生物科学专业_开题报告范例
生物开题报告模板
生物开题报告模板
标题：进化中的生物多样性
摘要：本报告主要介绍了生物多样性与进化的关系。
首先，概述了生物多样性的定义和重要性。
然后，探讨了进化是生物多样性形成的基础。
接着，介绍了进化对生物多样性的影响和作用。
最后，总结了进化对生物多样性的重要意义。
1. 引言
- 简介生物多样性的概念和意义
- 阐述研究生物多样性与进化关系的重要性
2. 生物多样性的形成与进化
- 解释生物多样性的来源和形成过程
- 论述进化是生物多样性的基础
3. 进化对生物多样性的影响和作用
- 说明进化对物种的习性、形态和适应能力的塑造作用
- 论述进化对物种的适应性进化和分化的重要性
- 探究进化对生态系统的稳定性和功能的影响
4. 进化对生物多样性的重要意义
- 分析进化对生物多样性维持和增加的作用
- 探讨生物多样性减少对进化的威胁和影响
5. 结论
- 总结进化对生物多样性的重要意义
- 强调进一步研究进化与生物多样性关系的必要性
参考文献
注意：此为一个开题报告模板，具体内容可以根据自己的主题进行调整和补充。
生物专业开题报告范文模板
生物专业开题报告范文模板前言本文档旨在为生物专业的学生提供开题报告的范文模板，方便同学们在撰写开题报告时参考和借鉴。
本文档将从实验背景、研究问题、研究方法、研究计划等方面进行说明。
实验背景生物学是研究生命现象以及生物组织、器官、生命系统的结构、性质、生理、生态、分子生物学等方面的科学。
目前，随着生物技术的快速发展和生物医药的巨大市场需求，生物学专业受到了越来越多人的关注。
因此，生物学领域的研究和开发受到了广泛的关注和支持。
研究问题在生物学领域内，研究问题的选择十分重要。
我们需要明确研究问题的背景，找出问题所在，以及针对问题进行实验和探究。
这里，我们以一些生物学课程的大体问题作为我们研究的问题，如下：1.DNA复制机制及其相关调控机制；2.蛋白质合成、结构和功能研究；3.细胞分裂及其重要生物学意义。
以上仅是我们在实验中可能涉及到的问题范畴，具体研究问题需要在后续的实验中进行进一步的探索和确定。
研究方法针对以上的研究问题，我们需要选择恰当的研究方法进行实验。
在生物学领域，研究方法十分繁杂，我们可以从以下几个方面进行探究：1.分子生物学技术：包括PCR，酶切、蛋白质分析等技术；2.细胞培养技术：包括细胞生长和培养、细胞冻存等技术；3.生物信息学：包括基因组学，转录组学等技术。
以上技术不仅仅是我们在这里可能用到的技术，还有很多其他的技术可以用来支撑我们的实验，我们可以根据具体的实验问题和需要来确定相应的技术。
研究计划根据以上的实验背景、研究问题和研究方法，我们制定了以下的研究计划：1.实验对象：以人类细胞为研究对象进行研究；2.研究问题：主要研究蛋白质合成、结构和功能；3.研究方法：使用细胞培养技术和蛋白质分析技术相关方法；4.预期结果：期望通过实验明确蛋白质的结构和功能，探究生物合成的机理。
结论通过以上的分析和研究计划，我们设定的实验方向得到了明确和具体的表述，我们可以根据以上的计划进一步开展实验，并且不断完善实验方案，以使我们的实验研究进一步深入和完善。
生物课题开题报告
生物课题开题报告（经典版）编制人：__________________审核人：__________________审批人：__________________编制单位：__________________编制时间：____年____月____日序言下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种类型的经典范文，如公文写作、报告体会、演讲致辞、党团资料、合同协议、条据文书、诗词歌赋、教学资料、作文大全、其他范文等等，想了解不同范文格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you!In addition, this shop provides you with various types of classic sample essays, such as official document writing, report experience, speeches, party and group materials, contracts and agreements, articles and documents, poems and songs, teaching materials, essay collections, other sample essays, etc. Learn about the different formats and writing styles of sample essays, so stay tuned!生物课题开题报告生物课题开题报告（通用3篇）生物课题开题报告篇1课题题目：普通高中生物作业分层设计的实践研究由XX老师申报的课题《普通高中生物作业分层设计的实践研究》，经XX市教育科学规划领导小组批准，列为XX市教育科学规划立项课题，批准号为。
生物学论文开题报告模板
生物学论文开题报告模板一、选题背景与意义在这个部分，需要简要介绍你选择的研究领域以及研究主题的背景和意义。
解释为什么这个主题是重要的，以及它如何填补当前研究的空白或解决现有问题。
二、研究目的与研究问题明确你的研究目的以及你想要解决的研究问题。
确保研究目的和问题都与你的选题相关，并指明你研究的重点和目标。
三、研究方法与设计详细描述你打算使用的研究方法和实验设计。
确保解释你选择这些方法和设计的理由，并说明它们如何帮助你回答你的研究问题。
四、论文结构与内容安排简单概述你的论文计划和结构，列出每个章节的主要内容安排。
确保每个章节的标题与具体内容相关，并指明每个章节的目标和重点。
五、预期结果与创新点阐述你预期的研究结果和创新点。
解释你的研究结果对当前学术领域的贡献，并指明你的研究是否有潜力推动进一步的研究。
六、研究进度与时间安排展示你的研究进度与时间安排。
列出关键任务和里程碑，并使用时间表或图表形式明确每个任务的完成时间和进度。
七、预期的困难与挑战说明你预计在研究过程中可能遇到的困难和挑战。
解释你计划如何克服这些困难，并指出你将采取什么措施来应对可能的问题。
八、参考文献列出你在开题报告中引用的参考文献。
确保按照规定的引用格式书写，并遵循学术规范。
九、结语总结你的开题报告，再次强调你的研究的重要性和独特性，并指出你对完成这项研究的信心与承诺。
以上是生物学论文开题报告模板的基本框架，你可以根据你的研究主题和具体需求进行适当的调整和补充。
请记住，报告的内容需要全面、准确，并保持逻辑清晰。
生物学专业毕业论文开题报告
生物学专业毕业论文开题报告生物学专业毕业论文开题报告课题：探究性学习在中学生物教学中的应用1 课题提出的背景在以知识经济为主体的21世纪，必须非常重视人才素质的培养，特别是发展个性、培养人的创造能力，是教育者首先要考虑的问题。
生物科学将成为21世纪带头科学，进行生物教学改革，提高培养人才的素质，具有重要的现实意义和深远的历史意义，结合当前生物教学的现状，把探究学习与生物教学有机联系起来，是生物教学改革的必要途径。
(一)有效实施中学生物课程改革的需要1.长期以来，我国中学生物教师习惯于在应试教育的框架下从事各种教学活动，而新课程标准倡导的探究性学习则是对传统教学方式和学习方式的变革。
探究性学习是中学生物新课程的新重点、新难点、新目标、新方式。
目前，大多数学校为了完成教学任务，还是延续以往实验的操作程序，只是在部分环节上安排少量的讨论，大部分的探究实验都存在“表面化”“走过场”的现象。
农村教师在开展探究教学活动中遇到的困难比城市教师更多一些，分析原因主要是由于知识性教学量过大，教师的认识和能力不足，实验教学的要求和评价没有细化，实验条件不完善。
学生学习中最困难的事情是交流表达、实验设计、实验结果不能达到预期效果时不知如何是好等等。
总的来说，探究性学习在生物教学实践中已经有很多的尝试,但也存在一定的局限和误区。
该课题的研究旨在改变教师陈旧的传统教学模式，改变课堂教学过程和学生的学习方式，增强学生学习的积极性和主动性，培养学生的创新意识，提高学生自主学习和科学探究的能力，提高教学质量。
2.《高中生物新课程标准》指出：高中生物课程要让学生初步学会生物科学探究的一般方法，具备较强的生物学基本操作技能、收集和处理信息能力、观察能力、实验能力、思维能力和解决实际问题能力。
教学研究表明，探究性学习是一种积极自主的学习过程，倡导学生主动参与、探究发现、合作交流，注重学生的经验与学习，让学生感受理解知识产生和发展的的过程。
【生物】生物课题开题报告
【关键字】生物生物课题开题报告篇一：生物研究性学习开题报告生物研究性学习开题报告（第2小组）课题名称：《调查昌江海水养殖对周边环境的影响》指导老师：唐利英组员：文海童、包兴光、陈迎欣、符大豪、何维华、胡建宇、鞠永峥、李华龙、吴鸿燕、邢元丰、赵杨涛组长：文海童一、选择课题的原因：近几年,有人针对昌江水产养殖存在的自身污染,提出了“养殖污染”的概念并注意到它对生态环境的影响。
而“养殖污染”主要包括养殖过程中营养物的污染,药物的使用污染以及底泥的富集污染等水产养殖水体是一种人工生态系统,如果我们将人工生态系统与自然生态系进行比较,可看出它的养殖对象一般是单种群,即使混养,也不过两三个种群,为追求高产,部分生物因子被人为的强化,而另一部分则被削弱甚至去除,造成了物质循环的部分路线受阻或被切可能对沿岸生态环境造成影响。
而且有研究表明,昌江有些地区高密度的水产养殖成为刺激近海海水发臭的一个重要因素,从而威胁养殖鱼类、虾类和贝类的安全。
也影响昌江的旅游经济对昌江发展造成一定的影响。
特此组织该小组进行一定的了解昌江海水养殖对周边环境的影响。
二、课题研究的意义：我们以《昌江海水养殖对周边环境的影响》为课题进行研究性学习，不仅仅是对环境问题的关注、认识和了解，也让我们思考经济发展与环境保护的关系问题，如何做到社会、经济、自然和协发展？使我们人类在享受社会经济发展的成果的同时，也能够在一个良好的自然环境中生存和发展。
在本次的课题研究中，通过亲身实践和亲身体验来直接获取和丰富我们知识，提升我们自身的实践水平；通过相互合作、表达与交流，锻炼我们的能力，提高我们的素质；通过亲身实践和调查研究让我们对环境问题有更加深入的认识和新的思考；通过调查研究向有关政府部门提出一些保护海洋生态环境的合理性建议，为环境保护做出应有的贡献。
三、课题研究的内容：⑴、昌江海洋生物物种的多样性。
⑴、人类海水养殖对生物多样性的影响。
⑴、生物物种多样性的价值。
生物科学论文--开题报告
浙江师范大学本科毕业设计(论文)开题报告学院化学与生命科学学院专业生物科学学生姓名付文佳学号05260204指导教师杨莉职称副教授合作导师职称论文题目肉蜜柚突变体及其亲本琯溪蜜柚PSY基因的分离一、选题背景和意义类异戊二烯是自然界中分布广泛的一类化合物，目前已知的类异戊二烯化合物有23,000多种。
类胡萝卜素是其中较为重要的植物色素，不仅参与光合作用和光保护，还赋予根、叶、花和果实等多彩的颜色，使之具有较大的经济价值和观赏价值。
除此之外，类胡萝卜素中一些代谢中间产物还具有较高的营养和保健价值，如番茄红素能预防心脏病和多种癌症、减缓动脉粥样硬化、保护心血管、抗老化、保护皮肤等；β-胡萝卜素是维生素A原，维生素A缺乏会引起夜盲症等多种疾病的发生。
1998年福建省科学院果树所研究人员在平和县小溪镇琯溪蜜柚园中发现果实汁胞呈红色的芽变单株，命名为红肉蜜柚[19]。
红肉蜜柚是继强德勒红心柚、丰都红心柚等之后发现的又一红近年来，包括番茄红素和β-胡萝卜素在内的植物类胡萝卜素代谢途径的主要成员、关键酶及其基因已基本明确[1-4]。
应用类胡萝卜素合成途径中相关基因的转基因研究也取得了较大进展，―黄金稻米‖就是最成功的例子[5]。
然而，由于植物合成类胡萝卜素的生物调控机制还未完全阐明，在应用遗传工程技术调控植物类胡萝卜素代谢时还存在较大盲目性。
例如，Ye等[6]与Romer等[7]分别向水稻和番茄中导入类胡萝卜素合成途径相关基因，并未获得预期中高水平的番茄红素积累，却导致靶器官中β农业-胡萝卜素含量增加。
由此可见，为减少类胡萝卜素遗传工程中的盲目性，阐明植物体内类胡萝卜素代谢相关基因表达调控机制十分必要。
肉柚类突变新品种，不仅保持了亲本琯溪蜜柚所具有的优良栽培经济性状，而且果实因积累番茄红素和β-胡萝卜素而呈现红色[20]。
本实验中拟分离红肉蜜柚及其亲本琯溪蜜柚果实PSY基因全长，比较分析二者序列是否存在差异，以期了解PSY基因在突变体中的具体功能，为解释红肉蜜柚发生变异机制提供理论基础。
生物课题研究开题报告
生物课题研究开题报告生物课题研究开题报告「篇一」教科研工作是教师在教育实践中的科学认识与发现，是对教育教学科学规律的探索与把握。
我校把教科研工作的重点放在校本教研的基本框架内，充分发挥教育科研的内涵，做到在聚焦课堂、聚焦教研的活动中，达到引导、开发和提升的作用。
一、我校教科研整体思路以校本教研为依托，以教科研为先导，以“上海方略”培训为契机，以课题研究为引领，以探索实验“目标引领，问题导学，先学后教，合作探究，当堂达标”的新型课堂教学模式为目标，不断探索教育教学规律，提高科研质量，增强教科研工作的实效性。
牢固树立问题意识、过程意识和成果意识，树立“问题即课题，教学即研究，成长即成果”的教研意识，切实把自己实际教学真实问题转化成研究课题。
以研究并解决目前学校教育教学管理服务各领域的实际问题为出发点，促进教职员工多角度反思，促进教育教学方式的转变，促进教师专业化发展，促进学校学习型组织的建设，围绕落实课堂教学，推动校本研究工作的深入开展。
二、加强教研组建设，促进校本教研深入开展教研组是校本教研的基本单位，教研组即是校本教研的基地，也是青年教师成长的摇篮，因此加强教研组建设是实现校本教研的基本保障。
1、成立教科研领导小组：组长：王艳辉；副组长：高文草、刘欣，教研处史存存具体负责学校教科研工作。
2、成立各学科专业研究团队，并带领组员进行分学科教研活动。
语文学科：何美霞、曹春香、王靖、孙琰数学学科：史存存、魏琳琳、袁亚静、王阁英语学科：杨静、赖可可、赵艳霞3、为保证教科研活动的有效进行，活动时间由原来的40分钟调整为100分钟，由统一的活动时间调整为各教研组自订活动时间。
三、抓好教研和科研的有机结合，促进教师专业发展。
建设一支高素质的教师队伍是兴校之本。
针对学校开展教科研工作的实际情况，“请进来、走出去”也是我们学习教科研理论知识和操作方法的一个重要手段。
本学期我们主要开展了以下活动：1、3月25日，芳华路小学语文、数学、综合教研组各推出2节优质课，同时邀请教育局师训办领导及手拉手学校————新安县土古洞村全体教师参加并交流。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
XX大学本科生毕业论文（设计）开题报告毕业论文（设计）题目应用原生质体融合技术构建耐胆盐、耐酸乳酸菌菌株选题类型应用基础型课题来源自选项目学院生命科学与理学院专业生物科学指导教师×××职称××姓名×××年级2006级学号×××开题报告（立题依据、研究的主要内容及预期目标、研究方案、论文进度安排、主要参考文献）1立题依据2一、选题的理论意义与实践意义：3选题理论意义: 黄瓜（Cucumis sativus Linn）是我国广泛栽培的夏秋季主要蔬菜之一。
它喜温怕热，在胁迫因子当中，夏季高温是影响黄瓜幼苗地上部分生长发育的主要因子，露地和保护地栽培均存在高温热害，高温影响黄瓜的光合作用、呼吸作用和矿质元素的吸收，从而易使黄瓜授粉受精失败，落花落果，严重影响了黄瓜的产量和品质，因此黄瓜耐热性的提高是露地及保护地栽培需要解决的重要问题。
4硒作为谷胱甘肽过氧化物酶系（GSH-Px）的组成成分，参与作物体内自由基的消除，进而提高了植物对逆境的抗性，硒的使用可显著提高黄瓜叶片GSH-Px 的活性，使叶片中丙二醛(MDA)的含量明显降低。
高温胁迫下，硒还能中和与衰老相关的氧化胁迫。
5实践意义：高温胁迫使黄瓜的品质下降，严重影响栽培设施的利用效率及黄瓜设施栽培的高效可持续发展。
因此，研究硒对高温胁迫黄瓜幼苗地上部的生长调节，可以采取有效措施，对于黄瓜设施生产具有重要意义牛奶的组成最为接近人体母乳，含有人体所需的全部营养成分，营养最为丰富和均衡，在人们的膳食结构中有其它食品无法替代的地位和作用。
由新鲜牛奶发酵成的酸奶由于其丰富的营养、特殊的风味、爽滑的质构和良好的生理功能，倍受人们青睐[1]。
在当今社会，酸奶早已成为人们茶余饭后的饮料，酸奶所具有的独特功效备受人们喜爱。
1908年俄国诺贝尔奖获得者E．Metchnikof提出“酸奶长寿”理论，认为高加索地区居民长寿者多的原因是由于食用大量的含有乳酸菌的酸奶。
乳酸菌是一类可以发酵碳水化合物产生乳酸的细菌的统称，很早就被用来加工和保存食品，不仅可以提高食品的营养价值，改善食品风味，提高食品保藏性和附加值，而且近年来对乳酸菌的研究表明，乳酸菌还有很多特殊的医疗保健作用，如改善胃肠道功能，提高免疫力，维持维生素供应，降低胆固醇，美容，长寿，降血糖等，益生作用突出[2-4]。
另外，乳酸菌能产生一系列具有抗菌活性的有机小分子物质，常见的有乳酸、乙酸、丙酸。
除了这些具有抑菌作用的初级代谢产物外，益生乳酸菌还产生如细菌素等多种抗菌物质，其中酸性物质和乳酸菌素是最有效的抑菌物质，并通过减少肠道中有毒物质的形成，来帮助人们的延年益寿。
人类的肠道拥有一个丰富而有活力的菌群，至少含有400～500种细菌，益生菌是通过维持或改善肠道菌群平衡而对消费人群具有确实的保健功能的活菌制剂。
然而人体胃环境的低pH（有时pH值小于3）下，不利于微生物的生长；同时胆汁进入小肠，也大大影响肠道微生物的生长繁殖。
研究发现，酸奶中的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌在摄入消化道中后，经受不住强烈的胃酸和胆汁的强烈作用，不能在人体肠道内固定下来和生存增殖。
口服乳酸菌若要到达肠道并在肠道内起作用，需要菌体或菌体产生的酶能够通过低pH胃液存活下来，耐受肠道内的胆盐浓度[5]。
因此要求具有一定耐受胆盐、耐受酸度使乳酸菌能够活着到达作用位点，而且它还必须能通过上消化道，并能在肠道中的环境中发挥积极作用[6]；而且益生性乳酸菌可用于治疗肠道菌群失调，以及消化道的通透性增加等症状，而后者是许多肠道失控的主要特征[7]。
所以如何构建耐受胆盐和耐受低pH的酸奶发酵剂，是提高酸奶营养价值被机体吸收利用的关键，成为当前研究的重要方向。
近年来，由于乳酸杆菌具有转化率高、产酸快和基因工程可操作性而广泛用于乳酸发酵生产。
尤其是基因组洗牌分子技术，此技术是DNA shuffling技术的一个改进，通过改变乳酸菌基因组原有的核苷酸序列，产生新的遗传结构，创造新的基因，并赋予表达产物以新的功能[8]。
目前国内外也做了很多这方面的研究。
微生物原生质体融合技术的整个过程包括：原生质体的制备、原生质体融合、原生质体再生。
国内外学者在每一个关键技术上都做了大量的工作，取得了可喜的成就[9]。
并在工业生产中大量应用，尤其是微生物育种方面应用最为广泛。
2 研究的主要内容及预期目标原生质体融合技术是构建多突变组合微生物的有效工具，可以在短时间内获得多亲本的良好的菌株性状(耐受胆盐、耐受pH 特性、快速产酸特性、细菌素产生、良好的风味)的遗传基因的重组菌株，每次原生质体融合都能获得一些有用的遗传多样性，对乳酸菌的育种具有重要意义。
进行原生质体融合时，先用酶脱去两个亲本细胞壁，使菌体细胞在高渗环境中释放原生质体，并在高渗条件下混合，再经聚乙二醇促进，两种原生质体凝集而发生融合，获得异核体或重组子。
利用杂合菌可以提高发酵制品的特性或发展新的产品[1]。
将从酸奶和牛场中分离筛选具有一定的pH 和胆盐耐受特性的6株乳酸菌进行原生质体的融合，构建耐受高胆盐浓度和低酸度的优良菌株。
在整个实验中，探讨原生质体制备的最优方案成为一个难点，包括菌株预处理时间，酶解条件等；以及用通过互补致死损伤进行原生质体灭活的方案，作为原生质体融合的标记是一个重点；关于原生质体的融合的再生条件是本实验的关键。
必须准确把握每个步骤，达到预期目的。
3 研究方案3.1 实验流程3.2 实验材料 3.2.1 实验材料样品及其来源：从牛奶和牛场环境中筛选出6株具有一定耐胆盐和耐酸乳酸菌菌株 1.0ug/ml 青霉素MRS 预处理4h0.6%Gly +0.5ug/ml 青霉素液体MRS 预处理4h1.2%Gly 液体MRS 预处理4h原生质体高温灭活原生质体紫外线灭活 2mg/ml 溶菌酶酶解1.0-2.0h耐性筛选原生质体的融合再生培养液体MRS 活化菌株、370C 过夜培养PEG6000，溶菌酶 3.2.2 培养基与溶液配制MRS 液体培养基：蛋白胨10克，牛肉浸取物10克，酵母提取液5克，葡萄糖5克，乙酸钠5克，柠檬酸二胺2克，吐温801ml ，磷酸氢二钾2克，四水硫酸锰0.25克，七水硫酸镁0.58克，蒸馏水1升。
固体培养基琼脂20.0克(进口的15克)，蒸馏水定容至1.0升；半固体MRS 培养基，加0.9%琼脂和1%的氯化钙。
再生培养基：不含吐温80的液体MRS ，明胶2.5%，氯化镁25mmol/L,氯化钙25mmol/L ，蔗糖0.5mol/L ，小牛血清0.5%。
选择培养基：在液体MRS 基础上调节pH1、pH2、pH3;添加牛胆盐1%、2%、3%。
LBP 缓冲液：Tris-HCl 10mmol/L, 氯化钙20mmol/L ，蔗糖0.5mol/L,pH6.3 40％聚乙二醇PEG6000溶液用灭菌高渗缓冲液配制，溶菌酶储液用TE 配置。
3.2.3 实验设备与仪器高压蒸汽灭菌锅，超净工作台，生化培养箱，紫外可见分光光度计、电子天平 3.3 实验步骤 3.3.1 原生质体制备 3.3.1.1 菌种活化将实验室所保存的来自酸奶和牛场的具有一定的耐受胆盐和耐受酸度的乳酸菌，转接于MRS 培养基中37℃中过夜培养，进行菌株活化（图1）。
3.3.1.2 菌株前处理每几株菌过夜培养后新鲜菌液按2%一起接种于5ml 分别含1.0%甘氨酸、1mg/ml 青霉素、0.5%甘氨酸+0.5mg/ml 青霉素MRS 液体培养基37℃振荡培养4h （图2）。
A B FC D E 图1 MRS 液体培养基，37℃过夜培养10～12h ，进行菌株活化3.3.1.3 制备原生质体悬液取1ml 混合培养菌液，离心收集菌体，高渗缓冲液洗涤2次，重悬于高渗缓冲液中，甘氨酸和青霉素预处理的菌体分别添加终浓度为2mg/ml 溶菌酶，37℃保温1.0～2.0h ，显微镜下观察破壁情况。
酶解后当90％以上菌体破壁时，3000r/min 离心10min ，再用高渗缓冲液洗涤2次，重悬于50ul 高渗缓冲液中备用。
酶解条件如表1。
表1 各预处理下菌株酶解条件预处理条件 预处理 酶解 原生质体形成率1.2%Gly 4h 2h 1.0ug/ml 青霉素 4h 1h 1.2%Gly+0.5ug/ml 青霉素 4h1h3.3.2 原生质体灭活灭活的双亲原生质体只有通过融合后致死损伤得到互补才能形成融合子，因此采用能引起细胞不同部位的致死作用的热和紫外线灭活方法，热灭活的致死机理是细胞质中蛋白变性，紫外线灭活的机理是核酸(DNA)断裂所致。
利用原生质体互补致死灭活作为分子标记。
两亲株融合后，损伤可以互补，形成能够生长繁殖的融合子。
基因组改组技术应用多母本递进融合，定向筛选具有重要表型特征改变的突变体。
作为有效的工业微生物菌种改造技术，可以用于工业微生物复杂表型的改良[ 10-11]。
取悬于缓冲溶液中的1/2原生质体液60℃保温120min ，其余1/2紫外线下照射32min ，分别灭活。
原生质体灭活条件如表2。
ABC 1.2%Gly MRS DEF ABC DEF0.6%Gly+0.5ug/ml 青霉素ABC DEF 1.0ug/ml 青霉素MRS 图2 37℃培养4h 至对数期前期表2 原生质体灭活条件灭活技术作用部位灭活时间灭活率紫外线细胞核32min高温细胞质120min3.3.3 原生质体的融合将上述不同方法灭活原生质体混合，在3000r/min条件下离心10min，重悬于50ul高渗缓冲液中，加4.5ml 40％PEG6000，充分混匀，室温下放置6min，加5ml高渗缓冲液稀释PEG6000，终止反应，迅速在3000r/min条件下离心10min，然后洗涤2次，悬于100ul 高渗溶液中。
3.3.4 再生培养将高渗溶液中融合的原生质体转接于再生培养基，在倒好的MRS培养基表面将融合的原生质体涂布均匀，将冷却至50～60℃的再生半固体培养基倒在涂布有融合菌的平板中，37℃避光培养培养24～96小时，每隔一天观察记录融合子形成情况。
融合子形成数统计表如下表3表3 各处理下融合子形成数预处理条件 1.2%Gly 1.0ug/ml青霉素 1.2%Gly+0.5ug/ml青霉素融合子形成数3.3.5 耐受性筛选胆盐耐受性：将再生的融合菌分别转接于1%、2%、3%胆盐浓度的液体MRS培养基37℃培养4h,吸取筛选菌200ul涂布于MRS平板中，37℃培养24～48小时。
pH耐受性：将高胆盐浓度平板上的抗胆盐菌落分别转接到pH1、pH2和pH3的液体MRS 培养基中37℃培养4h后，吸取200ul涂布于MRS平板，37℃培养24～48小时。