毒理学动物实验设计.ppt
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《动物毒理实验》课件：实验3 皮肤刺激性试验
皮肤刺激强度分级
皮肤局部反应
无刺激性 轻度刺激性
无异常改变 充血、红斑
中等刺激性
红斑，少量小出血点，水肿， 少量丘疹以及小水疱
强刺激性
红斑，皮下出血，水肿，有很 多小水疱并有可能合并成大水 疱，糜烂，表皮剥落，有溃疡 形成等
评分 0 <2
2~6
>6
方法评价
皮肤刺激试验的结果不仅与检测技术有关， 也与试验过程中的质量控制相关。
经4~8h后，除去斑贴物，每24h观察一次各小区皮肤的局部 反应，连续观察4d，按皮肤刺激反应评分（表1），定量地 评定受试化学物对皮肤局部刺激作用的强度。红斑通过肉眼 观察，水肿通过轻轻触摸的方法来评分。
表1 皮肤刺激强度反应评分
皮肤反应强度
评分
无红斑
极轻微红斑（勉强可见）
1
A.红斑和 边界清晰的红斑（明显红斑，淡红至鲜红色） 2
本法与局部全封闭斑贴法不同之处在于： 1.每组的白色家兔数不应少于3只； 2.采用纱布作斑贴物，在无刺激作用的前提下，用半封
闭敷料固定； 3.斑贴不需要在擦伤皮肤上进行； 4.斑贴4h，然后去掉斑贴并清洗皮肤，观察0.5h、1h、
24h、48h和72h后的皮肤反应。 皮肤刺激反应评分同全封闭法。
结果分析
皮肤刺激试验又称皮肤原发性刺激试验。
试验目的
了解受试化学物对皮肤的直接刺激作 用以及刺激强度。
试验材料——实验动物
实验动物：成年白色家兔或白色豚鼠， 首选白色家兔。
在皮肤刺激试验中，动物品种的选择 很重要。目前多选用兔和豚鼠，对于 强刺激或无刺激作用的化学物选用家 兔检测效果好，但对作用缓和的刺激 性化学物，选用豚鼠所获得的试验结 果较准确。
第十一章 毒理学实验方法讲解
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染毒方法：
（1）静式染毒法 （2）动式染毒法
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静式染毒法
静式染毒是将实验动物放在一定体积的密闭容器 （染毒柜）内，加入一定量的受试样品，并使其 挥发，造成试验需要的受试样品浓度的空气，一 次吸入性染毒2h。
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（3）剂量和分组
实验动物随机分为4～5个剂量组。若使用水、植 物油、凡士林、羊毛脂外的赋形剂，则需设赋形 剂对照组。豚鼠或大鼠每一剂量组（单性别）不 少于5只；家兔每一剂量组（单性别）不少于4只。
各剂量组间要有适当的组距，可按等比或等差级 设置剂量，以使各剂量组实验动物产生的毒性反 应和死亡率呈现剂量-反应（效应）关系。
试验基本原则：
以经口灌胃法给予各试验组动物不同剂量 的受试样品，每组用一个剂量，染毒剂量 的选择可通过预试验确定。染毒后观察动 物的毒性反应和死亡情况。试验期间死亡 的动物要进行尸检，试验结束时仍存活的 动物要处死并进行大体解剖。本方法主要 适用于啮齿类动物的研究，但也可用于非 啮齿类动物的研究。
（5）所用染毒浓度和动物分组，每组所用动物性别、数 量及体重范围；
（6）计算LC50的方法； （7）染毒后动物中毒表现及出现时间和恢复情况、死亡
时间、大体解剖所见；
（8）列表报告结果（建议的表格形式见附录1-D），计 算的LC50及其95%可信区间；
（9）结论。
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3、急性经口毒性试验
适用范围：
本方法规定了动物急性经口毒性试验 的基本原则、技术和要求。
本方法适用于评价化学品的急性毒性 作用。
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《毒理学实验基础》课件
通过统计图表（如柱状图、折线图、散点 图等）直观地展示实验数据和分析结果。
05
毒理学实验的应用与展望
毒理学实验在药物研发中的应用
药物安全性评价
毒理学实验是药物研发过程中评 估药物安全性的重要手段，通过 动物实验观察药物对机体的毒性 作用，为新药上市提供安全性依
据。
药物作用机制研究
毒理学实验可以帮助研究药物的 作用机制，了解药物在体内的代 谢、转化和毒性作用机制，为新
生态风险评估
毒理学实验可以帮助评估人类活 动对生态环境的潜在风险，预测 污染物对生物多样性和生态平衡 的影响，为环境保护和可持续发 展提供支持。
环境修复与治理
毒理学实验可以用于环境修复与 治理过程中，研究生物修复技术 的有效性，评估治理措施对环境 的影响，提高环境治理的效果。
毒理学实验的发展趋势与展望
实验动物的选择
实验动物种类
01
选择适合的实验动物种类，如小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等，以
满足实验需求。
实验动物品系
02
根据实验目的和要求，选择不同品系的实验动物，以确保实验
结果的准确性和可靠性。
实验动物年龄与性别
03
根据实验目的和要求，选择不同年龄和性别的实验动物，以确
保实验结果的准确性和可靠性。
染毒方法与途径
盲法原则
实验过程中应保持盲态，避免主观偏见对实 验结果的影响。
实验数据的收集与整理
数据记录
准确、完整地记录实验数据，包括实验对象的基本信息、实验条件、观察指标等。
数据整理
对实验数据进行分类、排序、筛选等处理，使其更易于分析和解释。
数据核对
对实验数据进行核对，确保数据的准确性和完整性。
数据保密
毒理学动物实验基础
近交系动物的特点
基因型相同，表现型一致，近交系数大于 98.6%（99%）；
对外来刺激反应一致，实验结果重复性好，可 比性强；
遗传背景明确，生物学特性、生理生化特点等 资料齐全；
不同品系具有各自明显的特性。 抵抗力差，对营养及饲养管理条件要求高；
常用的近交系动物
使用最为广泛的十个小鼠和大鼠近交系
不同动物致敏顺序：豚鼠>家兔>狗>小鼠>猫>青蛙 4.实质性脏器损害：大、小鼠 5.呕吐反应：猫、狗（草食动物兔、豚鼠不会呕吐）
6.发热：兔、有时猫；大、小鼠不稳
7.血压：狗、大鼠、家兔
8.致癌：大、小鼠 9.致畸：大、小鼠 10.苯胺及衍生物致变性血红蛋白作用：狗猫
（肉食） 11.黄曲霉毒素急性毒性：鸭雏 12.黄曲霉毒素致癌：鳟鱼 13.迟发性神经毒性：母鸡
开放 18-29 40-70
14 60 15012/12
亚屏障 18-29 3 40-70 10-20 0.18 20-50 十万 12.2 14 60
12/12
屏障 18-29 3 40-70 10-20 0.18 20-50 万 2.45 14 60
用现代手段检不出任何其他生命体
二、常用实验动物简介
•小鼠（mice) •大鼠 (rat) •家兔 (rabbit) •豚鼠 (guinea pig) •地鼠 (hamster)
小鼠
动物种 属
习性
小白鼠 1.喜安静、暗环境；
（mice) 2.不耐热、寒，对冷 敏感；
3.性温和，日休息， 夜活动；
4.抗病力弱。
（rat) 鼠）
〜 250g
3.白天休息，夜活动； 3.初配适龄期80〜110d
毒理学实验
七、毒理学实验（一）、急性毒性试验的定义、目的和意义急性毒性试验，又称单次给药急性毒性实验，是指在24h内一次或多次给予动物受试物后，所产生的毒性反应。
（二）、基本内容和技术要求1、实验动物可根据不同情况选用不同的实验动物，例如大鼠、小鼠、犬。
本实验随机选用健康成年的12只大鼠和12只小鼠，要求雌雄分别对半，动物初始体重不超过或低于平均体重的20%。
2、给药途径由于本品为浓缩丸，因此选用口服进行实验。
给药前将实验动物禁食24h。
3、给药剂量将大鼠和小鼠分别两只一组，分大鼠6组，小鼠6组。
然后编号。
分剂量0g/kg，1g/kg，2g/kg，3g/kg，4g/kg，5g/kg对小鼠和大鼠进行灌胃口服，20ml/kg。
然后观察小鼠反应。
一般认为口服5g/kg时未见急性毒性或死亡，可不必提高剂量进行实验。
4、观察时间及指标给药后几小时内应严密观察动物反应，之后每天上下午各观察一次，至少连续观察14d。
5、在口服给药24h后，如果没有实验动物死亡，则每组各选一只动物进行病理组织学检查；如果有动物死亡，则将死亡动物和未死亡的动物小组中选一只动物进行病理学检查。
6、实验动物临床表现与器官系统的关系急性毒性试验一般指征观察参考表（三）、长期毒性实验实验要求和内容1、实验药品要求选用符合相关制剂要求的同一批药品。
2、实验动物选用正常、健康、雌雄各半和动物体重应在平均体重的20%之内的成年各20只大鼠和小鼠。
将每种动物平均分四组，分别为高、中、低、和对照组。
3、实验动物饲养按照动物室正常标准进行饲养。
4、药物剂量根据相应动物急性毒性的最大无症状剂量（MTD）、1/3MTD、1/10MTD 分别设高中低三个剂量。
对照组为空白对照。
5、给药方法将药物加入到饲料中，依据确定的量进行。
6、给药时间给药6个月。
7、观察指标（1）一般指标实验动物的体重，和解剖后相关脏器的重量。
每周固定时间测1次大鼠体重及摄食量，试验期间详细观察大鼠一般状况，包括外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸、粪便等，必要时应测定大鼠饮水量。
药物毒理学实验动物
总结词
生殖毒性实验主要研究药物对雌雄性生殖器官、生殖细胞、受精、胚胎发育、妊娠、分娩和哺乳期等方面的毒性作用。该实验有助于了解药物对生殖过程的影响，为药物的安全性评价提供依据。
详细描述
生殖毒性实验
发育毒性实验是评估药物对胎儿和新生儿发育的毒性作用。
发育毒性实验主要研究药物对妊娠期和哺乳期动物及其子代的发育毒性作用，包括对胎儿和新生儿的生长、发育和行为等方面的影响。该实验有助于了解药物对胎儿和新生儿发育的影响，为药物的安全性评价提供依据。
VS
慢性毒性实验是评估药物长期给药对实验动物的毒性作用。
详细描述
慢性毒性实验通常在较长时间内（如几个月到一年或更长）观察药物对实验动物的长期毒性作用，包括致癌性、致畸性、致突变性等方面的研究。该实验旨在评估药物长期使用或接触后的潜在危害，为药物的安全性评价提供重要依据。
总结词
慢性毒性实验
生殖毒性实验是评估药物对实验动物生殖功能的毒性作用。
操作规程
遵循实验操作规程，正确使用仪器设备和化学试剂，避免意外事故发生。
个人防护服
穿着符合要求的实验服，保护实验人员免受化学物质和微生物的侵害。
要点一
要点二
护目镜、口罩和手套
佩戴合适的护目镜、口罩和手套，防止化学物质和生物污染物的侵入。
个人防护措施与装备
废弃物分类
将实验废弃物进行分类，分别处理，避免对环境和人体造成危害。
详细描述
急性毒性实验
总结词
亚急性毒性实验是评估药物在较长时间内对实验动物的毒性作用。
详细描述
亚急性毒性实验通常在较长时间内（如几周到几个月）观察药物对实验动物的多方面毒性作用，包括生长、发育、生理生化指标、组织病理学变化等。该实验有助于更全面地了解药物的毒性作用，为药物的安全性评价提供依据。
生殖毒性实验主要研究药物对雌雄性生殖器官、生殖细胞、受精、胚胎发育、妊娠、分娩和哺乳期等方面的毒性作用。该实验有助于了解药物对生殖过程的影响，为药物的安全性评价提供依据。
详细描述
生殖毒性实验
发育毒性实验是评估药物对胎儿和新生儿发育的毒性作用。
发育毒性实验主要研究药物对妊娠期和哺乳期动物及其子代的发育毒性作用，包括对胎儿和新生儿的生长、发育和行为等方面的影响。该实验有助于了解药物对胎儿和新生儿发育的影响，为药物的安全性评价提供依据。
VS
慢性毒性实验是评估药物长期给药对实验动物的毒性作用。
详细描述
慢性毒性实验通常在较长时间内（如几个月到一年或更长）观察药物对实验动物的长期毒性作用，包括致癌性、致畸性、致突变性等方面的研究。该实验旨在评估药物长期使用或接触后的潜在危害，为药物的安全性评价提供重要依据。
总结词
慢性毒性实验
生殖毒性实验是评估药物对实验动物生殖功能的毒性作用。
操作规程
遵循实验操作规程，正确使用仪器设备和化学试剂，避免意外事故发生。
个人防护服
穿着符合要求的实验服，保护实验人员免受化学物质和微生物的侵害。
要点一
要点二
护目镜、口罩和手套
佩戴合适的护目镜、口罩和手套，防止化学物质和生物污染物的侵入。
个人防护措施与装备
废弃物分类
将实验废弃物进行分类，分别处理，避免对环境和人体造成危害。
详细描述
急性毒性实验
总结词
亚急性毒性实验是评估药物在较长时间内对实验动物的毒性作用。
详细描述
亚急性毒性实验通常在较长时间内（如几周到几个月）观察药物对实验动物的多方面毒性作用，包括生长、发育、生理生化指标、组织病理学变化等。该实验有助于更全面地了解药物的毒性作用，为药物的安全性评价提供依据。
毒理学动物实验基础
不同动物致敏顺序：豚鼠>家兔>狗>小鼠>猫>青蛙 4.实质性脏器损害：大、小鼠 5.呕吐反应：猫、狗（草食动物兔、豚鼠不会呕吐）
6.发热：兔、有时猫；大、小鼠不稳
7.血压：狗、大鼠、家兔
8.致癌：大、小鼠 9.致畸：大、小鼠 10.苯胺及衍生物致变性血红蛋白作用：狗猫
（肉食） 11.黄曲霉毒素急性毒性：鸭雏 12.黄曲霉毒素致癌：鳟鱼 13.迟发性神经毒性：母鸡
2. 消耗毒物少；
２. 避免随时间延长，容器
3. 用于急性毒性实验，毒物 内O2下降、CO2含量升高
来源少也用于其它毒性试验。 ３. 适用于较长时间、反复
染毒的实验
缺点
随时间延长， 1. 容器内O2下降、CO2含量 升高
2. 毒物浓度下降
3. 气温、气湿升高
１. 设备装置复杂、昂贵 ２. 耗毒物
３. 经皮染毒 备皮 染毒方法 浸尾 涂皮
二、实验动物的检疫标记与分组
实验前检疫，按性别分笼饲养 实验动物的标记 实验动物的分组
三、实验动物的染毒方法
染毒（administration, exposure) 为研究毒物对实验动物的毒性作
用，模拟人的实际接触途径将毒物经 某种途径与动物接触的过程。
染毒前的准备工作
毒物一般资料的收集 溶剂的选择 剂型的选择
毒理学动物实验基础
BASIS OF ANIMAL EXPERIMENT IN TOXICOLOGY
第一节 实验动物（laboratory animal)
第二节 动物实验 (animal experiment) (animal testing)
第一节 实验动物
一、实验动物的分类 二、常用实验动物简介
6.发热：兔、有时猫；大、小鼠不稳
7.血压：狗、大鼠、家兔
8.致癌：大、小鼠 9.致畸：大、小鼠 10.苯胺及衍生物致变性血红蛋白作用：狗猫
（肉食） 11.黄曲霉毒素急性毒性：鸭雏 12.黄曲霉毒素致癌：鳟鱼 13.迟发性神经毒性：母鸡
2. 消耗毒物少；
２. 避免随时间延长，容器
3. 用于急性毒性实验，毒物 内O2下降、CO2含量升高
来源少也用于其它毒性试验。 ３. 适用于较长时间、反复
染毒的实验
缺点
随时间延长， 1. 容器内O2下降、CO2含量 升高
2. 毒物浓度下降
3. 气温、气湿升高
１. 设备装置复杂、昂贵 ２. 耗毒物
３. 经皮染毒 备皮 染毒方法 浸尾 涂皮
二、实验动物的检疫标记与分组
实验前检疫，按性别分笼饲养 实验动物的标记 实验动物的分组
三、实验动物的染毒方法
染毒（administration, exposure) 为研究毒物对实验动物的毒性作
用，模拟人的实际接触途径将毒物经 某种途径与动物接触的过程。
染毒前的准备工作
毒物一般资料的收集 溶剂的选择 剂型的选择
毒理学动物实验基础
BASIS OF ANIMAL EXPERIMENT IN TOXICOLOGY
第一节 实验动物（laboratory animal)
第二节 动物实验 (animal experiment) (animal testing)
第一节 实验动物
一、实验动物的分类 二、常用实验动物简介
实验动物PPT课件
03
CATALOGUE
实验动物在科学研究中的应用
实验动物在生命科学研究中的应用
生命科学研究
实验动物在生命科学研究中发挥着重要作用，如遗传学、细胞生 物学、神经科学等领域的实验研究。
基因编辑技术
利用实验动物进行基因敲除、敲入等基因编辑技术的研究，有助 于深入了解基因功能和疾病发生机制。
人类疾病模型
药物研发与筛选
利用实验动物模型研究药物作用机制，提高新药 研发效率和成功率，降低临床试验风险。
疾病机制研究
通过实验动物模型揭示人类疾病的发病机制，为 疾病预防、诊断和治疗提供科学依据。
3
生物医学工程与组织再生
利用实验动物模型研究生物医学工程和组织再生 技术，为器官移植、损伤修复等领域提供技术支 持。
实验动物的疾病控制与预防
健康监测
定期对实验动物进行健康检查，及时发现异常情况。
免疫接种
根据需要制定免疫接种计划，提高动物的免疫力。
隔离与治疗
对患病动物进行隔离和治疗，防止疾病传播。
06
CATALOGUE
实验动物未来发展展望
实验动物技术的发展趋势
基因编辑技术的进一步应用
随着CRISPR-Cas9等基因编辑技术的发展，实验动物基因 型和表型将更加精确可控，有助于研究特定基因功能和疾 病机制。
03
豚鼠
豚鼠在免疫学研究中具有重要价值， 是常用的过敏反应和免疫学实验动物 。
05
04
兔子
兔子在生理学、毒理学和皮肤病学研 究中较为常用，其皮肤结构和功能与 人类相似。
02
CATALOGUE
实验动物的饲养管理
实验动物饲养环境
温度
实验动物饲养环境应保持恒定 的温度，以满足不同实验动物