AKTA Purifier中文操作手册
AKTApurifier中文说明书
GE Healthcare实施您ÄKTApurifier的首次运行重要用户信息所有用户必须阅读整本手册以充分理解ÄKTApurifier的使用安全。
WARNING（警告）警告标识强调必须严格遵循指令以避免人身伤害。
在说明书完全弄懂和所有规定条件都具备后才能开始动手操作。
Caution（小心）小心标识用于引起注意以避免人身伤害，必须遵循指令和条件以避免毁坏产品和其它设备。
在说明书完全弄懂和所有规定条件都具备后才能开始动手操作。
Note（注意）注意标识用于指出对产品的无故障及最佳使用的重要信息。
CE证书产品符合适用于CE规定的所有要求。
相应合格证的复印件函索即寄。
CE标志和相应合格证对该仪器是有效的。
当仪器– 连接到其它标有CE标志的 GE Healthcare 仪器上，或，– 连接到本手册中推荐或所述的其它仪器上, 和，– 除了在本手册中提到的变更外，按 GE Healthcare 所提供的说明使用。
警告本产品为A类产品。
在局部环境下，本产品可能引起无线电干扰，在此情况下用户可能需要进行适当的测量。
销售条款和规定除非另有书面协议，在 GE Healthcare 集团供应范围内，所有售出货物和服务都服从公司的销售条款和规定。
这些销售条款和规定的复印件函索即寄。
如果您对本产品有任何意见，我们将乐意接受。
请寄往：GE HealthcareSE-751 84 UppsalaSweden商标水滴图样, ÄKTA, ÄKTApurifier, UNICORN and Superloop 均为 GE Healthcare 的商标。
Amersham 和 Amersham Biosciences 为 GE Healthcare 的商标。
.Windows为Microsoft Corporation 的注册商标。
办事处地址GE HealthcareSE-751 84 UppsalaSwedenGE Healthcare 香港办事处香港九龙望角亚皆老街8号朗豪坊办公大楼12楼电话：（852）2100 6314传真：（852）2100 6338GE Healthcare 北京办事处北京市经济开发区永昌北路1号电话：（010）5806 9689传真：（010）6787 1162邮编： 100176GE Healthcare 上海办事处上海市虹桥开发区兴义路8号万都中心2401室电话：（021）5257 4650－67337传真：（021）5208 1282邮编： 200336GE Healthcare 广州办事处广州市建设六马路33号宜安广场1212室电话：（020）8363 3828－67961，67956 传真：（021）8363 3291邮编： 510060800热线：800－810－9118© GE Healthcare Life Sciences 2003版权- 所有权利受保护目录1关于本指南 (5)1．1 必要条件 (5)1．2 印刷上的规定 (5)2系统和软件 (6)2．1 概论 (6)2．2 UNICORN综述 (9)2．3 帮助 (11)3 建立方法 (12)4准备运行系统 (15)4．1 系统连接 (15)4．2 系统的一般准备 (16)4．2．1充满入口管道 (17)4．2．2 充满样品环 (17)5开始运行 (18)6查看运行 (23)7查看和打印结果 (26)7．1 查看 (26)7．2 打印和生成报告 (29)8缓冲液制备 (32)9探索 (34)10进一步应用 (36)索引（略）简短说明 (38)注意：本手册所涉及内容以英文原版为准1关于本指南本指南是为不熟悉UNICORN™ 软件和ÄKTApurifier™的用户而写的。
AKTApurifier手动命令介绍
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Watch电导曲线功能，Delta_Peak为根据峰顶 的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base为 根据平均峰高来区分不同峰的参数。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Alarms&Mon
Watch浓度曲线功能，Delta_Peak为根据峰顶 的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base为 根据平均峰高来区分不同峰的参数。
Frac
进行峰收集的曲线来源，UV为紫外， AD900为检测糖类的一个信号转换。
进行紫外曲线峰收集的参数设定，可以根 据紫外水平或者斜率来设定。
24 / GE Title or job number /
2020/3/15
Frac
进行AD900曲线峰收集的参数设定，只可 以根据AD900水平来设定。
Pump
系统泵流速压力控制模式的调节参数。一 般情况不进行改变。
样品泵流速压力控制模式：在此模式下，当样 品泵压力达到设定的压力上限时系统会自动调 节流速，从而降低压力；若达到设定最低流速 时还超过设定压力，系统报警，停止。
Pump
AKTAexplorer系统泵清洗命令。其中A1进 口有八个通道，请确认A1入口的阀门位置 。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Watch PH曲线功能，Delta_Peak为根据峰顶 的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base为 根据平均峰高来区分不同峰的参数。
Watch功能一般在自动编程方法中应用。
Alarms&Mon
Watch压力曲线功能，Delta_Peak为根据峰顶 Watch功能一般在自动编程方法中应用。 的差额来区分不同峰的参数。Delta_Base为 根据平均峰高来区分不同峰的参数。
AKTApurifier 层析操作规程
AKTApurifer层析仪操作规程
1、打开电脑和显示器，打开层析仪电源，等待仪器自检完成后，点击电脑桌
面上的UNICORN软件，输入用户名和密码进入软件控制系统。
2、系统清洗：依次用水和缓冲液。
A管放入A缓冲液中，B管放入B 缓冲
液中，进样阀4，5出口管和收集阀的废液出口接到废液瓶中，在System control窗口下，点击Manual打开pump菜单，选择PumpWashPurifier命令，指定冲洗液入口，执行。
样品环的清洗用注射器从进样阀3号位推入缓冲液，反复几次。
3、手动控制：在运行前设定Alarm & Mon 中的报警压力。
缓冲液平衡柱，
用注射器从进样阀3入口推入过滤好的样品，着路在样品环中。
待基线稳定后，在flowpath菜单中injectValve选择切换到inject状态上样，并在Alarm & Mon菜单中选autozeroUV 将紫外调零，上样后转换到load状态，进行样品的洗脱操作。
4、自动控制：先在Method Edit窗口中编辑好方法，然后用注射器从进样阀
3入口推入过滤好的样品着路在样品环中，在System control的窗口中直接按Run，调出编辑好的程序，按照提示将它运行。
5、纯化结束后，用水和20％乙醇依次清洗管路和保存。
如果用泵上样品，
运行PumpWashPurifier命令，将上样品的入口选中，并放置在1MNaOH 中，运行30min，然后用缓冲液，水和20％乙醇依次清洗和保存管路。
AKTAPurifier使用202011
平衡时不需要走整个柱体积，进样后也一样。合理安排时间，尽量不 要出现因为有事而长时间的空走。 4、用大柱子进行分析 注意：大柱子用于制备，小柱子进行分析。 5、开机使用pumpwash 注意：为避免对泵造成损伤，开机运行后不要立即使用pumpwash，应先 用低流速走几分钟。保证抽过泵头后，可省略pumpwash。 6、注意平衡时关闭紫外灯。 7、压力偏高时请不要降低流速继续使用，考虑更换滤器和通知管理员冲 洗柱子。 8、所有配件和说明书使用完后必须归位。
AKTA Purifier使用
一、仪器使用注意事项
AKTA purifier
流路图
Inlet
Pump
压力感应器
混合器 在线滤器
进样阀
色谱柱
紫外检测器
电导检测器PH计收集器使用环境对操作环境的要求： 室内温度：4－40度 相对湿度：10－90％ 输入电压：100－240VAC 功率：400AV－900AV 重量：40KG-70KG 注意事项： 1、主机要有良好的接地；计算机和主机不 要用同一电源 2、当把主机置于远端控制时，com线不要 长于15m
维护－每周
缓冲液筛网（Inlet filters）：
• 检查筛网是否很脏，如有必要须更换.
在线滤器（On-line filter）：
• 清洗滤器，如有必要须更换滤膜，否则会形成 很高的在线压力，损坏层析柱。
泵冲洗液（Pump rinsing solution）：
• 更换泵后冲洗液（20%乙醇）。如果冲洗液瓶中液体量增加，说明 泵头密封圈渗漏，须更换
AKTA全自动层析仪(AKTA Purifier)操作规程
AKTA全自动层析仪（AKTA Purifier）操作规程1.开机打开主机和电脑电源，待仪器自检完毕（CU950上面的3个指示灯完全点亮不闪烁），双击桌面上UNICORN图标，进入操作界面。
2.准备流动相和样品所有的工作溶液和样品必须经过0.45 um的滤膜过滤，样品也可高速离心后取上清备用。
当缓冲液中含有有机溶剂（如乙腈，甲醇），需在使用前用低频超声唾弃10 min。
3.清洗管道及装柱3.1首先将A1管道放入平衡液或banding buffer中，将B1管道放入高盐溶液中或elutionbuffer中，再system control窗口点击manual → pump → pump wash basic，选中A1，B1管道为ON，点击execute。
泵清洗程序会自动运行至结束。
3.2选择manual → pump → flow rate，输入流速为1 mL/min，点击insert；选择manual →alarm＆mon → alarm pressure，设置high alarm（输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到），点击insert，点击execute。
将进样阀的1号位管道接入柱子的柱头（用几滴管道中流出的液体润湿，防止空气进入），稍微拧紧后将柱子下端的堵头卸掉，直接拧入紫外流动池或连接管道（可用柱子中流出的液体润湿接头，防止空气进入）。
4.手动运行4.1平衡柱子平衡好了（观察电导COND及pH的数值曲线走稳了），此时将紫外调零：选择manual → alarm＆mon → autozero，点击execute，就准备上样了。
4.2上样4.2.1用样品环上样：将样品吸进注射器，推掉气泡，从进样阀的3号位推入（进样量不得低于样品环的体积的2倍），不要取下注射器，选择manual →flowpath → injectionValve → inject，点击execute。
4.2.2用样品泵上样（AKTA explorer系统）：将样品置于Sample Valve 1号位（可以选8个不同的位置），点击manual → pump → Direct Load_960输入进样流速和体积，点击execute。
AKTA操作说明
一、ÄKTApure层析仪简明操作规程1、开机打开仪器的主电源，打开电脑电源。
待仪器自检完毕（主机控制面板白灯常亮）。
双击桌面上UNICORN图标，进入操作界面。
2、准备工作溶液和样品所有的工作溶液和样品必须经过0.45µm的滤膜过滤（样品也可高速离心后取上清使用）。
缓冲液需在使用前用低频超声脱气15 min。
3、清洗及管道准备首先将A1管道入口放入平衡缓冲液（binding buffer）中，将B1管道入口放入洗脱缓冲液（elution buffer）中，在system control窗口点击工具栏内的manual，选择execute manual instructions→pump →pump A wash和pump B wash，选中A1和B1入口，点击execute。
泵洗完成后自动停止。
4、安装层析柱在manual instructions里选择pump→system flow，输入流速1 ml/ml，insert；选择Alarms→alarm pre column pressure，设置high alarm（输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到），insert，execute。
待Injection Valve的1号位管道流出溶液后，将管路接入柱子的上端，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉接入管道，连上紫外流动池。
5、开始纯化：1）选择检测波长，Monitors→Wavelength→UV1, UV2, UV3 (可以只打开一个波长) 等待柱子平衡好了（观察UV、COND、pH的数值和变化趋势）就可以准备上样。
此时将紫外调零，选择Monitors →auto zero UV，exectue。
2）用样品环上样：将样品吸进注射器，推掉气泡，从injectionValve的3号位推入, 上样后不要取下注射器。
在manual instructions里选择flowpath→injection Valve→inject，execute。
AKTA purify 10使用流程
Ni柱纯化His标签蛋白（5ml柱）1.打开AKTA电源，系统自检，打开电脑电源，启动Unicorn软件。
用户名选择default，密码输入default。
2.弹出4个窗口，Unicorn Main Menu窗口出现在屏幕上。
另外三个模块：Method Editor 用于建立新方法；System Control用于运行程序；Evaluation求值结果。
3.进入system control界面，Manual下拉框中选择pump，选择PumpWashBasic命令，同时选择A、B泵，保证两个泵头均在液面（纯水）下，Execute执行，对泵头和管路进行清洗。
4.Manual下拉框中选择pump，设置流速3ml/min。
5.Pause暂停，将层析柱接入系统，上端不要拧紧，将下端接入柱位阀的对应位置，将下端拧紧后再将上端拧紧。
6.Continue调整一个较小流速如0.8ml/min清洗层析柱，End。
（注：FlowRate最大与柱体积相等。
）7.将两泵头从纯水中拿出，1A管泵头放入buffer A中，1B管泵头放入buffer B中。
8.Manual下拉框中选择pump，选择PumpWashBasic命令，Pump B on先洗B泵。
B泵自动关掉后，再选择Pump B off，Pump A on，清洗A泵，使管路中充满buffer A。
9.清洗完A、B泵后，调整流速Flow 3ml/min，用buffer A 平衡。
10.平衡至3倍柱体积后（电导、pH数值和变化趋势稳定），Manual下拉pump中，选择Alams&Mon，选择AutozeroUV校零。
11.Pause暂停，上样，将A泵头放入样品溶液中。
（样品最好放在圆底离心管中。
）12.Continue（或者End重新开始）。
待样品注入完毕，将A泵头拿出在水中清洗一下后再放入buffer A中。
13.当UV曲线降至20-30时，在manual中选择pump →Gradient 10% B。
AKTA层析仪使用操作规程
ÄKTA全自动层析仪操作规程1. 开机打开主机和电脑电源，待仪器自检完毕（CU950上面的3个指示灯完全点亮不闪烁），双击桌面上UNICORN图标，进入操作界面。
2. 准备流动相和样品所有的工作溶液和样品必须经过0.45µm的滤膜过滤，样品也可高速离心后取上清备用。
当缓冲液中含有有机溶剂（如乙腈、甲醇），需在使用前用低频超声脱气10min。
3. 清洗管道及装柱3.1 首先将A1管道放入平衡液或banding buffering中，将B1管道放入高盐溶液中或elutionbuffering中，在system control窗口点击manual→pump→pump wash basic，选中A1,B1管道为ON， execute。
泵清洗程序会自动运行结束。
3.2 选择manual→pump→flow rate，输入流速1ml/ml，insert；选择manual→Alarm&mon→alarm pressure，设置high alarm（输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到），insert，execute。
将进样阀的1号位管道接入柱子的柱头，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉，直接拧入紫外流动池或连接管道。
4. 手动运行4.1 平衡柱子平衡好了（观察电导COND，pH的数值正确曲线走稳了）。
此时将紫外调零，选择manual →Alarm&mon→autozero，exectue，就准备上样了。
4.2 上样4.2.1 用样品环上，将样品吸进注射器，推掉气泡，从进样阀的3号位推入（进样量不得低于样品环的体积的2倍），不要取下注射器。
选择manual→flowpath→injectionValve→inject，execute。
4.2.2 用样品泵上样（AKTAexplorer系统），将样品置于Sample Valve 1号位（可以选8个不同的位置），点击manual→pump→Direct Load_960输入进样流速和体积，execute。
蛋白质纯化系统AKTAPurifer10操作规程
仪器操作规程-蛋白质纯化系统 AKTA Purifer 10
一、标准操作规程
1.检查各部件连接是否正常（电源开关，仪器部件，流动相，色谱柱等）。
2.打开AKTA purifierTM10蛋白层析仪和计算机电源。
3.双击UNICON 5.11图标，进入实时方法编辑、实时运行、结果分析界面。
4.编辑新方法:
1)编辑方法：点击文件，点击新建方法，编辑方法（运行时间，流动相选择，流速，
检测波长等）。
2)保存方法：点击文件，点击另存方法为（输入文件名）。
3)运行方法：选择文件，点击右键，点击RUN，进行方法运行。
4)平衡色谱柱，一般约1—2个柱体积。
5)手动单针进样：在Load状态，将样品注入进样环，完毕后，点击Inject状态。
6)批处理进样：编辑方法，选择A—905自动进样器，进入scouting界面，利用向
导进行批处理编辑，保存批处理文件，点击批处理运行图标。
7)数据处理：点击第四个谱图分析图标，进入数据处理界面，打开要处理的文件，
点击积分向导图标进行数据处理（还可点击界面顶部的手动积分进行手动处理）。
保存数据处理方法。
5.运行已有方法：在实时分析界面点击文件，打开方法文件，点击RUN即可。
6.清洗色谱柱，在方法文件中调出自动清洗方法，点击RUN即可。
二、注意事项
1.流动相的溶剂须使用色谱纯，水为超纯水，缓冲盐需用0.45um的滤膜过滤。
2.清洗泵后的保护液为20%乙醇，一周更换一次。
3.如经常使用仪器，在线过滤器中的滤芯需每周超声清洗一次。
三、送样要求
初级纯化过滤后的样品。
AKTA_Purifier中文操作手册
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您可以在本指南中学到UNICORN的基础知识以及如何从UNICORN操作ÄKTApurifier。
UNICORN是ÄKTApurifier色谱系统的一个控制和管理的软件包。
它在IBM兼容 PC机上Windows™下运行，并包括连结控制PC机与ÄKTApurifier色谱液体处理部件的硬件。
在本指南中，将学习到如何：• 建立方法• 准备运行系统• 完成运行• 简单求值• 生成报告• 完成自动方法优化（探索）• 自动地制备各种pH缓冲液（BufferPrep）在计算机前逐页领会指南。
时间就很容易度过。
注意：遵照说明进行不需要阅读包含在附加信息中的注释（这些注释用较小字体写出）1.1 必要条件系统使用前，阅读安装指南单行本：按指南中所述• 系统和软件必须安装并起作用，以及• 检测器和泵必须校准1.2 印刷上的规定菜单命令和对话框提示在文本中都是用黑体。
用冒号分隔菜单级别，如File:Open是指在File 菜单中的Open命令。
2. 系统和软件2.1 概论ÄKTApurifier是为方法开拓及研究应用而设计的全自动液相色谱系统。
该色谱系统的分离装置有三个主要组件，在底部平台的左侧整齐堆起。
它们是：• Pump-900为双端口高效梯度泵系列。
在ÄKTApurifier 100，流速高达100 ml/min以上，压力高达10 Mpa（泵名为P-901）在ÄKTApurifier 10，流速高达10 ml/min以上，压力高达25 Mpa（泵名为P-903）• Monitor UV-900，同时监控190－700nm范围内高达3个波长的多波长UV-Vis监测器。
• Monitor pH/C-900*，在线电导和pH监测的组合监测器。
如果安装部分收集器，它应装在系统的右侧。
*选配件组成部件，如混合器、柱及不同的阀安装在系统的右侧。
分离装置由UNICORN软件控制。
图中：监测器pH/C-900、切换阀 A SV－903、切换阀B SV－903、电导流动池和出口阀PV908 为选配件。
P-900泵，监测器UV-900和监测器pH/C-900也可在没有UNICORN软件的情况下由模块单独控制。
但在本指南中，您将只学习如何从UNICORN操作色谱系统。
按位于底部平台前左侧的ON/OFF按钮，打开色谱系统。
注释：以下为在分离装置中的各组件和不同模块之间的流动路径和说明。
在您第一次运行时没有必要仔细通读本注释。
图中：部分收集器和出口阀为选配件。
1 泵有4个泵头，2个用于泵A，2个用于泵B。
泵A是最靠前面的一个。
2 缓冲液通过转换阀泵出，再进入混合器。
入口A1和B1分别插入缓冲液A和B中。
当用BufferPrep自动制备缓冲液时用入口A2和B2。
它们也可用于在方法运行期间更换缓冲液。
2流动路径继续从泵到混合器并向前经过在线滤器到注入阀。
4 样品环连接在注入阀的端口2和6之间。
样品环用注射器手工充满。
为此，连接一上样接口到注入阀的端口3上。
5液流经注入阀后，液流被导入柱中，然后向前进入到UV 流动池及电导流动池。
6 流动路径继续到限流器，[并通过pH流动池（选购）]，再向前到出口阀，出口阀用于转换出口液体流到废液瓶、部分收集器或出口收集。
7 如果需要，流动路径可继续流向部分收集器（选购）。
2.2 UNICORN 综述1 打开计算机。
先按Ctrl-Alt-Del登陆Windows，然后点击OK。
稍后出现Windows桌面。
2 在UNICORN图标上双击，起动UNICORN。
3 在开动期间，信息窗口出现。
4 在Logon对话框中，从Users列表中选择用户并输入密码。
如果您确是第一次登陆，选择用户default并输入密码default。
点击OK.。
注意：按常规在开始使用ÄKTApurifier前应输入用户名和个人密码。
5打开四个模块，并且它们各自的快捷键位于屏幕底部的任务栏中。
UNICORN Main Menu窗口出现在屏幕上。
6Main Menu窗口是UNICORN显示的主要部份，主要用于文件处理。
从此窗口您可通过控制系统来导航。
在Methods窗格到Main Menu左边，显示出您建立的所有方法文件。
一个方法文件包括一系列控制运行的指令。
在Results窗格右边，显示出所有的结果文件。
一个结果文件是一次运行的结果，包括所有的文档(例如所用方法) 和产生的色谱图。
总的来说，UNICORN由四个不同的模块组成，Main Menu是其中之一。
其余的模块在工具栏中用图标呈现。
这些模块是：• Method Editor（方法编辑器）打开有对话窗口的Method editor建立新方法。
• System control（系统控制）打开对话窗口控制系统和运行您的方法• Evaluation（数据处理）打开对话窗口求值您的结果。
要进行模块窗口之间的切换，在屏幕底部任务栏中点击其各自的按钮。
工具栏中还有其它按钮，这些按钮是：• Instant run（即时运行）打开对话框，在此您可直接挑选运行方法，对立刻开始常规运行很方便。
• Logon/Logoff（进入/退出）打开对话框，控制进入/退出程序。
• Method Queue*（方法队列）打开对话窗口，指定新的方法队列。
• Existing Method Queue（当前方法队列）打开对话窗口，显示正在运行的方法队列。
--------------------------------------------------------------------------------* Method Queue用于将几个方法连接到一起。
2.3 帮助全面的在线帮助是现成的。
要得到有关指令或模块的帮助，将光标放在指令/模块上，并按F1键。
或者，点击在每个模块右上角的Help菜单并选择Help for......，得到有关当前指令或模块的一般性的帮助，并找到新的帮助主题，或对特殊的主题选择Index。
在任何对话框中，要得到如何用当前活化的对话框来取得帮助点击Help按钮。
3 建立方法UNICORN软件供给一个方法向导程序（Methed Wizard）用于建立新方法。
此向导程序是帮助您建立方法的有问题和指令的许多对话窗口。
建立方法：1点击在Method Editor模块的Method Wizard图标。
如果需要，挑选您想要用的系统并点击OK。
Method Wizard窗口出现。
注意：通过点击Set Default您可以重建所有设置到默认值（只能在此对话框中进行）。
2 选择一色谱技术，例如，Anion-Exchange（阴离子交换）。
3 选择您打算要用的柱。
对应该柱的正确的柱体积、推荐的柱流速和正确的压力限制就将在方法中自动执行。
注释：如果您手动改变了默认值，并因此超过所选柱的推荐值，在您保存方法时将会得到警告。