固相抗原在寄生虫病免疫学诊断中的应用
第章固相膜免疫分析技术
第章固相膜免疫分析技术引言固相膜免疫分析技术（solid-phase immunoassay）是一种非常常见的生物学方法，其中固定在固体表面的抗体（或抗原）作为一种固定相，与在样品中检测的抗原（或抗体）结合形成复合物。
本文将介绍固相膜免疫分析技术以及它在生命科学中的应用和发展。
原理固相膜免疫分析技术的基本原理是将一种生物分子（例如抗体或抗原）固定在固体表面上形成固相，然后用另一种生物分子（例如抗原或抗体）测量待测样品中的含量。
这通常涉及到标记生物分子的技术，包括荧光标记、酶标记和放射性标记等。
固相在固相膜免疫分析技术中，固相是指为检测所需的生物分子提供固定表面的固体物质。
通常使用的材料包括微孔板、玻璃微珠和固相膜等。
在固相上提供特异性固定的分子通常是抗体，或者是可用于检测抗体的抗原。
检测固相膜免疫分析技术中的检测通常基于“标记”分子的使用，标记分子通常是一些颜色染料或金标记。
标记分子的选择取决于需要检测的具体生物分子类型和浓度范围。
例如，如果需要检测血清中的IgG抗体，则可以使用与IgG结合的酶标记二抗。
检测通常与“可见的”信号相关，例如与标记分子的所处位置相关的颜色。
常见的信号读数技术包括吸光度读数（例如在ELISA中使用），色谱技术和质谱技术等。
生命科学中的应用固相膜免疫分析技术广泛应用于生命科学领域。
以下是一些主要应用：ELISAELISA（酶联免疫吸附试验），是固相膜免疫分析技术最常见的应用之一。
在ELISA中，固定于微孔板中的一种抗体与检测样品中的分子结合，在发现复合物之后，颜色标记的酶会将染料沉淀在固体表面上。
通过吸光度测定标记的物质的浓度以确定待测物的浓度。
生物芯片生物芯片是一种利用半导体Wafer技术制作的小型晶片，可用于同步检测数千个基因或蛋白质。
在生物芯片中，官能团分子（例如抗体或抗原）被固定在芯片表面，并与含多种生物分子的混合物反应。
待测物质会结合到芯片表面上相应分子上，而不结合则不会。
寄生虫免疫
土源性线虫病：指不需要中间宿主，其中卵和幼虫在外界发育到感染期后直接感染人的线虫。
食物源性寄生虫病：因生食或半生食含有感染期寄生虫的食物而感染的寄生虫病。
抗原的纯化：通过物理的化学的方法，利用寄生虫的物理化学特性进行组分分离的过程。
纯化的方法：凝胶层析、离子交换层析、亲和层析凝胶层析：凝胶层析是一种以分子大小为基础的分离技术，凝胶中每个颗粒的细微结构的小孔使被分离组分在流经途径上出现差别，大分子物质首先从孔外经过，首先被洗脱出来，其次是较小的组分，最后是小分子物质。
（常用载体：交联葡聚糖、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶。
）离子交换层析：是利用离子交换剂作固定相，利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的层析方法。
离子交换层析原理：依靠静电吸引溶液中带相反电荷的离子结合利用待分离的各种蛋白质的等电点或所带电荷的不同而引起的与载体结合力不同和进行区分。
离子交换层析过程：起始、吸附、解脱、完成亲和层析(affinity chromatography)：将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中，当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时，与吸附剂有亲和力的蛋白质就被吸附而被滞留在层析柱中。
那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附直接流出，从而与被分离的蛋白质分离，然后选用适应的洗脱液改变条件将被结合的蛋白质洗脱下来亲和层析原理：亲和层析是一种吸附层析抗原（或抗体）和相应的抗体（或抗原）发生特异性结合，而这种结合在一定的条件下又是可逆的，所以将抗原（或抗体）固相化后，就可以使存在的液相中的相应抗体（或抗原）选择性的结合在固相载体上借以与液相中的其它蛋白质分开达到分离提纯的目的。
理想载体的基本条件：1、不溶于水，但高度亲水2、惰性物质，非特异性吸附少3、具有相当量的化学基团可供活化4、理化性质稳定5、机械性能好，具有一定的颗粒形式以保持一定的流速6、通透性好，最好为多孔的网状结构，使大分子能够自由通过7、能抵抗微生物和醇的作用固相载体包括皂土、玻璃微球、纤维素、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶等在缓冲液离子浓度大于0.05mol/l时对蛋白质几乎没有非特异性吸附。
动物微生物学__河南农业大学(19)--动物微生物学期末考试答案(A)
答：病原菌的毒力由侵袭力和毒素构成。侵袭力的大小、毒素的性质和数量决定 着病原菌毒力的强弱（2 分）。
一、侵袭力是指病原性细菌突破机体的防卫屏障，在体内生长、繁殖、扩散、 蔓延的能力。侵袭力本身无毒害机体的作用，只是协助细菌侵入机体，抵抗机体 的防卫功能。便于细菌在机体内迅速向深部扩散并进行繁殖（2 分）。它的主要 作用有以下几个方面：（一）细菌的附着力 细菌的附着力是靠菌体表面的菌毛 和 M 蛋白质等附着到粘膜上皮细胞的（1 分）。（二）抗吞噬作用 有些细菌如 炭疽杆菌、肺炎球菌等因带有荚膜，似保护菌体的“甲”，构成了抗吞噬作用的 侵袭力，能抵抗吞噬细胞吞噬消化作用（1 分）。（三）促进扩散能力 有些细 菌侵入机体后，在体内生长繁殖，破坏组织结构，并扩散转移（1 分）。
性菌在生长过程中产生并分泌到环境中的毒性蛋白质，即外毒素（1 分）。 （二）内毒素是病原性或非病原性革兰氏阴性菌细胞壁的组成成分，细菌在生 活状态下不释放或分泌到外界环境中去，只有菌体细胞自溶、死亡崩解，或人工 方法（超声波处理、反复冻融、研磨等）破坏其细胞的完整性时，才能释放出来。 所以称为内毒素（1 分）。
二、填空题，每空 0.5 分，总 20 分。 1 微生物八大类包括细菌、真菌、放线菌、螺旋体、霉形体、立克次氏体、衣原体、病 毒和少数藻类 。 2 革兰氏染色法的染色步骤是（1）滴加草酸铵结晶紫染色液，1min 后水洗。
（2）加革兰氏碘液媒染，1min 后水洗。（3）加 95%酒精脱色约 30sec，水洗。 （4）加石炭酸复红液复染， 1min 后水洗。（5）吸干后镜检。G﹢细菌呈蓝紫 色，G-细菌呈红色。 3 人工培养病毒的方法有 鸡胚培养 、试验动物培养 、细胞培养 。 4 细菌的繁殖方式为 裂殖 ，病毒的繁殖方式为 复制 。 5 细菌的特殊结构有 鞭毛、芽孢、荚膜 、 菌毛 。 6 细菌生长繁殖的条件 营养物质、酸碱度、温度、渗透压、气体 。 7 目前我国规定：生活饮用水的标准为 1 毫升水中细菌总数不超过 100 个，大 肠杆菌指数不超过 3 个，大肠杆菌价不低于 300 。 8 病原菌引起传染的条件病原菌的毒力和数量、侵入门户、易感动物、环境条件。 9 正常的免疫功能包括 抗传染功能、自身稳定功能、免疫监视功能。 10 禽流感病毒简写 AIV ，属于 副黏病毒 科的 流感病毒属 。
寄生虫学及寄生虫学检验课程大纲
《寄生虫学与寄生虫学检验》课程教学大纲一、课程的性质和任务临床寄生虫学是医学检验专业主要的专业课程之一。
是研究与疾病有关的寄生虫与人体之间相互作用以及寄生虫病的发生、发展和转归规律的科学，是临床医学的重要课程之一。
学习寄生虫检验的目的是根据寄生虫的形态、生活史（生态）、致病机制、流行规律和免疫遗传特征等，利用各种检测技术，对寄生虫感染进行病原的或者辅助的诊断，从而使患者得以及时准确的治疗，有效地控制寄生虫病的流行，保护人类健康。
通过本课程学习，培养学生具有扎实的基础理论和临床实践技能，为学生以后从事临床检验工作并对临床检验结果的正确分析打下坚实基础，使学生具有一定的临床应用思维分析能力和对寄生虫病诊断及防治能力，同时培养学生具有较强的动手能力和一定的科研能力。
二、课程教学目标本课程要求学生掌握寄生、寄生虫、宿主之间的关系，各类寄生虫的形态特征、生活史及其发育阶段，寄生虫感染人体的特点，传播的媒介，致病机制和致病作用，寄生虫病的流行特征与防治的原则，寄生虫病的诊断方法与原则，特别是病原学检查的方法。
能对各种检测方法进行选择，把握检测过程中的要点并进行控制，能独立完成常见寄生虫病的实验室诊断。
三、教学内容与要求第一篇绪论【教学目的】通过本章学习，熟悉临床寄生虫学基本概念，临床寄生虫学在医学中的地位，学习医学寄生虫的目的和任务。
了解寄生虫对人类的危害，寄生虫病在世界范围内的流行状况，热带病特别规划防治的7类寄生虫病。
寄生虫病对社会经济发展带来的影响；我国寄生虫病防治所取得的成就，我国寄生虫病的现状及所存在的问题。
【教学重点与难点】本章重点是临床寄生虫的概念，目的和任务。
学习的难点是我国寄生虫病的现状及存在问题，食源性寄生虫病。
第一节寄生虫与宿主一、寄生现象与寄生虫1、共栖2、互利共生3、寄生二、寄生虫分类寄生虫按不同的分类依据所分的类型三、寄主的分类四、寄生虫的生活史第二节寄生虫的感染及致病作用一、寄生虫的感染方式1、经消化道感染2、经皮肤感染3、经媒介昆虫叮咬感染4、经接触感染5、经胎盘感染二、寄生虫对人体的致病作用1、夺取营养2、机械性损伤3、毒素作用4、免疫病理损伤三、寄生虫感染的转归1、显性感染2、隐性感染3、带虫状态第三节寄生虫的感染与免疫一、抗寄生虫感染的免疫机制1、固有免疫2、适应性免疫二、寄生虫感染免疫的特点1、寄生虫抗原复杂、种类繁多2、非消除性免疫3、寄生虫的免疫逃避第四节寄生虫病的流行与防治一、寄生虫流行的基本环节1、传染源2、传播途径3、易感人群二、寄生虫流行的影响因素1、自然因素2、生物因素3、社会因素三、寄生虫病流行的特点1、地方性2、季节性3、自然疫源性四、寄生虫病的防治原则1、控制和消灭传染源2、切断传播途径3、保护易感人群五、我国寄生虫病的流行与防治概况第五节寄生虫检验的目的和方法一、寄生虫检验及目的1、寄生虫检验的目的2、寄生虫检验的概念二、寄生虫检验的方法1、病原学检查2、免疫学诊断3、分子生物学检验技术【教学建议】建议采用多媒体教学，理论讲授为主，辅以讨论、提问第二篇医学蠕虫第一章线虫【教学目的】通过本章学习，掌握蛔虫、蛲虫、钩虫、鞭虫虫卵和丝虫蚴、旋毛虫囊包形态特征，生活史过程与实验诊断方法。
《寄生虫学检验》模拟习题含参考答案
《寄生虫学检验》模拟习题含参考答案一、单选题（共80题，每题1分，共80分）1、关于猪肉绦虫成虫头节形态结构特征的错误描述是A、呈圆球形B、有四个吸盘C、有一个顶突D、无小钩E、直径约1mm正确答案：D2、蛔虫对人体危害最为严重的是A、成虫的扭结.钻孔而造成的多种并发症B、成虫在肠腔内移动,造成肠粘膜损伤.炎症C、幼虫经肺.心脏移行造成的损害D、成虫夺取宿主营养,造成营养不良E、成虫代谢产物造成宿主的中毒反应正确答案：A3、关于蛲虫描述错误的是A、生活史属间接发育型B、带虫者和病人是唯一的传染源C、生活史简单D、感染率儿童高于成人,城市高于农村E、幼虫对宿主肺部没有损害正确答案：A4、绦虫头节的吸盘(槽).小钩等结构的主要功能是A、取食B、运动C、消化D、附着E、排泄正确答案：D5、关于蛔虫致病性的错误描述是A、可引起皮炎B、可引起肺炎C、可引起阑尾炎D、可引起胆道阻塞E、可引起肠梗阻正确答案：A6、人毛滴虫A、做定向的阿米巴运动B、做不定向的阿米巴运动C、做直线翻滚运动D、做迅速的旋转运动E、做活泼的突进式运动正确答案：E7、疟疾的传染源是A、外周血有配子体的患者和带虫者B、感染的哺乳动物C、带虫者D、感染的禽类E、疟疾病人正确答案：A8、引起离心性淋巴管炎的线虫是A、旋毛虫B、蛲虫C、丝虫D、钩虫E、蛔虫正确答案：C9、下列哪种寄生虫成虫为绦虫中最小者A、猪肉绦虫B、多房棘球绦虫C、缩小膜绦虫D、牛肉绦虫E、细粒棘球绦虫正确答案：E10、阴道毛滴虫最常见寄生部位是A、女性消化道B、女性阴道后穹隆C、男性生殖道D、女性泌尿生殖道E、男性尿道正确答案：B11、人毛滴虫寄生于A、泌尿系统B、生殖系统C、支气管D、口腔E、肠道正确答案：E12、尾蚴为感染阶段的寄生虫是A、姜片吸虫B、血吸虫C、肺吸虫D、肝吸虫E、绦虫正确答案：B13、尘螨过敏性疾病主要诊断方法是A、查患者痰液中螨卵B、根据病史,接合免疫学检测C、做血涂片检查螨体D、取活组织查找螨E、粪便涂片检查螨卵正确答案：B14、目前对病媒节肢动物综合防治措施中常用的防治方法是A、化学防治B、环境防治C、法规防治D、生物防治E、遗传防治正确答案：B15、所致疾病具有易治难防特点的寄生虫是A、十二指肠钩虫B、蛔虫C、姜片虫D、鞭虫E、蛲虫正确答案：E16、埃及血吸虫的中间宿主为A、川卷螺B、扁卷螺C、沼螺D、钉螺E、水泡螺正确答案：E17、蓝氏贾第鞭毛虫的感染方式是A、经胎盘感染B、性接触感染C、经媒介昆虫感染D、经口误食感染E、经皮肤黏膜感染正确答案：D18、机械性传播阿米巴原虫的医学节肢动物是A、蚤B、蝇C、蚊D、虱E、白蛉正确答案：B19、眼裂头蚴病的病原体为A、盘尾丝虫B、结膜吸吮线虫C、猪囊尾蚴D、曼氏迭宫绦虫裂头蚴E、牛囊尾蚴正确答案：D20、盘尾丝虫的感染阶段为A、感染期虫卵B、成虫C、含蚴卵D、感染期幼虫E、桑葚期卵正确答案：D21、蠕形螨感染最常见的部位是A、颜面部B、颈部C、四肢D、胸部E、腹部正确答案：A22、确诊结膜吸吮线虫病应检获A、幼虫B、囊包C、包囊D、虫卵E、成虫正确答案：E23、根据寄生虫的生活史,下列哪种寄生虫的生活史属于间接型A、蛔虫B、鞭虫C、肝吸虫D、蛲虫E、钩虫正确答案：C24、棘球蚴最常寄生于人体哪一部位A、血液B、肾脏C、肝脏D、肺E、脾脏正确答案：C25、疥螨在人体内寄生主要摄取A、血液B、淋巴液C、组织液D、角质组织E、肌肉组织正确答案：D26、关于蜱的正确描述是A、硬蜱能长久在宿主身上寄生B、硬蜱吸血时间短C、蜱常在人体寄生部位产卵D、蜱对温度十分敏感E、蜱的活动范围大正确答案：A27、下列哪种标本对肝吸虫病原体检出率最高A、尿液B、骨髓C、十二指肠引流液D、血液E、粪便正确答案：C28、体内有寄生虫长期生存,但无临床症状的人称为A、亚急性期病人E.健康者B、带虫者C、急性病人D、慢性病人正确答案：B29、关于血吸虫的虫卵形态结构的错误描述是A、卵壳薄B、卵内含毛蚴C、卵壳旁有一侧棘D、有卵盖E、椭圆形正确答案：D30、溶组织内阿米巴A、做定向的阿米巴运动B、做不定向的阿米巴运动C、做活泼的突进式运动D、做直线翻滚运动E、做迅速的旋转运动正确答案：A31、哪种人疟原虫有新月型配子体?A、三日疟原虫B、以上都可以C、卵形疟原虫D、人恶性疟原虫E、间日疟原虫正确答案：D32、蛔虫对人体最大的危害是A、引起并发症B、蛔蚴性肺炎C、夺取营养D、破坏肠粘膜E、引起超敏反应正确答案：A33、间日疟原虫最初使红细胞胀大的时期是A、子孢子B、裂殖体C、大滋养体D、小滋养体E、配子体正确答案：C34、关于弓形虫传播途径的错误说法是A、经口感染B、经输血感染C、经胎盘感染D、经受损的皮肤黏膜感染E、经媒介昆虫叮咬感染正确答案：E35、诊断急性日本血吸虫病常用的方法是A、厚.薄血膜法B、骨髓穿刺法C、薄血膜法D、毛蚴孵化法E、厚血膜法正确答案：D36、检查人体蠕形螨感染采集的标本为A、肌肉B、粪便C、额面部皮脂D、痰液E、胸腔积液、腹腔积液、房水、脑脊液、羊水等体液正确答案：C37、医学节肢动物对人的危害包括A、寄生和传播疾病B、毒害作用和致敏作用C、直接危害和间接危害D、致敏作用和寄生E、吸血骚扰和毒害作用正确答案：C38、感染广州管圆线虫后,宿主CSF中以哪种细胞增高为主A、嗜碱性粒细胞B、中性粒细胞C、嗜酸性粒细胞D、淋巴细胞E、单核细胞正确答案：C39、关于结肠小袋纤毛虫滋养体描述错误的是A、具有大.小两个细胞核B、运动形式为穿梭运动C、具有伸缩泡结构D、具有胞肛结构E、具有胞口结构正确答案：B40、血吸虫的感染途径是A、经胎盘感染B、经蚊叮咬感染C、经口感染D、经皮肤感染E、经吸入感染正确答案：D41、疟疾复发的原因是A、被蚊再次叮咬感染B、迟发型子孢子与速发型子孢子共同作用引起的发作C、迟发型子孢子引起的发作D、速发型子孢子引起的发作E、红细胞内残存的疟原虫重新大量繁殖引起的发作正确答案：C42、患日本血吸虫病时可出现A、肝脓肿B、周期性发热.贫血.脾大C、A/G倒置.贫血.脾大D、肝大.腹疼.腹泻E、淋巴管炎.淋巴结炎正确答案：D43、环卵沉淀试验用于辅助诊断的寄生虫病是A、疟疾B、肺吸虫病C、丝虫病D、日本血吸虫病E、姜片虫病正确答案：D44、食肉哺乳动物可能是哪种寄生虫的转续宿主A、卫氏并殖吸虫B、布氏姜片吸虫C、以上都不是D、蛔虫E、血吸虫正确答案：A45、粪便标本检查寄生虫的方法有A、幼虫孵化法B、以上均可C、直接涂片检查法D、成虫或节片检查法E、浓集法正确答案：B46、溶组织内阿米巴生活史的基本过程是A、小滋养体—大滋养体—包囊B、包囊—大滋养体—小滋养体C、滋养体—包囊—滋养体D、大滋养体—小滋养体—包囊E、包囊—滋养体—包囊正确答案：E47、透明胶纸法用于检查A、溶组织内阿米巴滋养体B、蠕形螨C、疥螨D、蝇蛆E、旋毛虫囊包正确答案：B48、关于猪肉绦虫描述正确的是A、中间宿主只有猪B、虫体长度为4~8米C、头节呈方形D、只能引起人体的猪肉绦虫病E、头节上有小钩正确答案：E49、人疥螨A、属于体外寄生虫B、偶可寄生于人体多部位脏器及组织C、寄生于毛囊和皮脂腺D、作为病原体可继发引起人.畜气性坏疽和破伤风E、寄生于人体皮肤表皮层内正确答案：E50、下列哪种寄生虫能分泌抗凝素,使被咬附的肠粘膜伤口不易凝血A、蛔虫B、姜片虫C、蛲虫D、鞭虫E、钩虫正确答案：E51、弓形虫生活史中对人没有感染性的阶段是A、包囊B、滋养体C、配子体D、卵囊E、假包囊正确答案：C52、肝吸虫的第二中间宿主是A、淡水鱼B、狗C、鸟D、牛E、猫正确答案：A53、关于带绦虫卵形态结构特征的错误描述是A、棕黄色B、内含一个毛蚴C、呈圆球形D、胚膜上有放射状条纹E、常见不到卵壳正确答案：B54、患疟疾时可出现A、肝大.腹疼.腹泻B、淋巴管炎.淋巴结炎C、肝脓肿D、周期性发热.贫血.脾大E、A/G倒置.贫血.脾大正确答案：D55、鉴别间日疟原虫雌.雄配子体的主要依据是A、疟原虫的外形B、疟原虫的大小C、疟原虫染色后的颜色深浅D、虐色素的分布E、疟原虫细胞核的特点正确答案：E56、血吸虫虫卵肉芽肿形成的机制主要是T细胞介异的几型变态反应A、2型变态反应B、都可以C、3型变态反应D、4型变态反应E、1型变态反应正确答案：D57、人体最大的寄生原虫是A、阿米巴B、疟原虫C、人芽囊原虫D、弓形虫E、结肠小袋纤毛虫正确答案：E58、患丝虫病时可出现A、周期性发热.贫血.脾大B、A/G倒置.贫血.脾大C、肝大.腹疼.腹泻D、淋巴管炎.淋巴结炎E、肝脓肿正确答案：D59、蛲虫患儿造成自身重复感染的主要原因是A、虫卵污染食物B、蛲虫病的治疗比较困难C、患儿免疫力较低D、感染性虫卵可吸入感染E、患儿用手搔抓肛周皮肤,虫卵污染手指正确答案：E60、没有卵盖的吸虫卵是A、肝吸虫卵B、斯氏狸殖吸虫卵C、日本血吸虫卵D、姜片虫卵E、肺吸虫卵正确答案：C61、下列哪种寄生虫属于互利共生寄生虫A、蛔虫B、纤毛虫C、血吸虫D、姜片虫E、鞭虫正确答案：B62、诊断急性日本血吸虫病常用的方法是A、厚、薄血膜法B、厚血膜法C、骨髓穿刺法D、薄血膜法E、毛蚴孵化法正确答案：E63、鉴别阿米巴性痢疾与细菌性痢疾的主要依据是A、腹疼的性质B、粪便中能否查到包囊C、粪便中能否查到红细胞D、粪便中能否查到滋养体E、粪便中能否查到白细胞正确答案：D64、刚地弓形虫无性生殖阶段在人体的A、毛囊和皮脂腺B、小肠C、有核细胞内D、横纹肌E、肢端的皮下组织正确答案：C65、可能检出溶组织内阿米巴包囊的标本是A、水样便B、肺脓肿穿刺液C、成形便D、脓血黏液便E、肝脓肿穿刺液正确答案：C66、关于麦地那龙线虫,下列说法错误的是A、本虫致病主要是由于雌虫移行至皮肤时所释放的幼虫及大量代谢产物,引起宿主组织强烈的变态反应B、诊断麦地那龙线虫感染还可用皮内试验或用冻干幼虫固相抗原进行IFA检测特异性抗体C、成虫细长,乳白色,雌虫长60~120cm,宽0.9~2mmD、自伤口处获取伸出的雌虫是诊断麦地那龙线虫病主要的确诊依据E、粪便检查虫卵是诊断的主要依据正确答案：E67、可形成自身体外感染的寄生虫是A、蛔虫B、鞭虫C、钩虫D、蛲虫E、旋毛虫正确答案：D68、东方眼虫病的病原体为A、猪囊尾蚴B、牛囊尾蚴C、盘尾丝虫D、结膜吸吮线虫E、曼氏迭宫绦虫裂头蚴正确答案：D69、蝇传播疾病的主要方式是A、发育式B、繁殖式C、机械性传播D、发育繁殖式E、经卵传递式正确答案：C70、关于蚤成虫形态结构特征的正确描述是A、足4对,后足特别发达B、头胸腹融合为躯体C、背腹扁平,体表有毛D、口器为刺吸式,翅1对E、体侧扁,全身有毛.鬃.刺或栉正确答案：E71、下列对急性阿米巴痢疾患者进行病原学检查时须注意的情况不包括A、及时送检标本B、挑取脓血便中脓血部分,采用生理盐水涂片法检查C、注意防止尿液.药物等对采集标本的影响D、冬季注意标本保温E、必须采集发热患者的粪便才能检出病原体正确答案：E72、血吸虫感染时,病人血清中的免疫复合物可抑制哪种细胞介导的对童虫的杀伤A、中性粒细胞B、淋巴细胞C、嗜碱性粒细胞D、嗜酸性粒细胞E、单核细胞正确答案：D73、日本血吸虫感染人体后产生的免疫力可以杀伤再进入人体内的A、雌虫C、童虫D、雄虫E、成虫正确答案：C74、阔节裂头绦虫A、肠腔共栖性原虫B、以人作为其终宿主和中间宿主的寄生虫C、因食入未煮熟的鱼肉而感染的寄生虫D、以查找卵囊作为确诊依据的寄生虫E、兼性寄生虫正确答案：C75、检查原虫滋养体,粪便的取材时间为A、半小时内B、4小时内C、12小时内D、1小时内E、24小时内正确答案：A76、不寄生于人体消化道却可以从粪便排出虫卵的寄生虫是A、姜片虫B、血吸虫C、旋毛虫D、丝虫E、蛲虫正确答案：B77、患黑热病时可出现A、周期性发热.贫血.脾大B、肝大.腹疼.腹泻C、淋巴管炎.淋巴结炎D、A/G倒置.贫血.脾大E、肝脓肿正确答案：D78、黑热病原虫的传播媒介是B、钉螺C、白蛉D、人E、蝇正确答案：C79、急性期血吸虫病患者,排便多为A、软便B、果酱样便C、脓血便D、糊状便E、水样便正确答案：C80、蛲虫引起的常见疾病是A、慢性腹泻B、肛门及会阴皮肤区痒感C、异嗜症D、发热E、失眠正确答案：B二、多选题（共10题，每题1分，共10分）1、在血涂片上不可能查见A、.弓形虫B、.微丝蚴C、.疟原虫D、锥虫E、.隐孢子虫正确答案：ABCD2、人感染肾膨结线虫的可能方式为A、经胎盘传播B、因吞食了生水中的或水生植物上的寡毛类环节动物而获得感染C、幼虫经皮肤侵入而感染D、经血液传播E、吃了含该虫第三期幼虫的蛙或鱼类而引起正确答案：BE3、关于微丝蚴夜现周期性的机制,下列描述正确的是A、宿主剧烈运动B、迷走神经的兴奋与抑制C、氧气吸入量D、微丝蚴自身的生物学特点E、微血管舒缩正确答案：BCDE4、绦虫体壁的皮层表面布满微毛,其功能包括A、增加吸收营养物的面积B、增强对宿主的附着能力C、损伤宿主组织D、运动功能E、抵抗外界环境的干扰正确答案：ABC5、对急性阿米巴痢疾患者进行病原学检查时应注意A、取脓血粪便B、采用生理盐水涂片法C、冬季注意标本保温D、及时送检标本E、注意防止尿液.药物等对采集标本的影响正确答案：ABCDE6、下列对细粒棘球绦虫描述正确的是A、成虫除头颈部之外,幼节.成节和孕节各只有一节B、幼虫多寄生于人和多种食草动物的组织器官内C、对机体主要引起棘球蚴病D、棘球蚴为圆形囊状体,大小因寄生时间长短.寄生部位的宿主不同而异E、成虫寄生在犬科动物小肠内正确答案：ABCDE7、蛲虫传染的主要方式有A、呼吸道感染B、虫媒感染C、肛门-手口直接感染D、间接接触感染E、逆行感染正确答案：CDE8、疟原虫先后在人体内哪两种细胞内发育生长A、脑细胞B、血管内皮细胞C、红细胞D、肠系膜上皮细胞E、肝实质细胞正确答案：CE9、下列对耐格里属阿米巴描述正确的是A、滋养体的核为泡状核B、在外界可自由生活C、滋养体行二分裂,可形成包囊D、感染期为滋养体E、可经鼻粘膜进入机体,并沿嗅神经入脑组织内正确答案：ABCDE10、我国班氏丝虫病的主要传播媒介有A、嗜人按蚊B、白蛉C、致倦库蚊D、中华按蚊E、淡色库蚊正确答案：CDE。
应用环节动物抗原进行日本血吸虫病免疫诊断
虫匡ｌ丝友疸堂苤盍２凶垒堡！！爿２Ｑ旦筮２３鲞筮§塑ｇｂ也』Ｅ巡：盟业２Ｑ：２ＱＱ垒：ｙ丛２３：盟！：§（ＢＬｏ．ＲＡＤ），作ｓＤｓ—ＰＡＧＥ分离ＩＪＳＡ蛋白，恒电流１５ｍＡ，待指示剂溴酚蓝泳动至凝胶边缘，即终止电泳。
取下凝胶，作考马斯亮蓝Ｒ２５０染色，观察并根据参考标准蛋白的电泳迁移率（Ｒｆ），建立回归方程，进而求出各蛋白区带的相对分子质量。
３．Ｗｅｓｔｅｍ印迹：按上述方法对ＬＳＡ进行电泳分离后，取下凝胶，按滤纸、凝胶、硝酸纤维膜（ＮｃＰ）、滤纸顺序相紧贴、固定，放人转印槽。
恒流８０ｍＡ过夜（约１２ｈ）。
转印后，取出Ｎｃ膜，用０．４％丽春红染色液快速显色，观察转印效果，然后将Ｎｃ膜纵向切成宽约ｏ．４ｃｍ的条带置人印迹槽内，用ｐＨ７．４ＰＢｓＴ漂洗１次，加３％脱脂奶粉ＰＢＳＴ在室温下封闭３ｈ后，按设计分别加入１：１００稀释度的血吸虫病患者血清和正常人血清，在３７℃孵育２ｈ，然后用ＰＢｓＴ洗涤３次，加入１：３０００稀释度的ＨＲＰ．ｓＰＡ，３７ｃＣ反应ｌｈ，ＰＢｓＴ洗涤５次后，再用ＤＡＢ显色１５ｍｉｎ后，用蒸馏水终止反应，观察结果。
４．间接ＥＬＩＳＡ试验：（１）ＬＳＡ．ＥＬＩＳＡ：检测的试验条件经棋盘滴定确定。
ＬｓＡ抗原最佳稀释度１５ｍｇ／Ｌ；血清最佳稀释度１：１００；ＨＲＰ—ＳＰＡ的最佳工作浓度１：４０００。
主要试验步骤：抗原包被（ｐＨ９．６碳酸缓冲液稀释）３７℃２ｈ，４℃过夜，含３％脱脂奶粉ＰＢＳＴ３７℃封闭２ｈ，按１００“ｌ／孔加入经ＰＢＳＴ稀释的血清，３７℃孵育２ｈ，ＰＢｓＴ洗涤３ｍｉｎ，冲洗３次，加入ＨＲＰ—ｓＰＡ工作液，３７℃作用１ｈ，ＰＢｓＴ洗涤后，加低物ＴＭＢ显色１０ｍｉｎ，用Ｅ９６０酶标仪测定吸光度值（Ａ），根据样本Ａ值与对照Ａ值之比（ｓ／Ｎ）≥２．１笋０定为阳性。
（２）ＳＥＡ．ＥＬＩｓＡ：ｓＥＡ最佳稀释度１０ｍ玑，具体步骤同ＬｓＡ—ＥＬＩｓＡ。
结果～、ｓＤＳ－ＰＡＧＥ分离ＬｓＡ考马斯亮蓝染色的结果ｓＤＳ—ＰＡＧＥ及染色后显示，ＬＳＡ蛋白区带至少可见２０条，其中４条为显著宽蛋白区带，相对分子质量（×１０３）分别为９４、６７、４３和３０。
寄生虫常见诊断方法
动物接种法
有些原生动物，在病畜体内用上述显微镜 检查法不易查到，为了确诊常采用动物接 种试验。接种用的病料、被接种的动物种 类和接种的途径均依病的种类不同而异
15
动物剖检法
在动物死亡（或捕杀）后，首先制作血片，染色 检查，观察血液中有无寄生虫，而后仔细检查体 表，观察有无体表寄生虫。 而后剥皮，观察皮下组织中有无虫体寄生。 将各内部脏器依次取出，先收集胸水，腹水，沉 淀后观察其中有无寄生虫。而后取出全部消化器 官及其所附的肝、胰等腺体。取出呼吸系统、泌 尿系统和生殖系统、心脏和大的动脉和静脉血管， 分别进行检查。
5
3．沉淀集卵法sedimentation method
用水处理粪便，经离心或自然沉淀，使虫卵沉淀 集中，更易于检查。 自然沉淀集卵法是取粪便5~10g加水混合成悬浮 液，经40~60孔/2.54cm2铜筛滤去大块物质，静 置15min后倾去上清液,如此反复操作，直至上层 液体透明为止,最后弃去上层液体，置沉淀物于载 玻片上，镜检虫卵。 离心沉淀法是取1~2g被检粪便于试管中，加5倍 量的水制成悬浮液，经40孔/cm2铜筛过滤到一离 心管中，以800rpm离心3~5min,弃上清，将沉渣 置载玻片上，镜检虫卵。 本法也适用于检查尿液内的虫卵。
25
DNA探针（DNA probe）技术
DNA探针是带有标记物的已知序列的DNA片段。 DNA探针技术的基本原理是碱基配对。在变性而 成为单链的被检DNA中加入变性的探针，随着温 度的降低，探针便可与被检DNA中的互补序列形 成双链，这一过程称杂交。通过捕捉探针标记物 释放出的信号，便可知被检DNA中有无与探针序 列相同的DNA。每一种病原体都具有独特的DNA 片段，通过分离和标记这些片段，就可制备出探 针，氏计数法MacMaster method
寄生虫抗原的特点
寄生虫抗原的特点寄生虫抗原是指寄生虫体内或体外分泌、排泄或代谢产物，能够诱导机体免疫应答的物质。
它们具有以下几个特点：1. 多样性：寄生虫抗原种类繁多，包括蛋白质、多糖、脂类等。
不同种类的寄生虫抗原可以诱导不同类型的免疫应答。
2. 复杂性：寄生虫抗原具有复杂的结构和组成，其中包括多个抗原决定簇（epitope），每个抗原决定簇能与机体免疫系统中的特异性抗体或T细胞受体结合。
3. 可变性：寄生虫抗原具有一定的变异性，可以通过改变其表位（epitope）的结构或序列来逃避宿主免疫攻击。
这种可变性是寄生虫适应不同宿主环境的一种策略。
4. 免疫原性：寄生虫抗原可以诱导机体产生特异性免疫应答，包括体液免疫和细胞免疫。
在机体免疫应答中，寄生虫抗原被抗体或T 细胞识别并结合，从而激活免疫细胞和分子，参与免疫效应。
5. 免疫调节性：寄生虫抗原不仅可以激活机体免疫应答，还可以通过调节免疫细胞功能和分子信号传导途径，调控机体免疫平衡。
例如，一些寄生虫抗原可以诱导免疫耐受，抑制机体对自身组织的免疫攻击。
6. 交叉反应性：寄生虫抗原可能与其他病原体或自身抗原发生交叉反应。
这种交叉反应可能导致机体免疫系统对正常组织发生误攻击，产生自身免疫疾病。
寄生虫抗原的研究对于了解寄生虫与宿主的相互作用、开发新型抗寄生虫疫苗和药物具有重要意义。
通过研究寄生虫抗原的特点，可以设计针对特定抗原的免疫检测方法，评估寄生虫感染的程度和免疫应答的效果。
此外，寄生虫抗原也可以作为疫苗候选抗原，通过免疫接种来预防寄生虫感染。
但是由于寄生虫抗原的复杂性和可变性，研发有效的疫苗和药物仍然面临很大的挑战。
寄生虫抗原具有多样性、复杂性、可变性、免疫原性、免疫调节性和交叉反应性等特点。
研究寄生虫抗原对于深入了解寄生虫与宿主的相互作用、防治寄生虫感染和开发相关疫苗和药物具有重要意义。
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.
虫卵 抗原 切 片标 本仍 保 持抗原 活 性 不变 切 片经脱 蜡后干 燥 保 存 于 性 可保持三个 月
.
,
,
后 者 比薛启 贞等
( 1983 )的间
4 ℃冰箱 内
,
其 抗原
年》 的 醉联 免 疫 吸 附 试 验 假 阳 性 率 略 高 但 比 黄 玉英 等
.
( 2 5% )
,
年
,
。
,
:
,
12 4
例 健康 成 人和
,
.
,
,
2 例肺 吸 虫病 人 的血清 进行 检测 其 结 果 阳 7 性率达 9 8 皿
J
曹爱莲 等
<1 9 8 8
年》 用
8%
,
假 阳 性率 仅
,
0
8%
,
与肺 吸虫
P
、
肺吸 虫成 长石蜡 切片 免疫 酶染色 法法
l( E S T ) 诊 断 6 2 例 肺 吸虫 患 者 (根 据 流行 病
阳性 率 分 别 为 9 6
9%
、
5 9
.
3%
,
两种方法 一
致阳 性 者
例 一 致 阴性 者
.
,
2
例 共
,63例,来自性 及 特 异 性 高 通 过 试 验观察 石 蜡切 片的优 点 可 在 室 温 下 干 燥保存 未脱 蜡切 片保 存 2 5
,
,
。
,
总的符 合 率 达 9 8 而
CO P
,
4%
,
不 符合者 (l
,
C OP
可能 由于 切 片 后 卵 内抗泉
。
,
,
暴露 更 易直接与血 清 中抗体起反 应有 关 故 检 出率 比
(2
.
,
.
9 % 显 示 免疫 3
,
,
CO P
高 且反 应 时 间 也 大 大 缩 短
,
4 例肝 吸 虫 酶染 色法具 有较 高的敏 感性 对 5
5
小时 出结 果 而
,
CO P
需
72
小 时 ) 本文
著差 别 而
,
,
C OP T
的敏感 性 显著地 比 其前三
. 、 、 、
份 小白鼠 2 6 份 ) 除小 白 鼠
,
.
,
2
例 呈 阴性
,
种方 法低 而其 特异性 与前三 种方法相 仿 葡 萄球 菌
,
外 其余 6 2
6 9
9%
, ,
例均呈 阳性反 应 阳性率为 例 均呈 阴
6 份 4
,
A
蛋 白具 有 稳定 敏 感 简 易 快 速 等
A
断血吸虫病
。
张 才 康 等 《1 9 9 。 年 ) 应 用 尹卵石 蜡 切 片 原酶 联 葡 萄球 菌
E S T ) 检测
,
血 吸虫虫卵 肉 芽 肿 的小 白 鼠肝脏 在福 尔 马 林 液 保存 一 年 再 将含 虫 卵 的肝 组 织 用 石 蜡包 埋 制成 切 片在 室 温 下保 存 半年 与 感 染血 吸 虫病 患者 家兔 小 白 鼠的 血清 进 行试 验 每 次
寄 生 虫 病 防治 与 研 究
年第
卷第
期
固 相抗原在 寄生 虫病 免疫 学 诊断 中的应 用
安 徽 省寄 生 虫 病 防 治 研 究 所 芜湖
张
,
萍
(1 1P )
,
目前 随着 科 学 的发 展 石蜡 切 片也大 量
,
片 作抗原 作简接 免疫过 氧化 酶 试验 对 8 6 例 确诊血 吸虫病 人
.
应用 于 寄 生虫病 免疫学 诊断 例 如 间接荧光 抗体 试验 免疫 酶试验 间接 免疫过 氧化酶试 验 卵 内沉淀反 应 等
, , ,
。
正 常 人与 动 物血 清 共 4 0
优点 且性 质稳 定 耐 热 其最 大 特 点是 与第 一抗 体结合 不受宿 主抗体种宿 的限 制
,
性 此外还有 确诊肺 吸 虫病 人 血 清 n 例亦 呈 阴性
.
10P
与 C O P 试验血 吸虫病 血清
.
曾宪 芳 ( 1 9 8 4 年 ) 报道 用含卵 的兔 肝切
,
黄 天威等 ( 1 9 8 4 年 ) 利 用福 尔 马 林 液 固 定有 血 吸 虫 卵 肉 芽 肿 的动物 肝组 织 切 片 进 行 卵 内 沉 淀反 应
( I OP ) 试 验 诊
,
,
接 凝 血 试 验 的交 叉反 应 ( 1 3
IES T
6% )低
。
表 明了
县 有较高 的特 异性与 敏感性
, ,
,
: 作者 同 时又 作 了 四 种方 法 比较
、
对 照 外 在 同 一 份受 检 血清 冻干 血 吸 虫 卵按 常 规 操作 同时 做
8 2
,
、
IFA T
E LISA
、
C OP
作 比较 前三种方
,
CO P
试验 1 0
;
P
试 验 了人
、
法对检测 血吸虫 病人 的敏感性 和特 异性无 显
和 动物血吸 虫病血清 共 “ 份 ( 病 人 1 0 份 兔
.
oP
阳性
I OP
1 阴性 ) 仅 一例 (
P
6% ) P
,
没出现
个 同 抗 原 性 不 变 染 色 效果仍然 良好 脱蜡切 片保存
, 。
;
阴性 而 C O
阳性 者
。
根据 CO
,
的原理 和可
、
8
个 月 时 抗 原 性 不 变 保存 5 2 个月
,
,
溶性 虫 卵多糖 抗原 的耐 热 经福尔马林 二 甲 苯 等 处 理 不 改 变 其 抗 原 活性 的 特 点 揭 示 了 应 用 石 蜡 包 埋 虫 卵 肉 芽 肿 组 织 切片 卵 内 沉 淀 反 应 技术 诊 断血 吸虫 病 的可能性
, , ,
。
、
的增加而 增高 即
,
1 IP
.
的滴度
r 的几 何平均值 成 正 相关 ( 一 。 2 4 1 ) P
。
IEST
与血 吸虫病 患者 血清 无 明 显 交叉 反
3 7%
.
。
5 0
此外 还 观察 到 室 温 下对存 放半年 的
, ,
应 而与 肝 吸虫 病 患者 血 清可 有较 低 的交 叉 反 应 假阳 性率 为
病 人 血 清无 交 叉 反 应 本 文 比 较 了 n
L SA
、
COP
三 种血 清学 方 法 证 明
,
,
1
P 的 1
,
学史 症 状 体征 经过酶 联免疫 吸附试 验及皮 试 阳 性 确 诊 ) 血清 除 一 例为 可 疑 阴 性外 余 均 为 明显 阳 性 阳 性 率为 9 8
.
、
、
敏感 性高 于
I OP
,
、
蛋 白免疫 酶染 色试 验 ( I
,
-
,
0 1
护
0
例 血 吸虫病人 其 阳 性 者 9 3
,
,
例 与粪检 阳性 符 合 率为 9 3 % ;检测 7 6 例健
4 例 阴性 符 合 率 为 康 人 血 清 阴性 者 7
97 3肠 I ES T
、 . 。
,
试验 时 除用 正 常血 清 与 阳 性 血 清作
EPG 1
,
患 者 ( 根据 流 行病 学 史 有症 状 和 体 征 以 及
1 例血 吸虫 粪 检 阳性 确诊 ) 仅 二例 为 阳 性 5
,
,
对
l l P
的滴 度 与血 吸 虫 病 人 排 卵数
E PG
的
;
关 系进行 了观 察 发 现 2 8 例病 人血清 滴度 随着 与 <
EPG
.
P 的 1
病患 者 (根 据流行 病学 史 病史 及粪 检 阳 性确 诊 ) 除一例 可疑 阳 性外 其余 为阴性 这 揭 示 了