实验七
实验7 昆虫标本的采集方法
• 捕虫网
• 吸虫管
• 振虫布
• 筛子
• 毒瓶
以往多用氰化钾、乙醚或氯仿 等制作毒瓶，缺点是对人毒性大， 不安全，或易挥发，效果不好。
• 用乙酸乙酯作为杀虫药剂。 • 用棉花或面巾纸作为药剂载体。 • 药剂加至载体湿润为止。
优点： • 与氰化钾、乙醚等以往的毒瓶相比， 毒性小、不易挥发。 • 处死的标本不易变形、发霉。
各种采集场所
• 森林
• 溪水边
• 寄主植物
作业：
参考相关文献资料，总结等
三角盒
三角纸袋
• 干漏斗
将落叶放入篮中，上方用 灯加热、烘干。
将收集的落叶放入漏斗内。
• 诱虫罐
将诱虫罐埋在地表昆虫 出入的地方。
诱饵： • 瓜果类、肉类、 啤酒、 甜饮料
• 诱虫灯
二、采集技巧
• ⑴ 注意多种场所：除树上、草丛外，特别要 注意树皮、朽木、落叶、蘑菇、草堆、腐烂 的瓜菜、水溪边等。 • ⑵ 采集落叶中昆虫时，半湿半干的落叶，在 干湿交界处最多；连成大片的落叶中不易采 集；与泥土混在一起的落叶中不易采集；在 背风处聚集的落叶中是采集的重点。 • ⑶ 采集枯枝落叶或蘑菇上的昆虫时，预先不 能干扰这些落叶，准备好筛子、吸虫管后， 快速将落叶置于筛子中，否则昆虫将大部分 逃走。
实验7(挥发酚的测定)
4-AAP分光光度法测苯酚
1、条件： pH9.8~10.2 2、原理：在铁氰化钾存在的条件下，酚类 化合物与4-AAP反应生成橙红色染料。
λmax=510nm
λmax=510nm
pH9.8~10.2
比色管 (5Biblioteka mL)0.1 mL 氯化铵 缩合 反应
0.1 mL 4-AAP 0.2 mL 铁氰化钾
橙红色 λmax=510nm
3.实验仪器与试剂
仪器: 分光光度计 比色管 刻度吸管 移液管
试剂: 苯酚标准液 溴酸钾--溴化钾 pH＝10缓冲液 4-氨基安替比林 铁氰化钾 淀粉 碘化钾 硫代硫酸钠
4.操作步骤
用硫代硫酸钠标定苯酚，制作标准色列 管 分光光度计的校正 水样显色、比色 标准曲线绘制 计算
备注
注意事项： 每加完一种试剂，须摇匀，使反应完全； 分光光度计的校正； 矫零和测定用同一个比色皿； 注意测定过程中不要碰到波长旋钮； 掌控好标准液的加入体积，末梢一滴不吹； 需带：坐标纸、铅笔、橡皮擦、直尺。 课时：4
作业
1、完成实验报告。
环境质量监测技术
本次课内容
实验七：挥发酚的测定
1.实验目的
掌握4-氨基安替比林（ 4-AAP ）分光 光度法测挥发酚的原理和方法。 练习标准系列的比色法； 巩固标准曲线的制作方法。
2.原理
预处理：蒸馏法
原理： 4-氨基安替比林与酚类化合物在PH＝10 溶液中，在氧化剂铁氰化钾作用下，生 成橙红色的吲哚酚安替比林染料，于 510nm波长下测吸光度，由标准曲线上 查出含量。
实验7：甲基橙的制备(6h)
实验七甲基橙的制备（6h）（实验类型：综合设计）一、实验目的学习甲基橙制备的原理和方法，掌握重氮化反应、偶合反应和重结晶等基本操作。
二、实验原理p-H2N-C6H4-SO3H + NaOH →p-H2N-C6H4-SO3Nap-H2N-C6H4-SO3Na + NaNO2 + HCl →[p-HO3S-C6H4-N2+]Cl-[p-HO3S-C6H4-N2+]Cl-+C6H5N(CH3)2+HOAc→[p-HO3S-C6H4-N=N-C6H4-NH(CH3)2-p]+OAc-酸性黄(嫩红色)[p-HO3S-C6H4-N=N-C6H4-NH(CH3)2-p]+OAc-+NaOH →p-NaO3S-C6H4-N=N-C6H4-N (CH3)2-p甲基橙(橙黄色)三、主要试剂与仪器试剂：对氨基苯磺酸2g（0.0 mol）亚硝酸钠0.8g（0.0mol）5%NaOH溶液10mL 冰块10%NaOH溶液15mL 浓盐酸2.5mL 冰醋酸1mL N,N-二甲基苯胺1.3mL 饱和氯化钠溶液仪器：烧瓶（100mL）烧杯（50mL）温度计（200~300℃）玻棒布氏漏斗抽滤瓶电热套循环水真空泵冰箱烘干箱四、实验步骤1、对氨基苯磺酸重氮盐的制备在100mL烧杯中加2g对氨基苯磺酸，加10mL5%氢氧化钠溶液，加热使之溶解。
冷至室温后，加5mL16%亚硝酸钠溶液和8mL冰水，在搅拌下滴入5mL1：1（V/V）的盐酸溶液，并在冰浴中维持15min。
2、偶合在一支试管中加入1.3mL N,N-二甲基苯胺和1mL冰醋酸，振荡使之混合。
在搅拌下将此溶液慢慢加到刚制备的对氨基苯磺酸重氮盐溶液中，加完后，继续搅拌10min。
在冷却和搅拌下，慢慢加入28mL 5%NaOH溶液，粗产物析出。
将反应物加热至沸腾，使粗产物溶解后，稍冷，置于冰浴中冷却，等甲基橙全部析出后，抽滤收集结晶。
用2×10mL饱和氯化钠水溶液冲洗烧杯后，转续洗涤粗产品。
实验七 验证机械能守恒定律
实验七 验证机械能守恒定律1．实验目的验证机械能守恒定律。
2．实验原理(如图1所示) 通过实验，求出做自由落体运动物体的重力势能的减少量和对应过程动能的增加量，在实验误差允许范围内，若二者相等，说明机械能守恒，从而验证机械能守恒定律。
图13．实验器材打点计时器、交流电源、纸带、复写纸、重物、刻度尺、铁架台(带铁夹)、导线。
4．实验步骤(1)安装器材：将打点计时器固定在铁架台上，用导线将打点计时器与电源相连。
(2)打纸带 用手竖直提起纸带，使重物停靠在打点计时器下方附近，先接通电源，再释放纸带，让重物自由下落，打点计时器就在纸带上打出一系列的点，取下纸带，换上新的纸带重打几条(3～5条)纸带。
(3)选纸带：分两种情况说明①若选第1点O 到下落到某一点的过程，即用mgh ＝12m v 2来验证，应选点迹清晰，且第1、2两点间距离接近2__mm 的纸带(电源频率为50 Hz)。
②用12m v 2B －12m v 2A ＝mgh AB 验证时，由于重力势能的相对性，处理纸带时选择适当的点为基准点即可。
5．实验结论 在误差允许的范围内，自由落体运动过程机械能守恒。
1．误差分析(1)测量误差：减小测量误差的方法，一是测下落距离时都从O 点量起，一次将所打各点对应重物下落高度测量完，二是多测几次取平均值。
(2)系统误差：由于重物和纸带下落过程中要克服阻力做功，故动能的增加量ΔE k ＝12m v 2n 必定稍小于重力势能的减少量ΔE p ＝mgh n ，改进办法是调整安装的器材，尽可能地减小阻力。
2．注意事项(1)打点计时器要竖直：安装打点计时器时要竖直架稳，使其两限位孔在同一竖直线上，以减少摩擦阻力。
(2)重物应选用质量大、体积小、密度大的材料。
(3)应先接通电源，让打点计时器正常工作，后释放纸带让重物下落。
(4)测长度，算速度：某时刻的瞬时速度的计算应用v n ＝h n ＋1－h n －12T，不能用v n ＝2gh n 或v n ＝gt 来计算。
实验七 醋酸纤维薄膜电泳法分离牛血清蛋白
实验七醋酸纤维薄膜电泳法分离牛血清蛋白一.目的掌握醋酸纤维薄膜电泳法分离蛋白质的原理和方法。
二、原理蛋白质是两性电解质。
当PH>PI时，蛋白质为负离子，在电场中向阳极移动；当PH<PI时，蛋白质为正离子，在电场中向阴极移动。
血清中含有数种蛋白质，在同一PH值时，因所带电荷不同，而在电场中的移动速度也不相同，故可用电泳法将其分离。
本试验以牛血清为材料，醋酸纤维薄膜为支持物，通过点样、电泳、染色、脱色从而得到血清中蛋白质的分离图谱，再进行观察和定量分析。
血清中含白蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等。
其等电点低于pH7.0，在缓冲液中（pH8.6）中，电离成负离子，在电场中向阳极移动。
用醋酸纤维薄膜作蛋白电泳有简便，快速，分离清晰，容易定量等优点。
三、实验仪器1、牛血清2 、醋酸纤维薄膜3 、镊子4 、电泳仪5 、电泳槽6 、盖玻片四、实验试剂1、巴比妥—巴比妥钠缓冲液（离子强度，PH8.6）：称取巴比妥1.66g 和巴比妥钠12.76g，溶于蒸馏水并稀释至1000ml。
用pH计较正后使用。
2、染色液：氨基黑10B0.5g,甲醇50ml，冰乙酸10ml，蒸馏水40ml 混匀即可。
3、漂洗液：95%乙醇45ml，冰乙酸5ml和蒸馏水50ml混匀即可。
五、实验步骤1、准备：用镊子取薄膜一条，浸入缓冲液中，完全浸透后（大约3-5分钟），用镊子取出，将无光泽的一面向上，平放在干净滤纸上，将滤纸对折，吸取多余的缓冲液（注意不要吸的太干）。
2、点样：取盖玻片一块，用玻璃棒将血清均匀的涂在盖玻片的一端面上，直直的在薄膜一端1/3处点样。
3、电泳：将薄膜平贴于放在电泳槽上并已浸透缓冲液的滤纸上，无光泽面要向下放置，点样端放在阴极，进行电泳。
电泳条件：电压90-110V，电流0.4-0.6A,通电60分钟。
4、染色：电泳完毕，将薄膜浸入染色液（回收）中10分钟，进行染色。
5、漂洗：染色完毕，将薄膜取出，放入漂洗液中漂洗至背景无色，在浸入蒸馏水中。
实验七
pH对微生物生长的影响 对微生物生长的影响
菌种： 菌种：大肠杆菌 培养基：LB培养基 培养基：LB培养基 步骤： 步骤： 取培养18 20小时的大肠杆菌斜面一支 18- 小时的大肠杆菌斜面一支， 1、取培养18-20小时的大肠杆菌斜面一支，倒 5ml无菌水 用接种环将菌苔轻轻刮下、 无菌水， 入5ml无菌水，用接种环将菌苔轻轻刮下、振 制成均匀的菌悬液。 荡，制成均匀的菌悬液。 pH3、 11的LB试管 试管。 2、取pH3、5、7、9和11的LB试管。 向每管接入大肠杆菌菌液0.2ml 0.2ml。 3、向每管接入大肠杆菌菌液0.2ml。 37度温度下培养 24小时观察结果 度温度下培养， 小时观察结果。 4、在37度温度下培养，24小时观察结果。
环境因素对微生物生长的影响
抗生素的抑菌作用
菌种： 菌种：大肠杆菌 培养基：LB固体培养基 培养基：LB固体培养基 步骤： 步骤： 取培养18 20小时的大肠杆菌斜面一支 倒入5ml 18- 小时的大肠杆菌斜面一支， 1、取培养18-20小时的大肠杆菌斜面一支，倒入5ml 无菌水，用接种环将菌苔轻轻刮下、振荡， 无菌水，用接种环将菌苔轻轻刮下、振荡，制成均 匀的菌悬液。 匀的菌悬液。 LB固体培养基平板一块 固体培养基平板一块。 2、取LB固体培养基平板一块。 表面接种大肠杆菌菌液0.2ml 0.2ml。 3、表面接种大肠杆菌菌液0.2ml。 放入2个牛津杯，各加入链霉素0.2ml 0.2ml。 4、放入2个牛津杯，各加入链霉素0.2ml。 37度温度下培养 24小时观察结果 抑菌圈）。 度温度下培养， 小时观察结果（ 5、在37度温度下培养，24小时观察结果（抑菌圈）。
成分 蔗糖 NH4NO3 KH2PO4 混合液 蒸馏水 完全 6 ml 3 ml 1 ml 1 ml 4 ml 缺碳 0 ml 3 ml 1 ml 1 ml 10 ml 缺氮 6 ml 0 ml 1 ml 1 ml 7 ml 缺磷 6 ml 3 ml 0 ml 1 ml 5 ml
07实验7 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
722S型或721型分光光度计、容量瓶(100mL,50mL)、吸量管 １、铁标准溶液：含铁0.1mg/ml。 准确称取0.8634g的NH4Fe(SO4)2·12H2O，置于烧杯中，加入 20ml1:1HCl和少量水,溶解后,定量地转移至１升容量瓶中，以水稀释之 刻度，摇匀。 ２、邻二氮菲：0.15％(10-3mol/L)新配制的水溶液。 ３、盐酸羟胺： 10％水溶液（临用时配制） ４、醋酸钠溶液 1mol/L
实验七 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
一、实验目的
1.学会吸收曲线及标准曲线的绘制，了解分光光度法的基本原理。
2.掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。 3.学会722S型分光光度计的正确使用，了解其工作原理。 4.学会数据处理的基本方法。 5.掌握比色皿的正确使用。
二、实验原理
根据朗伯—比耳定律：A=εbc，当入射光波长λ及光程b一定时， 在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要 绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光 度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。同时，还 可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机，得到相应的分析结 果。
选用1cm比色皿，以试剂空白为参比溶液(为什么?)，取4号容量瓶 试液，选择440～560nm波长，每隔10nm测一次吸光度，其中500～520nm 之间，每隔5nm测定一次吸光度。以所得吸光度A为纵坐标，以相应波长 λ为横坐标，在坐标纸上绘制A与λ的吸收曲线。从吸收曲线上选择测 定Fe的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax为测定波长。
用分光光度法测定试样中的微量铁，可选用的显色剂有邻二氮菲 (又称邻菲罗啉)及其衍生物、磺基水杨酸、硫氰酸盐等。而目前一般采 用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消 除等优点。
试验七茶叶中咖啡因的提取
实验七茶叶中咖啡因的提取一、实验目的1、掌握从茶叶中提取生物碱的原理和方法2、巩固和熟悉利用显微熔点测定仪测定纯净物的熔点。
二、实验原理茶叶中含有多种嘌呤类衍生物的生物碱，其中主要成分为丹宁酸（又称鞣酸，约占11~12%，易溶于水和乙醇）、咖啡因（又称咖啡碱，约占1~5%），尚有少量的茶碱、可可豆碱，此外，还有约0.6%的色素，纤维素和蛋白质等。
OH3C CH3N NO N NCH3咖啡因的学名为1，3，7—三甲基黄嘌呤，具有弱碱性，无臭、味苦，置露于空气中，可以被风化，100℃时失去结晶水，并开始升华，120℃升华加快，170℃以上显著升华，可溶于水、丙酮和乙醇，易溶于氯仿，较难溶于乙醚和苯。
水溶液对石蕊试红呈中性反应。
咖啡因可用提取法或合成法获得。
本实验是用提取法从茶叶中提取咖啡因。
三、仪器与试剂1、仪器：250mL烧杯、丁字形玻璃棒、酒精灯、布氏漏斗、吸滤瓶、短颈漏斗、蒸发皿、滤纸、循环水真空泵、显微熔点测定仪等。
2、试剂：茶叶、氧化钙、蒸馏水、CaCO3。
四、实验步骤：1、称取5g茶叶、5g CaCO3[1]转入盛有75mL蒸馏水的烧杯中，用小火加热煮沸30min（其间加入少量的蒸馏水以弥补蒸发了的水分）。
趁热过滤，将滤液倒入干净的烧杯中，浓缩至10mL左右，转入蒸发皿中并加入氧化钙[2]2g，用小火焙干后研细备用（焙干时温度不宜过高，避免升华）。
2、取一支合适的短颈漏斗，颈部用脱脂棉塞住，罩在隔以刺有许多小孔的滤纸的蒸发皿上，小心加热[3]进行升华，（适当控制火焰，尽可能使升华速度放慢，提高结晶纯度），升华结束后冷却至室温，再揭开漏斗和滤纸，仔细观察滤纸上的晶体形状。
3、收集产品，并测定其熔点。
咖啡因纯品为白色针状晶体，熔点：236~238℃。
注释：[1] 加入CaCO3是使茶叶中的生物碱在弱碱性体系中充分游离出来，并使鞣酸水解成糖和没食子酸，从而溶解在水中。
没食子酸又叫五倍子酸，其结构如下：OHHOOC OHOH[2] 生石灰起吸水和中和作用，用以除去部分杂质。
实验七 制剂溶出度实验
制剂溶出度实验
实验指导
溶出度测定方法：
第一法：转蓝法
第二法：转桨法
第三法：小杯法
制剂溶出度实验
实验内容与操作
实验材料与设备
实验材料：维生素B2片、冰醋酸、4%氢氧化钠溶液。
制剂溶出度实验
实验内容与操作
实验材料与设备 实验器材：
制剂溶出度实验
实验内容与操作
实验材料与设备 实验器材：
制剂溶出度实验
溶出度数据记录及处 理以六个小组为一大 组，格式可参考《药 剂学》第465页。注 意：必须在表前将公 式及计算过程写固体制剂需测定溶出度？
2.溶出度测定时应注意哪些问题？
责任编辑：…… 撰稿教师：……（以姓氏为序） 电子编辑：…… 主编：…… 制作：……
药学实验教学中心
制剂溶出度实验
实验内容与操作
维生素B2片的溶出度测定
计算：按C17H20N4O6的吸收系数为 （E1cm1%）为323计算出每片的溶出量，限 度应为标示量的75%。 根据公式 A=ECL C=A/EL 得
制剂溶出度实验 实验报告格式
1.实验题目 2.处方 3.制法 4.实验结果 5.讨论 6.思考题
实验内容与操作
实验材料与设备 实验器材：
制剂溶出度实验 实验内容与操作
维生素B2片的溶出度测定
维生素B2片 生产厂家： 生产批号：
标示含量：
制剂溶出度实验 实验内容与操作
维生素B2片的溶出度测定
避光操作：取本品，照溶出度测定法（中国药典2005 年版附录73页），以冰醋酸3ml与4%氢氧化钠18ml， 加水至600ml为溶剂（配650ml），转速为每分钟100 转，依法操作，经20分钟时取溶液10ml，滤过，取续 滤液，照分光光度法（附录22页；在444nm的波长处 测定吸收度，
实验七过氧化物酶的显示
【观察与成果】
骨髓细胞内能够见到蓝色或者棕色旳颗粒， 即过氧化物酶所在旳部位。
【试验环节】
用颈椎脱臼法处死小鼠，剪开大腿上旳皮肤和肌肉， 取出股骨；
剪断或者折断股骨，用牙签挑取骨髓，放置于载玻片 上制成涂片，晾干；
将涂片上滴加几滴0.5% CuSO4，固定1分钟； 倾去CuSO4溶液，滴加0.1%联苯胺混合液，染色6分
钟； 用自来水或蒸馏水冲洗，滴加1%番红染液（染色细胞
试验7 细胞内过氧化物酶旳显示
联苯胺反应
【试验目旳】
掌握联苯胺反应法显示细胞内过氧化物酶旳原 理和措施。
过氧化物酶 - 定义
利用过氧化氢作为电子受体来催化底物氧化作 用旳酶。
【试验原理】
细胞内旳过氧化物酶能够催化过氧化氢氧化联 苯胺成蓝色或者棕色产物，蓝色为中间产物联 苯胺蓝，很不稳定，可自然转变为棕色旳联苯 胺腙，经过产物颜色间接显示出细胞内过氧化 物酶旳分布。
【试验仪器、材料和试剂】
光学显微镜；小白鼠、剪刀、镊子、载玻片、 牙签、吸管。
0.5% CuSO4（0.5克CuSO4溶于100ml蒸馏 水中）、联苯胺混合液（0.1克联苯胺在研钵 中加少许蒸馏水研成细浆，加入100ml蒸馏水， 过滤后加入2滴3%双氧水，放棕色瓶中备用）、 1%番红[1克番红O（Safranine O）染料溶于 100ml蒸馏水中]。
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【实验目的】： 通过设计与仿真一个计数器，使同学们更全面的理解多进制计数器电路的 设计过程，同时掌握数字电路的基本设计与仿真技能。 【实验内容】： 一、应用两片74160或者74161芯片（可根据需要添加逻辑门）设计一个60进 制计数器。设计电路，并分析输出波形，如图7-1所示。 二、用四片74161及若干基本逻辑门设计一个20×20进制计数器，要求用层次 化设计方法完成设计。其中每个BLOCK（H1和H2)各用两片74161，如图72所示。其输出波形如图7-3所示。 【实验要求】： 本次实验要求同学们完成实验内容的第一项。实验内容二作为课后练习， 实验报告书写要求包括：实验题目、实验目的、实验内容、实验步骤、实验 结果（实验数据、仿真波形及对结果的分析）、实验过程中遇到的问题及解 决方法、实验心得总结。
CLK RST D0};;H
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
0
1
2
48ms
50ms
52ms
54ms Time
56ms
58ms
60ms
62ms 63ms
图7-1
H1
H2
20 进 制 计 数 器
20 进 制 计 数 器
S_D[0..7]
S_D[0..7]
M_D[0..7]
M_D[0..7]
400.0us
405.0us
410.0us
图7-3
S_CLK
M_CLK_I
S_RST
M_RST
20
20
图7-2
H2 H1
18 14 15 16 17 18 19 0
1
2
3
4
5
6
7
8
19 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 0
1
2
3
4
5
0 6
7
8
9 10 11
375.0us
380.0us
385.