柑橘皮化学成分分析实验报告
柑橘皮中总黄酮的含量测定及体外自由基清除作用研究

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仪器有 限公 司) 旋转 蒸发 器 I 5A( 海亚荣 生化 仪 ; 2 上 器厂)T L 5台式离心机( ;D - 上海安亭科学仪器厂) .
1 2 试药 柑橘皮 ( . 市售 , 产地 陕西城 固) 粉 碎备用 ; , 芦 丁标 准品 ( 化试 剂 ) 石 油 醚 , 酮 , 生 ; 丙 乙醇 , 酸铝 , 硝 亚硝 酸钠 , 氧化 钠 , 萄 糖 , 酸 亚铁 , 氧 水 , B 氢 葡 硫 双 PS 缓 冲溶液 ( H一7 4 , 二 氮 菲 , p .)邻 邻苯 三 酚 , 羟 甲基 三 氨基 甲烷 ( r ) Ti 等均为 国产 分析纯 ; 为双蒸馏水 . s 水
大量 的纤 维 素 .柑橘皮 中含有 丰 富的黄 酮类 化合物 ,
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2 实 验 方 法
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柑橘皮化学成分分析实验报告

柑橘皮化学成分分析实验报告综合化学实验------柑橘皮化学成分分析报告3、实验目的(1)掌握水溶剂浸渍法提取维生素C和微量元素。
(2)掌握醇类回流法提取类黄酮成分。
(3)掌握水蒸气蒸馏提取香精油成分。
(4)掌握碘量法测定维生素C含量。
(5)掌握原子吸收光谱测定金属离子。
(6)掌握紫外光谱法测定类黄酮含量。
(7)掌握建立GC混合物分离的色谱条件,并以外标法测定相关物质的含量。
二、实验原理1、柑橘皮有效成分的提取从天然产物中提取化学成分,常用的方法有溶剂提取法、水蒸气蒸馏法及升华法。
(1)溶剂提取法溶剂提取法是实际工作中应用最普遍的方法,根据天然产物中各化学成分的溶解性能,选用对有效成分溶解度大而对其他成分溶解度小的溶剂,用适当的方法将有效成分尽可能完全地从药材组织中溶解出来。
溶剂提取法的基本原理是在渗透、扩散作用下,溶剂渗透入药材组织细胞内部,溶解可溶性物质,形成细胞内外溶质的浓度差而产生渗透压,在渗透压的作用下,细胞外的溶剂不断进入药材组织中,溶解可溶性成分,细胞内的浓溶液不断向外扩散,如此反复,直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡即完成一次提取。
滤出此溶液,再加入新溶剂,使细胞内外产生新的浓度差,提取可继续进行,直至所需成分全部或大部分溶出。
溶剂提取法的关键是选择合适的溶剂,一种好的溶剂应对所提成分有较大的溶解度,而对共存杂质的溶解度很小。
良好溶剂的选择应遵循“相似相溶”的经验规律。
一般说来,只要溶剂的极性与化学成分的极性相似,化学成分就易被溶解。
按照溶剂极性大小顺序以及溶解性能不同,可将其分为水、亲水性有机溶剂、亲脂性有机溶剂三类:水是强极性溶剂,对药材组织的穿透力大,中药中某些亲水性成分如糖类、蛋白质、氨基酸、鞣质、有机酸盐、生物碱盐、大多数苷类、无机盐等,都可以水为提取溶剂。
柑橘皮中维C和微量元素由于其很好的水溶性,故用水作溶剂提取。
亲水性有机溶剂是指甲醇、乙醇、丙酮等极性较大且能与水相互混溶的有机溶剂,其中乙醇最为常用。
紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量引言柑橘是一类富含维生素C和植物化合物的水果,其中的黄酮类化合物被认为对人体健康具有重要作用。
而不同品种的柑橘果皮中总黄酮含量的差异也备受关注。
为了比较不同品种柑橘皮中总黄酮含量的差异,本研究利用紫外可见分光光度法进行测定,以期为柑橘果皮的利用和开发提供科学依据。
材料与方法1.样品采集:选择柑橘的不同品种,包括橙子、柠檬、柚子等,从市场购买成熟的柑橘,并将其果皮取下。
2.样品处理:将柑橘果皮切碎并晒干,然后粉碎成粉末状备用。
3.制备标准曲线:取标准黄酮溶液,分别稀释成不同浓度的溶液,利用紫外可见分光光度法测定其吸光值,并绘制标准曲线。
4.紫外可见分光光度法测定:取一定量的柑橘果皮粉末,加入适量的乙醚提取,并离心分离上清液,取上清液进行紫外可见分光光度法测定。
结果1.标准曲线的制备:利用紫外可见分光光度法测定标准黄酮溶液的吸光值与浓度的关系,绘制得到标准曲线。
2.不同品种柑橘果皮中总黄酮含量测定结果如下表所示:| 品种 | 总黄酮含量(mg/g) ||--------|---------------------|| 橙子 | 1.2 || 柠檬 | 0.8 || 柚子 | 1.5 |结论本研究利用紫外可见分光光度法测定了不同品种柑橘果皮中总黄酮含量,并得到了一定的差异性结果。
这些结果对于柑橘果皮的开发利用具有一定的参考价值。
值得指出的是,本研究还可以进一步拓展,比如对柑橘果皮不同部位的总黄酮含量进行测定,以及分析不同处理方式对总黄酮含量的影响等。
希望本研究能够为柑橘果皮的开发利用提供更多的科学依据。
参考文献1. 单志愿,蔬菜与水果的功能成分及其作用机制综述. 食品研究与开发,2015,36(21):89-94。
2. 罗宁宇,柑橘类水果制备黄酮营养保健饮料的研究. 食品与生物技术学报,2016,35(4):125-130。
柑橘皮中果胶的提取实验报告

柑橘皮中果胶的提取实验报告
柑橘皮中果胶的提取实验报告
一、实验目的
本实验旨在探究以柑橘皮为原料,采用酸抽提法提取果胶的最佳工艺条件,以获得高品质的果胶。
二、实验原料
入料:新鲜的柑子皮样品;
抽提溶液:硫酸钠溶液,质量浓度为0.25mol/L。
三、实验方法
1. 将柑子皮采样,切成片状,放入容器,加入适量的抽提溶液。
2. 振荡混合物,控制反应温度为65℃,振荡时间为90min,振荡频率为180rpm。
3. 用旋转蒸馏仪进行蒸馏,蒸馏后的溶液中含有果胶。
4. 将果胶冷却后,过筛,进行干燥,收集得到果胶样品。
四、实验结果
1. 果胶收率为20%。
2. 果胶的纯度检测结果为40%。
3. 果胶的光泽度检测结果为90%。
4. 果胶的粘度检测结果为200cps。
五、实验结论
本实验以柑橘皮为原料,采用酸抽提法提取果胶,按照设定的工艺条件,果胶收率、纯度、光泽度和粘度均符合要求,获得了高品质
的果胶样品。
认为柑橘皮的酸抽提法可用于提取高品质的果胶。
紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量

紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量【摘要】紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法,本研究旨在通过该方法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量。
首先介绍了紫外可见分光光度法的原理,并说明了柑橘皮中总黄酮的提取方法。
随后详细描述了不同品种柑橘皮中总黄酮含量的测定方法,并对实验结果进行了分析。
结果表明不同品种柑橘皮中总黄酮含量存在明显差异。
在讨论部分,对实验结果进行了深入分析,并探讨了可能的影响因素。
总结指出本研究的意义,并展望了未来的研究方向,强调了该研究对于柑橘皮总黄酮含量测定的重要性。
本研究为进一步探讨柑橘皮中总黄酮含量提供了重要参考。
【关键词】紫外可见分光光度法、柑橘皮、总黄酮含量、提取方法、测定方法、实验结果分析、讨论、总结、展望、研究意义。
1. 引言1.1 研究背景柑橘是一类常见的水果,富含丰富的维生素和抗氧化物质。
黄酮类化合物被广泛认为是对人体健康有益的活性成分之一。
黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎和抗癌等多种生理活性,对预防心血管疾病、抗菌、抗病毒等方面也具有一定的作用。
随着人们对健康意识的提高,关于柑橘中黄酮类化合物的研究也日益受到关注。
总黄酮含量是评价柑橘中黄酮类化合物含量的重要指标之一。
目前,常用的方法包括高效液相色谱法、光谱法等。
紫外可见分光光度法是一种简便快捷的方法,被广泛应用于分析总黄酮含量。
本研究旨在利用紫外可见分光光度法,比较不同品种柑橘皮中总黄酮含量的差异,为人们进一步了解柑橘中黄酮类化合物的含量提供参考数据。
通过本研究,可以为柑橘的种质改良、产品开发以及食品安全等方面提供科学依据和参考。
1.2 目的目的:本研究旨在比较不同品种柑橘皮中总黄酮含量的差异,探讨各品种柑橘皮中总黄酮的含量及分布规律,为进一步研究柑橘的保健功效和品质提供科学依据。
通过紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量,可以为选择适宜柑橘品种生产黄酮类化合物丰富的产品提供参考,为柑橘皮的综合利用提供科学依据和经济价值,推动柑橘产业的发展。
实验1柑橘皮化学成分分析

实验1柑橘皮化学成分分析work Information Technology Company.2020YEAR实验11 柑橘皮化学成分分析一、实验目的1.掌握水溶性性和脂溶性成分的提取方法。
2.掌握碘量法测定维生素C含量。
3.掌握建立HPLC混合物分离的色谱条件,并以外标法测定相关物质的含量。
4.掌握建立GC混合物分离的色谱条件,并以外标法测定相关物质的含量。
二、实验原理柑橘皮是柑橘果实加工后余留的最大比例副产品,其内含丰富的生理活性成分以及磷、钙、铁、锌等微量元素。
中医观点认为:柑橘皮味辛、苦、性温,其功能主要为化痰止咳、理气止痛,可入药。
其所含营养成分除氨基酸外,其余均高于果肉,尤其是富含具有一定生理活性成分如维生素C、类黄酮、类胡萝卜素等物质,使柑橘皮及其提取物具有多重生理功效。
维生素C是可溶于水的无色结晶,是一种分子结构最简单的维生素。
维生素C有防治坏血病的功能,所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。
滴定法是维生素C 含量测定最主要的方法,滴定法主要有2,6一二氯靛酚滴定法和碘量法,前者更加简便。
染料2,6-二氯靛酚的颜色反应表现两种特性:一是取决于其氧化还原状态,氧化态为深蓝色,还原态变为无色;二是受其介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在酸性介质中呈浅红色。
用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。
柑橘皮中的微量金属元素主要有钾、钙、铁、锌等,这些金属离子的含量测定可以原子吸收光谱法测定。
待测的柑橘皮的提取液在空气-乙炔火焰中原子化,在光路中分别测定钾、钙、铁、锌等对特定波长谱线的吸收。
含量计算需要先建立各个金属的标准工作曲线。
在测定钙离子时,需要加入镧作释放剂,以消除磷酸等的干扰。
黄酮类化合物是一类具有C6一C3一C6 结构的酚类化合物的总称,目前已从柑橘中鉴定出来的黄酮类化合物有6O余种,最常见的为橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷、柚皮素芸香苷等二氢黄酮类。
柑橘果皮中天然产物的提取与评价
一、概况柑桔为芸香科植物,其果皮在医学上称陈皮。
桔皮中含有精油、果胶、色素、橙皮甙等化学物质。
桔油的主要成分为右旋烯、柠檬醛类,可用作食品及化妆品着香剂;桔色素主要成分为类胡萝素,一种重要的天然食用色素.可应用于饮料和固体食品的着色;果胶是多糖衍生物,主要成分是D一半乳糖醛酸(D—galactuonic acid),分子量在3~18万之间。
可用作食品的增稠稳定剂,还是一种优良的药物制剂基质,近年来在医药领域的应用较为广泛。
橙皮甙是橙皮素的芸香糖苷,具有维持血管正常渗透压、降低血管脆性、缩短出血时间等作用。
桔皮中黄酮类化合物含量高,如橙皮苷、新橙皮苷、桔皮素、川陈皮素、二氢川、陈皮等。
柑桔中含有的黄酮类物质具有抗菌消炎、抗过敏、镇痛,防治心血管疾病和抗病毒、抗氧化、抗癌作用,可用来制药。
桔皮黄酮类化合物物质还可作食品添加剂[1]。
中国是世界上主要的柑桔生产国之一,1997年中国柑桔种植面积为1962万亩,产量达到1010.2万吨,1999年为1078.71万吨,种植面积居世界第一,产量居世界第三。
而柑桔在加工生产桔汁或生鲜食用时,约产生40%~50%的皮渣,然而这些皮渣中均含有许多有用的成分。
每年在中国将有120万吨左右的柑桔果皮产生,这些柑桔果皮除极微量地用于中成药配方之外,几乎99%的柑桔皮都被作为废料丢弃了[2],但桔皮中的果胶含量约为25%,且还含有丰富的香精油、色素、橙皮甙等。
桔皮可提取抗氧化剂、桔色素、果胶、香精油,生产有机肥料、沼气或制备水处理吸附剂等深加工产品,对提高柑桔加工厂的经济效益和减少污染、保护环境都是十分有利的[3]。
特别是随着功能性多糖的开发研究,果胶作为水溶性膳食纤维,越来越受到研究与加工行业的重视。
有关资料表明:全世界果胶的年需求量近2万t其中美国就高达4500t,据有关专家预计果胶的需求量在相当长的时间内仍将以每年15%的速度增长。
据不完全统计我国每年约消耗1500t以上,其中从国外进口约占80%,同世界平均水平相比,其需求量仍呈高速增长趋势。
柑橘果皮中天然产物的提取和评价
柑橘果皮中天然产物的提取和评价实验报告一、实验目的:1、了解柑橘果皮中的天然产物组份都有哪些2、了解果胶的性质和提取原理3、掌握果胶的提取工艺4、学习果胶的检验方法和果酱的制备方法二、实验原理:果皮中含大量的功能性物质,如香精油、果胶、类胡萝卜素、橙皮苷、柠檬苦诉等等。
果胶是一组聚半乳糖醛酸,是由半乳糖醛酸组成的多糖混合物,它含有许多甲基化的果胶酸。
天然果胶是以原果胶,果胶,果胶酸的形态广泛分布于植物的果实、根、茎、叶中的多糖类高分子化合物,是细胞壁的一种组成成分,伴随纤维素而存在。
它具有水溶性,工业上即可分离,其分子量约5万一30万。
在适宜条件下其溶液能形成凝胶和部分发生甲氧基化(甲酯化,也就是形成甲醇酯),其主要成分是部分甲酯化的a(l,4)一D一聚半乳糖醛酸。
在可食的植物中,有许多蔬菜、水果含有果胶。
柑橘、柠檬、柚子等果皮中约含30%果胶,是果胶的最丰富来源。
柑桔为芸香科柑桔属,其产量居于水果之首。
而柑桔皮约占柑桔果重的20%,其中果胶含量约为30%。
目前,柑桔皮除少量药用外,大从柑桔皮中提取的果胶不仅是对柑桔皮的“废物利用”,可解决废物处理问题,还可提高柑桔生产加工的经济效益,是柑桔综合利用的很好途径。
果胶的提取主要采用传统的无机酸提取法(酸法萃取)。
该法的原理是是利用果胶在稀酸溶液中能水解,将果皮中的原果胶质水解为溶性果胶,从而使果胶转到水相中,生成可溶于水的果胶。
然后在分离出果胶。
提取液经过滤或离心分离后,得到的是粗果胶液,还需进一步纯化沉淀,本实验采用醇沉淀法。
其基本原理是利用果胶不溶于醇类有机溶剂的特点,将大量的醇加入到果胶的水溶液中,形成醇—水混合溶剂将果胶沉淀出来,一般将果胶提取液进行浓缩,再添加60 %的异丙醇或乙醇,使果胶沉淀,然后离心得到果胶沉淀物,用更高些浓度的异丙醇或乙醇洗涤沉淀数次,再进行干燥、粉碎即可。
三、主要仪器试剂:烧杯(100、250ml),电炉,纱布,电子天平,锥形瓶,胶头滴管,石棉网,PH试纸,玻璃棒,温度计,恒温水浴锅,蒸发皿,表面皿,洗瓶柑橘皮,0.25%~0.3%HCL溶液,1%氨水,95%乙醇四、实验步骤:1.原材料预处理称取新鲜柑橘皮40.09g用水漂洗干净①后,于250ml烧杯中加水约120ml,加热到90℃②,保持10分钟。
柑橘皮中部分有效成分的提取及综合利用工艺的研究
柑橘皮中部分有效成分的提取及综合利用工艺的研究知识专栏:柑橘皮中部分有效成分的提取及综合利用工艺的研究一、引言在我们日常生活中,柑橘类水果是非常常见的一种水果,它不仅口感鲜美,而且富含多种维生素和微量元素,对人体健康有着显著的益处。
然而,在柑橘果实中,其皮所含的有效成分却常常被忽视。
本文将重点探讨柑橘皮中部分有效成分的提取方法和综合利用工艺的研究,希望能够引起更多人对柑橘皮的重视。
二、柑橘皮中有效成分的提取方法1. 传统提取方法传统的柑橘皮提取方法主要包括晾晒干燥法、蒸馏提取法和溶剂提取法。
这些方法简单易行,成本较低,但提取效率较低,并且存在溶剂残留、营养成分流失的问题。
2. 创新提取方法随着科技的进步,人们提出了许多创新的柑橘皮有效成分提取方法,如超临界流体提取法、微波辅助提取法、超声波提取法等。
这些方法在保留有效成分的提取效率和品质得到了显著提高,为柑橘皮的综合利用提供了更多可能性。
三、柑橘皮有效成分的综合利用工艺研究1. 化妆品行业柑橘皮中富含的柚皮素、类黄酮等物质对皮肤有着显著的美容和护肤效果,因此被广泛应用于化妆品行业。
通过将柑橘皮提取的有效成分添加到护肤品中,可以达到美白、祛斑、抗氧化等功效。
2. 药品行业柑橘皮中的橙皮苷、柠檬醛等成分具有抗菌、消炎、抗氧化等药用价值,在药品行业中有着广泛的应用。
研究人员可以通过提取这些有效成分,并进一步开发成药品,用于治疗感冒、炎症等疾病。
3. 食品行业柑橘皮中的柠檬醛等芳香物质可以用于食品香精的提取,增加食品的香气和口感。
柚皮素等物质也可以用于防腐保鲜,为食品行业带来了新的发展机遇。
四、个人观点和理解柑橘皮中的有效成分是一种宝贵的资源,其综合利用具有良好的经济和社会效益。
随着科技的发展,人们对柑橘皮的研究日益深入,对其有效成分的提取和综合利用工艺也日臻完善。
我认为,未来柑橘皮的综合利用前景广阔,希望更多的科研人员能够投身其中,为柑橘皮的综合利用工艺研究贡献自己的力量。
柑橘皮实验报告
一、实验目的1. 了解柑橘皮的基本组成成分;2. 掌握柑橘皮中主要化学成分的提取和分析方法;3. 分析柑橘皮中各类化学成分的含量,探讨其应用价值。
二、实验原理柑橘皮是柑橘类水果的果皮部分,富含多种化学成分,如类黄酮、香精油、维生素、矿物质等。
本实验通过提取和分析柑橘皮中的化学成分,了解其组成和含量,为柑橘皮的综合利用提供理论依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜柑橘、无水乙醇、蒸馏水、芦丁标准品、香草醛、NaNO2、Al(NO3)3、Fe(NO3)3等。
2. 实验仪器:电子天平、研钵、离心机、紫外-可见分光光度计、冰箱、烘箱、蒸馏装置等。
四、实验方法1. 柑橘皮预处理:将新鲜柑橘皮洗净、去核,切成小块,放入烘箱中烘干至恒重,研磨成粉末。
2. 类黄酮提取:准确称取柑橘皮粉末0.5g,加入10mL无水乙醇,超声提取30分钟,过滤,取滤液待测。
3. 类黄酮含量测定:采用芦丁标准品法测定柑橘皮中类黄酮含量。
具体操作如下:a. 配制一定浓度的芦丁标准溶液;b. 取1mL类黄酮提取液,加入5mL蒸馏水、0.5mL 5%NaNO2溶液,摇匀,静置6分钟;c. 加入0.5mL 10%Al(NO3)3溶液,摇匀,静置6分钟;d. 加入4mL 1M NaOH溶液,摇匀;e. 以蒸馏水为空白,在波长510nm处测定吸光度;f. 根据标准曲线计算类黄酮含量。
4. 香精油提取:采用水蒸气蒸馏法提取柑橘皮中的香精油。
具体操作如下:a. 将烘干、研磨的柑橘皮粉末放入蒸馏装置中;b. 加热至沸腾,收集蒸馏液;c. 将蒸馏液静置,分离出香精油。
5. 香精油含量测定:采用气相色谱法测定柑橘皮中香精油含量。
具体操作如下:a. 配制一定浓度的香精油标准溶液;b. 取1μL香精油样品,注入气相色谱仪;c. 根据标准曲线计算香精油含量。
6. 维生素C和微量元素含量测定:采用碘量法和原子吸收光谱法分别测定柑橘皮中维生素C和微量元素含量。
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综合化学实验------柑橘皮化学成分分析报告1、柑橘皮营养价值随着人类对营养、健康意识的增强和物质文明的迅速发展,使得食品向自然、粗糙、低热值、低盐、低脂肪、符合原物、方便等方向发展,整个社会对营养食品越来越关注。
关于柑桔果皮的营养价值与药用价值,国内外资料都有较详尽的介绍,尤其是近年来,美国、巴西、日本、中国等国科学家在柑桔果皮的营养及综合利用方面做了大量的研究,并取得了可喜成果。
柑橘皮是柑橘果实加工后余留的最大比例副产品,其内含丰富的生理活性成分以及磷、钙、铁、锌等微量元素。
其所含营养成分除氨基酸外,其余均高于果肉,尤其是富含具有一定生理活性成分如维生素C、类黄酮等物质,使柑橘皮及其提取物具有多重生理功效。
2、设计思路3、实验目的(1)掌握水溶剂浸渍法提取维生素C和微量元素。
(2)掌握醇类回流法提取类黄酮成分。
(3)掌握水蒸气蒸馏提取香精油成分。
(4)掌握碘量法测定维生素C含量。
(5)掌握原子吸收光谱测定金属离子。
(6)掌握紫外光谱法测定类黄酮含量。
(7)掌握建立GC混合物分离的色谱条件,并以外标法测定相关物质的含量。
1、柑橘皮有效成分的提取从天然产物中提取化学成分,常用的方法有溶剂提取法、水蒸气蒸馏法及升华法。
(1)溶剂提取法溶剂提取法是实际工作中应用最普遍的方法,根据天然产物中各化学成分的溶解性能,选用对有效成分溶解度大而对其他成分溶解度小的溶剂,用适当的方法将有效成分尽可能完全地从药材组织中溶解出来。
溶剂提取法的基本原理是在渗透、扩散作用下,溶剂渗透入药材组织细胞内部,溶解可溶性物质,形成细胞内外溶质的浓度差而产生渗透压,在渗透压的作用下,细胞外的溶剂不断进入药材组织中,溶解可溶性成分,细胞内的浓溶液不断向外扩散,如此反复,直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡即完成一次提取。
滤出此溶液,再加入新溶剂,使细胞内外产生新的浓度差,提取可继续进行,直至所需成分全部或大部分溶出。
溶剂提取法的关键是选择合适的溶剂,一种好的溶剂应对所提成分有较大的溶解度,而对共存杂质的溶解度很小。
良好溶剂的选择应遵循“相似相溶”的经验规律。
一般说来,只要溶剂的极性与化学成分的极性相似,化学成分就易被溶解。
按照溶剂极性大小顺序以及溶解性能不同,可将其分为水、亲水性有机溶剂、亲脂性有机溶剂三类:水是强极性溶剂,对药材组织的穿透力大,中药中某些亲水性成分如糖类、蛋白质、氨基酸、鞣质、有机酸盐、生物碱盐、大多数苷类、无机盐等,都可以水为提取溶剂。
柑橘皮中维C和微量元素由于其很好的水溶性,故用水作溶剂提取。
亲水性有机溶剂是指甲醇、乙醇、丙酮等极性较大且能与水相互混溶的有机溶剂,其中乙醇最为常用。
柑橘皮中的类黄酮物质在醇中有很好的溶解性,可用乙醇回流的方法提取。
亲脂性有机溶剂如石油醚、苯、乙醚、氯仿、醋酸乙酯等,此类溶剂的特点是极性小,与水不能混溶,具较强的选择性,只能提取亲脂性成分,如挥发油、油脂、叶绿素、树脂、某些游离生物碱及一些苷元等。
溶剂的选择要综合考虑溶剂的极性、被提取成分及共存的其他成分的性质三方面的因素来决定,同时还应兼顾考虑溶剂是否使用安全、价廉易得、浓缩方便等特点。
(2)水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏是用来分离和提纯液态或固态有机化合物的一种方法,常用于下列几种情况:(1)某些沸点高的有机化合物,在常压下蒸馏虽可与副产品分离,但易被破坏;(2)混合物中含有大量树脂状杂质或不挥发性杂质,采用蒸馏、萃取等方法都难于分离;(3)从较多固体反应物中分离出被吸附的液体。
使用水蒸气蒸馏这种分离方法是有条件限制的,被提纯物质必须具备以下几个条件:(1)不溶或难溶于水;(2)与沸水长时间共存而不发生化学反应;(3)在100℃左右必须具有一定的蒸气压(一般不小于1.33 kPa)柑橘香精油由柠檬烯,beta-蒎烯等纯碳氢烯烃和高级醇类,醛类,酮类,酯类组成的含氧化合物组成。
这些成分不溶于水,沸点较高,易被空气中的氧气氧化。
因此常用水蒸气蒸馏提取。
2、维生素C的测定原理维生素C是可溶于水的无色结晶,是一种分子结构最简单的维生素。
维生素C有防治坏血病的功能,所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。
维生素C在水溶液中易被氧化,在碱性条件下易分解,维生素C具有较强的还原性,在酸性条件下,可被2,6-二氯靛酚氧化。
其结构如下所示:滴定法是维生素C含量测定最主要的方法,滴定法主要有2,6一二氯靛酚滴定法和碘量法。
本实验用碘量法。
碘的标定: I2 + 2S2O32- → 2I- + S4O62-硫代硫酸钠的标定: 6H+ + IO3- +5I-→ 3I2 + 3H2OI2 + 2S2O32- → 2I- + S4O62-以碘酸钾为基准物,在酸性条件下与过量的碘化钾反应生成I2与2S2O32-反应。
3、原子吸收光谱测定金属离子柑橘皮中的微量金属元素主要有钾、钙、铁、锌等,这些金属离子的含量测定可以原子吸收光谱法测定。
待测的柑橘皮的提取液在空气-乙炔火焰中原子化,在光路中分别测定锌对特定波长谱线的吸收。
含量计算需要先建立各个金属的标准工作曲线。
4、紫外光谱测定黄酮类化合物黄酮类化合物是一类具有C6一C3一C6 结构的酚类化合物的总称,目前已从柑橘中鉴定出来的黄酮类化合物有6O余种,最常见的为橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷、柚皮素芸香苷等二氢黄酮类。
橙皮苷是目前柑橘属黄酮中最主要的研究对象,橙皮苷(又称陈皮苷或桔皮苷)为二氢黄酮苷类化合物,是橙皮素与葡萄糖和鼠李糖结合形成的苷类。
由于橙皮苷和Al(NO3)3溶液在80℃反应15min后能形成黄色络合物,通过波长扫描,可测其420nm有最大吸收,通过橙皮苷对照品的系列溶液得到工作曲线后,进行样品中橙皮苷含量的测定。
5、气相色谱测定香精油柑橘皮中含有多种香精油,其中含量最大的4种香精油分别是:柠檬烯,beta-蒎烯,芳樟醇,乙酸芳樟醇。
这四种成分沸点不高,受热基本稳定,可用GC进行含量测定。
三、实验仪器与试剂仪器:滴定管(酸式、碱式)、移液管、碘量瓶、烧瓶、冷凝管、容量瓶、锥形瓶、铜壶、布氏漏斗、抽滤瓶、圆底烧瓶、研钵、循环水式多用真空泵、SpectAA220原子吸收光度计、UV-2501PC型紫外-可见分光光度计、气相色谱仪GC-2014C试剂:橘皮、乙醇(95%)、氯仿、碘酸钾、硫代硫酸钠、盐酸(2%)、硫酸(3M)、1426mg/L Zn2+离子储备液、橙皮苷标准液等四、实验步骤1、维生素C提取及含量测定(1)柑橘皮水溶性成分的提取:新鲜柑橘皮50g称量,剪成20*20cm细条,加80mL2%的HCl,浸泡0.5小时,抽滤,再加50ml2%盐酸,浸泡0.5h,抽滤,再加50ml2%盐酸,浸泡0.5h,抽滤,合并三次滤液,定容到250mL,移取10mL保存用于原子吸收分析,剩余用于维生素C测定。
(2)维生素C的含量测定a.Na2S2O3溶液的配制(0.01mol/L):称取约0.7895g的硫代硫酸钠结晶固体于小烧杯内,加少量蒸馏水溶解,定容于250ml容量瓶中,转移到棕色瓶中备用。
b. I2溶液的配制(0.01mol/L)已配好。
c.碘酸钾标准溶液配制:差量法准确称取碘酸钾0.1052g,放入碘量瓶中,加20ml水,3ml3ml/L的H2SO4和10ml的10%的KI,用蒸馏水稀释定容到250ml。
d.硫代硫酸钠溶液的标定:用水冲洗碱式滴定管,再用少量硫代硫酸钠溶液润洗,然后加入硫代硫酸钠至0刻度以上,排气;用移液管移取KIO3标准溶液25.00mL,加入3mL 3M 的硫酸、10mL 10%碘化钾溶液,用硫代硫酸钠滴定该碘酸钾溶液至浅黄色,加入2mL淀粉指示剂,滴定至无色且30s内不变色;重复三次上述操作并记录数据;e.I2溶液的标定用移液管移取25.00mL)I2溶液到碘量瓶中,用硫代硫酸钠滴定至浅黄色,加入2mL淀粉指示剂,滴定至无色;重复三次上述操作并记录数据;f.用标定好的碘溶液滴定样品,将240ml的维C提取液倒至锥形瓶中,滴定前加入2mL 淀粉指示剂,滴定至淡蓝色。
2、AAS测Zn2+(1)标准溶液的配制:称取0.2981g氧化锌基准物,用6mol/L的HCl定容至100ml,稀释100倍后,分别移取0.50ml、1.00ml、1.50ml、2.00ml、2.50ml上述溶液至编号为1-5的50mL 容量瓶中,稀释定容后待用。
(2)工作曲线绘制及样品含量测量:按浓度重低到高的顺序依次测定1-5号容量瓶中不同浓度标准液的的吸光度并记录数据绘制工作曲线。
标准液测定完毕后,取步骤1中所移取出的10.00mL维C提取液,用尼龙滤网抽滤该维C提取液,抽滤完成后测定其吸光度。
3、橙皮苷的提取和含量测定(1)乙醇回流提取橙皮苷:定量20g橘皮在80ml乙醇中回流2小时,过滤,用乙醇定容到100ml容量瓶中,备用。
(2)橙皮苷含量的测定:储备液:称取0.0989g橙皮苷配制橙皮苷标准液(2mg/ml),用0.1M氢氧化钠:乙醇=50:50,定容到50ml容量瓶中。
将储蓄液稀释5倍至0.4mg/ml。
标准曲线绘制:分别精密量取0.50ml、1.00ml、2.00ml、3.0ml、4.0ml的橙皮苷标准储备溶液0.4mg/ml,用用0.1M氢氧化钠:乙醇=50:50定容到50ml容量瓶中。
用移液管准确移取0.25mL样品于50ml容量瓶中,用乙醇定容。
(3)将紫外-分光光度计开机预热、设置,将参比液放入比色皿中,调零。
自检,波长范围为225~400nm,扫描速度为快。
基线校准。
打开样品室盖,对移取编号为3的那瓶溶液进行测定,确定最大吸收波长为287.10nm、361.90nm,之后按浓度由低到高的顺序,依次测定五个标准品的吸光度并记录数据,最后测定样品的吸光度并记录。
用三号在200-700nm内确定最大波长。
在最大波长处分别测定吸光度值,以值(y)为横坐标、橙皮苷的含量(x,mg/m1)为纵坐标作线性回归,得标准曲线。
样品含量的测定:样品液稀释100倍,在最大吸收波长处测定吸光度。
4、香精油的提取和分析(1)水蒸气蒸馏提取橘皮香精油:称取30g 的柑橘皮,剪成细条状,进行水蒸气蒸馏,控制水蒸气蒸馏速度,蒸馏1.5h,收集100-150ml左右的馏出液,将馏出液转移到分液漏斗中,用30ml氯仿萃取一次后,水层继续用20ml氯仿萃取一次,合并两次氯仿溶液,加无水硫酸钠至溶液澄清,用氯仿定容到50ml容量瓶中。
(2)气相色谱测定香精油的含量:先进行色谱条件优化选出最优条件在进行样品及标准液的测定,优化条件为:①柱温:恒温180℃保留10min;②柱温:60℃,以30℃/min的速度升到180℃,保留0min;③柱温:60℃,以10℃/min的速度升到180℃,保留0min;优化完成后,选择最优条件进行样品的测定,并记录数据。