基因工程练习题
高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)
高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)XXX《基因工程》练题题号得分一一、单选题（本大题共20小题，共20.0分）1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（）二总分A.解旋酶、限制酶、DNA连接酶C.限制酶、DNA连接酶、解旋酶B.限制酶、解旋酶、DNA连接酶D.DNA连接酶、限制酶、解旋酶2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快D.只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.如图为基因表达载体的模式图。
以下有关基因工程的说法错误的是（）A.基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B.任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C.图中启动子和终止子分歧与起始暗码子和终止暗码子D.抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限定酶的降解。
以下在动物体内发生的过程当中，与上述细菌行为相似的是（）A.巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体B.T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子C.组织液中抗体与抗原的特异性结合D.疫苗诱导机体发生对病原体的免疫5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒作为载体（）XXX.C.D.6.下图是研究人员使用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。
以下相关叙述精确的是（）A.酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键B.Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞C.筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测D.上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（）A.切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B.PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C.载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D.目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确的是（）A.若X是DNA，Y是RNA，则Z是逆转录酶B.若X是DNA，Y是mRNA，则Z是脱氧核苷酸C.若X是RNA，Y是DNA，则Z是限制性内切酶D.若X是mRNA，Y是核糖体上合成的大分子，则Z是氨基酸9.下图透露表现的是三种黏性末端，以下说法精确的是A.甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的B.若甲中的G处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C.乙中的酶切位点在A与G之间D.目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物10.如图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。
基因工程试题及答案解析
基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。
答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。
答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。
在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。
2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。
四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。
重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。
然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。
基因工程练习题
基因工程练习题一、选择题1. 基因工程中常用的工具酶是：A. 纤维素酶B. 限制性核酸内切酶C. DNA聚合酶D. RNA聚合酶2. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 基因的转录D. 目的基因的检测与鉴定3. 基因工程中，将目的基因导入植物细胞最常用的方法是：A. 农杆菌介导法B. 显微注射法C. 电穿孔法D. 脂质体介导法4. 基因工程中，检测目的基因是否成功表达的方法是：A. DNA分子杂交技术B. 抗原-抗体杂交技术C. 酶联免疫吸附测定D. 所有选项都是5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 生产重组疫苗C. 基因诊断D. 基因编辑二、填空题6. 基因工程的基本操作步骤包括四个环节：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的________和鉴定。
7. 基因工程中，常用的运载体包括质粒、噬菌体的衍生物以及________。
8. 基因工程在农业上的应用包括抗虫转基因植物的培育、抗病转基因植物的培育、耐除草剂转基因植物的培育以及________转基因植物的培育。
9. 基因工程在环境保护方面的应用包括污染物的生物降解、生物修复等，其中生物修复是指利用生物，特别是微生物催化降解________，从而净化环境。
10. 基因工程产品在食品工业中的应用包括生产________、改良食品加工所需的酶等。
三、简答题11. 请简述基因工程在医学领域的主要应用。
12. 请列举基因工程在农业领域中的三个具体应用实例。
13. 基因工程中，目的基因的检测与鉴定方法有哪些？四、论述题14. 论述基因工程在现代生物技术中的重要性及其潜在的伦理问题。
15. 基因工程产品在食品工业中的应用前景如何？请结合实例进行分析。
五、实验设计题16. 设计一个实验方案，以验证某转基因植物是否成功表达外源基因。
六、案例分析题17. 阅读以下案例：某公司利用基因工程技术培育出一种抗虫棉，该棉能够抵抗棉铃虫的侵害。
《基因工程》习题及参考答案
《基因工程》习题及参考答案一、习题：1. What are biotechnology and genetic engineering?2. What is a gene?3. What are genetically engineered medicines?4. What do genome research and human genetics deal with?5. What potentials are held out by genetic diagnosis?6. What options are given by gene therapy?7. What is an embryo - and what is a fetus?8 What is a genetic fingerprint?9 What does the term "therapeutic cloning" mean?10 What are stem cells?11 What is a transgenic organism?12 What does xenotransplantation mean?13 How will genetic engineering be used in agriculture?14 How are genetically modified organisms assessed?15 What does the German Embryo Protection Act regulate?16. What is a genome?17. Is there a risk of bioterrorism?18. How does genetic engineering affect the environment?19. Are genetically engineered crops good for farmers?20.What is the difference between restriction digestion and restriction mapping?21.Can you combine two different restriction enzymes in the same reaction tubes todigest the DNA molecules?22.Why should we need to generate restriction mapping data?23.How many restriction enzymes available now on the market?24.Why do you consider mutagenesis in vitro as one of the most critical techniquesfor us to understand in genetic engineering class?25.How do we choose the methods for DNA modification?26.How do we choose a gene expression system?27.How can we express eukaryotic gene in E.coli?28.What should we consider before we start the recombinant protein expressionexperiment?29.What is the advantage of yeast expression system?30.What is the advantage of insect expression system?31.Why there are so many different types of vectors available for cloning?32.What is the difference between cloning vector and expression vector?33.What is a genetic fingerprint?34. 基因具体分成多少种类？35. 什么叫印记基因？36．什么叫遗传漂变？37．人类基因组图谱和初步分析结果是在哪一年公布的？38．人类基因组共有多少基因?39. 克隆羊成功的技术关键是什么？40. 有人计划将两个不同物种的动植物体细胞进行融合，然后将融合体的核移植到其中一种生物的未受精卵细胞中，进行体细胞克隆。
基因工程试题及答案
《基因工程》一、选择题（每小题1.5分，共15分)1．基因工程的创始人是（）。
A A。
KornbergB W。
GilbertC P。
BergD S. Cohen2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有（）不太恰当。
A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D 不同的宿主系统具有不同的限制—修饰系统3．在DNA的3’—5'链上，基因的起始密码子是（)A ATG（或GTG）B AGTC TAGD TGA4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别（）。
A 双链DNA的特定碱基对B 双链DNA的特定碱基序列C 特定的三联密码D 以上都正确5．末端转移酶是合成酶类，具有( ）活性。
A 3’→5’DNA聚合酶B 5'→3'DNA聚合酶C 5'→3'DNA内切酶D 5'→3’DNA外切酶6．下面关于松弛型质粒（relaxed plasmid）性质的描述中，( )是不正确的。
A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数.B 可以在氯霉素作用下进行扩增。
C 通常带有抗药性标记。
D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。
7．关于cDNA的最正确的说法是（）.A 同mRNA互补的单链DNAB 同mRNA互补的双链DNAC 以mRNA为模板合成的双链DNAD 以上都正确8．关于T4 DNA Ligase,下列说法中哪一项不正确？（）A 是最常用的DNA连接酶.B 不但能连接粘性末端,还能连接齐平末端。
C 不但能连接粘性末端。
D 最适温度37 ℃.9．下列关于建立cDNA文库的叙述中,（）是错误的?A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNAB 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAD 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞10．用下列方法进行重组体的筛选，只有（）说明外源基因进行了表达.A Southem blotB Northem blotC Western印迹D 原位菌落杂交二、填空题（每空1分，共25分)1．限制性内切核酸酶分为三类，基因工程中应用的是_____________。
基因工程习题集
基因工程习题集一、名词解释Southern blotting；Cosmid；cDNA library；RACE；RT-PCR；MCS ；cDNA；插入失活；反义RNA；PCR，mRNA差异显示技术；巢式PCR；实时荧光定量PCR；基因文库；星号活性；载体；转化；转染二、填空题1.基因工程的四大要素是、、、2.在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用酶3.用冷的氯化钙处理对数生长期的大肠杆菌细胞，可以诱导细胞进入称为态的生理状态进行遗传转化。
4.写出在质粒载体图谱上下列符号表示的含义：Amp , LacZ , ori ,MCS 。
5.PCR包括三个步骤_ ，，。
6.限制性内切酶酶切DNA片断后通常有两类末端：、。
7.目的基因与噬菌体DNA进行重组时，可采用重组方式，也可采用重组方式。
8.柯斯质粒是一类人工构建的质粒-噬菌体杂合载体，它的复制子来自，cos 位点序列来自9分离目的基因常采用从基因组DNA中扩增含目的具有的DNA片断，或者用分子杂交等方法从构建的或中获得含目的基因的克隆子。
10.在的作用下，将含目的基因的DNA片断与克隆载体连接成为重组DNA分子11.载体根据功能可以分为和12.常用的DNA连接酶有和，前者即可以连接粘性末端又可以连接平末端，后者只可以连接粘性末端。
13.据图回答：①图中基因组文库（填“小于”、“等于”或“大于”）cDNA 文库。
②B过程需要的酶是；A、C过程中（填“可以”或“不可以”）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。
③目的基因Ⅰ和Ⅱ除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中和为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是。
二、选择题1.基因工程的设计操作是在什么水平进行的（）A.细胞B.分子C.细胞器D.原子2.基因工程的单元操作顺序是（）A 增，转，检，切，接B 切，接，转，增，检C 接，转，增，检，切D 切，接，增，转，检3.分离纯化基因组DNA应保证核酸一级结构的完整性，下列哪些因素可能导致一级结构被破坏（）A. PH 8.0B.EDTAC.PH 14D.70%乙醇4.分离纯化基因组DNA应尽量去除蛋白质的污染，实验过程中我们通常采用什么方法去除与DNA结合的蛋白质（）A.等电点沉淀法B.盐析法C.有机溶剂变性法D.强酸强碱法5.分离纯化基因组DNA时，我们通常选用以下哪种试剂来沉淀基因组DNA（）A.水B.乙醇C.氯仿D.苯酚6.关于不同构象的质粒DNA的电泳速率，下列排列顺序正确的是 ( )A ocDNA >lDNA>scDNAB scDNA >ocDNA> lDNAC ocDNA >scDNA > lDNAD scDNA >lDNA>ocDNA7.PCR技术的操作步骤依次是（）A．高温变性、中温延伸、低温复性B．高温变性、低温复性、中温延伸C．中温延伸、高温变性、低温复性D．中温延伸、低温复性、高温变性8.PCR的主要步骤不包括（）A.设计一对特异性引物B.高温使模板DNA变性C.降温到合适的温度使模板DNA与引物杂交D.加热使DNA聚合酶失活9.PCR反应体系不包括（ )A.DNA模板B.引物C.dNTPD.NTP10.核酸分子杂交实验不能用于（）A.单链DNA分子之间杂交B.单链RNA分子之间杂交C.单链DNA分子与RNA之间的杂交D.抗原与抗体分子之间的杂交11.用作探针的DNA分子必须（）A.在杂交前变性B.在杂交前复性C.是双链分子D.能形成颈环结构12.Southern blotting是（）A.将DNA转移到膜上所进行的杂交B.将RNA转移到膜上所进行的杂交C.将蛋白质转移到膜上所进行的杂交D.将多糖转移到膜上所进行的杂交13.确切地讲，cDNA文库包含（）A.一个物种的全部基因信息B.一个物种的全部RNA信息C.一个生物体组织或细胞的全部基因信息D.一个生物体组织或细胞所表达的mRNA信息14.要了解某一基因在某组织细胞中的mRNA表达水平时，采用哪种方法最合适A.Southern blottinB.Northern blottingC.Western blottingD.Eastern blotting15.DNA序列自动化测序中不正确的描述是（）A.测序原理与手工测序基本相同B.不需要引物C.需要模板D.需要四种荧光染料标记的ddNTP16.Sanger双脱氧末端终止法中不需要（）A.dNTPB.ddNTPC.DNA聚合酶D.DNA连接酶17.cDNA文库的建立不需要（）A.逆转录酶B.DNA模板C.mRNA模板D.依赖于RNA的DNA聚合酶18.下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A.细菌质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.细菌核区的DNA19.下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D.有一个或多个限制酶切点20.下列有关基因的叙述，错误的是（）A蛋白质是基因表达的唯一产物B 基因是 DNA 链上具有编码功能的片段C 基因也可以是 RNAD 基因突变不一定导致其表达产物改变结构21.下列各组专业术语中，含义最为接近的是（）A 终止子与终止密码子B 基因表达与基因转译C DNA 退火与 DNA 复性D 重组子与转化子22.下列有关连接反应的叙述，错误的是（）A 连接反应的最佳温度为 37 ℃B 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10%C 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mMD 连接酶通常应过量 2-5 倍23.下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是（）A Cosmid >λ-DNA > PlasmidB λ -DNA > Cosmid > PlasmidC Plasmid >λ -DNA > CosmidD Cosmid > Plasmid >λ-DNA24.质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A ：①③⑤⑦B ：②④⑥C ：①③⑥⑦D ：②③⑥⑦25下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是：A．①② B．①③ C．①④ D．②③26下列平末端属于同一种限制酶切割而成的是A.①③B.①④C.②③D.②④27．作为基因的运输工具——运载体，必须具备的条件之一及理由是A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B.具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C.具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合D.对宿主细胞无伤害，以便于重组DNA的鉴定和选择28.限制性内切核酸酶的星活性是指：A 在非常规条件下，识别和切割序列也不发生变化的活性。
高中生物基因工程练习题(含解析)
高中生物基因工程练习题学校:___________姓名：___________班级：___________一、单选题1．蛋白质工程中目前已成功的是( )A．对胰岛素进行改造，使其成为速效型药品B．蛋白质工程应用于微电子方面C．室温下可保存半年的干扰素D．耐储存的番茄2．下列有关限制性酶的描述，错误的是（）A．限制酶主要从原核生物中提取B．限制酶具有热稳定性C．限制酶和DNA连接酶作用的化学键相同D．一种限制酶一般只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列3．蛋白质工程的最终目的是（）A．分析蛋白质的三维结构B．研究蛋白质的氨基酸组成C．获取编码蛋白质的基因序列信息D．改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类的需求4．下列基因工程的基本操作程序中，属于基因工程核心步骤的是（）A．基因表达载体的构建B．目的基因的检测与鉴定C．将目的基因导入受体细胞D．目的基因的筛选与获取5．葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，科学家将其第 138 位甘氨酸替换为脯氨酸后，其最适温度提高了 10℃左右。
相关叙述正确的是（）A．蛋白质功能是由氨基酸的种类和数量决定B．改造蛋白质结构可通过改造基因结构实现C．蛋白质工程不可以定向改变蛋白质的结构D．酶最适温度提高是因为脯氨酸比甘氨酸更耐热6．基因和表达载体相连时既可以正向连接也可以反向连接。
下图甲、乙分别表示某质粒、含目的基因和酶切位点的DNA片段，构建基因表达载体时应用酶B和酶C进行切割，不应用酶A切割运载体和DNA片段，其原因不包括（）A．防止目的基因和运载体发生反向连接B．保证构建的重组质粒中含有标记基因C．防止目的基因或运载体重新自身环化D．保证构建的重组质粒中含有启动子7．关于基因工程和下图所示黏性末端的叙述，正确的是（）A．①与③是由相同的限制酶切割产生的B．DNA连接酶可催化①与③的连接C．经酶切形成④需要脱去2分子水D．基因工程中常用的工具酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体8．DNA琼脂糖凝胶电泳的分子筛效应是指作为支持介质的琼脂糖，具有网络结构，使大分子物质在通过时受到较大阻力，借此分离不同大小的DNA片段。
基因工程练习题带答案
基因工程练习题一、单项选择题1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用A.同种限制酶B.两种限制酶C.同种连接酶D.两种连接酶2．基因工程常用的受体有①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞A.①②③④B.①②③C.②③④D.①②④3．有关基因工程的叙述正确的是A.限制酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成是在细胞内完成的C.质粒都可作为载体D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料4．下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A.细菌质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.细菌核区的DNA5．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。
在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是A.人工合成目的基因B.目的基因与运载体结合C.将目的基因导入受体细胞D.目的基因的检测表达6．不是基因工程方法生产的药物是A.干扰素B.白细胞介素C.青霉素D.乙肝疫苗7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是A.限制酶和连接酶B.限制酶和水解酶C.限制酶和运载酶D.连接酶和运载酶8．下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D.有一个或多个限制酶切点9．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。
在转基因技术中，这种蛋白质的作用A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测和选择D.使目的基因容易成功表达10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。
这里的基因探针是指A.用于检测疾病的医疗器械B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子10/ 1C.合成β—球蛋白的DNAD.合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段11．基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。
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1．cDNA克隆与基因组克隆有何不同? 2．怎样将一个平末端DNA片段插入到EcoRI限制位点中去?
3．在Cohen构建有生物功能重组体的第一步实验中，用EcoRI切割了R6-5质粒，然后转化E．coli C600，在卡那霉素抗性子板上筛选到了pSCl01，它是由R6-5的三个EcoRI片段组成，请推测这个质粒具有什么遗传特性?
4．某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因? 5．在序列5’—CGAACATATGGAGT-3’中含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么? 6．用连接酶将Sau 3AI('GATC)切割的DNA 与经BamHI(G 'GATCC)切割的DNA连接起来后，能够被BamHI切割的机率有多大(用百分比表示)?
7．用Klenow酶填补的办法可使5’黏性末端转变成平末端。
这种方法常使DNA
上的某些限制酶的识别位点消失。
请
问，对于下列限制酶，用这种方法处
理会不会使它们的识别序列都消失?
Sau 3AI('GATC)；Taq I(T 'CGA)，
BssHⅡ(G 'CGCGC)。
8.以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因，并使之在大肠杆菌中进行表达，简要说明实验中可能遇到的问题及可能的解决办法。
9．假定你分离到一个E．coli的Thr-突变体，并推测有可能是ThrA基因突变。
请设计一个方案用PCR从染色体DNA
扩增突变的ThrA基因，测定突变的序
列。
(注：E．coli野生型的ThrA基因
的序列是已知的)
10．酵母人工染色体要在酵母细胞中稳定存在，必须有哪些基本的结构?
11．用EcoRI和HindⅢ分别切割同一来源的染色体DNA，并进行克隆，在前者的克隆中筛选到A基因，但在后者的克隆中未筛选到A基因，请说明原因。
12．一个携带有氨苄和卡那霉素抗性基因的质粒被仅在卡那霉素基因中有识别位点的EcoRI消化。
消化物与酵母DNA连接后转
化对两种抗生素都敏感的E.coli菌株。
(1)利用哪一种抗生素抗性选择接受了质粒的细胞?
(2)怎样区分接受了插入酵母DNA的质粒的
克隆?
13.限制性内切核酸酶BamH I和Pst I切割某一DNA序列，结果如图。
(1)指出切割后DNA分子的5’端和3’端；
(2)如果你将切割后的DNA同DNA聚合酶、4种dNTP在一起温育，这些DNA末端会有什么样的变化?
(3)经过(2)中的反应后，你还能够用T4 DNA 连接酶将BamH I末端连接起来吗? Pst I末端呢？
14．计算下列三种酶各自在某染色体DNA 序列上识别位点间的平均距离：
Alu I：5’AGCT 3’，EcoR I：5’GAATTC 3’TCGA 5’3’CTTAGG 5’Acy I：5’GPuCGPyC 3’
3’CPyGCPuG 5’
15.现有一段A基因序列：
ATG CAT AAT CGA CAT CGT GAT ACA GAT AAT AAT TTC TCA AAG GAC GAT GCT TGG TAT AAG CTT TAT TCT ATA CCT GAC ACA GGG CAA ATA AGA AAA TTT TCA GCA TTA GCT AGA TAT GAT CTC TGG TCA AAA GAA TAT GCA AGA GGT TTT GCT AAA ACA GGA AAA TCA GTA GCT GGA TCC TAA
已知：1、限制性核酸内切酶识别的碱基序列如下：
NcoI:CCATGG
BamHI: GGATCC
EcoRI: GAATTC
2、限制性核酸内切酶保护性碱基情况如下：NcoI: CATGCCATGGCATG，
BamHI: CGCGGATCCGCG,
EcoRI: CCGGAATTCCGG
3、载体pET-28 含有NcoI、BamHI、 EcoRI、HindⅢ、SacI单一限制性核酸内切酶识别序列。
回答下面问题：
1、在设计PCR引物时，P1引物中应该含有哪个限制酶的识别序列，P2引物中应该含有哪个限制酶的识别序列？
2、设计1对PCR引物，写出P1和P2 的引物序列。
3、如果用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，应该用多大浓度的琼脂糖凝胶比较合适？
4、要求将A基因片段克隆至表达载体pET-28相应位点上，构建含此段基因的克隆质粒，写出将A基因克隆至pET-28中的技术路线。
叙述包涵体型异源蛋白的表达、分泌型异源蛋白的表达、融合型异源蛋白的表达的优缺点。
16.依据下图设计实验，运用全酶解图谱法鉴定重组子。
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