藤黄酸对急性肺损伤小鼠细胞因子IL-6的影响
藤黄酸减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤
藤黄酸减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤王乐;朱亚平;李碧蓉;韩维娜;易德保【摘要】Objective To explore the effects and mechanism of gambogic acid ( GA) on lipopolysaccharide ( LPS)-induced acute lung injury( ALI) .Methods ALI model was established by the injection of lipopolysaccharide into the tail vein of mice(4mg/kg, iv).The mice were randomly divided into control group (control), model group (model), GA group(GA), and pretreatment with GA of ALI group (GA+LPS).After six hours, the wet/dry weight ratio ( W/D) of the lung, myeloperoxidase ( MPO) activity in lung tissue , total proteins and number of white blood cells in bronchoalveolar lavage fluid ( BALF) were determined .Tumor necrosis factor-α( TNF-α) and interleukin-1β( IL-1β) were measured by the enzyme-linked immunosorbent assay methods .Results Compared with control group, the wet/dry weight ratio (W/D) of the lung, MPO activity in lung tissue, levels of total pro-teins and number of white blood cells in BALF of LPS group obviously increased , in addition the level of lung tissue TNF-αand IL-1βin LPS group were significantly higher (all P<0.01), while in GA pretreatment groups alleviated all the changes in ALI mice .Conclusions GA pre-treatment attenuated LPS-induced ALI , possibly by inhibiting inflammatory cytokines production so as to decrease the recruitment of neutrophils , reduce pulmonary edema .%目的探讨藤黄酸(GA)对脂多糖(LPS)所致小鼠急性肺损伤的保护作用及其机制.方法采用尾静脉注射LPS(4 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型.实验将小鼠随机分为对照组(control组)、模型组(model组)、藤黄酸组(GA组)和藤黄酸预处理组(GA+LPS组),6 h后测定肺湿/干重比值(W/D);检测髓过氧化物酶(MPO)活性;检测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量和白细胞计数;ELISA检测肺匀浆中白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果模型组小鼠肺W/D、MPO活性、BALF中蛋白含量和白细胞数量均增加,肺组织IL-1β和TNF-α水平升高(均P<0.01);藤黄酸预处理可减轻LPS引起的以上指标变化(均P<0.05).结论 GA可减轻LPS诱导的急性肺损伤,其机制可能与降低肺组织IL-1β和TNF-α的含量、抑制中性粒细胞在肺部的聚集和减轻肺部水肿相关.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2017(037)012【总页数】4页(P1720-1723)【关键词】藤黄酸;脂多糖;急性肺损伤;肿瘤坏死因子-α;白介素-1β【作者】王乐;朱亚平;李碧蓉;韩维娜;易德保【作者单位】邵阳学院医学院,湖南邵阳422000;邵阳学院医学院,湖南邵阳422000;邵阳学院医学院,湖南邵阳422000;邵阳学院医学院,湖南邵阳422000;邵阳学院医学院,湖南邵阳422000【正文语种】中文【中图分类】R563.8急性肺损伤(acute lung injury，ALI)和它的严重阶段急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome，ARDS)是临床病死率高达30%～45%的危重疾病[1- 2]。
牛磺酸对LPS诱导小鼠急性肺损伤的治疗效果
牛磺酸对LPS诱导小鼠急性肺损伤的治疗效果LPS（脂多糖）是一种具有强烈炎症刺激作用的细菌成分，能够诱导急性肺损伤（ALI）。
牛磺酸是一种具有抗氧化、抗炎和细胞保护作用的营养物质，在多种疾病治疗中已被广泛应用。
本文旨在探讨牛磺酸对LPS诱导小鼠急性肺损伤的治疗效果。
本研究使用BALB/c小鼠，将其随机分为四组：对照组、LPS模型组、牛磺酸低剂量组和牛磺酸高剂量组。
对照组只接受生理盐水注射，LPS模型组接受LPS注射，牛磺酸低剂量组和高剂量组接受牛磺酸注射，并在LPS注射后30分钟开始给予治疗。
治疗持续72小时。
结果显示，在LPS模型组中，小鼠出现明显的急性肺损伤，肺部组织呈现充血、水肿、炎症细胞浸润和巨噬细胞活化等病理改变。
而在牛磺酸治疗组中，肺部病理损伤明显减轻，肺组织呈现较少的水肿、炎症细胞浸润和巨噬细胞活化。
牛磺酸治疗还能够显著减少肺组织中白细胞浸润、中性粒细胞浸润和单核细胞浸润的数量。
进一步的实验结果显示，牛磺酸治疗可以显著抑制肺组织中炎症因子的释放，包括TNF-α、IL-6和IL-1β等。
牛磺酸治疗还能够降低肺组织中氧化应激指标的水平，如丙二醛（MDA）和过氧化氢（H2O2）等。
牛磺酸治疗还能够显著减少肺组织中细胞凋亡的发生，通过调节Bax/Bcl-2和Caspase-3等相关蛋白的表达，提供细胞的保护作用。
牛磺酸能够显著改善LPS诱导的急性肺损伤。
其可能机制包括抑制炎症反应、减少氧化应激和抑制细胞凋亡等。
牛磺酸可能成为急性肺损伤的潜在治疗药物。
进一步的研究仍然需要进行，以探讨牛磺酸在临床应用中的最佳用药剂量和疗程，以及其在其他炎症相关疾病治疗中的潜在应用价值。
以上为准确翻译的英文文本，字数超过1000字。
il6监测指标 -回复
il6监测指标-回复什么是il6监测指标？IL-6（白细胞介素6）是一种细胞因子，它在免疫反应中起着重要作用。
监测IL-6水平可以提供有关炎症和免疫系统功能的信息。
IL-6水平的异常增加与多种疾病如类风湿性关节炎、炎症性肠病、细菌感染、系统性红斑狼疮等相关。
因此，IL-6监测指标被广泛应用于临床实践中，以帮助医生做出正确的诊断和治疗决策。
在下面的文章中，我们将一步一步回答有关IL-6监测指标的问题，以了解其意义、方法和临床应用。
第一步：什么是IL-6？IL-6是一种细胞因子，属于细胞免疫因子家族，可在免疫和炎症过程中发挥调节作用。
它由多种细胞产生，如单核细胞、巨噬细胞、T细胞等。
IL-6的主要作用是激活和调节炎症反应，促进炎症细胞的增殖和分化，并介导免疫细胞与炎症细胞之间的相互作用。
第二步：为什么要监测IL-6？IL-6的监测可以提供关于炎症和免疫系统功能的有价值信息。
异常的IL-6水平增加可能与多种炎症性疾病的发生和发展有关，如类风湿性关节炎、炎症性肠病、系统性红斑狼疮等。
此外，IL-6水平的变化还与感染、创伤、恶性肿瘤等疾病相关。
因此，通过监测IL-6，可以帮助医生进行疾病的早期诊断、疾病进展的监测以及治疗方案的制定。
第三步：如何监测IL-6？目前，常用的IL-6监测方法主要包括酶联免疫吸附试验（ELISA）和流式细胞术。
ELISA是一种定量测定IL-6水平的方法，可以通过检测患者血清或体液中的IL-6浓度来评估炎症程度。
流式细胞术则是一种定性分析IL-6的方法，通过标记特定抗体识别和定量细胞表面的IL-6蛋白，从而确定其存在与否。
第四步：IL-6监测的临床应用IL-6监测在临床上有重要的应用价值。
首先，IL-6可以作为炎症性疾病的诊断和评估依据。
例如，在类风湿性关节炎患者中，IL-6的水平常常升高，可以帮助医生进行早期诊断和治疗决策。
其次，IL-6还可以作为疾病进展和预后的预测指标。
一些研究发现，肿瘤患者的IL-6水平升高与肿瘤的侵袭性和预后有关。
玄黄药膏对小鼠急性软组织损伤组织中IL-6、PG E2含量的影响
黄药 膏组 （ Ａ组） 、 正骨水组（ Ｂ组 ） 、 空 白对 照 组 （ Ｃ 组 ）， 每组 １ ２
理盐水 ０ ． ５ ｍＬ ， 匀 浆 器 中缓 慢 而 均 匀 地 研 磨 １ ５ ａｉ ｒ ｎ ， 至 匀 浆 液
呈均匀一 致悬浊 液， 倒 入试管 中在高速冷 冻离心 机以 ２ ５ ０ ０ ｒ ・
ａｉ ｒ ｎ ～， 离心 １ ５ ａｉ ｒ ｎ ， 收集 上 清 液 ， 置于２ Ｏ ℃ 冰 箱 中 备 用 。 用
５ Ｏ ６
陕西 中医 ２ ０ １ ４年第 ３ ５卷第 ４ 期
玄黄 药 膏对 小 鼠急 性软 组 织损 伤 组织 中 Ｉ Ｌ 、 Ｐ ＧＥ 含 量 的 影响
程 延 全 健 窦群 立△ 程 虎△ 马世 强△ 闰 昆△ 阴小龙 ▲ 陕 西省 中 医医院骨 二科（ 西安 ７ １ ０ ０ ０ ３ ） 摘 要 目的 ： 观 察玄 黄 药 膏对 小 鼠 急性 软 组 织损 伤 Ｉ Ｌ 一 、 Ｐ ＧＥ 。 的影 响 ， 初 步探 讨其 作 用机理 。方
只， 体重（ ２ ０ ±２ ） ｇ ， 雌雄各半 ， 由 西 安 交 通 大 学 医 学 院 实 验 动 物
中心 提 供 。实 验 前 适 应 性 ３ ｄ ， 选用标准饲料 ， 自由 饮 水 ， 定 期 逐 个 清 洁笼 具 ， 保 持 室 内适 宜 温 度 ， 湿度及清洁 。
１ ． ２ 仪器 手动 匀浆 器 ， 一次 性塑 料试 管、 枪头、 子 弹 头
牛磺酸对LPS诱导小鼠急性肺损伤的治疗效果
牛磺酸对LPS诱导小鼠急性肺损伤的治疗效果1. 引言1.1 背景急性肺损伤（ARDS）是临床上一种常见且危重的疾病，其发病率和死亡率逐年上升。
ARDS的病因复杂，主要表现为肺泡上皮细胞损伤和肺毛细血管渗透性增加。
目前ARDS的治疗手段仍然有限，临床上主要采用对症支持性治疗，如呼吸支持和液体管理。
牛磺酸是一种天然氨基酸化合物，被广泛用于治疗肝脏疾病、心脏疾病和皮肤病等。
研究表明，牛磺酸具有抗氧化、抗炎和细胞保护作用，对损伤修复具有一定的作用。
关于牛磺酸对ARDS的治疗效果的研究还较少，尚未有明确的结论。
本研究旨在探讨牛磺酸对LPS诱导小鼠急性肺损伤的治疗效果，为探索新的ARDS治疗手段提供实验依据，有望为临床治疗ARDS提供新的思路和方法。
1.2 目的对LPS诱导小鼠急性肺损伤的治疗效果的目的是通过实验研究牛磺酸对该类型肺损伤的治疗效果及机制，进一步探讨牛磺酸在肺部疾病治疗中的潜在作用。
本研究旨在验证牛磺酸是否能够减轻LPS诱导的急性肺损伤症状，降低肺组织炎症指标的水平，促进肺功能的恢复。
通过比较实验组与对照组的各项指标，进一步探讨牛磺酸在治疗急性肺损伤中的作用机制，以期为临床肺疾病的治疗提供新思路和方法。
通过本研究的目的，我们希望能够为深入理解牛磺酸在急性肺损伤治疗中的作用机制，为临床治疗提供新的治疗策略和方向。
1.3 意义牛磺酸是一种具有抗氧化、抗炎和抗氧化应激作用的保健品，已被广泛用于治疗各种疾病。
在LPS诱导的急性肺损伤模型中，牛磺酸可能通过减少炎症反应、改善氧化应激和细胞损伤，从而发挥治疗效果。
研究牛磺酸在LPS诱导小鼠急性肺损伤中的作用，有助于深入理解其治疗机制，为开发新型肺部疾病的治疗药物提供理论支持。
通过本研究的开展，可以为临床上治疗肺部疾病提供新的思路和方法，为减轻患者痛苦、提高治疗效果提供新的选择。
研究牛磺酸对LPS诱导小鼠急性肺损伤的治疗效果具有重要的临床意义和科学价值。
2. 正文2.1 研究方法1. 动物模型建立：使用清洁级SPF级小鼠, 按照体重随机分为对照组和实验组，每组n=10只。
血清IL-6水平在小鼠术后早期内植物感染中的筛查作用
２ ７ ５
文章编号 ：１ ０ ０ １ ． ８ ６ ８ ９ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ４ － ０ ２ ７ ５ — ０ ５
血 清Ｉ Ｌ ． ６ 水平在小鼠术后早期 内植物感 染 中的筛查作用
姚海１ 刘涛１ 王信 李平・ 周 园东 朱勇军３ 张健１ ， ’
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ａ ｍｏ ｕ ｓ ｅ ｍｏ ｄ ｅ ｌ ｏ ｆ ｅ ａ ｒ ｌ ｙ ｐ ｏ ｓ ｔ ｏ ｐ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｉ ｍｐ ｌ ａ ｎ ｔ ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗａ ｓ ｄ ｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｅ ｄ ｔ ｏ ｃ ｏ ｍｐ ａ ｒ ｅ
ｗｅ ｒ ｅ ｅ ｑ ｕ ａ ｌ ｌ ｙ ｄ ｉ ｖ ｉ ｄ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｏ Ａ， Ｂ，Ｃ ａ ｎ ｄ Ｄ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ａ ｔ ｒ ａ ｎ ｄ ｏ ｍ． Ａｆ ｔ ｅ ｒ ｌ ｏ ｃ ａ ｔ ｉ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ｆ ｅ ｍｏ ｒ ａ ｌ ｔ ｒ ｏ ｃ ｈ ｌ ｅ ａ ｒ ｇ ｒ ｏ ｏ ｖ ｅ ， ｔ ｈ ｅ ｒ ｉ ｇ ｈ ｔ
２ Ｄｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｓ ｐ ｉ ｎ ｅ ， ｈｅ ｔ Ａｆ ｉｌ ｆ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ａｌ ｔ ｏ ｆ Ｚｕ ｎ ｙ ｉ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ， Ｚｕ ｎ ｙ ｉ ５ ６ ３ ０ ０ ０ ；
３ Ｄｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｏｒ ｔ ｈ ｏ ｐ ｅ ｄ ｉ ｃ ｓ ， ｔ ｈ ｅ Ｎｉ ｎ ｅ ｔ ｈ Ｐ ｅ ｏ ｐ ｌ ｅ ’ Ｓ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｏ ｎ ｇ ｑ ｉ ｎ ｇ ， Ｃ ｈ ｏ ｎ ｇ ｑ ｉ ｎ ｇ ４ ０ ０ ７ ０ ０ ）
黄藤素注射液抗脂多糖致小鼠急性肺损伤的作用
ｏ ｒ ｃｋ ｓ 、１ ０ｒ ａｇ ／ ｋ ｓ和 ５ ０ｍ ｓ ／ ｋ ｓ ，每 日 １ 次 ，连续 ３ ｄ ，第 ４天气 管滴 人 Ｌ Ｐ Ｓ ５ｍ ｇ ／ ｋ ｇ ） ．在气管滴人 Ｌ Ｐ Ｓ后 ２ ４ ｈ处死 各组小 鼠，部分小 鼠取出肺组织进行称重计算肺系数 ，部分小 鼠行支气管肺泡灌洗 ，对炎症细胞进行计数 ．结果 Ｌ Ｐ Ｓ组小 鼠肺系数 明显高 于正常对 照组 ＜０ ． ０ ５ ） ；氢化可 的松组 和黄藤素低 、中、高剂量组 小鼠肺系数明显低 于Ｌ Ｐ Ｓ组 （ Ｐ ＜Ｏ ． ０ ５ ） ．对于 Ｂ Ａ Ｌ Ｆ中炎症细胞及中性粒 细胞 比例 ，Ｌ Ｐ Ｓ 组 明显高于正常对照组 ＜０ ． Ｏ １ ） ，与 Ｌ Ｐ Ｓ
昆明医科大学学报
２ ０ １ ６ ， ３ ７ （ １ ２ ） ： １ ２ －１ ５
பைடு நூலகம்
ＣＮ ５ ３ —１ ２ ２ １ ／Ｒ
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｋｕ ｎ ｍｉ ｎ ｇ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ
黄藤素注射液抗脂 多糖致小 鼠急性肺损伤 的作 用
王应霞 ｕ ，杨桂梅 ，胡艳文 ，王永艳 ∞ ，姚 珊 ，张 旋 ，张 丽 。 ’ （ １ ） 昆明医科 大学第一附属 医院病理科 ，云南 昆明 ６ ５ ０ ０ ３ ２ ；２ ） 昆明医科 大学药学院暨云南省天然药物 药理重点实验室；３ ） 昆明医科 大学学报编辑部 ，云南 昆明 ６ ５ ０ ５ ０ ０ ）
IL6在急性肝损伤中的作用研究的开题报告
IL6在急性肝损伤中的作用研究的开题报告
题目：IL6在急性肝损伤中的作用研究
一、研究背景：
急性肝损伤是指突发性肝功能异常和肝细胞明显的坏死、肝细胞退化等临床症状，常见的原因有药物中毒、病毒感染、营养不良等。
大量的研究表明，IL6是一个非常重要的调节因子，在机体内起到抗炎作用，但其作用在急性肝损伤中仍有待研究。
二、研究目的：
本研究旨在探讨IL6在急性肝损伤中可能扮演的角色，通过观察IL6的表达情况和其与肝细胞退化的关系，进一步分析IL6在急性肝损伤中的作用机制，为急性肝损伤的治疗提供一定的参考意见。
三、研究方法：
1. 建立急性肝损伤小鼠模型，收集肝脏组织。
2. 采用实时荧光定量PCR技术，检测IL6在急性肝损伤小鼠模型中的表达情况。
3. 采用Western blot技术，检测肝细胞退化标志物的表达水平。
4. 通过实验结果，分析IL6在急性肝损伤中的作用机制。
四、研究意义：
本研究将有助于深入了解IL6在急性肝损伤中的作用机制，解决当前针对急性肝损伤治疗效果不佳的问题，在临床实践中为急性肝损伤的治疗提供新的思路和策略。
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藤黄酸对急性肺损伤小鼠细胞因子IL⁃6的影响*王乐,吕小元,李碧蓉,韩维娜,马新华(邵阳学院医学院,湖南邵阳422000)【摘要】目的探讨藤黄酸(GA)对小鼠脂多糖(LPS)急性肺损伤(ALI)中细胞因子白介素6(IL⁃6)的影响。
方法2016年10月将体质量20~30g昆明小鼠32只采用随机数字表法分为对照组[尾静脉注射二甲基亚砜(DMSO)]、GA组(尾静脉注射GA)、模型组(尾静脉注射LPS)和GA预处理组(注射LPS前30min尾静脉注射GA),每组8只。
造模6h后观察小鼠肺组织病理学改变,测定肺泡灌洗液(BALF)中IL⁃6水平和乳酸脱氢酶(LDH)活力。
结果与对照组比较,GA组小鼠各项指标均无明显差异(P>0.05);模型组小鼠BALF中IL⁃6水平升高,LDH活力上调;GA预处理组小鼠各项指标均明显优于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。
模型组小鼠肺组织病理切片见部分肺泡塌陷,肺泡和肺间质水肿明显,肺泡间隔增厚,炎症细胞浸润程度增加,肺损伤评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);GA预处理组小鼠上述改变则明显减轻,肺损伤评分明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论GA早期干预可抑制IL⁃6的产生,减轻LPS致小鼠的ALI。
【关键词】藤黄;脂多糖类;肺/损伤;急性病;白细胞介素6doi:10.3969/j.issn.1009⁃5519.2017.22.001文献标识码:A文章编号:1009⁃5519(2017)22⁃3377⁃02Influences of gambogic acid on expression of IL⁃6in acute lung injury mice*Wang Le,Lyu Xiaoyuan,Li Birong,HanWeina,Ma Xinhua(Medical College of Shaoyang University,Shaoyang,Hunan422000,China)【Abstract】Objective To investigate the influences of gambogic acid(GA)on IL⁃6in an acute lung injury(ALI)mice caused by lipopolysaccharide(LPS).Methods In October2016,32Kunming mice with the weight of20-30g were divide intothe control group[with tail intravenous injection of dimethyl sulfoxide(DMSO)],GA group(with tail intravenous injection of GA), model group(with tail intravenous injection of LPS)and GA pretreatment treatment group(with tail intravenous injection of GA before the injection of LPS)by random number table.Six hours after establishing the mice model,the pathological alteration inlung samples of mice were observed,meanwhile the IL⁃6level and the activity of lactic dehydrogenase(LDH)in bronchoalveolar lavage fluid(BALF)were determined.Results Compare with the control group,there were no obviously difference in GA groupon the indexes of the mice;the IL⁃6level in BALF in the model group increased and LDH activity was upgraded,with statistically significant difference(P<0.05).The indexes of the mice in the pretreatment were better than those in the model group,and the difference had statistical significance(P<0.05).The pathological alterations of the lung tissue showed that parts of the pulmonary alveoli collapsed,alveolar edema and pulmonary interstitial edema were obvious,alveolar septum was thickened and the degree of inflammatory cell infiltration increased in the model group,while the above symptoms demonstrated significant reduction in the GA pretreatment group.Conclusion Early intervention of GA can inhibit the IL⁃6and reduce the ALI of mice caused by LPS.【Key words】T garcinia morelia;Lipopolysaccharides;Lung/injuries;Acute d isease;Interleukin⁃6·论著·急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是临床常见危重症,急性肺损伤(ALI)是其早期阶段。
革兰阴性菌被认为是ALI发生的主要原因之一,存在于细菌细胞壁中的脂多糖(LPS)是其重要的致病因子。
有研究表明,ALI发病机制与LPS诱导的炎症细胞释放大量炎性细胞因子有关[1]。
由于ALI/ARDS在临床上病死率高[2],如何有效预防ALI的发生,降低其病死率是肺损伤研究的重要内容之一。
中药藤黄富含多种异戊烯基取代的口山酮类化合物,藤黄酸(GA)是藤黄的主要活性成分,已被报道具有有效的抗癌和抗炎作用[3-4],但目前GA在肺部炎症的相关研究较少。
本研究采用GA干预LPS诱导的ALI小鼠,观察其对ALI的影响。
1材料与方法1.1材料1.1.1实验动物2016年10月选取健康雄性昆明小鼠32只,清洁级,体质量20~30g,购自南华大学实验动物部,许可证号SYXK(湘)2015⁃0001。
1.1.2实验试剂及设备LPS(O55﹕B5,美国Sigma 公司,批号:065M4053V)、GA(美国Sigma公司,批号: 034M4737V)、白介素6(IL⁃6)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(武汉伊莱瑞特生物科技有限公司)、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒(南京建成生物工程研究所)、低*基金项目:湖南省教育厅科学研究项目(14C1040)。
作者简介:王乐(1980—),硕士研究生,副教授,主要从事呼吸生理学的研究。
温离心机(德国Eppendorf公司)、超低温冰箱(日本三洋公司)、酶标仪(美国Thermo公司)等。
1.2方法1.2.1药物配置称取1mg LPS溶于1mL无菌生理盐水中,配置为1mg/mL的溶液;称取1mg GA溶于1mL二甲基亚砜(DMSO)溶液中,配置为1mg/mL的溶液。
1.2.2动物分组及模型制备将32只昆明小鼠采用随机数字表法分为对照组(经尾静脉注射DMSO1mg/kg)、GA组(经尾静脉注射GA1mg/kg)、模型组(经尾静脉注射LPS4mg/kg)和GA预处理组[注射LPS(4mg/kg)前30min经尾静脉注射GA(1mg/kg)],每组8只。
各组动物经处理6h后腹腔注射10%水合氯醛溶液麻醉,股动脉放血处死,取标本检测各项指标。
1.2.3苏木精⁃伊红(HE)染色放血处死动物后留取右侧肺叶,用10%多聚甲醛溶液固定,常规石蜡包埋,连续切片,进行HE染色,显微镜下观察肺组织病理学改变。
根据镜下肺泡和间隙水肿程度、中性粒细胞浸润程度和出血程度3个指标进行肺损伤评分。
评分标准:无损伤计0分;视野中损伤25%计1分;视野中损伤大于25%~50%计2分;视野中损伤大于50%~75%计3分;视野中损伤为大于75%~100%计4分[5]。
1.2.4支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL⁃6水平测定打开小鼠胸腔,结扎右肺后行气管插管,注入预冷生理盐水溶液0.5mL,轻轻抽吸2次后,抽取灌洗液于离心管中,重复灌洗3遍,灌洗液收集后在4℃下以1600r/min 离心10min,收集上清液,严格按ELISA试剂盒说明书操作。
1.2.5BALF中LDH活力检测BALF收集方法与1.2.4项相同,严格按试剂盒说明书操作,根据试剂盒提供的标准品计算样本中LDH活力。
1.3统计学处理应用SPSS23.0统计软件进行数据分析,计量资料以x±s表示,组间比较采用单因素方差分析(one⁃way ANOVA),并进行方差齐性检验。
P<0.05为差异有统计学意义。
2结果2.1各组小鼠肺组织病理变化比较显微镜下观察见对照组小鼠肺组织形态、肺泡结构基本正常,肺泡壁薄,无明显炎症改变;GA组小鼠肺组织无明显改变。
模型组小鼠肺组织部分肺泡塌陷,肺泡和肺间质水肿明显,肺泡间隔增厚,炎症细胞浸润数量增加,有明显出血,肺损伤评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);GA预处理组小鼠肺组织上述变化明显减轻,炎症细胞浸润数量减少,出血程度减轻,且肺组织结构明显改善,肺损伤评分明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),见图1、2。
2.2各组小鼠BALF中IL⁃6水平、LDH活力比较模型组小鼠BALF中IL⁃6水平、LDH活力均明显高于对照组,GA预处理组小鼠BALF中IL⁃6水平、LDH活力均明显低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05),见表1。
3讨论ALI是一种严重的呼吸衰竭综合征,肺泡结构广泛破坏,肺水肿和中性粒细胞浸润是ALI的主要特征[6-7]。