单位，并按小鼠体重，校正鼠单位(corrected mouse unit，CMU)，计算确定每100 g样品中PSP的鼠单位。
以石房蛤毒素作为标准，将鼠单位换算成毒素的微克数，计算确定每100 g贝肉内的PSP微克数。
所测定结果代表存在于贝肉内各种化学结构的PSP毒素总量。
3 试剂和材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1 氢氧化钠（NaOH）：将4.0 g氢氧化钠（NaOH）溶于1 L蒸馏水中。
3.2 盐酸（HCl）：分析纯。
3.2.1盐酸溶液（0.18 mol/L）：将15 mL浓盐酸（HCL）用蒸馏水稀释至1 L。
3.2.2盐酸溶液（5 mol/L）：将41.7 mL浓盐酸用蒸馏水稀释至100 mL。
3.3 无水乙醇（CH3CH2OH）：分析纯。
3.4 石房蛤毒素标准品（Saxitoxin，STX,C10H17N7O4·2HCl）：纯度≥98.0％。
3.5 标准溶液的配制3.5.1 石房蛤毒素贮备液（100 μg/mL）：用蒸馏水配制20％（v/v）的乙醇溶液，用5 mol/L盐酸调节pH到2.0～4.0之间，备用。
麻痹性贝毒单克隆抗体的制备和酶联免疫检测方法的建立
文献标识码 Ａ 文章编号 １ ０ ０ ０ － ４ ８ ４ Ｘ（ ２ ０ １ ３ ） ０ １ － ０ ０ ６ ９ － ０ ５
中 国 图 书分 类号
Ｒ ３ ９ ２ ． ４
［ 摘
ＢＡＬＢ／ｃ ｍｏ ｕ ｓ ｅ ．Ｔｈｅ ｓ ｅ ｌ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｆ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｐｒ ｏ ｄ ｕｃ ｅ ｄ ｂ ｙ ｆ ｕ ｓ ｉ ｎ ｇ ｍｏ ｕｓ ｅ ｓ ｐ ｌ ｅ ｅ ｎ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｗｉ ｔ ｈ ＳＰ ２／ ０ ｍｙ ｅ ｌ ｏ ｍａ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ，ｆ ｏ ｌ ｌ ｏ ｗｅ ｄ ｂ ｙ ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｉ ｎｇ
ａ ｎ ｄ ｃ ｌ ｏ ｎ ｉ ｎ ｇ，ａ ｎ ｄ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ＨＡ Ｔ ｍｅ ｄ ｉ ｕ ｍ．Ｔ ｈ ｅ ａ ｎ ｔ ｉ — Ｓ Ｔ Ｘ－ Ｍｃ ＡＢ ｈ ｙ ｂ ｒ ｉ ｄ ｏ ｍａ ｓ ｅ ｃ ｒ ｅ ｔ ｉ ｎ ｇ ｃ ｅ ｌ ｌ ｌ ｉ ｎ ｅ ｓ ｗ ａ ｓ ｏ ｂ ｔ ａ ｉ ｎ ｅ ｄ ｂ ｙ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ ． Ｍｏ ｎ ｏ ｅ ｌ ｏ ｎ ａ ｌ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ｗａ ｓ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ ｂ ｙ ｍｏ ｕ ｓ ｅ ｉ ｎ ｖ ｉ ｖ ｏ ｉ ｎ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ ａ ｓ ｃ ｉ ｔ ｅ ｓ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ． Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ： Ｗｅ ｏ ｂ ｔ ａ ｉ ｎ ｅ ｄ ａ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ ｆ ｏ ｕ ｒ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｅ Ｐ Ｓ Ｐ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ
麻痹性贝毒的分析方法研究进展
麻痹性贝毒的分析方法研究进展作者：石昌磊周志刚刘童丁家林于永刚来源：《现代农业科技》2010年第21期摘要针对麻痹性贝毒的检测技术,着重从生物学测试方法、化学测试分析方法2个方面概括地介绍了贝毒检测技术研究的进展。
总结了几种相关检测技术各自的优点和不足及几种方法有机结合和优势互补,提出了技术的革新和新方法的使用将是贝类毒素检测手段的发展方向。
关键词麻痹性贝毒;分析方法;生物学测试法;化学测试法中图分类号R994.6;X55文献标识码A文章编号 1007-5739(2010)21-0340-03AdvanceintheResearchMethodtoDetermineDiarrheticShellfishPoisonsSHI Chang-leiZHOU Zhi-gangLIU TongDING Jia-linYU Yong-gang(The Fishery Technology Spread Station of Lvshun in Dalian City of Liaoning Province,Dalian Liaoning 116041)AbstractIn this paper,focusing on the detection of paralytic shellfish poisoning techniques,the biological testing methods,and chemical test analysis methods were described in general on shellfish poisoning detection technology progress. The advantages and disadvantages of several related detection techniques,and several ways to combine and complement each other were summarized. New technology and new methodology will be the direction for shellfish toxins.Key wordsparalytic shellfish poisoning toxins(PSP);analytical method;biologicalmethod;chemicalmethod随着社会的发展,人们的生活质量渐渐提高,各种海产贝类食品越来越多地进入了寻常百姓家的餐桌,并且越来越受到欢迎。
贝类中麻痹性贝类毒素的测定 标准文本(食品安全国家标准)
食品安全国家标准贝类中麻痹性贝类毒素的测定1 范围本标准适用于贝类及其制品中麻痹性贝类毒素的测定。
第一法为小鼠生物法，适用于麻痹性贝类毒素的总量测定；第二法为酶联免疫吸附法，适用于麻痹性贝类毒素的筛查检测；第三法为高效液相色谱法，适用于麻痹性贝类毒素总量(STXeq)，以及GTX4、GTX1、dcGTX3、B1、dcGTX2、GTX3、GTX2、neoSTX、dcSTX、STX等组分含量的常规检测；第四法为液相色谱-串联质谱测定法，适用于GTX1、GTX 4、GTX2、GTX 3、dcGTX2、dcGTX 3、neoSTX、STX、dcSTX、GTX5等10种麻痹性贝类毒素组分含量的测定及确证。
第一法小鼠生物法2 原理方法采用小鼠生物法对PSP予以定量。
根据小鼠腹腔注射贝类提取液后的死亡时间，查出鼠单位，并按小鼠体重，校正鼠单位(corrected mouse unit，CMU)，计算确定每100 g样品中PSP的鼠单位。
以石房蛤毒素作为标准，将鼠单位换算成毒素的微克数，计算确定每100 g贝肉内的PSP微克数。
所测定结果代表存在于贝肉内各种化学结构的PSP毒素总量。
3 试剂和材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1 氢氧化钠（NaOH）：将4.0 g氢氧化钠（NaOH）溶于1 L蒸馏水中。
3.2 盐酸（HCl）：分析纯。
3.2.1盐酸溶液（0.18 mol/L）：将15 mL浓盐酸（HCL）用蒸馏水稀释至1 L。
3.2.2盐酸溶液（5 mol/L）：将41.7 mL浓盐酸用蒸馏水稀释至100 mL。
3.3 无水乙醇（CH3CH2OH）：分析纯。
3.4 石房蛤毒素标准品（Saxitoxin，STX,C10H17N7O4·2HCl）：纯度≥98.0％。
3.5 标准溶液的配制3.5.1 石房蛤毒素贮备液（100 μg/mL）：用蒸馏水配制20％（v/v）的乙醇溶液，用5 mol/L盐酸调节pH到2.0～4.0之间，备用。
麻痹性贝毒的分析方法研究进展
的最 低 限为 ２ ｇＴ ｅ／０ ０ｐ Ｓ Ｘ ｑ１０ｇ贝组 织ｌ。 由于该 方法 需 要 ｌ但 １ 借助 显微镜 注射 样品 。 作困难 ， 有被推 广使 用。 操 没
蝗 虫 生 物 测试 法 分 析 Ｐ Ｐ： 蝗 虫 的腹 部 在 体 节 之 间 Ｓ 沿 注射 １ Ｌ的测 试样 品 ， 察并 记 录一 定 时 间 内被 麻痹 蝗 ０ 观
细胞 毒性 测试 法也 叫组 织培 养分析 法 ， 该方 法 测试Ｐ Ｐ Ｓ
毒 素的原理 是箭 毒 、 藜芦 定对 神经 母细胞 瘤 Ｎ ａ通道 具有协
同的开放 作 用 ， 增进 Ｎ 可 ａ向细 胞 内 的流 动 ，至 导致 细胞 裂 解死 使 亡。 作为 Ｎ ￣ 道 阻断剂 的 Ｐ Ｐ毒 素可 拮抗 这种 细胞肿 胀作 ａ通 Ｓ 用 ， 且 拮抗 程 度 与 毒 素 的剂 量 具 有很 好 的相 关 性 。ｅ ｅ 并 ＪＨ ａ 等 【应 用这 一原 理 建 立 了测 试 Ｐ Ｐ的方 法 ， 要 步 骤是 将 ｔ ３ １ Ｓ 主 分 离 的小 脑 神 经细 胞 悬浮 于 一定 的培 养 基 中 ， 细 胞一 旦 该
随着社会 的发 展 ， 人们 的生活 质量 渐渐提 高 ， 各种 海产
方法 与小鼠生物测 试很相近 。 该方 法检测 贝样 中 ＰＰ 用 Ｓ
贝 类食 品越来 越 多地 进入 了 寻常 百 姓家 的 餐桌 ， 且越 来 并
越 受到 欢迎 。 然而 人们 在享受 美味 的同时 ， 不知道 有 些 贝 却 类 是有 毒的 ， 使近 年来 贝类 中毒事 件频 繁发 生ｌ 。 洋 中的 ｌ 海
动物科 学
现 代农 业科技
２１ ０ ０年第 ２ 期 １
麻痹 性贝 毒 的分 析方 法研 究进 展
贝类毒素及其贝类毒素检测的研究
导读：贝类毒素及其贝类毒素检测的研究，摘要：贝类中毒是由一些浮游藻类合成的多种毒素而引起的，这些藻类是贝类的食物,这些毒素在贝类中蓄积，通过生物测定、物理分析、免疫化学可测定贝类毒素，赤潮毒素对人类造成的危害事件日益增多，贝类毒素属于海洋天然高分子有机化合物，它的形成与海洋中有毒素藻类赤潮密切相关，经过生物积累和放大转化为有机毒素，即贝类毒素，因此开展对贝类毒素的研究对人类有重要意义，1贝类毒素贝类（南京财经大学食品科学与工程学院,江苏南京，210000）摘要：贝类中毒是由一些浮游藻类合成的多种毒素而引起的，这些藻类是贝类的食物,这些毒素在贝类中蓄积。
通过生物测定、物理分析、免疫化学可测定贝类毒素。
关键词：贝类；毒素；检测；藻类；毒理效应；化学分析。
Shellfish poison and shellfish toxin detection research(Nanjing University of Finance and Economics Institute of Food Science and Engineering，Nanjing 21000,Nanjing,China) Abstract: shellfish poisoning is by some planktonic algae synthesis of a variety of toxin and cause, these algae is shellfish food, the poison in the shellfish accumulation. Through the bioassay, physical analysis, immune chemical measurement shellfish poison.Keywords: Shellfish; Poison; Detection; Algae, Toxicological effect; Chemical analysis. 20世纪50年代以后，海洋赤潮频繁，赤潮毒素对人类造成的危害事件日益增多。
贝类毒素的测定
精品课件
样品的测定
小鼠试验
若注射样品原液后，1只或2只小鼠的死亡时间 大于7min，则需再注射至少3只小鼠以确定样 品的毒力
若小鼠的死亡时间小于5min，则要稀释样品提 取液后，再注射另一组小鼠（3只），得到 5min-7min的死亡时间
将混合物加热，并徐徐煮沸5min，冷却至室温， 调节pH至2.0-4.0（切勿＞4.5）。将混合物移至 量筒中并稀释至200mL
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样品的测定
提取
将混合物倒回烧杯，搅拌至均质状，使其沉降至 上清液呈半透明状，不能堵塞注射针头即可
必要时将混合物或上清液以3000r/min离心5min， 或用滤纸过滤
DSP是由于双壳贝类滤食含毒的涡鞭毛藻而引起 影响较严重的地区主要是日本和欧洲沿海国家，
发病率高，引起许多国家地区的关注 受DSP中毒的症状表现为消化功能紊乱（腹泻、
呕吐、腹痛），食用含毒贝类后30分钟至几小 时出现症状，中毒者一般在3-4天康复，尚无死 亡病例
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腹泻性贝类毒素的测定方法
试剂
盐酸溶液：0.1 mol/L 盐酸溶液：5 mol/L 氢氧化钠溶液：0.1 mol/L
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仪器和设备
均质器 天平（感量0.1g） 离心机 pH计 秒表 玻璃皿；烧杯、量筒、容量瓶、搅拌棒等 注射器：1mL 注射器针头：8#
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小白鼠：
体重为19-21g的健康ICR系雄性小白鼠 若体重＜19g或＞21g，查表中的校正系
精品课件
剂
样品的测定
检样的制备
贝类罐头 1.将罐内所有内容物（包括贝肉组织及汁液），
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麻痹性贝类毒素 ｆ Ｐ Ｓ Ｐ １是 指 存 在 于 贝 类 体 内 化 学 结 构 以石 房 蛤 毒 ｆ Ｓ ａ ｘ ｉ ｔ ｏ ｘ ｉ ｎ ， Ｓ Ｔ Ｘ ）为 代 表 ．摄 食 后 可产 生 麻痹 作 用 的海 洋 生 物毒 性 物 质 的总 称
其 它 设 备 ：离 心 机 、 电炉 、涡 旋 振 荡 器 、秒 表 、烧杯 、量 筒 、离心 管 、微 量 移液 器 、注射 器 ； 试 验 小 鼠 ：体 重 １ ９ ～ ２ １ ｇ的健 康 Ｉ Ｃ Ｒ系雄 性 小
鼠． 由浙 江省 动物 实验 中心繁 育 。
１ ． ３ 提 取 和 净 化
主要 是 由 甲 藻类 中 的 亚 历 山 大 藻 属 ｆ Ａ ｌ ｅ ｘ ａ ｎ ｄ ｒ ｉ ｕ ｍ ）
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材料 与试 剂
试剂 ：盐 酸 （ 分析 纯 ） ，水 为超 纯水 ； 麻痹 性 贝类 毒素 试 剂盒 （ ９ ６孔微 孔 板 ） ：美 国
Ａ ｂ ｒ ａ ｘ ｉ ｓ 公司：
较 为繁琐 、过程 较 为复杂 、对 小 白 鼠和 实验 环境 要 求 较 高 ，且 重 现性 差 。近年来 。利用抗 原抗 体结 合 的酶联 免疫 法 在海 洋生 物毒 素检测 方 面得 到 了迅 速 发展 ，该法 操 作 简单 ，实 验 时 间较 短 ，灵 敏 度 高 ， 适 合 浓度低 的样 品 ，但该 法成 本 较高 ，且 由于 贝类 的复 杂性 ．很 多毒 素类 似物 容易 相互转 化 ．因此 对
以及 膝 沟 藻 属 ｆ Ｇ ｏ ｎ ｙ ａ ｕ ｌ ａ ｒ ｘ ） 、原 甲藻 属 ｆ Ｐ ｒ ｏ ｒ ｏ ｃ ｅ ｎ ． ｔ ￣ ｕ ｍ ）等 一些 形 成赤 潮 的种 类 产生 的一 系列 氨 基 甲 酸 酯类 衍生 物 ．是 目前世界 上 分布最 广 、食物 中毒 发 生频 率最 高 、危害 程度 最大 的一类 毒 素 。麻 痹性 贝 类毒 素最 常见 的生 物是蛤 和 贻贝 ．偶 尔也 出现 于 布 氏海菊蛤 、扇 贝 和牡蛎 目前 国际上 普遍 采用 小 白 鼠生 物法 、酶联免 疫法 、色 谱法 和质 谱法 等手 段 来 检测 贝类 毒 素 ．并 做 出预警 ［ １ － ２ ］ 。 小 白 鼠生 物 法 和酶 联 免疫 法 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ）是 近 几 年来测定 Ｐ Ｓ Ｐ最 常 用 的 的 方 法 。小 白 鼠生 物 法 是
将 每个 西林 瓶 中 的冻 干 粉 末 作 为 一 个 检 测 样
样 品 中的原 始 或潜 在总 毒素作 出判 断 比较 困难 由
于国内 Ｐ Ｓ Ｐ标 准 物 质 获 取 困难 ．本 文 以历 年 农 业 部能 力验 证盲 样检 测 为实验 基础 同时采 用小 白鼠
生 物法 和 酶联 免疫 法对 样 品进 行测 定 ，通 过 比较 ２ 种方 法 的优缺 点 ．为建 立快 速准 确 的麻痹 性 贝类毒
１ ． ２ 仪器 与 设备
酶 标仪 ：雷 勃 ＭＳ Ｋ ３ ，美 国 Ｔ ｈ ｅ ｒ ｍｏ 公 司；
电子 天平 （ 感应 ０ ． ０ １ ｇ ） ：Ｔ Ｅ ４ １ ２ 一 Ｌ ，德 国 Ｓ ａ ｒ ．
ｔ ｏ ｕ ｒ ｉ ｕ ｓ 公司 ：
法 ．该 法 较 适 用 于 Ｐ Ｓ Ｐ浓 度 较 高 的 样 品 ，但 操 作
目前 唯一 得 到 国际 公 认 Ａ Ｏ ＡＣ标 准 生 物检 测 的 方
ｐ Ｈ精 密试 纸 ：测定 范 围 ０ ． ５ ～ ５ ； 试验 样 品 ：采 用 天然海 域生 长 的含麻 痹性 贝类 毒 素 的扇 贝肝 胰腺 做基 质 ，经低 温冷 冻 干燥制 备 而 成 ．并 经过 均匀 性实 验验证 的冻干 粉末 ．封 装于 西 林 瓶 ．由农 业部麻 痹 性贝类 毒 素能力 验 证组 织部 门 提供。
没有结 合 的酶标 记 物在 洗涤 步骤 中被 除去 。将 底物
提取 液转移 到 ５ ０ ｍＬ离 心 管 中 ． ４ ０ ０ ０ ｒ ｐ ｍ 离 心
ｌ ４
宁 浊 栉 技
２ ０ １ ４ 年 第 ３ 期
麻痹性贝类毒素的生物法与酶联免疫法测定 比较
吴蓓 莉 ，钟 惠 英 ，邱 洁琼 ，郑 文炳
（ 宁波 市海 洋－ ９渔 业 研 究 院 ３ １ ５ ０ １ ２ ）
摘
பைடு நூலகம்
要 ：采 用 小 白 鼠生 物 法 和试 剂 盒 酶 联 免 疫 法 对 近 ４年农 业部 贝类 毒 素 的 实 验 室 间 能 力 验 证 比对 ，结 果 表 明 ，２
种 方 法 检 测 的 数 据 结 果 吻 合 性 较 好 ，检 测 同一 样 品 时 相 对 偏 差 为 １ ． １ ９ ％一 ６ ． ２ ５ ％ ，准 确 度 较 高 。 但 ２种 方 法 各 有 其 优 缺 点 ，如将 这 ２种 方 法 结 合 运 用 ，可 以 提高 实 验 数 据 的准 确 性 ，可 作 为 实验 室质 控 的一 种 有 效 手 段 。
４ ． ０ ．将 烧 杯置 电炉 上 加热 ．徐 徐煮 沸 ５ ｍｉ ｎ后 ，冷
素 检测 方法 奠定 良好 的基 础
却至 室 温 ，调 节 ｐ Ｈ至 ２ ． ０ ～ ４ ． ０ 。将该 混合 物 移到 量
２ ０ １ ４年第 ３期
宁皿 杯鼓
１ ５
筒 中 ．用 水 定 容 到 ５ ０ ｍＬ 。静 置数 分 钟 后 ，将 上 层
本 ，转 移 人 １ ０ ０ ｍＬ烧 杯 中 ，用 ２ ０ ｍＬ 、０ ． １ ８ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ 盐 酸 溶液分 数 次反 复冲洗 西林 瓶 ．最终 合 并到烧 杯 中制 备 成 混 悬 样 本 然 后 再 加 入 约 ３ ０ ｍ Ｌ蒸 馏 水 ， 充 分 混 合 ．用 ０ ． １ ８ ｍ０ １ ／ Ｌ盐 酸 溶 液 调 节 ｐ Ｈ至 ２ ． ０ ～