分光光度计的使用原理、
分光光度计使用原理

分光光度计使用原理
分光光度计是一种常用的光谱仪器,用于分析和测量物质的光学性质。
它的工作原理是基于光的吸收现象。
光是由电磁波组成的,不同波长的光具有不同的能量和频率。
当光通过一个物质时,物质会吸收或传播光的不同波长。
分光光度计利用这个原理来测量物质的光学吸收特性。
分光光度计的核心部件是光源、光栅、光电二极管和检测器。
光源发出白光,光栅将白光分散成多种颜色的光谱,然后透过一个样品室,样品室中含有要测量的物质。
物质会吸收光谱中特定波长的光,其余波长的光则通过样品室。
通过测量样品室中进入和离开的光的强度,可以计算出被样品吸收的光的量。
光电二极管和检测器记录并转换通过的光强度为电信号,然后由光度计进行计算和显示。
为了准确测量物质的吸收特性,分光光度计需要进行一系列校准。
首先,需要对光源进行校准,确保其发出的光强度稳定。
其次,需要校准检测器,确保其对不同波长的光具有相同的响应。
最后,需要校准样品室,以消除样品室自身对光的吸收。
总结而言,分光光度计利用光的吸收现象来测量物质的光学性质。
通过分散光谱、测量光强度和进行校准,可以获取准确的吸收光谱和浓度数据,为物质分析和测量提供依据。
分光光度计的使用原理

分光光度计的使用原理光是一种电磁波,具有波长和频率的特性。
不同物质对光的吸收能力不同,吸收的波长也不同。
利用这个原理,分光光度计可以测量物质在不同波长光下的吸光度,从而确定物质的浓度或者反应进程。
光源是分光光度计的重要组成部分,常用的光源有白炽灯、氘灯和钨灯等。
白炽灯可以广泛产生连续光谱,氘灯和钨灯可以产生不同波长的单色光。
光源产生的光通过样品室,经过或透射、或反射样品后,进入单色器。
单色器是分光光度计中的一部分,它的作用是从光源中选择一定波长的光,使其通过样品。
单色器通常由光栅或光柱组成。
通过调节光栅或光柱的角度,可以选择不同波长的光。
样品室是分光光度计中用来放置样品的空间。
样品可以是液体、气体或固体。
当光通过样品后,样品会吸收一部分光,剩余的光进入检测器。
检测器的作用是测量通过样品的光的强度。
常用的检测器有光电二极管(Photodiode)和光电倍增管(Photomultiplier tube,PMT)。
光电二极管可以转换光信号为电流信号,而光电倍增管可以将微弱的光信号放大后输出。
检测器将测得的信号输入到放大器中放大,然后通过电路处理后送入显示器上显示。
显示器可以显示样品的吸光度值。
根据不同的分析需要,显示器可以是电压表、伏安表、计算机等。
在使用分光光度计时,首先要选择合适的波长。
根据待测样品产生的吸收峰,选择对应波长的光。
然后将样品放置在样品室中,调整光强到合适值,调节单色器选择合适波长的光通过样品。
检测器将通过样品的光信号转换为电信号,放大后输入显示器,在显示器上可以读取到样品的吸光度值。
总结起来,分光光度计的使用原理是利用不同物质对光的吸收能力不同的特性,通过选择不同波长的光,测量光通过样品后的强度变化,进而确定物质的浓度或反应进程。
分光光度计在生物化学、医药、环境保护等领域有着广泛的应用。
分光光度计的使用原理

分光光度计的使用原理分光光度计是一种常用的实验仪器,用于测量溶液中各种成分的浓度、反应动力学和吸收光谱等。
分光光度计的使用原理主要是基于光的吸收和波长选择性。
分光光度计的主要部件包括光源、样品室、光栅、检测器和数据处理系统。
其中光源通常采用白炽灯、钨丝灯或氘灯等发出宽波长连续光源。
样品室是用来放置待测样品的空间,通常有双臂样品室和流通样品室两种形式。
光栅是分光光度计的核心组成部分,它是一个具有一定波长分辨能力的平面凹面反射镜。
检测器可以分为光电二极管、光电倍增管和光电二极管阵列等不同类型。
数据处理系统则是用来记录和处理测量结果的电子设备。
分光光度计的使用原理主要有两种,即比色原理和分光光度法。
首先,比色原理是基于溶液中吸收物质对特定波长的光的吸收程度与其浓度成正比的原理。
根据比色原理,当光通过样品室中的溶液时,吸收物质会吸收特定波长的光。
溶液中吸收的光的强度与吸收物质的浓度成正比,即样品吸收光强度的变化可以用来计算样品中吸收物质的浓度。
分光光度计常用的波长有紫外、可见和近红外等。
其次,分光光度法是通过光栅将光分散成不同波长的光束,并使用检测器测量各个波长的光强度。
分光光度计的光栅是一个具有一定波长分辨能力的平面凹面反射镜,它可以将入射的连续光分散成不同波长的光束,进而进入检测器。
检测器可以根据不同波长的光强度变化来计算样品中吸收物质的浓度。
在测量过程中,首先需要通过调节光源和光栅来选择适当的波长。
然后,待测样品被放入样品室中,光束透过样品后到达检测器,检测器记录各个波长下的光强度。
数据处理系统会将记录的光强度转化为吸光度,并根据吸光度与浓度之间的关系来计算样品中的目标物质浓度。
需要注意的是,分光光度计的测量结果还会受到一些其他因素的影响,如光束路径长度、背景光干扰、样品的色散和溶液的浓度范围等。
为了准确测量样品中的目标物质浓度,需要进行校正和控制这些因素。
综上所述,分光光度计的使用原理主要基于光的吸收和波长选择性。
分光光度计工作原理

分光光度计工作原理
分光光度计是一种用来测量物质吸收、发射或透射光谱的仪器。
其工作原理主要包括以下几个方面:
1. 光源:分光光度计通过一个稳定的光源产生一束光。
常见的光源有白炽灯、钨丝灯、氘灯等。
光源发出的光通过空气或光学元件进入进样室。
2. 进样室:进样室是一个容器,光线进入其中与样品发生相互作用。
进样室通常由透明的材料制成,在光路上引入待测样品。
3. 分光装置:分光光度计采用一种称为分光器的光学元件,将进入进样室的光束分成两束。
其中一束光束与样品相互作用,这些光被样品吸收、发射或透射。
另一束光不经样品直接通过。
4. 检测器:分光光度计采用一种灵敏的检测器来测量透射或发射光的强度。
常见的检测器有光电二极管(Photodiode)、光
电倍增管(Photomultiplier tube)等。
5. 数据处理:分光光度计通过检测器测量样品光的强度,然后将其转换为电信号。
这些电信号经过放大、滤波、数值转换等处理,最终转化为测量结果。
常见的数据处理包括吸光度测量、发射光谱、透射光谱等。
总的来说,分光光度计通过光源、进样室、分光装置、检测器和数据处理等部件的协同工作,实现了对样品光的测量和分析。
这种测量分析方法可以广泛应用于化学、生物、医学等领域,用于研究物质的光学性质和测量物质的浓度等。
分光光度计工作原理

分光光度计工作原理
分光光度计是一种常用的分析仪器,用于测定溶液中物质浓度或溶液中吸光物质的含量。
分光光度计的工作原理基于比尔-朗伯定律,即吸光度与溶液
中物质的摩尔吸光系数、物质的浓度和光程之间成正比关系。
在可见光和紫外光区域,大多数物质表现出吸光特性,即当光通过物质时,一部分光会被物质吸收,并产生吸收波谷。
分光光度计的工作是通过下述步骤完成的:
1. 光源:光源通常使用白炽灯或氙灯等。
它会发出可见光或紫外光。
2. 单色器:光线首先通过单色器,单色器将混合的白光分离成不同波长的光。
3. 样品室:待测溶液放置在样品室中。
样品室通常由两个透明的玻璃或石英片构成,光线可以透过它们进入样品。
4. 检测器:在样品室的另一侧,放置有检测器。
检测器可以是光电二极管或光电倍增管等,用于测量通过样品室的光的强度。
5. 波长选择:根据需要选择所需的波长以进行测量。
可以通过旋转单色器上的光栅或使用滤光片来选择特定波长的光。
6. 记录测量结果:检测器会将通过样品的光强度转换为电信号,
并传输给显示器或记录仪。
测量结果可以通过显示器或记录仪来读取和记录。
通过测量已知浓度的标准溶液的吸光度,可以制作吸光度与浓度之间的标准曲线。
然后,通过测量未知溶液的吸光度,使用标准曲线可以计算出未知溶液中的物质浓度或吸光物质的含量。
总结来说,分光光度计的工作原理是利用光的吸收特性和比尔-朗伯定律,通过测量波长选择后的光经过样品后的强度变化
来确定溶液中物质的浓度或吸光物质的含量。
分光光度计使用原理及操作方法

分光光度计使用原理及操作方法分光光度计是一种常用的光学仪器,用于测量溶液或气体中物质对特定波长的光的吸收或透射程度。
它的工作原理基于比尔-朗伯定律,即物质对光的吸收与物质的浓度成正比。
以下是关于分光光度计的使用原理及操作方法的详细介绍。
一、工作原理分光光度计的工作原理基于比尔-朗伯定律,它描述了物质溶液或气体对光的吸收或透射程度与物质的浓度之间的关系。
根据该定律,若吸光度为A,物质的浓度为c,吸光度与浓度之间存在一个线性关系,即A = εcl,其中ε为摩尔吸光系数,l为光程长度。
在分光光度计中,光源会通过一束光线产生可见光或紫外线,该光线通过一个狭缝,称为波长选择装置,以选择特定波长的光进行测量。
然后进入样品室,通过样品室中的溶液或气体,通过光电三极管(光敏元件)接收到另一端。
分光光度计会比较入射光和通过样品后的光的强度差异,通过转化为电信号进行测量和计算。
根据比尔-朗伯定律,通过对吸光度的测量,可以推算出溶液中物质的浓度。
二、分光光度计的操作方法1.打开分光光度计电源,待仪器启动完成,确保仪器工作正常。
2.校准仪器:选择所需波长,并将光路调整为100%T(透过率)或0%T(吸光度)。
根据操作手册的指示进行校准。
3.准备样品:使用准确的浓度称量所需样品,并使用溶剂稀释至合适的浓度范围。
4.装载样品:打开样品室并放置样品池,将样品注入样品池,并确保池中没有气泡。
5.设置参数:根据实验需要,在分光光度计上设置参数,如波长、采集速度等。
6.测量样品:选择所需波长,并将样品室对准该波长设置,调节入射光的强度。
7.记录数据:测量样品的吸光度,并将数据记录下来。
可以选择多次测量,以获得更准确的结果。
8.分析结果:根据吸光度值和已知浓度值之间的关系,计算出样品的浓度,或者在已知浓度下,确定样品的吸光度。
9.清洗仪器:在测量结束后,将样品室和样品池清洗干净,以防止可能的交叉污染。
关闭仪器电源。
10.维护仪器:定期进行仪器的维护和保养,包括清洁仪器的各个部件,并按照操作手册的要求更换或校准配件。
分光光度计的原理及应用

分光光度计的原理及应用1. 分光光度计的原理分光光度计是一种用于测量物质溶液中某种物质浓度的仪器。
其原理基于光的吸收和透射特性。
•光的吸收特性:物质在特定波长的光照射下,会吸收光束中的能量,导致光的强度减弱。
•光的透射特性:物质在特定波长的光照射下,会让光束透过并传播,导致光的强度没有明显的改变。
基于光的吸收和透射特性,分光光度计通过测量待检测物质的溶液对光的吸收程度来确定其浓度。
具体的原理如下:1.光源产生具有特定波长的光束。
2.光束通过一个称为样品池的透明容器中的溶液。
3.通过检测器测量光束透过溶液后的光强度。
4.根据光的吸收定律(比尔-朗伯定律),测量光的强度与物质浓度之间的关系。
分光光度计的原理基于比尔-朗伯定律,该定律表示光强度与物质浓度呈指数关系。
通过测量光的强度,可以计算出溶液中特定物质的浓度。
2. 分光光度计的应用分光光度计在化学、生物分析、环境监测等领域被广泛应用。
以下列举了一些分光光度计的主要应用场景:2.1 化学分析•分子吸收光谱分析:分光光度计可用于测量化学反应中产生的吸收或产物的特征峰值,以确定物质的浓度。
•金属离子分析:通过测量金属离子在特定波长下的吸收特性,可用于测量金属溶液中金属离子的浓度。
2.2 生物学•蛋白质和核酸分析:分光光度计可用于测量蛋白质和核酸的浓度,并用于分析蛋白质和核酸的纯度。
•酶动力学研究:通过测量酶在特定底物浓度下的反应速率,可以研究酶的催化机制和动力学参数。
2.3 环境监测•水质监测:分光光度计可用于测量水中各种污染物质的浓度,如氨氮、亚硝酸盐、硝酸盐等。
•大气监测:利用分光光度计测量大气中特定气体的浓度,如二氧化碳、一氧化碳等。
2.4 制药工业•药物浓度测量:分光光度计可用于药物中活性成分的测量,用于制药工艺控制和药物质量监控。
2.5 食品安全•残留农药检测:利用分光光度计测量食品中农药残留物的浓度,用于评估食品安全性。
总结:分光光度计作为一种常用的分析仪器,其原理基于光的吸收和透射特性。
分光光度计原理

分光光度计原理分光光度计是用来测量物质溶液中的吸收光的仪器,其原理基于比尔-朗伯定律。
根据比尔-朗伯定律,溶液中的光吸收与溶液中物质的摩尔浓度、溶液层厚度和物质的摩尔吸光系数之间存在线性关系。
光通过溶液时,会与溶液中的物质发生相互作用,物质会吸收特定波长的光,使得通过溶液的光强减弱,被吸收的光强与溶液中物质的浓度成正比。
分光光度计将可见光、紫外光或红外光通过样品溶液,然后测量溶液中的吸收光强。
它包括以下主要部件:1.光源:分光光度计使用的光源通常是电灯泡或光电二极管。
对于紫外光度计,使用的光源是发射紫外线的灯泡。
2.单色器:单色器用来选择想要测量的特定波长的光。
它通过一束光通过光栅或棱镜进行分光。
单色器将其他波长的光过滤掉,只保留特定波长的光。
3.样品室:样品室是放置溶液的容器,通过样品室的光路径来测量吸光度。
样品室可以是一个光学玻璃池或一个光学带。
4.检测器:检测器用来测量通过样品室的光强。
常用的检测器有光电二极管,它将吸收的光转化为电信号。
在测量过程中,首先设置一个空白样品,即只有溶剂而没有待测物质的溶液。
然后设置一个带有待测物质的溶液作为样品。
光源发出的光经单色器选择特定波长后,通过空白样品和样品室,然后被检测器测量。
检测器输出的信号与通过样品的光强成正比,通过与空白样品的信号进行比较,可以得到样品的吸光度。
通过吸光度的测量,可以计算样品中待测物质的浓度。
这是因为吸光度与物质的浓度成正比,即通过比尔-朗伯定律计算吸光度与待测物质的摩尔吸光系数和样品的层厚度。
总之,分光光度计的工作原理是利用样品中物质对特定波长光的吸收来测量物质的浓度,通过比尔-朗伯定律计算吸光度与浓度之间的关系。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
4 检测器 检测器的作用是检测光信号,并将光 信号转变为电信号。现今使用的分光光度 计大多采用光电管或光电倍增管作为检测 器。 信号显示系统 常用的信号显示装置有直读检流计, 电位调节指零装置,以及自动记录和数 字显示装置等。 5
二、紫外-可见分光光度计的类型 按其光学系统可分为单波长分光光 度计和双波长分光光度计。
二、朗伯-比尔定律 朗伯 比尔定律 朗伯-比尔定律:当一束平行单色光通过含有 吸光物质的稀溶液时,溶液的吸光度与吸光 物质浓度、液层厚度乘积成正比,即 A= κ cl 式中比例常数κ与吸光物质的本性,入射光 波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度,l 为透光液层厚度。 朗伯-比尔定律是紫外-可见分光光度法的 理论基础。
这些显色反应,必须满足以下条件: 1.反应的生成物必须在紫外 可见光区 较 紫外-可见光区 紫外 可见光区有较 吸光能力,即摩尔吸光系数较大; 强的吸光能力 吸光能力 2.反应有较高的选择性 较高的选择性,即被测组分生成 较高的选择性 的化合物吸收曲线应与共存物质的吸收光谱 有明显的差别; 3. 反应生成的产物有足够的稳定性 足够的稳定性,以保 足够的稳定性 证测量过程中溶液的吸光度不变; 4.反应生成物的组成恒定。
3 无机化合物的紫外-可见吸收光谱 无机化合物的紫外1. f电子跃迁吸收光谱 镧系和锕系元素的离子对紫外和可见光的 吸收是基于内层f电子 电子的跃迁而产生的。其 电子 紫外可见光谱为一些狭长的特征吸收峰, 这些峰几乎不受金属跃迁吸收光谱 过渡金属的电子跃迁类型为d电子 电子在不同d轨 电子 轨 道间的跃迁,吸收紫外或可见光谱。这些峰 强烈受配位环境的影响。 例如 cu2+以水为配位体,吸收峰在794nm 处,而以氨为配位体,吸收峰在663nm处。此 类光谱吸收强度弱,较少用于定量分析。
2.纯度的鉴定 用紫外吸收光谱确定试样的纯度是比较方 便的。 如蛋白质与核酸的纯度分析中,可用 A280/A260的比值,鉴定其纯度。
3.结构分析 紫外-可见吸收光谱一般不用于化合物 的结构分析,但利用紫外吸收光谱鉴定化 合物中的共轭结构和芳环结构还是有一定 价值。 例如,某化合物在近紫外区内无吸收,说 明该物质无共轭结构和芳香结构。
通过测定被测物质对不同波长的光的吸 收强度(吸光度),以波长为横坐标,吸光 度为纵坐标作图,得出该物质在测定波长范 围的吸收曲线 吸收曲线。如图3-1; 吸收曲线 在吸收曲线中,通常选用最大吸收波长 λmax进行物质含量的测定。
2 有机化合物的紫外-可见吸收光谱 有机化合物的紫外2.1 有机化合物的电子跃迁 与紫外与紫外-可见吸收光谱有关的电子有三 种,即形成单键的σ电子、形成双键的π 种,即形成单键的σ电子、形成双键的π电 子以及未参与成键的n 子以及未参与成键的n电子。 跃迁类型有:σ 跃迁类型有:σ σ*、n σ* 、π π *、 n π * 四种。
§3. 紫外-可见分光光度计 紫外一、主要部件的性能与作用 基本结构:
光源→单色器 吸收池 检测器→信号显示系统 光源 单色器→吸收池 检测器 信号显示系统 单色器 吸收池→检测器 ↑ 样品
1 光源 在紫外可见分光光度计中,常用的光源 有两类:热辐射光源和气体放电光源 热辐射光源和气体放电光源 热辐射光源用于可见光区,如钨灯和 卤钨灯;气体放电光源用于紫外光区,如 氢灯和氘灯。
§2. 朗伯-比尔定律 朗伯一、吸光度和透光度 设入射光强度为I0,吸收光强度为Ia,透 射光强度为 It,反射光强度为Ir,则 I0= Ia+ It+ Ir 由于反射光强度基本相同,其影响可相互抵 消,上式可简化为: I0= Ia+ It
透光度: 透光度:透光度为透过光的强度It与入射光 强度I0之比,用T表示: 即 T= It/I0 吸光度: 吸光度 为透光度倒数的对数,用A表示, 即 A=lg1/T=lgI0/It
1.酸度 显色反应最适宜的酸度范围可通过实 验来确定:测定某一固定浓度的试样的吸 光度随酸度的变化,以吸光度为纵坐标, 溶液的PH值为横坐标作图。 2.显色剂的用量 3.显色时间和温度
三、参比溶液的选择 测定试样溶液的吸光度,需先用参比 溶液调节透光度(吸光度为0)为100%,以 消除其它成分及吸光池和溶剂等对光的反 射和吸收带来的测定误差。 射和吸收带来的测定误差
比吸光系数 比吸光系数是指百分含量为1%, l为1cm 1% 时的吸光度值,用 E1cm 表示。
ε = 0.1M r E
1% 1cm
四、偏离朗伯-比耳定律的因素 (1)入射光为非单色光 ) (2)溶液的不均性。 )溶液的不均性。 实际样品的混浊,加入的保护胶体,蒸 馏水中的微生物,存在散射以及共振发射 等,均可吸光质点的吸光特性变化大。 (3)光程的不一致性。 )光程的不一致性。 光源不是点光源,比色皿光径长度不一 致,光学元件的缺陷引起的多次反射等,均 造成光径不一致,从而与定律偏离。
红移和紫移 在有机化合物中,常常因取代基的变更 或溶剂的改变,使其吸收带的最大吸收波长 λmax发生移动。向长波方向移动称为红移(表33),向短波方向移动称为紫移。
2.2 有机化合物的吸收带 吸收带( 吸收带(absorption band): 在紫外光谱中,吸 收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分 子轨道的种类,可将吸收带分为四种类型。 (1) R吸收带 (2) K吸收带 (3) B吸收带 (4) E吸收带
紫外分光光度计的使用原理和方法 紫外-可见吸收光谱 朗伯-比耳定律 朗伯 比耳定律 紫外-可见分光光度计 分析条件的选择 测定方法 在医学检验中的应用
紫外-可见分光光度法(ultraviolet-visible spectrophotometry, UV-VIS) 它是利用物质的分子或离子对某一波 长范围的光的吸收作用,对物质进行定性 定性 分析、定量分析 结构分析, 定量分析及结构分析 分析 定量分析 结构分析 所依据的光 谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的 光而产生的吸收光谱。 按所吸收光的波长区域不同,分为紫外 分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外可见分光光度法。
3. 电荷迁移光谱 某些分子既是电子给 电子给 电子受体,当电子受辐射能激发 体,又是电子受体 电子受体 从给体外层轨道向受体跃迁时,就会产生 较强的吸收,这种光谱称为电荷迁移光谱。 如 苯酰基取代物在光作用下的异构反应。
1.4 影响紫外-可见吸收光谱的因素 影响紫外物质的吸收光谱与测定条件有密切的关系。 测定条件(温度、溶剂极性、pH等)不同, 吸收光谱的形状 吸收峰 形状、吸收峰 形状 吸收峰的位置、吸收强度 吸收强度 等都可能发生变化。 1.温度 在室温范围内,温度对吸收光谱的影 响不大。
3.双波长分光光度计 双波长分光光度计的优点:是可以在有 背景干忧或共存组分吸收干忧的情况下 对某组分进行定量测定。 国产WFZ800-5型、岛津UV-260型、 UV-265型等。
三、分光光度计的校正和检验 1.波长校正 2.吸光度校正 3.杂散光的检验 4.稳定性的检验
§4 分析条件的选择 一、 仪器测量条件的选择 1.适宜的吸光度范围 由朗伯-比尔定律可知: A=lg1/T=εcl 微分后得: dlgT=0.4343dT/T= -εldc 或 0.4343∆T/T= -εl∆c
参比溶液的选择视分析体系而定,具体有: 1.溶剂参比 试样简单、共存其它成分 溶剂参比 对测定波长吸收弱,只考虑消除溶剂与吸 消除溶剂与吸 收池等因素; 收池 2.试样参比 如果试样基体溶液在测定 试样参比 波长有吸收,而显色剂不与试样基体显 色时,可按与显色反应相同的条件处理 试样,只是不加入显色剂。
紫外紫外-可见分光光度法的特点: 1 与其它光谱分析方法相比,其仪器设备和 仪器设备和 操作都比较简单,费用少,分析速度快; 操作都比较简单,费用少,分析速度快 2 灵敏度高 灵敏度高; 3 选择性好 选择性好; 4 精密度和准确度较高 精密度和准确度较高; 5 用途广泛 用途广泛。
§1. 紫外-可见吸收光谱 紫外1. 物质对光的选择性吸收 选择性的,利用 物质对光的吸收是选择性 光 选择性 被测物质对某波长的光的吸收来了解物 质的特性,这就是光谱法的基础 光谱法的基础。 光谱法的基础
2. 溶剂 注意如下几点: (1)尽量选用低极性溶剂; (2)能很好地溶解被测物,并且形成的溶液 具有良好的化学和光化学稳定性; (3)溶剂在样品的吸收光谱区无明显吸收。 3. pH值
1.5 紫外-可见吸收光谱的应用 紫外紫外-可见吸收光谱除主要可用于物质的定量 定量 分析外,还可以用于物质的定性分析、纯度鉴定、 分析 结构分析。 1.定性分析
3.试剂参比 如果显色剂或其它试剂在 试剂参比 测定波长有吸收,按显色反应相同的条件, 不加入试样,同样加入试剂和溶剂作为参 比溶液。 4. 平行操作参比 用不含被测组分的试 样,在相同的条件下与被测试样同时进 行处理,由此得到平行操作参比溶液。
饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ→σ*, 饱合有机化合物 n→σ* 跃迁,吸收峰一般出现在真空紫外区, 吸收峰低于200nm,实际应用价值不大。 不饱合机化合物的电子跃迁类型为n→π*, 不饱合机化合物 π→π* 跃迁,吸收峰一般大于200nm。
生色团:是指分子中可以吸收光子而产生电 子跃迁的原子基团。人们通常将能吸收紫外、 可见光的原子团或结构系统定义为生色团。 见表3-1和3-2。 助色团:是指带有非键电子对的基团,如OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等, 它们本身不能吸收大于200nm的光,但是当 它们与生色团相连时,会使生色团的吸收峰 向长波方向移动,并且增加其吸收强度。见 表3-4。
2 单色器 单色器的主要组成:入射狭缝、出射狭 缝、色散元件和准直镜等部分。 单色器质量的优劣,主要决定于 色散元件的质量。色散元件常用棱镜 棱镜 和光栅。 和光栅
3 吸收池 吸收池又称比色皿或比色杯,按材 料可分为玻璃吸收池和石英吸收池,前 者不能用于紫外区。 吸收池的种类很多,其光径可在 0.1~10cm之间,其中以1cm光径吸收池 最为常用。