肠肌灌流实验 豚鼠
豚鼠的基本操作(中文)
e. 固定插管.
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Ⅲ. 头静脉穿刺（输液、给药） ❖(1) 位置: 肱二头肌外侧缘
❖(2)方法:
a. 剪开上臂外侧皮肤; b. 用镊柄按压近心端; c. 用头皮针以15度角向心刺入
5 操作步骤
❖备皮: 粗剪刀剪毛 ❖切口: 颈正中切口 ❖钝性分离: 逐层分
离皮下筋膜和肌肉 直至暴露气管。
注意：操作过程中要 保持正中位置，如 果位置偏离中线易 损伤血管
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Ⅰ. 气管插管（改善呼吸，保持通畅）
4 麻醉（Anesthesia）
❖5.麻醉深度的判断: 呼吸的速度和深度 角膜反射 肌张力 疼痛反应
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5 固定（Fixation）
仰卧位
双活结
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Ⅱ. 颈总动脉分离与插管（取血样、放血）
❖ 方法:
a. 游离颈总动脉3-4 cm, 备线2根;
b. 先用线结扎远心端，再 用另一线拖个血管钳阻 断近心端；
c. 靠远心端用留置针针芯 刺破血管，然后将软管 套入血管;
❖3. 能够熟练操作豚鼠气管插管、颈总动脉 留置针穿刺和头静脉穿刺。
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离体肠管实验操作步骤
一、实验目的1. 掌握离体肠平滑肌器官的实验条件；2. 观察药物对离体肠平滑肌的作用；3. 学习药物相互作用的基本方法；4. 熟悉氯化钡的作用与受体关系。
二、实验原理离体肠管实验是通过将动物肠道取出，在体外条件下研究肠道平滑肌的生理和药理特性。
实验过程中，通过观察肠管的收缩和舒张变化，分析药物对肠平滑肌的影响，从而了解药物的药理作用。
三、实验材料1. 实验动物：家兔或豚鼠；2. 离体肠管：空肠、回肠；3. 实验仪器：手术器械、显微镜、恒温箱、生理盐水、药物、氯化钡、生理盐溶液；4. 实验试剂：0.9%氯化钠溶液、药物溶液、氯化钡溶液。
四、实验步骤1. 实验动物处死与解剖（1）将实验动物（家兔或豚鼠）用空气栓塞法处死；（2）打开腹部，暴露出空肠和回肠；（3）剪取空肠和回肠各一段，长度约5cm。
2. 离体肠管的制备（1）将离体肠管置于含有0.9%氯化钠溶液的保温箱中；（2）用镊子轻轻去除肠系膜和脂肪，保留肠壁；（3）将肠管两端用线扎紧，形成一段管道。
3. 离体肠管实验装置的搭建（1）将制备好的离体肠管插入充满生理盐水的管道中；（2）将管道两端分别与生理盐水和药物溶液连接；（3）将实验装置置于恒温箱中，调节温度至37℃。
4. 药物对离体肠管的作用观察（1）观察肠管的自然收缩和舒张现象；（2）依次加入不同浓度的药物溶液，观察肠管的收缩和舒张变化；（3）记录肠管在不同药物作用下的收缩幅度、舒张幅度、收缩频率等数据。
5. 药物相互作用实验（1）将不同浓度的药物溶液分别加入生理盐水和肠管中；（2）观察肠管的收缩和舒张变化，分析药物相互作用；（3）记录肠管在不同药物相互作用下的收缩幅度、舒张幅度、收缩频率等数据。
6. 氯化钡的作用与受体关系实验（1）在肠管中加入氯化钡溶液，观察肠管的收缩和舒张变化；（2）记录肠管在氯化钡作用下的收缩幅度、舒张幅度、收缩频率等数据；（3）分析氯化钡与受体的关系。
7. 实验数据整理与分析（1）将实验数据整理成表格；（2）运用统计学方法对实验数据进行处理；（3）分析实验结果，得出结论。
药物对离体豚鼠回肠收缩的作用
实验报告
针对实验数据，进行结果描述 针对实验数据， 总结Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2分别对离体 豚鼠回肠有什么作用。 2. 讨论和结论 分析Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2 对离体豚鼠 回肠平滑肌的作用机理。 3. 参考文献 如：[1]陆源，夏强. 生理科学实验. 浙江大学出版社， 2004，245-247
肠管
观察项目
记录肠段基础张力，收缩张力，收缩频率。 记录肠段基础张力，收缩张力，收缩频率。 基础张力 加入10 换液。 加入 -2 g/L Ach 0.2ml，观察并记录曲线，作用明显时换液。 ，观察并记录曲线，作用明显时换液 重复以上Ach剂量，待收缩到最高点时加入1 g/L阿托品 0.2ml， 剂量，待收缩到最高点时加入 重复以上 剂量 阿托品 ， 观察曲线，此时不换液，待曲线基本稳定后， 观察曲线，此时不换液，待曲线基本稳定后，再加入相同量的 Ach，观察并记录收缩曲线，换液。 ，观察并记录收缩曲线，换液。 加入10 换液。 加入 -2 g/L组胺 0.3ml，作用明显时迅速换液。 组胺 ，作用明显时迅速换液 预先加入10 扑尔敏0.2 ， 预先加入 -2 g/L扑尔敏 ml，5 min后（不换液）加入同量组 扑尔敏 后 不换液）加入同量组 换液。 胺，观察并记录收缩曲线 ，换液。 加入10 g/L BaCl2 溶液1ml，当作用达到最高点，加入1 g/L阿托 加入 溶液 ，当作用达到最高点，加入 阿托 品 0.2 ml，观察并记录收缩曲线。 ，观察并记录收缩曲线。
标本准备（ ） 标本准备（2）
取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对 取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对 角处分别用缝针穿线 并打结。一端系于浴槽固定钩 分别用缝针穿线， 角处分别用缝针穿线，并打结。一端系于浴槽固定钩 另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 张力换能器的悬臂梁上 上，另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 换能器
离体回肠实验报告
实验日期：2023年4月15日带教教师：张伟小组成员：李明、王芳、张华、赵磊专业班级：医学实验技术专业2021级一、实验目的1. 了解离体回肠的基本结构和生理特性。
2. 学习离体回肠实验的操作方法和注意事项。
3. 探究不同药物对离体回肠平滑肌收缩的影响。
二、实验原理离体回肠实验是研究消化系统生理和病理的重要方法。
通过将豚鼠回肠置于人工生理盐水中，模拟体内环境，观察回肠平滑肌的收缩情况，可以了解药物对肠道平滑肌的影响。
三、实验材料与仪器1. 材料：豚鼠回肠、生理盐水、氯化钙、氯化钾、葡萄糖、肾上腺素、阿托品等。
2. 仪器：手术显微镜、手术器械、注射器、试管、恒温水浴箱、电生理记录仪等。
四、实验方法1. 将豚鼠处死，取出回肠，置于生理盐水中，去除脂肪和结缔组织。
2. 将回肠剪成长约2cm的肠段，固定于手术显微镜下。
3. 将肠段一端与注射器相连，另一端暴露于空气中。
4. 向肠段内注入生理盐水，观察回肠平滑肌的收缩情况。
5. 分别加入氯化钙、氯化钾、葡萄糖、肾上腺素、阿托品等药物，观察回肠平滑肌的收缩变化。
6. 记录不同药物对回肠平滑肌收缩的影响。
五、实验结果1. 在生理盐水中，离体回肠平滑肌呈现自发性收缩。
2. 加入氯化钙后，回肠平滑肌收缩幅度增大，频率加快。
3. 加入氯化钾后，回肠平滑肌收缩幅度减小，频率减慢。
4. 加入葡萄糖后，回肠平滑肌收缩幅度减小，频率减慢。
5. 加入肾上腺素后，回肠平滑肌收缩幅度增大，频率加快。
6. 加入阿托品后，回肠平滑肌收缩幅度减小，频率减慢。
六、实验讨论1. 生理盐水中的离体回肠平滑肌呈现自发性收缩，说明肠道平滑肌具有一定的自律性。
2. 氯化钙和肾上腺素可增强回肠平滑肌的收缩，可能与细胞膜上的钙离子通道和肾上腺素受体有关。
3. 氯化钾和葡萄糖可抑制回肠平滑肌的收缩，可能与细胞膜上的钾离子通道和葡萄糖代谢有关。
4. 阿托品可抑制回肠平滑肌的收缩，可能与副交感神经系统的功能有关。
第六章 综合机能学实验
第六章综合机能学实验实验 6. 1 影响豚鼠离体气管平滑肌的因素【实验目的】采用豚鼠气管来观察各种因素对气管平滑肌（tracheal smooth muscle）的影响，以掌握离体气管平滑肌实验方法和加深对气道在肺通气（pulmonary ventilation）中作用的认识。
【实验原理】气道是实现肺通气的器官。
气道阻力（airway resistance）是非弹性阻力的主要成分，占非弹性阻力的80%-90%。
而气道口径是影响气道阻力的重要因素。
因此气道口径的改变对通气阻力有很大的影响，从而影响肺通气。
常用的实验动物中，豚鼠的气管对药物的反应较其它动物更敏感，更接近于人的气管，因此豚鼠的气管是常用的实验标本（表6-l）。
表6-1 不同动物的气管的敏感性（g／ml）收缩剂豚鼠人狗猫兔大白鼠乙酰胆碱10-710-510-9* 10-810-610-6组织胺10-710-510-6- - -注：* 狗的气管对乙酰胆碱极度敏感（10-9）。
- 猫、兔和大白鼠的气管对组织胺不敏感。
【实验器材和药品】BL-420E生物机能实验系统、张力换能器、水浴箱、浴槽、Krebs－Henseleit( K-H )营养液、直剪刀、小镊子、棉线。
【实验对象】豚鼠【实验方法和步骤】1. 气管螺旋条制备取豚鼠（雄性为好）一只，350～500g重，股动脉放血致死。
取下气管，置于K-H液中，剥离外周组织后，将气管由一端向另一端螺旋形剪成条状，制备方法见图6-1。
剪成的整个螺旋长条，可作一个实验标本，也可以用半段螺旋条作一标本。
在气管螺旋条下端穿线固定于L型玻勾上，上端穿线连至张力换能器并用BL-420E生物机能实验系统进行记录。
图6-1 气管螺旋条制备法2. 仪器连接和系统操作将张力换能器输出线连入BL-420E系统的1通道，选择“输入”菜单中的“1通道”，在“1通道”子菜单中选择“张力”。
适当调节增益、滤波等参数获取最佳实验效果。
小肠平滑肌的生理特性和药物的影响
小肠平滑肌的生理特性和药物的影响姓名：学号：班级：一、实验目的1.学习离体肠平滑肌器官灌流的实验方法。
2.观察豚鼠离体小肠平滑肌的一般生理特性。
3.观察药物对豚鼠离体小肠平滑肌生理特性的影响。
二、实验材料1.实验动物：豚鼠2.器材：小肠平滑肌恒温水浴装置，球胆（气泵或氧气筒），张力换能器，烧杯，温度计，注射器，注射针头，棉线，手术剪，培养皿，滴管。
3.药品：台式液，10-5mol/L乙酰胆碱，10-4mol/L苯海拉明，10-5mol/L磷酸组胺，10-3mol/L硫酸阿托品，1%BaCl2溶液。
三、实验方法和步骤1.豚鼠离体肠平滑肌的制备以手倒提豚鼠，用木槌猛击其头后部令其急死，立即剖开腹腔，轻轻剪取回肠，迅速置于冷台式液中，除去肠系膜，并将肠管剪成数段，用台式液将肠内容物冲洗干净，然后剪成小段备用。
注意操作应轻柔。
2.实验装置的准备此装置由恒温、供气、供液和排液以及记录部分组成。
浴槽内水温由恒温装置控制在37±0.5℃。
浴管与浴槽相连，以使浴管内营养液保持同样的恒温。
气源（充气气囊或气泵等）与浴管相连，气流量以1～2个小气泡为宜。
浴管下端与排液管相连，其上端管口处可随时充入新的恒温营养液。
3.标本连接及记录轻取一段标本，一端用线系在装置的小钩上，对角线方向将另一端用与张力换能器相连的小钩钩住，慢慢放入浴管中并调节其紧张度至适宜，此时标本通过张力换能器与计算机相连。
标本连接好后向浴管内充入37±0.5℃营养液，适应10~15min后，描记一段离体回肠平滑肌正常收缩曲线。
4.如果环境适宜，标本存活，适应10～15min后，描记一段正常曲线，然后按如下步骤给药。
5.加入药物观察并记录曲线1)加入10-5mol/L乙酰胆碱0.2ml，待收缩到最高点时，加入10-3mol/L硫酸阿托品0.1ml，然后再加入同量的乙酰胆碱，观察结果。
实验完毕后冲洗浴管三次。
2)加入10-5mol/L磷酸组胺溶液0.3ml，待收缩到最高点时，加入10-4mol/L苯海拉明0.3ml，3min后再加入同量的磷酸组胺溶液，观察结果。
实验15药物对离体豚鼠回肠的作用 (2)
药物对离体豚鼠回肠的作用【摘要】目的：了解胆碱能神经递质乙酰胆碱（acetylcholine，ACh）和局部炎症介质组胺（histamine）对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受体的激动作用，以及它们的受体拮抗剂阿托品（atropine）和扑尔敏（chlorpheniramine）的阻断作用。
方法：取离体豚鼠回肠1cm，利用RM6240系统和张力换能器，分别检测乙酰胆碱，组胺，阿托品，扑尔敏和BaCl2作用前后，回肠平滑肌张力的变化。
结果：乙酰胆碱和组胺能使离体豚鼠回肠平滑肌的收缩幅度增高,用阿托品处理标本后，乙酰胆碱的收缩平滑肌效应被阻断（P<0.01）；用扑尔敏处理标本后，组胺的收缩平滑肌效应被阻断（P<0.01）；BaCl2能使离体豚鼠回肠平滑肌大幅度收缩，再用阿托品处理标本，BaCl2的收缩平滑肌效应被部分阻断。
结论：乙酰胆碱为M胆碱受体激动药，组胺为H1受体激动药，BaCl2为肌肉兴奋剂，三者分别作用与回肠平滑肌时，使平滑肌收缩。
阿托品为M胆碱受体阻断药，扑尔敏为H1受体阻断药，两者可以分别阻断乙酰胆碱和组胺对平滑肌的激动作用。
【关键词】乙酰胆碱组胺阿托品扑尔敏 M胆碱受体 H1受体胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势，小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体，产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用，兴奋胃肠道平滑肌。
Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用，却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合，从而产生抗胆碱作用。
Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用，豚鼠尤其敏感。
Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂，能阻断histamine与H1受体的结合，从而产生抗histamine作用。
BaCl2为肌肉兴奋剂，能够使平滑肌强烈收缩[1]。
1.材料和方法1.1 实验动物豚鼠1只（雄性，健康）1.2 仪器离体装置，麦氏浴槽（25ml），HSS－1（B）超级恒温器(成都仪器厂)，张力换能器，RM6240BD型生物信号采集处理系统（成都仪器厂），移液器20～200μl,100～1000μl 各一把（Finnipipette）,手术器械一套。
药物对离体豚鼠回肠收缩的作用
详细描述
平滑肌细胞的动作电位是肌肉收缩的 电生理基础，药物可以通过改变平滑 肌细胞的动作电位，影响肌肉细胞的 兴奋性和收缩性，进一步影响离体豚 鼠回肠的收缩活动。
04 药物作用效果评价
药物作用的量效关系评价
量效关系
药物作用的强弱与其剂量或浓度呈正相关，通过观察不同剂量或浓 度的药物对离体豚鼠回肠收缩的影响，可以确定药物的量效关系。
长的段。
药物处理
将待测试的药物加入灌流液中 ，观察回肠收缩情况。
数据记录
使用生物信号采集系统记录回 肠收缩的幅度和频率，观察药 物对回肠收缩的作用。
结果分析
对实验数据进行统计分析，比 较不同药物对回肠收缩的影响
。
02 实验结果
药物对离体豚鼠回肠收缩的影响
01
药物对离体豚鼠回肠收缩具有显著影响，可引起收缩幅度和频 率的变化。
生理盐水
用于维持离体回肠的正常生理环境。
药物
待测试的药物，如阿托品、肾上腺素等。
实验设备
01
02
03
离体器官灌流系统
用于维持离体器官的正常 生理环境，提供恒温、恒 流的灌流液。
生物信号采集系统
用于记录离体器官的收缩 活动。
显微镜
观察离体器官的形态变化。
实验方法
离体器官制备
将豚鼠处死后取出回肠，去除 周围组织，将回肠剪成约2cm
02
某些药物可增强回肠收缩，而另一些药物则可能抑制收缩。
不同药物对回肠收缩的作用机制可能不同，涉及神经调节、平
03
滑肌细胞膜电位变化等多种因素。
不同浓度药物对回肠收缩的影响
1
随着药物浓度的增加，其对回肠收缩的影响程度 也会发生变化。
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M胆碱受体和H1受体激动药对离题豚鼠回肠的作用实验步骤1．实验装置准备和仪器参数设置（1）离体肠管描记装置的准备见图7-15-1，麦氏浴槽中加固定量的台氏液，调节超级恒温器的温度，使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5℃。
通气管接95%O2＋5%CO2 混合气体管道。
用螺丝夹调节气体管道的气体流量，调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。
（2）张力换能器固定于铁支柱上，换能器输出线接微机生物信号处理系统，仪器参数设置：RM6240系统：点击“实验”菜单，“自定义实验项目”菜单中的“肠肌记录”。
系统进入该实验信号记录状态。
仪器参数：通道时间常数为直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率200Hz，扫描速度1s/div。
2．标本准备（1）取豚鼠一只，用木槌击其头部致昏死，立即剖开腹腔，找到回盲部，然后，在离回盲部1cm 处剪断，取出回肠约10cm左右一段，置于氧饱和的台氏液培养皿中，沿肠壁除去肠系膜，然后将回肠剪成数小段（约1~1.5cm），用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，换以新鲜台氏液备用。
注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能。
（2）取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角壁处，分别用缝针穿线，并打结。
注意保持肠管通畅，勿使其封闭。
肠管一端连线系于浴槽固定钩上，然后放入37℃麦氏浴槽中。
再将肠管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上，调节肌张力至2~3g（图7-15-1）。
【观察项目】1．待离体回肠稳定10~30分钟后，记录一段正常收缩曲线后，依次向麦氏浴槽中滴加下列药物。
加入一种药液后，观察2~3分钟，并连续记录肠管收缩曲线，然后用台氏液连续冲洗二次，待基线恢复到用药前的水平，随后记录一段基线。
再加入第二种药液。
浴槽液体的容量应相等。
2．加入10-2 g/L ACh 0.2ml，观察并记录其收缩曲线，2~3分钟后换液。
3．重复以上Ach 剂量，待收缩达最高点时，加入1g/L atropine 0.2ml，观察并记录其收缩曲线。
不换液，待曲线降至基线或基本稳定后，再加入相同浓度的ACh，观察并记录其收缩曲线。
4．加入10-2 g/L histamine 0.3ml，待作用明显时(1~2分钟)，迅速换液。
使肠肌张力恢复正常。
5．加入10-3 g/L chlorpheniramine溶液0.2ml 5分钟后(不换液)，加入同量histamine，观察并记录其收缩曲线。
6．加入10g/L BaCl2 溶液1ml，观察其反应，当作用达最高点，肠段持续于痉挛收缩状态时，问题1.5个关键词小鼠M胆碱受体H1受体离体豚鼠回肠单因素方差分析2.哺乳类消化道平滑肌细胞膜上受体B8 受体,M3 受体,H1、H2、H3 受体小肠：虽然M3是调节环肌收缩的主要受体，M3和M2两者都参与纵肌的收缩，除m2和m3外，m1和m4也可在鼠和兔回肠中检测到。
大肠：Maeda et al在猪和鼠大肠组织曾检测到m2和m3两类受体mRNA有表达. M2和M3两型受体可能都参与结肠环肌的收缩，但M3的成分更大M胆碱能受体激动剂——毛果芸香碱、新斯的明、碘解磷定M胆碱能受体拮抗剂——阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、筒箭毒碱、3.M胆碱能受体激动对消化道平滑肌有何影响胆碱受体激动药（cholinoceptor agonists）与胆碱受体结合，激动受体，产生与递质乙酰胆碱相似的作用按其对不同胆碱受体亚型的选择性，可分：①M，N 胆碱受体激动药；②M 胆碱受体激动药；③N 胆碱受体激动药。
许多器官是由胆碱能和去甲肾上腺素能神经双重支配的，通常是其中一占优势。
例如，在胃肠道、膀胱平滑肌和腺体是以胆碱能神经占优势，而心肌收缩和小血管方面则以去甲肾上腺素能神经占优势。
静脉注射小剂量Ach 即能激动M胆碱受体，产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用，引起心率减慢、血管舒张、血压下降，支气管和胃肠道平滑肌兴奋，瞳孔括约肌和睫状肌收缩以及腺体分泌增加等兴奋平滑肌，使其收缩M胆碱受体拮抗剂对乙酰胆碱的效应影响M抗胆碱药物阻断M3受体组胺H1受体激动对消化道平滑肌影响激活H1受体，通过三磷酸肌醇、二脂酰甘油介导，兴奋支气管和胃肠道平滑肌，增加毛细血管通透性和扩张部分血管H1受体阻断剂扑尔敏对组胺效应的影响氯苯吡胺品是最强的抗组胺药之一，镇静作用较异丙嗪弱，也有一定的抗胆碱作用。
它与苯海拉明相似，但中枢抑制作用较轻。
可诱发癫痫，禁用于癫痫患者。
抑制平滑肌收缩M受体细胞内信息传递机制M3受体的细胞内信息传递机制M3受体主要激活Gq蛋白(又称Gp蛋白)［1，19］，Gq蛋白与磷脂酶C(PLC)相联系，磷脂酶C则可使膜上4，5-二磷酸肌醇磷脂(PIP2)水解，而产生三磷酸肌醇(IP3)和1，2-二酰基甘油(DG).在小肠平滑肌组织或单个细胞，M3受体一旦激活，胞内IP3水平在10s～15s内即达高峰(增加5倍)，而DG水平在30s内超过对照值的2倍. iP3水平的升高可使肌浆网内贮存Ca2+释放，胞浆内Ca2+增多后触发平滑肌收缩［13］. dG水平的升高可激活蛋白激酶C(PKC)，而使其发生重分布至胞膜，产生磷酸化功能［1］.具体机制虽尚不明了，但蛋白激酶C重分布可能使胞膜上受体介导的Ca2+通道激活，促使Ca2+内流；也可能使胞浆内腺苷酸环化酶的活性降低而使cAMP水平降低；也可直接磷酸化收缩蛋白而激活收缩机制.M2受体的细胞内信息传递机制如将m2基因转化至不含M受体的哺乳类动物细胞，并让其表达m2受体蛋白后，发现m2受体与许多细胞内信息传递通路相联系［18］，其中最为显著和肯定的是其降低细胞内cAMP水平的作用，这被许多实验所证实［1，11］.与心肌的M2受体一样，当细胞外配体如乙酰胆碱或其他类似物兴奋消化道平滑肌M2受体，便激活Gi蛋白，Gi蛋白则降低腺苷酸环化酶的活性，使胞内cAMP含量减少，促使平滑肌收缩，.有趣的是，M2这种间接加强收缩的作用只发生在肌肉事先被肾上腺素能β受体激动剂所致的舒张状态。
M2受体不论在正常或炎症时均参与小肠纵肌的收缩，而几乎不参与正常状态的环肌收缩，但可部分参与炎症时的环肌收缩. m2受体加强胃肠道平滑肌收缩的作用在正常情况下可能被M3受体直接产生收缩的效应所掩盖而不甚明显，但在应激情况下如炎症等，M2受体加强收缩的作用则明显表现出来.离体肠段如何与检测系统连接取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角壁处，分别用缝针穿线，并打结。
注意保持肠管通畅，勿使其封闭。
肠管一端连线系于浴槽固定钩上，然后放入37℃麦氏浴槽中。
再将肠管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上，调节肌张力至2~3g维持离体肠段收缩需要条件需要将离体的平滑肌进入生理盐水中，来保证细胞的形态正常。
需要将溶液中放入极微量的钙离子，来保证肌肉收缩的机能正常。
需要保证离体平滑肌结构的完整性，使整个反射弧畅通。
需要一定的电刺激台氏液组成成分台氏液配制1000ml台氏液含：NaCl 8.0g、10% KCL 2.0ml(0.2g)、10% MgSO4.7H2O 2.6ml(0.26g)、5% NaH2PO4 .2 H2O 1.3ml(0.065g)、NaHCO3 1.0g、1M CaCL2 1.8ml（0.2g）、葡萄糖1.0g。
Leagene 改良Tyrode's solution 也属于平衡盐溶液的一种，主要由氯化钠、磷酸盐、氯化钙、葡萄糖等组成，含HEPES。
经常用于哺乳动物离体肠肌实验并维持离体肠肌的正常生理功能、肌体灌流、清洗组织，缓冲能力较常规Tyrode's solution(DF0011)强为何台氏液可以维持离体肠段活性提供所需离子，能量，缓冲作用RM6240多通道信号采集处理系统的参数如何设置RM6240系统：点击“实验”菜单，“自定义实验项目”菜单中的“肠肌记录”。
系统进入该实验信号记录状态。
仪器参数：通道时间常数为直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率200Hz，扫描速度1s/div。
改变标本与张力换能器之间连线的张力会对实验结果产生何种影响过紧影响肠道平滑肌正常生理状态，过松对张力变化不敏感肠段标本与张力换能器之间的连线要与水平面保持垂直，松紧适当，并且使之不与浴槽壁相摩擦。
观察肠段运动方向和计算机屏幕上的记录曲线是否一致，即收缩时，曲线上升；舒张时，曲线下降。
否则，可将张力换能器旋转180°组胺、乙酰胆碱、氯化钡三试剂被随机贴上A/B/C瓶标，利用离体豚鼠回肠实验方法和工具阿托品、扑尔敏设计实验，鉴别上述药物乙酰胆碱为胆碱能神经递质，可明显兴奋兔肠平滑肌的M 受体，使其收缩幅度、张力、蠕动增加；氯化钡不作用于受体，而是直接作用于肠管，使肠管受到钡离子的刺激后产生收缩痉挛；阿托品为阻断M 胆碱受体的抗胆碱药，能拮抗乙酰胆碱对平滑肌的M 样作用，但不能拮抗氯化钡对离体兔肠的收缩作用回肠，置盛有冷台氏液的培养皿中保存，将肠管剪成数段。
2、取离体兔肠一小段，置于浴槽内与张力换能器连接，在电脑中观察曲线变化。
3、鉴定药物（每次取0.2ml 滴入浴槽中）①依次往浴槽中滴入A、B、C、三种药物，每次只滴入一种药物，观察张力曲线变化。
注意每次加入新药物前要清洗兔肠。
②借助已经鉴定的药物继续鉴别，验证剩余药物。
对离体肠段的观察项目收缩曲线，处理前后收缩幅度的原始数据、频率、幅度和张力向台氏液中滴加试剂注意问题滴药时，不要碰触连接线，不要把药滴在管壁上，不要滴加在回肠上。
换液迅速在加药前，必须先准备好更换用的38℃台氏液。
每次加药出现效果后，必须立即更换浴槽内的台氏液，待肠段恢复正常活动后再观察下一个项目。
如果一次滴加时没有明显结果，可以适当追加一部分试剂为保持离体肠段的收缩活性，操作注意问题1) 每做一个离子或试剂对肠道的影响实验时，都要更换台氏液，并清洗干净保持肠道活性正常。
2) 所加的试剂的量不要过大，防止肠道受到不可恢复的破坏。
3）浴槽内台氏液要保持一定高度4）加药前必须准备好更换用的38℃台氏液5）标本安装好后，应在新鲜38℃台氏液中稳定5～10min，有收缩活动时即可开始实验6）游离及取出肠段时，动作要快，但要避免过度牵拉或使组织干燥而影响其活性。
整个过程应保持营养液恒温和通入O2。
实验结果属于何种数据类型计量资料实验数据适合何种统计分析方法双侧t-检验?离体肠段灌流实验影响因素有哪些实验室的温度、空气状况，操作的熟练程度，灌流液的配置情况，豚鼠本身的生理状态与整体实验相比，离体实验有何优点离体实验室将器官或细胞从体内分离出来，在一定条件下进行的研究。
离体实验具有以下特点：①条件易于控制；②操作简便，结果准确；③节约时间，提高实验效率。
离体实验三要素：①温度，38+/-0.5℃；②营养液；③气体：氧气，二氧化碳等。