Ca 2+、ABA预处理蝴蝶兰类原球茎的脱水保护系统比较及信号传导关系

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蝴蝶兰叶片诱导类原球茎(PLB)及转抗寒基因ICE1的初步研究

蝴蝶兰叶片诱导类原球茎(PLB)及转抗寒基因ICE1的初步研究

蝴蝶兰叶片诱导类原球茎(PLB)及转抗寒基因ICE1的初步研究本实验通过只采用一种培养基来对14个品种的蝴蝶兰叶片进行类原球茎(PLB)的诱导,并且类原球茎的继代增殖也可采用该培养基。

研究结果表明,将14个品种的蝴蝶兰叶片接种在培养基1/2MS+3mg/LTDZ+20g/蔗糖
+3g/Lphytagel(Sigma)上,均能诱导出类原球茎。

诱导率分别是:V31:32%,8106:33%,729:46%,777:51%,604:21%,602-3:9%,791:28%,8169:24%,735:31%,607:21%,771:4%,608:38%,728-3:18%,788:1%。

这为蝴蝶兰的大规模工厂化生产提供了技术依据,并且该培养基成分简单,成本低廉,重复性好,继代增殖效率高,大大降低了蝴蝶兰的培养成本,增加商业利润。

另外,本研究从拟南芥的RNA中克隆到ICEl,连上启动子35S构建成植物表达载体OVERICE1,并构建植物表达载体pCAMBIA2300YFP,通过农杆菌介导法导入烟草叶片中做瞬时表达,证明所构建的植物表达载体pCAMBIA2300YFP具有表达能力,为下一步的将植物表达载体OVERICE1导入蝴蝶兰类原球茎做稳定表达做
好技术储备,初步建立一个蝴蝶兰遗传转化系统,为进一步获得具有抗寒基因的
蝴蝶兰新品种打下基础。

石斛类原球茎体增殖及ABA对其耐脱水性的诱导

石斛类原球茎体增殖及ABA对其耐脱水性的诱导

石斛类原球茎体增殖及ABA对其耐脱水性的诱导本论文对金钗石斛和铁皮石斛的组织培养和ABA对铁皮石斛类原球茎脱水耐性的诱导及其机理研究进行了研究,主要结果如下:一.铁皮石斛和金钗石斛的组织培养 1.利用铁皮石斛成熟的种子为外植体,在无激素培养基上获得了无菌苗,在含有TDZ和NAA的1/2MS培养基上,诱导了铁皮石斛类原球茎,而6-BA的使用会导致材料进一步的分化。

铁皮石斛类原球茎的增殖,以1/2MS+0.1mg/LNAA+3%蔗糖为佳,尽管在不含NAA的培养基上也有高的增殖率,但类原球茎的质量却较差。

2.金钗石斛的外植体以幼茎基部效果最好,腋芽易萌发,但材料数量少;以老茎为外植体时,接种前严格的清洗和预处理,能够有效地提高消毒效率,降低材料的污染。

通过正交试验,对老茎腋芽萌发的研究表明,NAA和BA对腋芽的萌发都有一定促进作用,以0.1mg/L NAA和1mg/L BA混用效果最好,而GA抑制腋芽萌发。

二.ABA对铁皮石斛类原球茎脱水耐性的诱导及机理研究 1.50 μmol/L以下浓度的ABA预培养,都能够在一定程度上提高铁皮石斛类原球茎对脱水的耐性,其中以5 μ mol/L ABA的效果最佳,预培养时间以24h为好,经2h快速脱水后,成活率较对照提高10倍左右。

2.保护性溶质含量的测定结果表明,在24h内,ABA预培养并不能明显引起蔗糖、脯氨酸等物质的积累,但可溶性多糖的含量有一定程度的增加。

因此,认为脱水耐性的增强,可能与可溶性多糖含量的增加有关。

3.显微结构观察发现,ABA预处理过程中,淀粉粒逐渐降解。

证实ABA诱导的脱水耐性,可能与石斛多糖的积累相关。

4 超显微结构的观察发现,ABA预培养不会引起叶绿体、线粒体及液泡的明显变化,但脱水后,经ABA预培养的抗性类原球茎,其膜系统的完好性明显强于未经ABA预培养的敏感性类原球茎。

虽然在结构上,抗性类原球茎细胞中线粒体、叶绿体及液泡都出现一定程度的皱缩,但内外膜均保持较好,而在敏感材料的细胞中,线粒体、叶绿体膜的降解则较为严重。

外源钙及其抑制剂对蝴蝶兰幼苗耐热性的影响

外源钙及其抑制剂对蝴蝶兰幼苗耐热性的影响

外源钙及其抑制剂对蝴蝶兰幼苗耐热性的影响作者:杨华庚杨毅敏来源:《热带作物学报》2021年第02期摘要:为探讨Ca2+信号参与调节蝴蝶兰耐热性形成的生理机制,采用适宜浓度的外源Ca2+(CaCl2)、胞外Ca2+螯合剂(EGTA)和质膜Ca2+通道抑制剂(LaCl3)溶液喷施蝴蝶兰幼苗植株,以喷施蒸馏水为对照,测定高温胁迫下蝴蝶兰幼苗植株的抗氧化酶活性、丙二醛、渗透调节物质和光合色素含量的变化。

结果表明,与对照相比,CaCl2处理能显著增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性,增加脯氨酸、可溶性蛋白、可溶性糖、叶绿素和类胡萝卜素含量,显著降低丙二醛含量,减轻了蝴蝶兰幼苗的高温伤害,而LaCl3和EGTA处理不同程度地降低SOD、POD和CAT活性,降低脯氨酸、可溶性蛋白、可溶性糖、叶绿素和类胡萝卜素含量,显著增加丙二醛含量,使蝴蝶兰幼苗受害加重。

由此认为,Ca2+信号可通过参与抗氧化酶活性、脯氨酸和光合色素的代谢过程来调控蝴蝶兰幼苗耐热性的形成。

关键词:蝴蝶兰;钙离子信号;耐热性;生理机制Abstract: The objective of the study is to explore the underlying physiological mechanism of Ca2+ signal participating in the enhancement of Phalaenopsis heat tolerance. The seedlings of Phalaenopsis were sprayed appropriate concentration of exogenous calcium (Ca2+), extracellular Ca2+ chelator (EGTA) and plasma membrane Ca2+ channel inhibitor (LaCl3) respectively,taking distilled water as the control. The effects of antioxidant enzyme activity, malondialdehyde (MDA), osmotic regulators and photosynthetic pigment contents in Phalaenopsis leaves under high temperature stress were investigated. The results showed that SOD, POD and CAT activities,proline, soluble sugar, soluble protein, total chlorophyll and carotenoids contents were significantly increased and MDA content was significantly reduced in the CaCl2 treatment group,stress damages in Phalaenopsis seedlings caused by high temperature were alleviated. while the activities of three antioxidant enzymes and contents of three osmoregulation substances and contents of two photosynthetic pigments mentioned above were decreased to different extents and MDA content was significantly improved in LaCl3 and EGTA treatments group compared with the control group, thereby aggravating the damage of high temperature stress in Phalaenopsis seedlings. The study showed that Ca2+ signaling could improve the resistance of Phalaenopsis seedlings to high temperature stress by participating in antioxidant enzyme activity, proline and photosynthetic pigment metabolism processes.Keywords: Phalaenopsis; Ca2+ signal; heat tolerance; physiological mechanism蝴蝶兰(Phalaenopsis ssp.)是具有较高观赏性和商业价值的热带附生兰花。

ABA在生物胁迫应答中的调控作用

ABA在生物胁迫应答中的调控作用

农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2008,16(1):169一174ABA在生物胁迫应答中的调控作用木周金鑫I’2,胡新文1,张海文2,3,黄荣峰2,3·母(1.华南热带农业大学农学院,儋州571737;2.中国农科院生物技术研究所,北京100081;3.国家农作物基因资源与遗传改良重大科学工程,北京100081)·综述·摘要:脱落酸(ABA)不仅调控非生物胁迫应答,而且在应对各种生物胁迫中发挥重要的调控作用。

ABA负调控植物对生物胁迫的抗性主要是通过与水杨酸、茉莉素和乙烯信号传导途径的互作以及影响这些信号途径中的信号组分来实现的。

综述了ABA信号转导途径及其在生物胁迫应答过程中的调控作用。

关键词:脱落酸;生物胁迫;乙烯;水杨酸;茉莉酸中图分类号:S188文献标识码:A文章编号:1006.1304(2008)01-0169—06RegulatoryRoleofABAinPlantResponsetoBioticStressesZHOUJin—xinHUXin-wen1.ZHANGHai—wenHUANGRong—feng∞木幸化CollegeofAgriculture,SouthChinaUniversityofTropicalAgriculture,Danzhou571737,China;2.BiotechnologyResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,BeOing100081,China;3.NationalKeyFacilityofCropGeneResourcesandGene6cImpmvemengBeijing100081,Chin却AbsttactThephytohormoneabseisieacid(ABA)notonlyisinvolvedintheplantabioticstressresponsebutalsoplaysmajorroleintheregulationofvariousbioticstressresponses.ABAnegativelyregulatesplantbioticresistancewhichisthroughtheinterac—fionwiththesignaltransductionsofslicylicacid,jasmonicacidandethylene,andsharescomponentsinpathogen—relatedsignaling.Inthispaper,thesignaltransductionofABAanditsregulatoryroleinbioticresponsesreviewed.K盯鼬:ABA;bioticstress;salicylicacid;jasmonicacid;ethylene植物生长发育过程中经常遭受细菌、真菌、病毒和害虫等生物的侵害。

蝴蝶兰Phal.‘B’和Phalaenopsis.SogoYukidian‘V3’正反交后代花部性状

蝴蝶兰Phal.‘B’和Phalaenopsis.SogoYukidian‘V3’正反交后代花部性状

蝴蝶兰Phal. B 和Phalaenopsis.SogoYukidian V3 正反交后代花部性状分离表现张果,杨书才,王世尧,王俊∗,蒋拴丽,冯建,赵玉安,王瑞华,杨录军㊀(郑州市农林科学研究所,河南郑州450005)摘要㊀以蝴蝶兰Phal. B 和PhalaenopsisSogoYukidian V3 为亲本进行正反交,对杂交F1代花部性状的分离表现进行统计分析㊂结果表明,正反交F1代的花色花斑㊁唇部肉突颜色㊁唇部中裂片颜色分离类别基本一致;蝴蝶兰Phal.B的紫红色花斑可以遗传给后代,且作为父本更容易遗传;同时紫红色肉突与紫红色花斑的分布有一定的正向相关性,当花瓣上有紫红色花斑的,肉突颜色会显现紫红色,而花瓣上没有紫红色花斑的,肉突颜色则不会呈现紫红色,且会随着紫红色花斑面积的增加,紫红色肉突所占比例随之增加;而且紫红色花斑分布对中裂片的颜色有一定的影响,当花瓣上有紫红色花斑时,中裂片更易呈现红色,且Phal.B为父本时杂交后代中这种遗传影响尤甚㊂关键词㊀蝴蝶兰;正反交;花部性状;分离表现中图分类号㊀S682.31㊀㊀文献标识码㊀A㊀㊀文章编号㊀0517-6611(2023)16-0043-04doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2023.16.010㊀㊀㊀㊀㊀开放科学(资源服务)标识码(OSID):SegregationPerformanceofFloralTraitsinReciprocalCrossesGenerationBetweenPhal.BandPhalaenopsisSogoYukidian V3 CultivarsZHANGGuo,YANGShu⁃cai,WANGShi⁃yaoetal㊀(ZhengzhouInstituteofAgricultureandForestryScience,Zhengzhou,Henan450005)Abstract㊀Phalaenopsis. B ,PhalaenopsisSogoYukidian V3 andtheirF1offspringofreciprocalcrossingwereusedtoanalyzethesepara⁃tionperformanceoffloraltraits.Theresultsshowedthattheseparationofflowercolor,flowerspotsandlipcolorwerebasicallythesameinthereciprocalcrossesgeneration.Thedarkpurple⁃redspotsofPhal. B couldbeinheritedtotheoffspringandwereeasiertoinheritasthemaleparent.Atthesametime,therewasapositivecorrelationbetweenthedistributionofpurple⁃redcallusandpurple⁃redflowerspots,whentherewerepurple⁃redspotsonthepetals,thecolorofthecalluswouldappearpurple⁃red,whilethepetalswithoutpurple⁃redspots,thecolorofthecalluswouldnotappearpurple⁃red,andtheproportionofpurple⁃redcalluswouldincreaseastheareaofpurple⁃redspotsincreases.Moreover,thedistributionofthepurple⁃redspotshadaneffectonthecolorofthemiddlelobe,whichwasmorelikelytoappearredwhentherewerepur⁃ple⁃redspotsonthepetals,andthisgeneticeffectwasespeciallystrongintheprogenyofthecrosswhenP. B wasthemale.Keywords㊀Phalaenopsis;Reciprocalcrossesgeneration;Floraltraits;Segregationperformance基金项目㊀河南省2021年科技攻关项目 蝴蝶兰高效育种技术体系构建及创新应用 (212102110434)㊂作者简介㊀张果(1987 ),女,河南南阳人,研究实习员,硕士,从事兰花遗传育种与组织培养研究㊂∗通信作者,研究员,从事花卉引种㊁育种及栽培技术研究㊂收稿日期㊀2022-07-13㊀㊀蝴蝶兰为兰科(Orchidaceae)蝴蝶兰属植物,花形似蝶,花色绚丽,赏花期长,被誉为 兰花皇后 ,是国际上销量最高的兰科花卉之一[1]㊂杂交育种是选育蝴蝶兰新品种最常见且重要的一种手段,截至2021年3月在英国皇家园艺学会(RHS)上登录的兰科蝴蝶兰属杂交种达37211个[2],由于国内蝴蝶兰育种工作起步较晚,且种质资源多依赖于引进,自育品种较少,与我国蝴蝶兰市场规模极不匹配[3]㊂随着杂交育种工作的开展,国内蝴蝶兰新品种培育也步入正途,关于蝴蝶兰观赏性状分离表现研究也随之增多[4-6]㊂研究表明蝴蝶兰杂交F1代出现亲本没有的花部纹案,存在较深花斑色覆盖遮挡住较浅花底色的表现,推测花部纹案受多基因调控结果,可能与易变基因的体细胞突变或转座子的位置效应有关[7-9]㊂在蝴蝶兰杂交育种过程中,花色㊁花斑㊁唇部性状等观赏性状是衡量一个新品种优良的重要指标,探究花被片底色㊁花斑类别㊁唇部肉突和中裂片颜色等花部性状遗传表现,有助于更好地选择适宜的亲本,提高目标性状的育种效率㊂目前关于蝴蝶兰唇部肉突和中裂片颜色的研究尚未见报道,因此,笔者以Phal. B 和PhalaenopsisSogoYukidian V3 及其正反交后代(F1)为材料,探讨蝴蝶兰正反交F1代花色和唇部性状的遗传规律,以期为杂交育种选育亲本和目标性状定向育种提供理论依据㊂1㊀材料与方法1.1㊀试验材料㊀供试亲本材料为Phal. B 和PhalaenopsisSogoYukidian V3 ,试验亲本及其杂交后代均栽培于郑州市农林科学研究所新品种试验中心连栋温室内,植株长势良好㊂1.2㊀试验方法㊀于2015年4月进行人工授粉杂交,其中正交组合P. B (ɬ)ˑP. V3 (ȶ),反交组合为P. V3 (ɬ)ˑP. B (ȶ);同年9月进行无菌播种与组织培养,2017年3月出瓶移栽F1代群体,2018年12月F1代群体开花㊂2019 2021年1 3月对该正交开花株(306株)及反交开花株(376株)进行相关花部性状的调查㊁记录并拍照,具体调查质量性状5个,包括花斑类型㊁唇部肉突颜色㊁唇部中裂片的颜色㊁唇须及花型㊂1.3㊀数据分析㊀采用MicrosoftOfficeExcel2003㊁SPSSStatis⁃tics26对试验数据进行统计分析㊂2㊀结果与分析2.1㊀亲本花部性状表现㊀P. B 为白色花,花心有紫红色斑块,且该斑块有粗糙颗粒触感;P. V3 为大花型白色花,具体的花部性状见表1㊁图1A㊂安徽农业科学,J.AnhuiAgric.Sci.2023,51(16):43-46㊀㊀㊀表1㊀亲本性状Table1㊀Parentaltraits种或品种Speciesorvarieties花色Flowercolor唇须Lipstick唇肉突颜色Calluscolor唇中裂片颜色Mid⁃lobecolor花型Flowertype花瓣排列PetalsarrangementV3白底长须黄底分布均匀红点白色平整分开Phal. B 白底花心有紫红斑长须黄底带紫红斑块白色平整分开㊀注:花部性状描述参照国际新品种保护联盟(UPOV)制定的蝴蝶兰DUS测试指南(UPOVPhalaenopsisguidelines2003;UPOVPhalaenopsisguidelines2013)[10-11]㊂㊀Note:FlowertraitdescriptionreferencePhalaenopsisguidelinesfortheconductofthetestsforDUSbytheInternationalUnionfortheProtectionofNewVarie⁃tiesofPlants(UPOVPhalaenopsisguidelines2003;UPOVPhalaenopsisguidelines2013).注:A.亲本及杂交F1代花色;B.F1代肉突颜色;C.F1代中裂片颜色㊂Note:A.ParentalandhybridF1generationflowercolor;B.F1generationcalluscolor;C.F1generationmid⁃lobecolor.图1㊀正反交F1代花部性状分离表现Fig.1㊀SeparationoffloraltraitsintheF1generationofforwardandbackwardcrosses2.2㊀正反交F1代花部性状的分离表现2.2.1㊀正反交F1代花色花斑分离表现㊂根据花色㊁花斑的性状特征,P. B 和P. V3 的正反交后代(F1)均表现出一致的性状分离规律,故将其后代分为5个组群,编号为Group1 Group5(图1A),其中Group1 Group3组群特征:花被片上有紫红色斑块,且斑块的面积逐渐减少;Group4 Group5特征:花被片上无斑块,其中Group4的侧萼片分布均匀红点,而Group5则为纯白花㊂在P. B 和P. V3 的正反交后代中,不同组群所占总F1代比例的分布趋势一致,均为Group5>Group4>Group2>Group1>Group3;同一组群在正反交后代中所占比例有所差别,表现为反交组合中Group1 Group3组群所占比例均大于正交组合,而反交组合中Group4和Group5组群所占比例则小于正交组合(表2)㊂表明P. B 为杂交亲本时其紫红色花斑可以遗传给后代,且后代会分离出面积及分布规律不同的紫红色花斑,此外,P. B 作为父本更容易将紫红色花斑这一性状遗传给子代㊂表2㊀蝴蝶兰正反交杂交F1代花斑分离比率Table2㊀IsolationratioofflowerspotsinF1generationofPhalaenopsisorientalisforwardandbackwardcrosses杂交类型Hybridizationtype杂交后代分组株数及比例Numberandproportionofgroupedstrainsofhybridprogeny大面积紫红斑块(Group1)LargeareaPurple⁃redplaques小面积紫红斑块(Group2)SmallareasPurple⁃redplaques零星紫红斑点(Group3)ScatteredFuchsiaspots侧萼片红斑点(Group4)LateralsepalsRedspots纯白花(Group5)whiteflowers总F1代TotalF1generation正交Orthogonal24(7.84%)28(9.15%)20(6.54%)102(33.33%)132(43.14%)306反交Reciprocalcorss60(15.96%)72(19.15%)44(11.70%)99(26.33%)101(26.86%)3762.2.2㊀正反交F1代唇部肉突颜色分离表现㊂供试亲本正反交后代(F1)中均分离出3种肉突颜色,分别为紫红色(图1B1)㊁黄底带紫红斑块(图1B2)及黄底分布均匀红点(图1B3)㊂在5个组群中,正反交组合的肉突颜色分布及所占比例规律基本一致,具体为Group1 Group3仅表现出紫红色和黄底带紫红斑块2种颜色,而Group4和Group5均表现黄底分布均匀红点,且随着紫红色花斑面积的增加,紫红色肉突所占正反交比例随之增加,均为Group1>Group2>Group3;在总F1代中,正反交组合的肉突颜色趋势分布一致,但所占比例有所不同,黄底分布均匀红点最多,黄底带紫红斑块次之,紫红色最少,同时反交组合中紫红色和黄底带紫红斑块所占比例均比正交组合高(表3)㊂运用Spearman等级相关系数检验花瓣花斑面积与紫色肉突之间的相关性,得到的相关系数为0.975,说明花瓣面积越大,紫红色肉突出现的可能越大,显著性水平0.005<0.05,表明两变量之间的正向关系很显著㊂表明紫红色肉突与紫红色花斑的分布有一定的正44㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀安徽农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀2023年向相关性,当花瓣上有紫红色花斑的,肉突颜色会显现紫红色,而花瓣上没有紫红色花斑的,肉突颜色则不会呈现紫红色,且会随着紫红色花斑面积的增加,紫红色肉突所占比例随之增加㊂此外,P. B 为父本能提高杂交后代的肉突出现紫红色和黄底带紫红斑块的概率㊂表3㊀正反交杂交F1代唇部性状分离比率Table3㊀SegregationratioofliptraitsinF1generationofforwardandbackwardcrosses花部部位Flowerparts杂交类型Hybridizationtype颜色分类Colorclassification杂交后代分组株数及比例Numberandproportionofgroupedstrainsofhybridprogeny大面积紫红斑块(Group1)LargeareaPurple⁃redplaques小面积紫红斑块(Group2)SmallareasPurple⁃redplaques零星紫红斑点(Group3)ScatteredFuchsiaspots侧萼片红斑点(Group4)LateralsepalsRedspots纯白花(Group5)whiteflowers总F1代TotalF1generation肉突正交紫红色10(41.67%)8(28.57%)2(10.00%)0020(6.54%)Callus黄底带红斑块14(58.33%)20(71.43%)18(90.00%)0052(16.99%)黄底分布均匀红点000102(100.00%)132(100.00%)234(74.47%)总株数242820102132306反交紫红色25(41.67%)23(31.94%)14(31.82%)0062(16.49%)黄底带红斑块35(58.33%)49(68.06%)30(68.18%)00114(30.32%)黄底分布均匀红点00099(100.00%)101(100.00%)200(53.19%)总株数60724499101376中裂片正交白色8(33.33%)11(32.29%)12(60.00%)83(81.37%)125(94.70%)239(78.10%)Middlelobe白色带红点16(66.67%)17(60.71%)8(40.00%)19(18.63%)7(5.30%)57(21.90%)总株数242820102132306反交白色27(45.00%)30(41.67%)16(36.36%)74(74.75%)85(84.16%)232(61.70%)白色带红点33(55.00%)42(58.33%)28(63.64%)25(25.25%)16(15.84%)144(38.30%)总株数60724499101376唇须正交长须21(87.50%)26(92.86%)18(90.00%)86(84.31%)113(85.61%)264(86.27%)Labialpalp中须3(12.50%)2(7.14%)2(10.00%)13(12.75%)18(13.64%)38(12.42%)短须0003(2.94%)1(0.76%)4(1.31%)总株数242820102132306反交长须52(86.67%)62(86.11%)26(59.09%)81(81.82%)78(77.23%)299(79.52%)中须7(11.67%)10(13.89%)16(36.36%)14(14.14%)11(10.89%)58(15.43%)短须1(1.67%)02(4.55%)4(4.04%)12(11.88%)19(5.05%)总株数607244991013762.2.3㊀正反交F1代唇部中裂片颜色分离表现㊂在P. B 和P. V3 杂交后代(F1)中,均分离出2种中裂片颜色,分别为纯白色黄唇㊁白色黄唇带些许红色点或红纹㊂在Group1 Group3中,正反交后代中裂片颜色的分布趋势和比例均存在一定差异,其中正交后代的中裂片为白色带些许红色所占比例大小为Group1>Group2>Group3,而反交组合则刚好相反为Group3>Group2>Group1;在Group4和Group5中,白色带些许红色的分布和比例基本一致,除Group5反交外,均为Group4>Group5,且反交组合中白色带些许红色的比例都比正交组合大;在总F1代中,正反交组合均表现一致,具体为白色带些许红色所占比例都小于纯白色中裂片,同时反交组合中白色带些许红色中裂片所占比例要高于正交组合(表3)㊂表明紫红色花斑分布对中裂片颜色有一定的影响,当花瓣上有紫红色花斑时,中裂片更易呈现红色,且P. B 为父本时杂交后代中这种遗传影响尤甚㊂2.2.4㊀正反交F1代唇须分离表现㊂在P. B 和P. V3 的正反交后代(F1)中,唇须类型均分离出3种,分别为长须㊁中须和短须,除Group5外,正反交后代中的其他4个组群与总F1代的唇须比例规律基本一致,均为长须>中须>短须,不同组群的唇须分布差异不大(表3)㊂父母本均为长须,正反交后代结果表明长须和长须杂交更容易出现长须性状㊂2.2.5㊀正反交F1代花型及花瓣排列方式分离表现㊂在杂交后代(F1)中,正交组合后代花型分离出内弯和平整2种类型,分别占3.59%和96.41%,而反交组合则分离出内弯㊁平整及外弯3种类型,分别占比11.70%㊁86.70%和1.60%㊂结果表明杂交后代中出现了亲本没有的内弯和外弯,推测可能是受环境和遗传双重因素的影响,有待进一步的研究㊂杂交F1代花瓣均表现为分开,但分开的幅度有所不同,幅度最小花瓣几乎相接,幅度最大的花瓣接近父本㊂3㊀讨论蝴蝶兰的花瓣颜色㊁花斑分布㊁唇色㊁花型及花瓣排列方式等花部性状是主要的观赏部位,研究其后代的遗传分离规律,可为杂交育种中亲本的选择和新品种的选育提供理论参考㊂目前已对蝴蝶兰花部性状在杂交F1代中性状分离规律开展了大量研究[12-15]㊂关于花斑的形成机理比较复杂,形成花部彩斑的原因主要有嵌合体和病毒病质体㊁位置效应㊁叶绿体的分离和缺失㊁易变基因的体细胞突变和各种类型的染色体畸变等[16]㊂该研究以P. B 和P. V3 为亲本进行正反交,通过亲本性状及其F1代的性状分离,发现正反交后代5451卷16期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀张果等㊀蝴蝶兰Phal. B 和Phalaenopsis.SogoYukidian V3 正反交后代花部性状分离表现性状分离的类别㊁分布趋势及所占比例基本保持一致,这与李佐等[7-9]研究结果一致㊂表明P. B 为杂交亲本时其紫红色花斑可以遗传给后代,且后代会分离出面积及分布规律不同的紫红色花斑,此外,P. B 作为父本更容易将紫红色花斑这一性状遗传给子代㊂关于肉突的颜色遗传尚未见相关的报道,该研究着重探究了花斑面积分布对肉突颜色的影响,结果表明紫红色肉突与紫红色花斑的分布有一定的正向相关性,当花瓣上有紫红色花斑的,肉突颜色会显现紫红色,而花瓣上没有紫红色花斑的,肉突颜色则不会呈现紫红色,且会随着紫红色花斑面积的增加,紫红色肉突所占比例随之增加㊂此外,P. B 为父本能提高杂交后代的肉突出现紫红色和黄底带紫红斑块的概率㊂蝴蝶兰花斑色的遗传规律研究除在杂交后代性状分离方面外,还集中在调控花青素合成的转录因子方面,Hsu等[17-18]在小兰屿蝴蝶兰中鉴定出3个R2R3-MYB转录因子,即PeMYB2㊁PeMYB11和PeMYB12,推测三者分别参与了萼片和花瓣中红色色素沉着㊁红色斑点和条纹性状的形成,而唇瓣中底色和斑点的着色则由PeMYB12和PeMYB11决定,据此可以推测,MYB转录因子家族表达的时空特异性可能与蝴蝶兰花被片复杂多样着色模式的形成密不可分㊂随后,进一步证明了PeMYB11转录因子对黑色花朵上深紫色斑点的形成起调控作用[18]㊂随着基因组㊁转录组㊁代谢组㊁蛋白组等多组学时代的到来,花色相关功能基因的挖掘将是未来兰花研究的热点[19],未来将继续加深对蝴蝶兰花斑㊁唇色等花色形成机理的探索㊂蝴蝶兰花部性状在杂交后代中遗传研究虽取得了一定的进展,但仍存在不足之处㊂蝴蝶兰花色受多基因调控,机理复杂,后续将继续探索不同品种杂交后代观赏性状的遗传规律,为杂交育种选择亲本提供参考,为目标性状定向育种提供依据㊂参考文献[1]张玉娟,朱根发.蝴蝶兰[M].北京:中国农业出版社,2011.[2]孔霞,任羽,孙玲燕,等.蝴蝶兰杂交后代观赏性状遗传分析[J].分子植物育种,2021,19(21):7168-7178.[3]丁朋松,郭文姣,孙纪霞,等.蝴蝶兰杂交育种研究进展[J].安徽农业科学,2014,42(7):1954-1956.[4]吕复兵,陈和明,朱根发,等.蝴蝶兰新品种 红桃 [J].园艺学报,2013,40(1):195-196.[5]吕复兵,陈和明,肖文芳,等.蝴蝶兰新品种 滴彩 [J].园艺学报,2018,45(2):405-406.[6]陈春,庄西卿,陈孝丑,等.蝴蝶兰新品种 红天鹅 [J].园艺学报,2020,47(S2):3049-3050.[7]李佐,肖文芳,陈和明,等.蝴蝶兰杂种一代的花朵材质㊁花斑及花型遗传分化的初步探讨[C]//张启翔.中国观赏园艺研究进展2015.北京:中国林业出版社,2015:76-79.[8]李佐,肖文芳,陈和明,等.蝴蝶兰Phalaenopsis FrigdaasOxford 和Phal.SH49正反交后代观赏性状遗传倾向研究[J].热带作物学报,2017,38(1):4-11.[9]宫子惠,张英杰,张京伟,等.蝴蝶兰杂交F1代花部性状分离规律分析[J].分子植物育种,2021,19(8):2712-2718.[10]陈和明,朱根发,吕复兵,等.蝴蝶兰新品种DUS测试指南的研制[J].中国农学通报,2014,30(10):182-185.[11]Internationalunionfortheprotectionofnewvarietiesofplants(UPOV).TG/213/1.Phalaenopsis(PhalaenopsisBlume.)guidelinesfortheconductoftestsfordistinctness,uniformityandstability[EB/OL].[2022-03-17].http://www.upov.int/edocs/tgdocs/en/tg213.pdf.[12]操君喜,陈和明,吕复兵,等.P42ˑP39蝴蝶兰F1代性状分离研究[J].亚热带植物科学,2010,39(4):10-13.[13]李佐,肖文芳,陈和明,等.蝴蝶兰观赏目标性状在正反交后代中的表现[C]//张启翔.中国观赏园艺研究进展2016.北京:中国林业出版社,2016:183-186.[14]郭文姣,张英杰,刘学庆,等.蝴蝶兰 大辣椒 和 0436 杂交后代花部性状分离研究[J].中国农学通报,2017,33(20):55-60.[15]朱娇,孔维国,马蕾,等.大红花蝴蝶兰杂交后代观赏性状分离规律研究[J].中国农学通报,2018,34(32):70-77.[16]李佐,肖文芳,陈和明,等.蝴蝶兰Phalaenopsis FrigdaasOxford 和Phal.316杂交F1代性状分离研究[J].热带作物学报,2014,35(5):854-861.[17]HSUCC,CHENYY,TSAIWC,etal.ThreeR2R3⁃MYBtranscriptionfactorsregulatedistinctfloralpigmentationpatterninginPhalaenopsisspp.[J].Plantphysiology,2015,168(1):175-191.[18]HSUCC,SUCJ,JENGMF,etal.AHORT1retrotransposoninsertioninthePeMYB11promotercausesharlequin/blackflowersinPhalaenopsisorchids[J].Plantphysiology,2019,180(3):1535-1548.[19]郑清冬,王艺,欧悦,等.兰科植物花色相关基因研究进展[J].园艺学报,2021,48(10):2057-2072.64㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀安徽农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀2023年。

蝴蝶兰原球茎诱导研究进展

蝴蝶兰原球茎诱导研究进展

蝴蝶兰原球茎诱导研究进展范树国1,2,李应安1,邱 璐1,2,李国树1,2,杨海艳1,李易洲1,谢美华1,胡 超1(1.楚雄师范学院化学与生命科学系,云南楚雄675000; 2.滇中高原生物资源开发与利用研究所,云南楚雄675000) 摘要:对影响蝴蝶兰原球茎的诱导因素,包括外植体、培养基、生长调节剂、添加物和活性炭等进行了探讨。

关键词:蝴蝶兰;原球茎;诱导 中图分类号:S682.310.4+3 文献标志码:A 文章编号:1002-1302(2009)05-0054-04(上接第53页)[10]詹慧琴,额尔和花,张淑君,等.鸡催乳素基因内含子2RF LP检测及与产蛋性能关系的初步研究[G]//吴长信.家禽研究最新进展.青岛:吉林科学技术出版社,2003:30-32.[11]崔建勋,杜红丽,张细权.鸡催乳素基因序列多态及生物信息学分析[J].遗传,2005,27(2):208-214.[12]陈兴勇.皖西白鹅催乳素基因(PRL)编码区序列克隆及多态性分析的研究[D].合肥:安徽农业大学,2005.[13]王寿昆,吴 旭,王 宏,等.鸭催乳素基因外显子4单核苷酸多态性与就巢性状的相关分析[J].上海交通大学学报:农业科学版,2008,26(4):282-285.[14]吴 旭,李 昂,王寿昆,等.鸭催乳素基因外显子5多态性与就巢性状的关联分析[J].福建畜牧兽医,2008,30(5):6-9. [15]March J B,Shar p P J.Effect of active i m munizati on against recombi2nant-derived chicken p r olactin fusi on p r otein on the onset of br ood2 iness and phot oinduced egg laying in banta m hens[J].Journal of Rep r oducti on and Fertility,1994,101:227-233.[16]J iang R S,Xu G Y,Zhang X Q,et al.A ss ociati on of poly mor phis m sf or p r olactin and p r olactin recep t orgenes with br oody traits in chick2ens[J].Poultry Science.2005,84:4351-4357.[17]Bhattacharyya N,Banerjee D.Tanscri p ti onal regulat ory sequenceswithin the first intr on of the chicken apoli pop r otein A I(apoA I)gene [J].Gene,1999,234(2):371-380.[18]Cle ment J Q,W ilkins on M F.Rap id inducti on of nucleartranscri p tsand inhibiti on of intr on decay in res ponse t o the poly meraseⅡinhib2 it or DRB[J].J Mol B i ol,2000,299(5):1179-1191.[19]Mattick J S.lntr ons:evoluti on and functi on[J].Curr Op in GenetDev,1994,4(6):823-831.[20]Howe K J,A res M J r.I ntr on self-comp le mentarity enf orces exoninclusi on in a yeast p re-mRNA.Pr oc Nat Acad Sci,1997,94(23):12467-12472.[21]王金玉,陈国宏.数量遗传与动物育种[M].南京:东南大学出版社,2004.[22]吴井生,朱孟玲,邢 军,等.猪骨素O PN基因多态性的研究[J].江苏农业科学,2008(5):65-68. 蝴蝶兰(Phalaenop sis)为兰科(O rchidaceae)蝴蝶兰属植物。

蝴蝶兰原球茎状体的诱导及增殖

蝴蝶兰原球茎状体的诱导及增殖

蝴蝶兰原球茎状体的诱导及增殖
马杰;何蔚荭;崔波
【期刊名称】《河南科学》
【年(卷),期】2005(023)001
【摘要】利用蝴蝶兰的植株的不同部位,采用不同培养基对其进行诱导和增殖效果比较.结果表明,香蕉泥和椰胚乳(CM)对于蝴蝶兰外植体原球茎状体的形成具有明显的促进作用.在MS+6-BA 5.0mg/L+NAA2.0mg/L+香蕉泥10.0%+AC 0.3%的培养基中,叶片原球茎状体的诱导率可达48.6%;花梗腋芽和茎尖适宜的诱导培养基配方均为MS+6-BA5.0mg/L+NAA2.0mg/L+CM15.0%+AC 0.3%,其原球茎状体的诱导率分别达72.2%和64.3%.
【总页数】3页(P51-53)
【作者】马杰;何蔚荭;崔波
【作者单位】河南省科学院生物研究所,河南,郑州,450008;河南省科学院生物研究所,河南,郑州,450008;郑州师范高等专科学校,河南,郑州,450044
【正文语种】中文
【中图分类】Q94-3
【相关文献】
1.蝴蝶兰V31品种原球茎诱导增殖培养研究 [J], 廖福琴
2.蝴蝶兰种子无菌播种中诱导增殖原球茎试验研究 [J], 余慧琳;胡月华;朱一仪
3.不同激素对蝴蝶兰原球茎诱导与增殖的影响 [J], 杨艳梅;李国树;范树国;徐成东
4.不同激素水平对蝴蝶兰原球茎状体增殖影响 [J], 叶晓青;谢东;魏书;李惠芬;江卫华
5.蝴蝶兰花梗节间切段的类原球茎诱导与增殖 [J], 苏家乐;陈尚平;汤久顺;何小弟;李晓刚;姜维华
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农杆菌介导的蝴蝶兰、萼脊兰ACC氧化酶反义基因遗传转化研究

农杆菌介导的蝴蝶兰、萼脊兰ACC氧化酶反义基因遗传转化研究

农杆菌介导的蝴蝶兰、萼脊兰ACC氧化酶反义基因遗传转化研究本研究以蝴蝶兰(Phalaenopsis hybrid)和萼脊兰(Sedirea japonica (Linden et Rchb. f.) Garay et Sweet)为材料,分别建立了蝴蝶兰和萼脊兰的再生系统,优化了两种兰花的遗传转化条件。

克隆了蝴蝶兰和萼脊兰的ACC氧化酶的基因片段,构建了ACC氧化酶反义基因的植物表达载体。

采用根癌农杆菌介导法,将ACC氧化酶反义基因导入蝴蝶兰和萼脊兰植株内,并对蝴蝶兰和萼脊兰的转化植株进行了GUS组织化学染色检验和筛选,还对蝴蝶兰的转化植株进行了PCR和Southern杂交分子检验。

主要研究结果如下:1.蝴蝶兰再生系统的条件优化。

分别以蝴蝶兰的胚、花梗节间切片和叶片为材料,通过对不同培养基、不同激素及组合、不同添加物等影响因子的试验,优化了蝴蝶兰植株再生系统建立的条件。

结果表明,蝴蝶兰胚非共生萌发适宜的培养基为:1/3MS+ KT 0.5mg/L + CW15.0% + AC 2.0g/L+蔗糖20.0g/L +琼脂8.0g/L;花梗节间切片诱导类原球茎体(PLBs)和无菌苗叶片诱导原球茎的适宜培养基为:Hyponex1 2.5g/L + Hyponex2 0.5g/L+TDZ 1.0mg/L +2,4-D 1.0mg/L +蔗糖30.0g/L + CW 10% + AC 2.0 g/L。

丛生芽增殖培养基以改良Kyoto培养基为宜:Hyponex 1 2.5g/L + Hyponex2 0.5g/L + 6-BA 5.0mg/L +蔗糖30.0g/L + CW 10% + AC 2.0 g/L;生根培养基:Hyponex1 3.0g/L + NAA 0.5 mg/L + AC 2.0 g/L +蔗糖20.0g/L +琼脂8.0g/L。

2.以萼脊兰的胚为材料,通过非共生萌发,获得了萼脊兰的原球茎。

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o eid x so lb ec r o y rt, u r s, e u igc r o y ae S nt e e f ou l ab h d ae s co e r d cn ab h d t, OD cii n n ixd t ec p bl , h n s r a t t a da t iai a a i t vy o v i y
DOI 0 3 6 / a . 3 . 0 7 7 :1 . 9 9 g b 0 0 0 0 0
A sr c I i p p r rt a dP aanp i P B (rtc r l eb d ) t a I A A n oh r- b ta t nt s a e pe et h l o s L h we r e e s poo om— k o y wi C C2 B a db t,e i h ,


C C, A a I和 BA 溶液及 两 者 联合 分 别预 处 理蝴 蝶 兰类 原 球茎 (L ) 脱 水 , 比 P B脱 水 前后 的成 P B后 对 L
活 率 、 水 保护 系统 指标 变化 及 C z与 AB 脱 a + A信 号传 导 关系 。结 果表 明 , a 1和 AB 溶液 及 两者联 合 预处 C C: A 理 均 能 明显提 高 P B脱 水后 的成 活率 。 a 1和 AB L C C A溶 液对 可溶 性糖 、 蔗糖 、 原糖 、O 还 S D和 总抗 氧化 能力 有 相 同的 效应趋 势 , 对可 溶性 蛋 白、 稳定 蛋 白含量 及 P 热 OD、 AT活性 的作用 趋势有 所 差异 。 A 溶液 提高 C AB P B耐 脱 水 性 的 能 力被 胞 质 C 2螯合 剂 B P A/M 和 钙 调 蛋 白拮 抗 剂 氯 丙 嗪 所 削 弱 , a 预 处 理 提 高 L a + AT A C2 + P B耐脱 水 能力被 AB L A合 成抑 制剂 环 丙嘧 啶醇 削弱 。在 蝴蝶 兰 P B 的耐脱 水性诱 导 中 , a 和 A A 具有 L C2 + B 基 本相 同的生 理生 化基础 , 信 号传递 中两者 互相 关联 , a 1取代 A A 用于 提 高 P B耐脱 水性是 可行 的 。 在 C C: B L 关键 词 蝴蝶兰 类 原球 茎, a , BA, 处理 , 水保 护系 统, 号传 导 C 抖A 预 脱 信
基 因组学与应用生物学 ,0 1 第 3 2 1 年, O卷, 6期 , 7 7 7 3页 第 第 0—1
Ge o c n p id Bi lg , 0 , 1 0 No 6 7 7 7 n mi sa d Ap l o o y 2 1 Vo . , . , 0 — e 1 3 1 3
r s c i l bu t e pe tt he i d x s o o u e p o en,h a —tbl r t i e pe t y, twih r s c o t n e e fs l bl r t i ve e tsa e p o en,POD n a d CAT,t i mp c heri a t
Li uFu i p ng Fja stto S brpcl t y F j nKe a oaoyo P yilg dBice s yfr u t pcl l tXime ,6 0 6 ui I tue f u t iaBoa ,ui yL b rtr f h s o ya oh mir br iaPa , a n 3 10 nni o n a o n t oS o n C rep n ige i fl 5 3 @s acr orso dn mal pi 3 4 i . n , u n o
sg a r n d ci n r lt n h p b t e 2 n i n l a s u t e a i s i ewe n Ca t o o +a d ABA. h e u t h we u v v l a e f e y r t d P B p e T e r s l s o d s r i a t so h d a e L r — s r d t a e t C1 ABA n o h ali c e s d sg i c n l . C1 a d ABA x ii d smi ri a t e d n i s r td wi Ca 2 e h , a d b t l n r a e i n f a t Ca 2 n i y e h b t i l e a mp c n e ce t
Co a io n t e De y r t n P o e t n S se sa d S g a r n d c mp rs n o h h d ai r t ci y t m n i n lT a s u — o o t n Re ai n h p o C1 a d ABA r te t n n t eP aa p L i lto s i f o Ca 2 n P er ame t h le o ssP B o h n i
s e tvey n o p ci l ,a d c mpa e u v v lr t ,d h d ai n p o e to y tm e o e a fe e ic to r d s r i a ae e y r to r t ci n s se b f r nd a trd sc ai n,a l a he swer te
C 2 A A预处理蝴蝶兰类原球茎 的脱水保护系统 比较及信号传导关系 a、 B +
刘 福平
福建省亚热带植物研 究所, 福建省亚热带植物生理生化重点公共实验室, 厦门,6 0 6 3 10 通讯 邮件,pi5 3 @s a o fl 3 4 i . r u n cn
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