培养基配方

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一、LB培养基:

Yeast extract 5 g/L

Tryptone 10 g/L

Nacl 10 g/L

PH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。

二、YEB培养基:

Yeast extract 1 g/L

Peptone(或Tryptone) 5 g/L

Beef extract 5 g/L

Sucrose 5 g/L

MgSO4 2 mmol/L

PH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。

三、N6D2培养基(2,4D浓度2mg/L):

① N6大量母液1:20×大量元素(1L) 50ml

KNO

3

56.6g

(NH

4)

2

SO

4

9.26g

KH

2PO

4

8g

② N6大量母液2:40×大量元素(500ml) 25ml

CaCl

2·2H

2

O 3.32g

③ N6大量母液3:40×大量元素(500ml) 25ml

MgSO

4∙7H

2

O 3.7g

④ B5微量元素I:100×微量元素(1L) 10ml

溶液A:

MnSO

4∙H

2

O 781mg

ZnSO

4∙7H

2

O 200mg

溶于400ml无菌水溶液B:

H 3BO

3

300mg

KI 75mg

溶于400ml无菌水

然后缓慢将溶液A和溶液B混合,定容至1L

⑤ B5微量元素II:1000×微量元素(500ml) 1ml

Na

2MoO

4

·2H

2

O 125mg

CuSO

4·5H

2

O 12.5mg

CoCl

2·6H

2

O 12.5mg

⑥ B5维生素I:100×维生素(500ml) 10ml

盐酸硫胺素 500mg

盐酸吡哆醇 50mg

烟酸 50mg

⑦ B5维生素II:100×维生素(500ml) 10ml

甘氨酸 100mg

⑧200×铁盐(500ml) 5ml

Na

2

-EDTA 3730mg

FeSO

4·7H

2

O 2780mg

⑨ 2,4 D:100×2,4 D 10ml

200mg 2,4 D,先溶于1ml 无水乙醇中,再定容到1L。

配制1L NBD2 培养基时分别加入母液1 50 ml,母液2、3 各25 ml,B5微量I 10 ml,B5微量II 1ml,B5维生素I、II 各10ml 和200×铁盐 5 ml,另加入

蔗糖 30g

肌醇 0.1g

L-脯氨酸 0.5g

L-谷氨酰胺 0.5g

水解酪蛋白 0.5g

调节pH 值至5.8,高压灭菌。(固体培养基加0.3%的phytagel)

四、 MS 母液(现在基本用MS粉代替):

母液1:20×大量元素(500ml)

KNO

3

38g

NH

4NO

3

33g

MgSO

4·7H

2

O 7.4g

母液2:20×钙盐(1L)

CaCl

2·2H

2

O 8.8g

母液3:20×钾盐(1Ll)

KH

2PO

4

3.4g

母液4:100×微量元素(1L)

MnSO

4·4H

2

O 2230mg

ZnSO

4·7H

2

O 860mg

H 3BO

3

620mg

KI 83mg

Na

2MoO

4

·2H

2

O 25mg

CuSO

4·5H

2

O 2.5mg

CoCl

2·6H

2

O 2.5mg

母液5:100×维生素(500ml)

甘氨酸 200mg

盐酸硫胺素 40mg

盐酸吡哆素 50mg

烟酸 50mg

肌醇 10000mg

母液6:200×铁盐(500ml)

Na

2

-EDTA 3730mg

FeSO

4·7H

2

O 2780mg

配制1L MS 培养基时分别加入母液1、2、3 各 50 ml,母液4 10 ml,母液

5、6各 5ml。

五、AAM-AS 液体培养基

10×AA大量元素

KH

2PO

4

1.7g/L

MgSO

4·7H

2

O 3.7g/L

CaCl

2·2H

2

O 4.4g/L

100×AA微量元素I

MnSO

4·H

2

O 1.69g/L

ZnSO

4·7H

2

O 0.86g/L

H 3BO

3

0.62g/L

KI 0.083g/L 1000×AA微量元素II

CuSO

4·5H

2

O 0.025g/L

NaMoO4·2H

2

O 0.25g/L

CoCl

2·6H

2

O 0.025g/L

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