SABC(兔IgG)- FITC(POD)双标试剂盒使用说明

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SABC(小鼠 IgG)- FITC(POD)双标试剂盒说明书

SABC(小鼠 IgG)- FITC(POD)双标试剂盒说明书

SABC(小鼠IgG)- FITC (POD )双标试剂盒说明书货号:AC15835产品内容:封闭液(5% BSA ) 10ml Bio-羊抗小鼠IgG 浓缩液 100ul SABC-FITC 浓缩液 100ul SABC-POD 浓缩液 100ul 稀释液30ml 20×DAB 显色液A 1ml 20×DAB 显色液B 1ml 抗荧光衰减封片剂10ml 保存:如果长时间不使用,请将所有试剂存放于-20℃,如经常使用,可将封闭液,稀释液, 20×DAB 显色液B 和抗荧光衰减封片剂存放于2-8℃以方便使用。

产品简介: 本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG 来源的免疫组化实验. DAB 及FITC 显色。

SABC 是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。

链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(PI=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。

链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。

SABC 即StreptAvidin —Biotin Complex ,SABC 大约可形成一百个左右的过氧化物酶或者FITC 和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。

大量的酶与FITC 将保证SABC 具有很高的敏感性。

操作步骤:(以石蜡切片热修复为例)1. 切片常规脱蜡至水。

3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶(如果FITC ,可省掉此步)。

蒸馏水洗3次。

2. 热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。

冷却后PBS (pH7.2-7.6)洗涤1-2次。

3. 滴加5%BSA 封闭液,室温20分钟。

甩去多余液体, 免洗。

4. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。

支原体 PCR 检测试剂盒使用说明书

支原体 PCR 检测试剂盒使用说明书

支原体 PCR 检测试剂盒使用说明书Product Name: Mycoplasma PCR Detection KitIntended Use:The Mycoplasma PCR Detection Kit is intended for the qualitative detection of Mycoplasma spp. in cell cultures and other biological samples by PCR amplification.Kit Components:- PCR amplification reaction mix and enzyme mix- Positive control DNA template- Negative control DNA template- PCR tubes and caps- User manualStorage:The kit should be stored at -20°C. Thaw the kit components at room temperature before use.Sample Preparation:1. Collect the cell culture sample or other biological sample.2. Extract the DNA from the sample using a DNA extraction kit of your choice.3. Dilute the DNA extract as necessary in molecular grade water or buffer to achieve the optimal concentration for PCR amplification (typically between 10-100 ng/µL).PCR Amplification:1. Prepare the PCR reaction mix (in a sterile tube or plate) by adding the PCR amplification reaction mix, enzyme mix, andtemplate DNA to the appropriate volumes as specified in the table below.Component Volume per Reaction (20 µL)PCR amplification reaction mix 10 µLEnzyme mix 1 µLTemplate DNA 1-5 µLMolecular grade water/buffer To 20 µL2. Close the PCR tubes with the caps provided and mix the contents well by vortexing or pipetting.3. Place the tubes in a thermal cycler and perform PCR amplification according to the following conditions:Initial denaturation: 95°C for 5 minutesDenaturation: 95°C for 30 secondsAnnealing: 55°C for 30 secondsExtension: 72°C for 1 minuteFinal extension: 72°C for 5 minutesHold at 4°C4. Analyze the PCR products by gel electrophoresis or other methods as appropriate.Interpretation of Results:- Positive Result: A distinct band is observed in the gel at the expected size for Mycoplasma spp. This indicates the presence of Mycoplasma DNA in the sample.- Negative Result: No band or only faint bands are observed in thegel. This indicates the absence of Mycoplasma DNA in the sample. - Invalid Result: No bands or smear are observed in the gel or the band size is incorrect. Repeat the experiment with fresh controls and follow the instructions carefully.Limitations:1. This assay is designed for research use only and is not intended for diagnostic purposes.2. False negative results may occur due to low level or degraded Mycoplasma DNA in the sample, PCR inhibitors, or other factors.3. The presence of PCR inhibitors in the DNA extraction and amplification process may affect the sensitivity and reproducibility of the assay.4. The kit components must not be used beyond the expiry date.5. The Mycoplasma PCR Detection Kit may only be used by trained personnel.。

兔子皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析试剂盒说明书

兔子皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析试剂盒说明书

兔子皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定兔子血清、血浆或其它相关生物液体中皮质醇(Cortisol)含量。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗皮质醇(Cortisol)抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗皮质醇(Cortisol)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为180ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成180ng/ml,90ng/ml,45ng/ml,22.5ng/ml,11.25ng/ml,5.63ng/ml,2.82ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0ng/ml,临用前15分钟内配制。

如配制90ng/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)180ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml 样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3.样品稀释液:1×20ml。

4.检测稀释液A:1×10ml。

5.检测稀释液B:1×10ml。

6.检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。

如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。

7.检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。

sabc免疫组化法

sabc免疫组化法

sabc免疫组化法SABC免疫组织化学法(Streptavidin-Biotin Complex Immunohistochemistry)是一种常用的免疫组织化学技术,于1980年由Hsu等人首次提出,其基本原理是利用亲合素-生物素结合系统来增强免疫反应的信号和灵敏性。

该技术广泛应用于组织病理学和细胞生物学领域,用于检测和定位各种细胞和组织中的抗原或分子标记物,具有高灵敏度和高特异性的特点。

SABC免疫组织化学法的基本步骤如下:1. 样本固定:将待检测的细胞或组织固定在载玻片上。

常用的固定方法包括冰乙酸法、乙醇法和甲醛法等。

2. 抗原修复:由于组织样本在固定过程中可能导致抗原受损或掩盖,所以需要进行抗原修复。

抗原修复的方法有热处理、酶消化和酸碱处理等。

3. 阻断非特异性结合:添加合适的蛋白质阻断液,防止非特异性结合。

4. 一抗孵育:将第一抗体孵育在样本上,第一抗体可以是多种来源,如小鼠单克隆抗体、兔多克隆抗体等,与目标抗原结合。

5. 二抗孵育:将牛、羊或马等动物来源的生物素化的二抗孵育在样本上,二抗的特异性是由于其与人样本中免疫球蛋白的Fc区域结合而实现。

6. ABC复合物孵育:加入经过某种方式标记的ABC复合物,ABC复合物是指由Streptavidin(链霉亲和素A)和生物素化的过氧化物酶(HRP)构成的复合物,通过亲合素与生物素之间的高亲和力实现复合。

7. 标色显色:通过添加染色剂(如DAB)和过氧化氢等试剂,使得过氧化物酶催化反应产生沉积的有色产物。

8. 反应停止:用蒸馏水冲洗玻片,停止显色反应。

9. 后处理及封片:将玻片脱水,用透明剂固定标本,然后盖上封片剂,最后用显微镜观察和分析结果。

SABC免疫组织化学法的优点是具有高灵敏度和高特异性,对于目标抗原的检测和定位有较好的效果。

通过使用链霉亲和素A和生物素结合系统,可以增强免疫反应的信号,提高检测和定位的灵敏性。

此外,该方法简单易行,结果易于解释和分析,广泛应用于组织病理学和细胞生物学领域。

新冠抗原检测试剂盒使用说明书

新冠抗原检测试剂盒使用说明书

新冠抗原检测试剂盒使用说明书全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:新冠抗原检测试剂盒使用说明书一、检测试剂盒概述新冠抗原检测试剂盒是用于快速检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗原的一种便携式医疗设备。

该检测试剂盒采用免疫层析法,通过检测样本中的SARS-CoV-2抗原来判断被检测者是否感染新冠病毒。

该检测试剂盒具有快速、准确、便捷的特点,可广泛应用于各类医疗机构、边防口岸、社区防疫等场所,为防控疫情提供重要支持。

二、检测步骤1.准备工作- 打开检测试剂盒包装,取出所有需要的试剂盒、吸管、吸头和样本采集棒等物品。

- 将样本采集棒插入患者鼻腔或咽喉进行采样,确保采集到足够的样本。

2.操作步骤- 打开试剂盒,将样本采集棒放入样本溶解液中,反复挤压样本采集棒,确保样本完全溶解。

- 使用吸管吸取样本溶解液,滴入试剂盒中指定的孔里。

- 等待约15-20分钟,观察结果。

阳性结果为对应的孔出现两道线,阴性结果为仅出现一道线,无效结果为未出现任何线。

三、注意事项1.操作过程中需穿戴好口罩、手套等防护用具,避免交叉感染。

2.操作过程中要避免在不洁净的环境下进行,确保操作台面清洁。

3.请勿将试剂盒暴露在高温、潮湿、阳光直射等条件下,以免影响检测结果准确性。

4.请勿重复使用试剂盒或混用不同品牌的试剂盒,以免造成检测结果错误。

5.请按照操作说明进行操作,避免操作失误导致检测结果不准确。

四、结果解读1.阳性结果:指试剂盒检测出样本中存在SARS-CoV-2抗原,即被检测者可能已感染新冠病毒,应立即报告相关部门进行隔离治疗。

2.阴性结果:指试剂盒未检测出样本中存在SARS-CoV-2抗原,即被检测者目前未感染新冠病毒,但可能存在假阴性情况,需谨慎对待。

3.无效结果:指试剂盒未显示出任何结果,可能是操作失误或试剂盒受损导致,需重新进行检测。

五、贮存与运输1.试剂盒应存放在阴凉干燥处,避免高温、潮湿、日光直射等条件。

2.试剂盒在运输过程中需轻拿轻放,避免碰撞损坏。

细胞免疫组化(SABC法)教学文案

细胞免疫组化(SABC法)教学文案

细胞免疫组化(SABC法)步步看:细胞冻存够了,且状态良好!咋们就开始做细胞免疫组化吧!开始做实验了,先看要准备些什么吧!实验准备:实验用品:移液枪:1ml、200ul、10ul枪头:1ml、200ul、10ul枪头盒:1ml、200ul、10ulEP管:1.5ml湿盒需要灭菌的东西:培养皿(可以是重复用的)、细胞爬片(多聚赖氨酸处理,并经过环氧乙烷消毒)、常规细胞培养物品。

试剂:细胞消化液、完全培养基、4%多聚赖氨酸、0.01M PBS(ph7.2-7.4)、3%H2O2(现配)、0.5%Txiton X-100、浓缩型SABC试剂盒(血清封闭液、二抗、三抗《SABC》)、苏木素、ddH2O、DAB显色试剂盒操作步骤:一、细胞爬片的制作1、细胞用消化液消化后,用完全培养基重悬(4-5ml)或者密度为1-5x106/ml2、在灭菌的培养皿中铺上3块细胞爬片(圆片),圆片间不要重叠3、取细胞悬液分别滴到圆片上,注意不要滴到圆片外,让细胞贴片30min左右4、30min后,在培养皿中补加完全培养液(轻微的加入,以免冲力将贴壁的细胞打下来),放于37°C,5%CO2培养箱中培养3h左右(让其贴壁更牢)。

二、组化前处理1、取出培养皿,用PBS漂洗2x2min(PBS可以不灭菌)2、4%多聚甲醛处理(室温)20min;3、PBS漂洗,3x2min;4、0.5%Txiton X-100处理(室温)20min;5、PBS漂洗,3x2min;6、3%H2O2处理(室温)15min;7、PBS漂洗,3x2min;三、组化1、血清封闭:试剂盒中的血清封闭液,37°C,20min;2、取出甩干封闭液(不漂洗);一抗(1:200)(PBS稀释),阴性对照用PBS代替一抗,37°C1-2h或4°C过夜;3、PBS漂洗,3x2min;4、二抗孵育:试剂盒中的生物素化...37°C,20min;5、PBS漂洗,3x2min;6、SABC孵育:湿盒内37°C,20min;7、PBS漂洗,3x4min;8、DAB显色:DAB试剂盒中的A、B、C三种试剂,我是按照500ul蒸馏水中各加4ul,混匀。

食物特异性IgG抗体检测试剂盒(条带免疫印迹法)产品技术要求siderun

食物特异性IgG抗体检测试剂盒(条带免疫印迹法)产品技术要求siderun

食物特异性IgG抗体检测试剂盒(条带免疫印迹法)适用范围:用于体外定性检测人血清中食物特异性IgG抗体(最多可检测切达干酪,白软干酪,牛肉,鸡肉,猪肉,鸡蛋,羊肉,火鸡,酸奶,巧克力,玉米,大米,小麦,大豆,柠檬,菠菜,青豆,小米,杏仁,芝麻,腰果,花生,旱芹,茄子,青椒,欧芹,卷心菜,胡萝卜,菜花,嫩豌豆,葵花籽,黑胡桃,蓝莓,菠萝,橘子,桃,苹果,榴莲,芒果,香蕉,葡萄,柚子,草莓,哈密瓜,麦芽,黑麦,酵母,蔗糖,黄油,肉桂,芥末,蜂蜜,咖啡,燕麦,大麦,荞麦,西兰花,杂色豌豆,大蒜,洋葱,可乐豆,红茶,牛奶,螃蟹,对虾,鳕鱼,羊奶,蛤,三文鱼,沙丁鱼,带鱼,扇贝,龙虾,草鱼,牡蛎,鳟鱼,金枪鱼,红辣椒,大葱,生菜,黄瓜,马铃薯,南瓜,甘薯,香菜,小白菜,西红柿,蘑菇,西瓜,橄榄90种食物特异性IgG抗体)。

1.1包装规格6人份/盒,型号为FIGG-90;9人份/盒,型号为FIGG-64;FIGG-48;18人份/盒,型号为FIGG-36;FIGG-28;FIGG-21;FIGG-14A;FIGG-14B;FIGG-7A;FIGG-7B;FIGG-7C;FIGG-4A;FIGG-4B;其中,各型号/包装规格检测项目如下:表1 各型号/包装规格检测项目2. 主要组成成分表2 主要组成成分2.1. 外观2.1.1. 试剂盒外部包装盒应整洁,各组分应齐全完整,文字符号标识清晰,所有试剂瓶密闭,无漏液。

2.1.2. 样本缓冲液为无色或淡黄色澄清液体;浓缩洗液(10×)为无色澄清液体;酶结合物(10×)为无色或淡黄色澄清液体;底物液为淡黄色澄清液体。

2.2. 净含量液体试剂装量不小于标示值。

2.3. 膜条宽度膜条宽度不低于1.8mm。

2.4. 临界值及重复性食物特异性IgG抗体企业参考品各检测项目临界值浓度均为37.5U/mL。

阳性参考品各检测项目抗体浓度均为50U/mL,检测10次,结果的阳性率为100%,反应结果一致;阴性参考品各检测项目抗体浓度均为25U/mL,检测10次,结果的阴性率为100%,反应结果一致。

兔子免疫球酶联免疫分析试剂盒使用说明书

兔子免疫球酶联免疫分析试剂盒使用说明书

兔子免疫球酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T20ng/ml - 600ng/ml使用目的:本试剂盒用于测定兔子血清、血浆及相关液体样本中免疫球G(IgG)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中兔子免疫球G(IgG)。

用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入免疫球G(IgG),再与 HRP标记的抗原,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。

TMB在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中G(IgG)呈正相关。

用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准的免疫球曲线计算样品中兔子免疫球试剂盒组成G(IgG)浓度。

30倍浓20ml×1瓶6ml×1瓶12孔×8条6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1/瓶终止液6ml×1瓶2 酶标试剂标准品(1200ng/ml) 0.5ml×1瓶3 酶标包被板4 样品稀释液5 显色剂 A液6 显色剂 B液标准品稀释液1.5ml×1瓶1份10 说明书11 封板膜12 密封袋2张1个兔子免疫球酶联免疫分析试剂盒使用说明书标本要1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因 NaN3抑制辣根过(HRP)活性。

操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

600ng/ml300ng/ml150ng/ml75ng/ml5号标准品4号标准品3号标准品2号标准品1号标准品150µl的原倍标准品加入 150µl标准品稀释液150µl的 5号标准品加入 150µl标准品稀释液150µl的 4号标准品加入 150µl标准品稀释液150µl的 3号标准品加入 150µl标准品稀释液150µl的 2号标准品加入 150µl标准品稀释液37.5ng/ml2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔待测样品孔。

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SABC(兔IgG)-FITC(POD)双标试剂盒使用说明
货号:SA0025
产品内容:封闭液(5%BSA)10ml
Bio-羊抗兔IgG浓缩液100ul
SABC-FITC浓缩液100ul
SABC-POD浓缩液100ul
稀释液30ml
20×DAB显色液A1ml
20×DAB显色液B1ml
抗荧光衰减封片剂10ml
保存:
如果长时间不使用,请将所有试剂存放于-20℃,如经常使用,可将封闭液,稀释液,20×DAB显色液B和抗荧光衰减封片剂存放于2-8℃以方便使用。

产品简介:
本试剂盒适合于一抗为兔IgG来源的免疫组化实验.DAB及FITC显色。

SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。

链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(PI=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。

链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。

SABC即StreptAvidin—Biotin Complex,SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶或者FITC和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。

大量的酶与FITC将保证SABC具有很高
的敏感性。

操作步骤:(以石蜡切片热修复为例)
1.切片常规脱蜡至水。

3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶(如果FITC,可省掉此
步)。

蒸馏水洗3次。

2.热修复抗原:将切片浸入0.01M枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至
沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。

冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。

3.滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。

甩去多余液体,免洗。

4.用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买
抗体稀释液。

滴加稀释的一抗,37℃1小时孵育左右或20℃2小时左右,也可4℃过夜。

PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。

一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。

5.根据使用量,用稀释液将bio-羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释
液加入10ul bio-羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液,此工作液4℃可保存一周)。

滴加生物素化羊抗兔IgG工作液,20-37℃处理30分钟。

PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟。

如果用荧光观察,请接步骤6、7,如果用DAB显色,请直接转至步骤8。

6.根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入
10ul SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液。

此工作液4℃可保存一周)滴加SABC-FITC工作液,20-37℃,30分钟(避光)。

PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5分钟。

7.滴加抗荧光衰减封片剂封片。

荧光显微镜观察。

8.根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入
10ul SABC-POD浓缩液,混匀即成SABC-POD工作液。

此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。

PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5分钟。

9.DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1ml PBS加入50ul20×DAB显色
液A,加入50ul20×DAB显色液B,混匀后加至切片。

室温显色,镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。

蒸馏水洗涤终止反应。

10.苏木素轻度复染。

脱水,透明,封片。

显微镜观察。

对于细胞爬片:
常规固定后,PBS漂洗两次,再用0.5%Txiton X-100室温20分钟,PBS漂洗两次,3%H2O2(如果用FITC,刚可省掉此步)处理15分钟;PBS漂洗两次,下接上面第4步。

对于冰冻切片:
固定后,可用PBS漂洗两次,再接上面第二步。

注意事项:
如果用DAB染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01-0.02%TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。

如果用FITC观察背景过高,在SABC反应之后,用加有0.01—0.02%TWEEN-20的PBST (pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗涤2次,然后封片观察。

因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。

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