硫酸铜标准曲线)
硫酸铜标准曲线实验ppt
硫酸铜标准曲线的绘制原理
绘制硫酸铜标准曲线，需要准备不同浓度的硫酸铜溶液，并在一定波长下测量其 吸光度或荧光强度。
将不同浓度的硫酸铜溶液与其对应的吸光度或荧光强度绘制成曲线图，即可得到 硫酸铜的标准曲线。
03
实验步骤
硫酸铜溶液的配制
准备所需试剂：无水硫酸铜、浓硫酸、去离子水等。 加入适量的浓硫酸，搅拌至溶解完全。
误差来源
整理实验数据，包括硫酸铜浓度、吸光度等 。
分析实验过程中误差的来源，如测量误差、 操作误差等。
误差传递
数据可靠性
研究误差在吸光度和含量计算过程中的传递 ，评估结果的可靠性。
通过重复实验、数据验证等方法提高数据可 靠性，降低误差影响。
05
实验结论
硫酸铜标准曲线的绘制结果
线性关系良好
通过线性回归分析，得到硫酸铜浓度与吸 光度之间具有较好的线性关系，R^2值大 于0.99，表明线性关系良好。
硫酸铜含量的计算
准备所需试剂：待测硫酸铜溶液。 使用分光光度计测量待测溶液的吸光度。
将待测硫酸铜溶液稀释至适当浓度。
根据标准曲线的线性关系，计算待测溶液中硫酸铜的 含量。
04
实验数据分析
标准曲线的线性拟合
1 2
线性拟合
通过最小二乘法对硫酸铜浓度与吸光度进行线 性拟合，得到标准曲线。
线性范围
确定硫酸铜浓度的线性范围，保证线性拟合的 可靠性。
建议与展望
本实验的不足之处及改进措施
要点一
控制变量
要点二
标准化操作
在实验过程中，应尽可能减少其他变 量的影响，如温度、湿度等，以保证 实验结果的准确性。
对于关键步骤和操作方法，应建立更 加严格的标准，以提高实验的可重复 性和可靠性。
硫酸铜分光光度实验报告
一、实验目的1. 了解分光光度法的基本原理和应用。
2. 掌握分光光度计的使用方法。
3. 通过测定硫酸铜溶液在不同波长下的吸光度，绘制标准曲线，并利用标准曲线测定未知硫酸铜溶液的浓度。
二、实验原理分光光度法是一种常用的定量分析方法，基于朗伯-比尔定律（Lambert-Beer Law）。
该定律表明，在一定波长下，溶液的吸光度（A）与溶液的浓度（c）和光程（l）成正比，即：\[ A = \varepsilon \cdot c \cdot l \]其中，ε为摩尔吸光系数，是一个与溶液性质和波长有关的常数。
本实验中，通过测量硫酸铜溶液在不同波长下的吸光度，绘制标准曲线，并利用标准曲线测定未知硫酸铜溶液的浓度。
三、实验器材1. 分光光度计2. 烧杯3. 试管4. 移液器5. 50mL容量瓶6. 1cm比色皿7. 硫酸铜标准溶液8. 蒸馏水9. 氢氧化钠溶液四、实验步骤1. 标准溶液的配制（1）取一定量的硫酸铜标准溶液，用蒸馏水稀释至50mL，得到浓度为0.1mg/mL的标准溶液。
（2）取一定量的0.1mg/mL的标准溶液，用蒸馏水稀释至50mL，得到浓度为0.05mg/mL的标准溶液。
（3）重复上述步骤，得到浓度为0.025mg/mL、0.0125mg/mL和0.00625mg/mL 的标准溶液。
2. 标准曲线的绘制（1）取1cm比色皿，依次加入0.00625mg/mL、0.0125mg/mL、0.025mg/mL、0.05mg/mL和0.1mg/mL的标准溶液，分别加入蒸馏水至刻度线。
（2）用分光光度计测定各溶液在640nm处的吸光度，记录数据。
（3）以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 未知溶液的测定（1）取一定量的未知硫酸铜溶液，用蒸馏水稀释至50mL。
（2）取1cm比色皿，加入稀释后的未知溶液，加入蒸馏水至刻度线。
（3）用分光光度计测定溶液在640nm处的吸光度。
（4）根据标准曲线，计算未知溶液的浓度。
硫酸铜中铜含量的测定
硫酸铜中铜含量的测定实验目的:1熟悉分光光度法测定物质的含量的原理和方法2掌握吸收曲线和标准曲线的绘制3学习分光光度计的使用实验原理：硫酸铜的分析方法是在样品中加入碘化钾，样品中的二价铜离子在微酸性溶液中能被碘化钾还原，而生成难溶于稀酸的碘化亚铜沉淀。
以淀粉为指示剂用硫代硫酸钠标准溶液滴定，化学反应为：2+-22-2--223462Cu + 4I = 2CuI + I I + 2S O = S O + 2I矿石和合金中的铜也可以用碘量法测定。
但必须设法防止其他能氧化-I 的物质（如-3NO 、3+Fe 等）的干扰。
防止的方法是加入掩蔽剂以掩蔽干扰离子（比如使3+Fe 生成3-6FeI 配离子而被掩蔽）或在测定前将它们分离除去。
若有As （Ⅴ）、Sb （Ⅴ）存在，则应将pH 调至4，以免它们氧化-I 。
间接碘量法以硫代硫酸钠作滴定剂，硫代硫酸钠（Na 2S 2O 3·5H 2O ）一般含有少量杂质，比如S 、Na 2SO 3、Na 2SO 4、Na 2CO 3及NaCl 等，同时还容易风化和潮解，不能直接配制准确浓度的溶液，故配好标准溶液后还应标定其浓度。
本实验就是利用此方法测定CuSO 4中铜的含量，以得到CuSO 4试剂的纯度。
试剂与仪器Na 2S 2O 3·5H 2O ；Na 2CO 3（固体）；纯铜（99.9%以上）；6 mol ·L -1HNO 3溶液；100 g ·L -1KI 溶液；1+1和1 mol ·L -1H 2SO 4溶液；100 g ·L -1KSCN 溶液；10 g ·L -1淀粉溶液电子天平；碱式滴定管；碘量瓶 实验步骤 0.05 mol·L -1Na 2S 2O 3溶液的配制：称取12.5 g Na 2S 2O 3·5H 2O 于烧杯中，加入约300 mL 新煮沸后冷却的蒸馏水溶解，加入约0.2 g Na 2CO 3固体，然后用新煮沸且冷却的蒸馏水稀释至1 L ，贮于棕色试剂瓶中，在暗处放置1~2周后再标定。
BCA assay
BCA法测定蛋白质浓度BCA(bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂，混合一起即成为苹果绿，即BCA工作试剂。
在碱性条件下，BCA与蛋白质结合时，蛋白质将Cu2+还原为Cu+，一个Cu+螯合二个BCA分子，工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物，最大光吸收强度与蛋白质浓度成正比。
用标准的已知浓度的BSA溶液配几管不同浓度的，然后在分光光度计上测出来，把读数跟已知的浓度做一个曲线（有可能是直线），这就是你的标准曲线。
然后再测你的目标样品的浓度，用读数在标准曲线上找到对应的真实浓度【操作】标准曲线的绘制：取试管七支、编号，按下表操作：标准液0 0.125 0.25 0.5 0.75 1.0 1.5 2.01、样品每管20μl，测试范围为20~2000μg/ml，根据实际情况决定稀释倍数。
2、BCA试剂A：B =50：1，配置适量工作液，充分混匀。
3、每管加入1ml BCA工作液，充分混匀，置37ºC 30min。
在562nm波长下，记录吸光值。
【计算】（一）绘制标准曲线。
（二）以测定管吸光度值，查找标准曲线，求出待测血清中蛋白质浓度(g/L)。
（三）再从标准管中选择一管与测定管光密度相接近者，求出待测血清中蛋白质浓度(g/L)。
【优缺点】(一) 操作简单，快速，45分钟内完成测定，比经典的Lowary法快4倍且更加方便；(二) 准确灵敏，试剂稳定性好，BCA试剂的蛋白质测定范围是20-200μg/ml，微量BCA测定范围在0.5-10μg/ml。
(三) 经济实用，除试管外，测定可在微板孔中就进行，大大节约样品和试剂用量；(四) 抗试剂干扰能力比较强，如去垢剂，尿素等均无影响【器材】（一） 7220型分光光度计（二）恒温水浴箱（三）中试管7支（四）枪式移液管【试剂】1、试剂A：1％BCA二钠盐2％无水碳酸钠0.16%酒石酸钠0.4％氢氧化钠0.95％碳酸氢钠混合调PH值至11.25。
酸铜溶液分析方法
酸铜氯离子分析方法一、试剂：①乙二醇（AR）②0.1N AgNO3液③氯离子标准液，称干燥的NaCl 0.1648g 于1000ml容量瓶中稀释至刻度（1ml含0.1mg Cl-）。
二、分析方法：吸取镀液5ml于25ml容量瓶中，加入乙二醇10ml，0.1 N AgNO3液1ml，加水至刻度，暗处静置30min，用波长400nm进行比色。
空白液，同上述操作，但不加N AgNO3。
Cl- (毫克/升)=A*1000/5式中 A——从标准曲线上查得的试样含Cl-毫克数。
标准曲线的绘制：在6个25ml容量瓶中各加氯标准液0，1，2，3，4，5ml，再各加10ml乙二醇，1ml0.1N AgNO3稀释至刻度。
用上述方法，但不加AgNO3制参比液，暗处静置30min，用波长400nm测定吸光度。
作图：酸性铜溶液分析方法一、硫酸和硫酸铜的测定：1、试剂①甲基橙指示剂②0.1N NaOH ③PH=10缓冲溶液④PAN指示剂⑤0.1M EDTA2、分析步骤：吸取渡液1ml于250ml 锥形瓶中，加水100ml，甲基橙1~2滴，用0.1N NaOH滴至黄色为终点（V1）。
加缓冲溶液10ml，PAN指示剂3滴，用0.1MEDTA滴定至绿色为终点（V2）。
3、计算：硫酸（克/升）=49N V1 硫酸铜（克/升）=249.7NV2二、氯化物的测定：1、试剂① HNO3（浓）②5%AgNO32、分析步骤：用移液管吸取100ml镀液于400ml烧杯中，加100ml水，加20ml HNO3（浓），20ml AgNO3，当沉淀物下沉后，用玻璃漏斗过滤，在100℃干燥至重量保持不变，得AgCl的重量G。
3、计算：Cl-（克/升）=2.974G NaCl（克/升）=4.078G酸铜氯离子分析方法一：氯离子分析方法1、取50ml酸铜镀液于250ml锥形瓶中2、加50ml纯净水3、加10ml浓硝酸标准液4、加3-5ml 0.1N AgNO35、用0.01N硝酸亚汞标准液滴定至由浑浊刚变澄清为终点，消耗硝酸亚汞标准液的体积为V（ml）6、计算：Cl-（ppm）=710×NVN---硝酸亚汞标准液的当量浓度V---消耗硝酸亚汞标准液的体积。
分析化验 分析规程 铜含量的测定
铜含量的测定方法一铜试剂分光光度法1 适用范围本方法适用于工业循环冷却水、脱盐水、锅炉给水、炉水、凝结水和蒸汽中铜含量的测定，也适用于生活用水中铜含量的测定，Cu2+的测定范围为0.02～2.00mg/L。
2 分析原理在pH = 8～9.5的氨性溶液中，铜离子(Cu2+) 与铜试剂(二乙氨基二硫代甲酸钠即DDTC)反应，生成黄棕色络合物，此络合物可用四氯化碳萃取，在波长440nm处进行测定。
3 试剂和仪器3.1 试剂3.l.l 硝酸。
3.1.2 四氯化碳。
3.1.3 氨水(1+1)。
3.1.4 硫酸铜(CuSO4·5H2O)。
3.1.5 2g/L DDTC显色剂溶液称取0.2g二乙氨基二硫代甲酸钠(C5H10NS2Na·H20)溶于水中，并稀释至100mL，用棕色瓶贮存，置于暗处，有效期一个月。
3.1.6 氨—氯化铵缓冲溶液( pH≈9)称取氯化铵70g，溶于适量水中，加入浓氨水48mL，稀释至1000mL。
3.1.7 0.4g/L甲酚红指示液称取0.02g甲酚红钠盐试剂溶于50mL 95%乙醇中。
3.1.8 乙二胺四乙酸二钠盐一柠檬酸铵溶液称取乙二胺四乙酸二钠盐(C10H14N2O8Na2·2H2O) 2.0g，柠檬酸铵10.0g，溶于水并稀释至100mL，加入4滴甲酚红指示液，用(1+1)氨水调至pH 8～8.5 (溶液由黄色变为浅紫色)，加入少量2g/L DDTC显色液，用四氯化碳萃取提纯(弃去四氯化碳层)。
3.1.9 铜标准贮备液(0.100mg/mL)称取硫酸铜0.3930g溶于水中，加硝酸2.0mL 移入1000mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀备用。
3.1.10 铜标准工作溶液(1ug/mL)取铜标准贮备液5.0mL 于500mL 容量瓶中，加1.0mL 硝酸，用水稀释至刻度，摇匀备用。
3.2 仪器3.2.1 分光光度计。
3.2.2 125mL 梨形分液漏斗，活塞以硅油为润滑剂。
探讨用硫酸铜溶液制作标准曲线的实践改进
探讨用硫酸铜溶液制作标准曲线的实践改进【摘要】目的探讨中等卫生职业教育教材《生物化学检验技术》硫酸铜溶液标准曲线的制作实践中系列标准溶液吸光度偏小，影响标准曲线制作的原因。
方法用不同浓度的硫酸铜标准液进行对比实验。
结论适当增大系列标准管硫酸铜标准液的浓度，提高系列标准溶液的吸光度，便于标准曲线的绘制，减少实验误差。
【关键词】标准曲线制作；实验误差；实践；改进硫酸铜溶液标准曲线的制作实验是中等卫生职业学校医学检验专业《生物化学检验技术》要求掌握的实践操作，其目的是训练学生依据一定浓度范围内的硫酸铜溶液，在特定波长下的吸光度与溶液浓度成正比的关系，通过绘制已知硫酸铜系列浓度与相应吸光度的标准曲线，即可用待测硫酸铜溶液的吸光度在标准曲线上查找出相应的浓度【1】。
但在学生按课本操作步骤进行实践操作时出现系列标准溶液吸光度偏小，影响标准曲线的绘制。
对此，我们用不同浓度的硫酸铜标准液进行对比实验，找出原因，改进了实验。
1 材料与方法1.1 试剂及器材1.1.1 50 g/L硫酸铜溶液称取无水硫酸铜5.0 g溶解于约20 ml蒸馏水中，并转入100 ml溶量瓶内，加蒸馏水定容至刻度。
1.1.2 蒸馏水。
1.1.3 722N分光光度计、试管、试管架、刻度吸管等。
1．2 对比实验利用722 N型分光光度计,选用690 nm波长，以“蒸馏水”调零，分别读取不同浓度的硫酸铜溶液的A值。
重复三次【2】。
2 结果3 讨论上述结果表明：表1是按教材实践步骤的用量进行，5 个标准浓度的吸光度在0.031～0.254之间，吸光度偏小，相关系数（r）为0.9995，斜率（a）为0.0321，截距（b）为0.00097；表2和表3是增大了各标准管硫酸铜溶液的浓度进行的，表2中5个标准浓度的吸光度在0.098～0.493之间，吸光度适宜，相关系数（r）为0.9997，斜率（a）为0.0326，截距（b）为-0.0002；表3中5个标准浓度的吸光度在0.155～0.780之间，吸光度偏大，相关系数（r）为0.9991，斜率（a）为0.0311，截距（b）为0.0078。
硫酸铜标准曲线)
硫酸铜标准曲线)硫酸铜溶液是一种常见的化学试剂，广泛应用于实验室和工业生产中。
通过选择适当浓度的硫酸铜溶液，并按一定比例稀释，再测量吸光度，可以得到一系列数据对。
这些数据对可以根据光度计测得的吸光度和已知稀释倍数计算出浓度。
将吸光度作为纵坐标，浓度作为横坐标，可以建立硫酸铜标准曲线。
建立硫酸铜标准曲线的步骤如下：1.准备一定浓度的硫酸铜溶液。
可以通过称取一定重量的硫酸铜或者用V1浓缩液按照已知浓度配制。
2.选择不同的硫酸铜浓度，包括高、中、低等不同范围，可以根据实际需要选择。
3.将每个浓度的硫酸铜溶液适当稀释，溶液的浓度区间范围应该广泛，确保可以得到较好的线性关系。
4.使用分光光度计或紫外可见分光光度计，测量每个浓度的硫酸铜溶液的吸光度。
5.在坐标纸上绘制曲线，将吸光度作为纵坐标，浓度作为横坐标。
6.根据绘制的标准曲线，可以通过测量未知样品的吸光度，利用标准曲线反推出未知样品中硫酸铜的浓度。
在建立硫酸铜标准曲线的过程中，有一些注意事项需要注意：1.测量所用的吸光度计应该进行校准，以确保测量结果的准确性。
2.硫酸铜溶液在稀释过程中需要充分混合，确保溶液浓度均匀。
3.测量时要准确记录吸光度和相应的浓度值，以便后续曲线的建立和使用。
4.标准曲线的建立可以选择线性或非线性拟合，根据实际情况选择适合的拟合函数。
5.建立标准曲线时，可以重复测量多次，计算平均值，减少误差。
总之，硫酸铜标准曲线的构建是通过一系列实验操作，稀释硫酸铜溶液并测量其吸光度，得到一系列数据对。
通过这些数据对，可以建立硫酸铜标准曲线，进而用于测量未知样品中硫酸铜的浓度。
硫酸铜标准曲线的建立有助于分析和确定样品的含量和质量。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
硫酸铜标准曲线的绘制
1、仪器试剂：略 2、操作：见下表
标准管（S）
测定管（U）
试剂（mL） 未知浓度硫酸铜溶液 10%硫酸铜溶液 蒸馏水 A
空白管（B） — — 4
1
2
3
4
1
2
— 0.5 3.5
— 1.0 3.0
— — 2.0 3.0 2.0 1.0
4 — —
4Байду номын сангаас— —
λ=630nm；空白管调零测吸光度值，以硫酸铜溶液浓度为横坐标；吸光 度值未纵坐标绘制标准曲线。
L=1cm时，则常数k可用ε表示。
4、待测溶液浓度的计算
⑴利用标准管法计算：
A测 计算公式：C测= × C标 A标
⑵ 标准曲线法
先配置一系列浓度由大到小的标准溶液，测出A值，在 标准液一定范围内，溶液的浓度与A值呈直线关系。以各管 的A为纵坐标，各管浓度为横坐标，作出标准曲线；再测出 待测液的吸光度值，可直接从标准曲线查出浓度。
2、光吸收的基本定律(Lamber-Beer’定律)
当一束单色光通过透明介质时由于一部分光被溶液吸收 而光线强度减弱。
Lamber定律：光吸收与厚度间的关系 Beer定律：光吸收与浓度间的关系
3、表达式：A=K· C L·
k一吸光系数 L一光径，单位：cm. C一溶液浓度，单位：g／L 摩尔吸光系数：在公式“A=K·L·C”中，当C=1mol／L，
实验二 硫酸铜标准曲线绘制
目的要求：
1、掌握分光光度法原理 2、了解分光光度计原理及操作 3、学习标准曲线绘制
分光光度法原理
1、定义：利用各种化学物质所具有的发射、吸收或散射光
谱谱系的特征，来确定其性质、结构或含量的技 术， 称为光谱分析技术。 可见光波长：760~400nm 紫外线波长：小于400nm
注意事项
1、必须学会正确使用、分配吸量管。 2、溶液取量必须准确。 3、平行管间误差必须﹤5%。 4、要正确绘制标准曲线。 5、测定管浓度可查标准曲线，亦要用公式法计算。
结果计算
标准曲线法： 公式法：
热烈欢迎专家莅临指导！
分光光度法原理