临床中药学

中文名称：五灵脂酸

中文拼音：wulingzhisuan

英文名称：

原料来源：由香雪制药股份有限公司合成部提供，编号为：150101

对照品提供：由中国药品生物制品鉴定所提供，纯度为99.5%

三批提取物五灵脂酸片编号：201506022、201506023、201506024

外观形状：

样品批号外观形状

201506022 白色薄膜衣片，除去薄膜后显类白色

201506023 白色薄膜衣片，除去薄膜后显类白色

201506024 白色薄膜衣片，除去薄膜后显类白色

鉴别：

紫外分光光度法：取批次为20150622五灵脂酸片10片，除去薄膜，置于研钵中研磨至细粉，过筛，精密称取适量（约相当于五灵脂酸10mg）置于100ml量瓶中，加适量乙醇，超声提取20min，加乙醇至刻度线，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密称量续滤液3ml，置于25ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，用分光光度法（中国药典2005年版二部附录ⅣA），在200~400nm的波长范围内扫描。三批五灵脂酸药品及对照品紫外吸收光谱结果如下

样品编号最大吸收波长

λ

对照品212.0nm

20150622 212.0nm

20150623 212.0nm

20150624 212.0nm

结论：五灵脂酸片三批样品与对照品紫外吸收一致，且在该波长具有较大的吸收系数，因此可作为含量测定的检测波长。

高效液相色谱法：在含量测定项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致。对照品及三批样品HPLC图见附图10-6~10-9。保留时间结果见表10-4。

表10- 1 样品HPLC图主峰的保留时间

样品批号主峰保留时间(min)

对照品13.167

20150622 13.260

20150623 13.335

20150624 13.285

结论：五灵脂酸片三批样品主峰的保留时间与对照品主峰的保留时间相一致。

检查

溶出度

方法

照溶出度测定法（中国药典2010年版二部附录X C第二法）测定。

仪器与试剂

ZRS-8智能溶出试验仪（天津大学无线电厂制造）

岛津LC-10ATVP泵

岛津SPD-10A VP紫外可见光多波长检测器

TL9900色谱数据工作站

色谱柱迪马Diamonsil-C18 柱（5 m，250mm×4.6mm）

磷酸二氢钠（分析纯，北京红星化工厂，批号000420）

磷酸（分析纯，北京市益利精细化学品有限公司，批号000325）

甲醇（色谱纯，天津西华特种试剂厂）

测定法

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以

0.05mol/L磷酸二氢钠溶液[用磷酸（1→10）调节pH值至2.5]-甲醇（41: 59）为流动相；检测波长为212nm。理论板数按非索非那定计算应不低于3000。

取本品，以水为溶剂，照溶出度测定法（中国药典2010年版二部附录X C 第二法）测定，转速为每分钟75转，依法操作，在45分钟取溶液5ml，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取五灵脂酸片对照品适量，精密称定，用水超声溶解并定量稀释制成每1ml中约含33ug的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部V D），取上述两种溶液各10 l注入液相色谱仪，按外标法以峰面积计算出每片中五灵脂酸片的溶出量。限度为标示量的80%，应符合规定。

方法的建立

五灵脂酸片片溶出度测定检测波长的确定

取五灵脂酸片对照品适量，加水，超声，溶解，加磷酸盐缓冲液定量稀释制成每1ml中约含6 g的溶液，照分光光度法（中国药典2005年版二部附录ⅣA）在200~400nm的波长范围内扫描。

取五灵脂酸片片辅料混合物适量，同法配制，在200~400nm波长范围内扫描

五灵脂酸片对照品及辅料的紫外扫描结果

名称λmax（nm）

五灵脂酸片对照品218.8

空白辅料---

结论：五灵脂酸片对照品在212nm波长处有较大吸收峰而空白辅料在此波长处无吸收，辅料不干扰本品的溶出度测定。

溶出条件的确定

色谱条件

同五灵脂酸片原料药有关物质项下。

溶出介质

溶出介质为水，溶出介质的HPLC图如下图。

空白辅料的干扰性试验

取五灵脂酸片片的空白辅料适量，置200ml的量瓶中，加水超声并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液10 l，注入液相色谱仪，见附图10-13。在空白辅料的HPLC图谱上无色谱峰出现，五灵脂酸片片的空白辅料不干扰其溶出度的测定。

结论：五灵脂酸片溶出度测定的色谱条件定为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸二氢钠溶液[用磷酸（1→10）调节pH值至2.5]-甲醇（41:59）为流动相；检测波长为210nm。理论板数按非索非那定？计算应不低于3000。

溶出介质的筛选

根据五灵脂酸片原料药的理化性质研究结果，五灵脂酸片微溶于水，易溶于碱性介质，不溶于酸。因此，用0.1mol/L盐酸溶液、磷酸盐缓冲液（pH6.8）和水为溶出介质，进行介质筛选。五灵脂酸片片在不同介质中的溶出度测定结果见表，测定条件为：桨法，75转/分，介质为900ml。检测波长212nm。

溶出介质筛选结果（%）

介质时间

(min)

1 2 3 4 5 6 平均值±SD

水5 88.97 90.29 90.34 90.52 89.69 90.64 90.08±0.70 10 94.52 94.36 93.89 93.68 94.52 95.01 94.33±0.51 20 95.01 94.86 94.75 95.12 95.34 95.33 95.07±0.25 30 95.69 96.25 96.32 95.87 96.35 96.47 96.16±0.32 45 96.87 97.82 96.53 97.55 97.34 97.62 97.29±0.51 60 98.68 99.16 99.75 99.27 98.38 98.67 98.99±0.51

盐酸溶液0.1mol/L 5 62.56 62.38 63.86 63.45 62.89 62.37 62.92±0.98 10 81.89 82.03 82.31 82.43 81.78 82.04 82.08±0.30 20 86.75 85.37 86.21 86.29 86.39 87.24 86.38±0.72 30 90.89 91.39 91.82 90.76 91.64 91.42 91.32±0.46 45 92.64 92.68 93.54 93.52 92.69 92.72 92.97±0.47 60 94.68 93.82 93.54 94.66 94.34 94.26 94.22±0.48