时间分辨技术的原理
时间分辨荧光免疫层析 技术原理
时间分辨荧光免疫层析技术原理
时间分辨荧光免疫层析技术（TRFIA）是一种非同位素免疫分析技术，利用
镧系元素标记抗原或抗体，通过时间分辨技术测量荧光。
具体来说，当含有待测抗原（抗体）的样品滴在加样区时，待测样品中的抗原（抗体）与结合垫中的荧光纳米微球标记的抗体（抗原）结合并通过毛细作用向前层析。
当达到检测区后，与检测线上固定的抗体（抗原）结合，形成微粒-抗体-抗原-抗体夹心复合物并被固定在检测线上，而多余的荧光微
球标记物继续向前层析，与固定在质控线上的二抗结合。
反应结束后，用紫外光源（340nm）对检测区扫描检测，检测线和质控线
上荧光纳米微球发出高强度的荧光（615nm），且衰变时间也较长。
通过
测量延缓时间，待样品基质中自然发生的短寿命荧光（1-10ns）全部衰变后，再测量稀土元素的特异性荧光，这样就可以排除非特异本底荧光的干扰。
通过检测线和质控线荧光强度的强弱及其比值，即可分析出样品中待测物的浓度。
这种技术具有高灵敏度、高特异性和可定量分析等特点。
以上内容仅供参考，如需更多信息，建议查阅时间分辨荧光免疫层析相关文献或咨询该领域专家。
时间分辨荧光技术
时间分辨荧光技术时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）是一种非同位素免疫分析技术，它用镧系元素标记抗原或抗体，根据镧系元素螯合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非特异荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度。
（一）TRFIA分析原理在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本身就可以发荧光，因此使用传统的发色团进而进行荧光检测的灵敏度就会严重下降。
大部分背景荧光信号是短时存在的，因此将长衰减寿命的标记物与时间分辨荧光技术相结合，就可以使瞬时荧光干扰减到最小化。
时间分辨荧光分析法（TRFIA）实际上是在荧光分析（FIA）的基础上发展起来的，它是一种特殊的荧光分析。
荧光分析利用了荧光的波长与其激发波长的巨大差异克服了普通紫外-可见分光分析法中杂色光的影响，同时，荧光分析与普通分光不同，光电接受器与激发光不在同一直线上，激发光不能直接到达光电接受器，从而大幅度地提高了光学分析的灵敏度。
但是，当进行超微量分析的时候，激发光的杂散光的影响就显得严重了。
因此，解决激发光的杂散光的影响成了提高灵敏度的瓶颈。
解决杂散光影响的最好方法当然是测量时没有激发光的存在。
但普通的荧光标志物荧光寿命非常短，激发光消失，荧光也消失。
不过有非常少的稀土金属（Eu、Tb、Sm、Dy）的荧光寿命较长，可达1～2ms，能够满足测量要求，因此而产生了时间分辨荧光分析法，即使用长效荧光标记物，在关闭激发光后再测定荧光强度的分析方法医学教|育网搜集整理。
平时常用的稀土金属主要是Eu（铕）和Tb（铽），Eu荧光寿命1ms，在水中不稳定，但加入增强剂后可以克服；Tb荧光寿命1.6ms，水中稳定，但其荧光波长短、散射严重、能量大易使组分分解，因此从测量方法学上看Tb很好，但不适合用于生物分析，故Eu最为常用。
（二）时间分辨信号原理普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱，在选择荧光物质作为标记物时，必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差，即Stakes位移的大小。
时间分辨荧光免疫测定原理
时间分辨荧光免疫测定原理时间分辨荧光免疫测定（TRFIA，Time Resolved Fluorescence Immunoassay）是一种非同位素免疫分析技术。
它利用镧系元素（如铕、铽等）标记抗原或抗体，通过测量荧光强度和时间两个参数来检测待测物。
与传统的荧光免疫分析相比，TRFIA具有更高的灵敏度和特异性，能有效排除非特异性荧光的干扰。
TRFIA的分析原理主要包括以下几个方面：1.镧系元素标记：将镧系元素与抗原或抗体结合，形成具有荧光性质的标记物。
镧系元素的荧光具有较长的寿命，且发光强度与抗原或抗体的结合程度密切相关。
2.时间分辨技术：通过时间分辨技术对荧光信号进行测量，即在一定时间内对荧光信号进行积分和分析。
这种技术能够有效地区分特异性荧光信号和背景荧光信号，提高分析灵敏度。
3.信号分辨：通过检测波长和时间两个参数来分辨特异性荧光信号和非特异性荧光信号。
由于生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本身就可以发荧光，因此使用传统的发色团进而进行荧光检测的灵敏度会严重下降。
而TRFIA方法通过时间分辨技术使瞬时荧光干扰减到最小化。
4.激发光控制：TRFIA方法在测量时采用延迟测量时间的方法，有效地消除背景荧光的干扰。
同时，解决激发光的杂散光影响也是提高灵敏度的关键。
5.数据分析：通过对测量得到的荧光信号进行数据分析，得到待测物的浓度。
TRFIA方法能够实现对超微量样品的高灵敏度检测，具有很高的分析精度。
总之，时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）是一种基于镧系元素标记、时间分辨技术、信号分辨、激发光控制和数据分析等原理的一种高灵敏度、高特异性的免疫分析方法。
在生物医学、环境监测、食品安全等领域具有广泛的应用前景。
时间分辩光谱
时间分辨光谱（Time-Resolved Spectroscopy）是一种研究物质光谱性质的技术，它通过测量物质在受到激发后随时间变化的光谱响应来获取有关物质的信息。
这种技术在许多领域都有广泛的应用，如物理、化学、生物学和材料科学等。
时间分辨光谱的主要原理是利用脉冲光源（如激光）对样品进行短时间的激发，然后通过高速探测器测量样品在激发后随时间变化的光谱响应。
这种方法可以提供关于物质内部过程的动力学信息，例如能量传递、电子转移、化学反应等。
时间分辨光谱技术有几种主要类型，包括：1. 时间相关单光子计数（Time-Correlated Single Photon Counting，TCSPC）：这种方法通过测量单个光子的到达时间来获取时间分辨光谱。
它具有非常高的时间分辨率，通常在皮秒 （10^-12秒）或飞秒（10^-15秒）量级。
2. 泵浦-探测 （Pump-Probe）技术：泵浦-探测技术通过两个或多个光源 （通常是激光器）对样品进行激发。
一个光源 （泵浦光源）用于激发样品，另一个或多个光源 （探测光源）用于测量样品在激发后随时间变化的光谱响应。
这种方法可以用于研究非线性光谱过程和超快动力学过程。
3. 飞秒光谱学（Femtosecond Spectroscopy）：飞秒光谱学是一种利用飞秒激光器进行时间分辨光谱测量的技术。
它可以用于研究超快的动力学过程，如光子学过程、电子转移和化学反应等。
时间分辨光谱在许多研究领域具有重要应用价值，例如：在生物学中，时间分辨光谱可以用于研究光合作用、光敏蛋白质和光敏信号传导等过程。
在材料科学中，时间分辨光谱可以用于研究光致发光、载流子动力学和光催化等过程。
在化学中，时间分辨光谱可以用于研究光化学反应、能量传递和电子转移等过程。
总之，时间分辨光谱是一种强大的实验技术，可以为我们提供关于物质内部过程的动力学信息，有助于深入理解各种物理、化学和生物过程。
超快时间分辨光学光谱技术原理及其应用
超快时间分辨光学光谱技术原理及其应用现今，随着科学技术的不断发展，光学光谱技术已经成为了现代科学研究中必不可少的重要工具之一。
在这其中，超快时间分辨光学光谱技术，是一种能够以极其简单、快速的方式，获取高度精确的光谱信息的先进技术。
本文将着重探讨这种技术的原理及其应用。
一、原理概述超快时间分辨光学光谱技术是通过将精密测量仪器与光谱仪相结合，来实现对光谱特征的快速测量和分析的一种技术。
其核心原理在于，光谱分析时，数据的时序分量是由超快速光学脉冲所提供的，这种光学脉冲的时间宽度极窄，可以达到飞秒或亚飞秒量级。
在实际操作中，超快时间分辨光学光谱技术主要依靠激光系统来提供超快速脉冲，而激光系统则需要匹配高度精确的精密线路，来实现快速测量和分析光谱信息的目标。
二、应用领域超快时间分辨光学光谱技术被广泛应用于各种重要领域中，其中包括：1.材料科学与工程：超快时间分辨光学光谱技术可以用于分析材料的光学特性和电学特性等，探究材料背后的基本物理和化学原理，以便更好地设计和制造新型材料。
2.化学生物学：超快时间分辨光学光谱技术能够实现对分子运动的快速观测和测量，同时也可以观察到生物分子之间的相互作用，从而为药物研发和分子动力学研究提供有力的支持。
3.医用诊断：超快时间分辨光学光谱技术可以通过疾病标志物的测量，检测癌症、心血管疾病和感染等疾病的早期症状。
4.生物医学工程：超快时间分辨光学光谱技术还可以为医疗检测和治疗过程提供精确的辅助数据，特别是在眼科和皮肤病学研究等领域中。
5.光子学研究：超快时间分辨光学光谱技术也在发展着新型扫描技术和光子学实验室的新实验方法，为光子学研究的进一步发展提供了新的途径。
三、技术进展超快时间分辨光学光谱技术是一个不断发展和完善的领域，近年来还有很多重要的技术进展，其中包括以下：1.半导体激光器技术：半导体激光器如今已经变得非常成熟，使用寿命也相对较长，进一步推动了超快时间分辨光学光谱技术的发展。
时间分辨荧光免疫层析 技术原理
时间分辨荧光免疫层析技术原理
时间分辨荧光免疫层析（Time-Resolved Fluorescence Immunoassay，TRFIA）是一种高灵敏度、高特异性的生物分析技术，广泛应用于生物医学领域。
该技术基于免疫层析原理，结合了荧光
标记和时间分辨测量的特点，能够实现对微量生物分子的快速、准
确检测。
TRFIA技术的原理基于稀土金属离子的荧光特性。
在实验中，
检测物质（例如蛋白质、激素、抗体等）会与特定的荧光标记结合
形成复合物，然后通过免疫层析柱进行分离。
随后，样品中未结合
的荧光标记物会被洗脱，而复合物则被保留在柱中。
接下来，通过
加入特定的激发光源激发样品，荧光标记物会发出特定的荧光信号。
与常规荧光免疫层析不同的是，TRFIA采用时间分辨荧光测量技术，通过延迟时间来排除非特异性的背景信号，从而提高了检测的特异
性和灵敏度。
TRFIA技术具有许多优点。
首先，由于时间分辨测量可以排除
大部分非特异性背景信号，因此TRFIA具有极高的特异性。
其次，
由于稀土金属荧光物质具有长寿命的特性，可以在激发光停止后仍
然发出荧光信号，因此TRFIA具有极高的灵敏度。
此外，TRFIA还
可以同时进行多重检测，提高了检测效率。
总之，时间分辨荧光免疫层析技术以其高特异性、高灵敏度和多重检测的优势，成为生物医学领域中重要的分析技术，为生物分子的快速、准确检测提供了有力的工具。
时间分辨成像技术的分类及各自原理
详述时间分辨成像技术的分类及各自原理时间分辨成像技术，它以超短脉冲激光作为光源，根据光脉冲在组织内传播时的时间分辨特性，使用门控技术分离出漫反射脉冲中未被散射的所谓早期光，进行成像。
在边界上可以高时间分辨地测量与组织体内部光学参数有关的传输光,因此可以提供更多的组织体光学参数分布的信息。
正在研究的典型时间门有条纹照相机、克尔门、电子全息等。
该项技术是光学层析（断层）造影（OT）技术中最主要的一种。
利用组织中光的传输理论，确定组织体，尤其是人体的光学性质基本参数，即吸收系数、散射系数和散射相位函数或平均散射余弦g以及折射率n等。
已知光与组织的相互作用参数，在给定的光照方式和边界条件下，光能流率或其它参量全反射率R全透过率T等分布均可由有关的传输模型唯一地确定。
再利用图像重建技术。
由于生物散射介质的结构特征信息隐含在漫射光中，找到描述光在介质中迁徙规律，通过测试漫射光的有关参数，在眼光的散射路径逆向追溯，则应能重建散射介质结构图像。
如采用锁摸激光器作光源，条纹相机测试散射体周围的漫射光的时间分辨参量，再用逆问题算法进行图像重建。
目前，逆问题算法大体有两类：一类为蒙特卡罗法，采用这种方法，图像重建精度高，但是计算复杂；另一类是基于光的传输方程，采用优化算法，根据测试周围时间分辨率漫射光的信号进行图像重建。
一、磷光共轭聚电解质用于时间分辨生物检测与成像近年来，共轭聚电解质（CPEs）在传感和生物成像领域的应用引起人们的广泛关注。
除了信号放大的优势外，CPEs在极性溶剂（如水）中具有良好的溶解性，这使得该类材料非常适于传感与生物成像。
然而，目前报道的CPEs大都基于荧光作为检测信号，其检测性能易受到背景荧光信号（如生物体的自发荧光等）的干扰，从而降低了检测的信噪比。
相比于荧光材料，磷光过渡金属配合物具有长的发射寿命（微秒级），可通过时间分辨荧光技术有效消除短寿命的背景荧光信号（纳秒级）的干扰，从而可显著提高检测的信噪比和灵敏度。
时间分辨技术的原理
时间分辨技术的原理时间分辨技术是一种用于测量事件发生时间或时间间隔的技术，广泛应用于物理学、化学、生物学以及各种科学研究领域。
其原理主要基于精确的时钟和光学或电子信号的传播速度。
首先，时间分辨技术需要一个高精度的时钟来记录事件的发生时间。
这个时钟通常是一个基于稳定振荡器的计时器或一个精确到纳秒或更小时间间隔的定时电路。
这样的时钟能够提供非常准确和稳定的时间基准。
其次，时间分辨技术利用光学或电子信号的传播速度来测量事件的时间间隔。
在光学方法中，常用的技术包括飞行时间法和相位法。
飞行时间法利用光在介质中的传播速度，通过测量光脉冲的往返时间来计算事件的时间。
相位法则利用光波的相位变化来测量时间间隔，通过比较不同光波之间的相位差来确定事件的时间。
在电子方法中，常用的技术包括电脉冲法和计数法。
电脉冲法通过测量电信号的传播时间来计算时间间隔，而计数法则通过计算所记录的计数器数值来确定时间。
最后，时间分辨技术需要对测量结果进行数据处理和分析。
这包括对时钟的误差进行校正，舍弃异常数据的处理，以及利用统计学方法进行数据拟合和误差估计等。
通过这些处理和分析，可以得到精确而可靠的时间分辨结果。
总的来说，时间分辨技术基于精确的时钟和光学或电子信号的传播速度，通过测量事件的发生时间或时间间隔来实现对时间的分辨。
它在科学研究和实验中发挥着重要的作用，为我们研究更细微和快速的现象提供了强大的工具。
时间分辨技术作为一种测量事件时间的重要工具，被广泛应用于各个领域，包括物理学、化学、生物学、医学等，为我们研究和理解自然界中一系列复杂的过程提供了重要的帮助。
在物理学中，时间分辨技术的应用非常广泛。
例如，在粒子物理实验中，为了探索基本粒子的性质和相互作用，一个非常重要的参数就是事件发生的时间。
时间分辨技术可以帮助科学家们非常精确地测量粒子的飞行时间，从而推断出它们的轨迹和速度等信息。
此外，时间分辨技术还可以用于研究光的行为，在激光技术中也起到了至关重要的作用。
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时间分辨技术的原理目前最先进的免疫检测技术：1、时间分辨原理：用三价稀土离子及其鳌合剂作为示踪物，代替荧光物质、同位素或酶，标记蛋白质、多胎、激素、抗体、核酸探针或生物流行性细胞，当反应体系发生后，用时间分辨仪器测定最后产物中荧光强度。
根据荧光强度或相对荧光强度比值，来判断反应体系中分析物的浓度，达到定量分析之目的。
2、时间分辨原子标记物的特点：●发射光和激发光有较大的STOKES位移——高特异性●长寿命荧光，降低其他物质的荧光干扰——高灵敏度●半衰期长达几十万年，试剂受干扰小——高稳定性原子标记与大分子标记物的对比3、波长分辨：●标记离子的荧光激发光波长范围较宽，发射光光谱范围较窄，是类线光谱，有利于降低本底荧光强度，提高分辨率。
●激发与发射光之间有一个较大的STOKES位移，有利于排除非特异荧光的干扰，增强测量的特异性。
4、时间分辨：●标记离子螯合物产生的荧光强度高，寿命长，有利于消除样品及环境中荧光物质对检测结果的影响。
●每一秒名检测样品1000次，取其中不受干扰的400次的均值作为测定值，有利于提高检测的准确性。
时间分辨技术取代酶免、放免是免疫检测技术发展的必然趋势！RIA（放免）●放射性（125I），对环境和身体的危害，已经为重视环保的国家逐步取消，如整个欧洲仅尚存几个放免试验室。
●125I半衰期短，导致试剂的有效期短，需每次定标，造成很大的浪费。
●由于标记物（125I）的不断变化，带来药盒批间、批内较大的变异，标准曲线无法保存备用。
ELESA（酶免）●灵敏度、重复性不及放免，易造成漏检和假阳性。
●酶的纯度和反应过程容易受环境因素影响，导致稳定性、重复性不好。
与其它技术的相对优势：（1）、是现有的免疫检测方法中灵敏度最高的（2）、是现有的免疫检测方法中稳定性最好的（3）、多标记检测是目前所有免疫检测技术中独一无二的TRF技术与电化学发光的比较TRF与化学发光的比较时间分辨荧光免疫定量分析简介时间分辨荧光分析（Timeresolved Fluoroimmunoassay,TRFIA）是一种非同位素免疫分析技术，它用镧系元素标记抗原或抗体，根据镧系元素螯合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非异荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度。
解离增强镧元素荧光免疫分析是时间分辨荧光免疫分析中的一种。
它用具有双功能基团结构的螯合剂，使其一端与铕（Eu）连接，另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接，形成EU标记的抗体/抗原，经过免疫反应之后生成免疫复合物。
由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱，因此加入一种增强剂，使Eu3+从复合物上解离下来，自由Eu3+同增强剂中的另一种螯合剂螯形成一种胶态分子团，这种分子团在紫外光的激发下能发出很强的荧光，信号增强了百万倍。
因为这种分析方法使用了解离增强步骤，因此称为解离增强镧系元素荧光免疫分析。
乙肝病毒（HBV）标记物的检测方法常用测定乙肝病毒的抗原、抗体标记物，由60年代末70年代初的琼脂扩撒法，依次发展为血凝法→酶联免疫吸附（ELISA）、同位素免疫标记（RIA）→化学发光免疫分析、生物发光、电化学发光免疫标记和80年代中建立的稀土离子荧光标记（时间分辨荧光免疫分析）等不同的检测方法。
随着科学的发展和检验技术的进步，其方法每发展一步，乙肝标记物检出的灵敏度和准确性都得到不同的提高。
时间分辨荧光免疫分析（TRF）为近年新研制成功的用三价稀土离子作为示踪物，以单克隆抗体包被支持物与样品中抗原反应，再加入有铕（EU）标记的抗体，进行反应检测，可大大降低一般同位素和荧光标记受环境干扰缺点，提高了检测的灵敏度和准性，该TRF 法检测乙肝病毒标记物较其他方法灵敏度高、特异性好，干扰因素少，TRF为目前检测乙肝病毒标记物最理想的方法。
TRF定量检测乙肝病毒“两对半”为临床诊断乙肝提供了新手段，有助于临床客观的分析HBV感染情况、疗效的观察和转归等情况的分析，至少可对下列情况更具有独特的诊断价值：1、治疗前进行病毒定量检测，可以指导选择抗病毒药物，避免盲目用药。
2、治疗后定量间接判断体内病毒数量，有助于疗效的观察。
3、怀孕前进行定量测定，有助于选择有利于的怀孕时机。
乙肝孕妇进行定量检查，有助于使部分病人得到及时的正确的诊断目前我科已正式开展了乙肝二对半的TRFIA定量分析，其每一项的正常值范围均是由我国卫生部根据美国雅培的标准而制定，其灵敏度，准确度，及精确度都有远远优于一般的ELISA法，乙肝两对半的定量制定将给临床提供一个关于乙肝诊断及疗效，预后判断的更可靠的实验结果。
1、极大地提高了检测的灵敏度时间分辨荧光免疫定量技术（TRFIA）检测HbsAg灵敏度可达0.2ng/ml,而酶标（EIASA）检测的灵敏度是2ng/ml,极大地提高检测的灵敏度。
因此，在急性乙肝早期能及早检出HbsAg，确证HBV感染，缩短窗口期；其次，可发现低浓度HbsAg携带者；在部分慢性乙肝患者中，由于机体缺乏对HBV包蟆蛋白的免疫应答，HbsAg表达较低，酶标检测可出现HbsAg和HbsAb均阴性的情况，TRF技术则可避免这些情况的发生，为正确判断病情提供依据。
2、能动态观察疗效和监测病情1）定量分析HBsAg和HBsAb的浓度变化，可预见急性乙肝是否处于恢复期。
如HBsAg浓度降低，HBsAb浓度逐渐升高，可说明病情正往恢复期发展；反之，HBsAg浓度处于较高水平或上升趋势，而HBsAb一直处于较低水平，则易发展为慢性乙肝或病毒携带者。
2）定量分析HBeAg和HBeAb的浓度变化，可反映病情变化和治疗效果。
定量测定能明确检测HBeAg和HBeAb转换的时期，即表现为HBeAg浓度下降和HBeAb升高的过程。
高浓度的HBeAg还可间接提示病毒处于高复制状态，具有较高传染性。
高浓度的HBeAb 一方面提示病情好转而在某些时候（如肝功能指标很差）则可能与肝坏死、肝硬化、肝癌有关。
3）HBcAb浓度的高低可反映病毒感染的状态。
高浓度的抗-Hbc提示乙肝性感染，恢复期浓度降低。
慢性乙肝呈抗-Hbc持续高浓度。
而低浓度的抗-Hbc一般为恢复期或既往感染。
4）有利于对慢性肝炎活动性或非活动性的判断。
非活动性慢性乙肝各项指标相对稳定，活动性往往呈现进行性变化。
3、TRFIA和定量PCR技术可互相补充血清HBV—DNA荧光定量PCR测定可以直接反映血液中病毒复制状态，具有很多临床应用价值，但不能完全反映病毒复制静息期肝细胞内HBV病毒状态。
HBV—DNA阴性并不完全代表体内HBV已被清除，结合“两对半”各项指标更能客观反映体内HBV病毒状态。
4、HBsAb的定量测定能够对乙肝的预防起到监督作用HBsAb的定量测定能够对抗体是否真正具有“中和”HBV的免疫力作出正确评价，对乙肝的预防起到监督作用。
HBsAb的含量在10mlU/ml以上病人ELISA检测即可呈阳性结果，但并不提示机体都一定具有免疫力，而HBsAb的含量在10—100mlU/ml之间的样本，定性虽为“阳性”，但此时机体对HBV的免疫力较弱，甚至不能预防HBV感染。
只有HBsAb的含量达到100mlU/ml以上时才可确定具有抵抗HBV入侵的作用。
作定量检测，可根据HBsAb 的含量判断机体对HBV的免疫状态及乙肝苗的免疫效果。
因此定量测定对乙肝疫苗免疫力的评价和高危人群预防免疫具有重要意义，特别是在少年儿童预防乙肝方面。
乙肝两对半定量的临床意义1、乙肝表面抗原（HBsAg）定量●能极早地检出HBsAg，确证乙肝感染，几乎能与preSl同时检测出。
在乙肝病程中大大缩短了窗口期的时间。
●由于机体常缺乏对包膜蛋白的免疫应答，HBsAg表达较低，可出现HBsAg、Anti-HBs均阴性的情况，定量检测HBsAg则可避免这些情况的出现。
●病毒发生变异后，病毒表达量较低，甚至“定性”检测不出抗原。
可检测出HBsAg，并极有可能同时检测出HBsAg、Anti-HBs。
●国内外学者研究表明HBsAg的细胞免疫应答与肝细胞损伤有一定关系。
血清中HBsAg含量和病人对HBsAg细胞免疫成反比关系，而肝功能改就则与此种细胞免疫成反比。
而定量检测HBsAg是反映这一关系的唯一手段。
●一般来说，慢性肝炎HBsAgCOI相对恒定：而活动性肝炎HBsAgCOI往往较高且不稳定。
2、乙肝表面抗体（Anti-HBs）定量●Anti-HBs的定量检测能够地机体是否真正具有“中和”HBV免疫力作为正确评价，避免误误导病人，对乙肝的预防起到监督作用。
●Anti-HBs含理在10—100IU/L之间的样本，乙肝两对半定性的结果为阳性，但此时机体对HBV并无中和作用，仍有感染HBV的危险。
只有定量检测Anti-HBs在100UI/L 以上时才具有抵抗HBV入侵的作用。
因此，定量检测乙肝两对半对乙肝疫苗免疫力的评价和高危人群预防具有重要意义。
3、乙能e抗原（HBeAg）定量●HBeAg是乙肝病毒在肝细胞在繁殖时出现的前C/C基因的产物，经蛋白酶水解后HBe蛋白质以非颗粒形式分泌入血清中。
在急性HBV感染时，血清中可出现HBeAg，但维持可测水平的时间很短暂（数天—数周）。
HBeAg阳性一般是提示有大量病毒存在，是急性乙肝恢复期的首选血清学指标。
●由前C基因突变HBV感染所致的急性或慢性乙肝，始终不出HBeAg，但HBV-DNA进行性复制。
HBeAg亦在高COI水平波动。
与前者HBeAg阳性慢性乙肝类型中的转换期比较，两对半定性均表现为小三阳，但后者主要表现在高HBeAgCOI值，忽高忽低的ALT 值和HBV-DNA始终阳性。
4、乙肝e抗体（Anti-HBe定量●由HBV野型株感染所引起的急性或慢性乙型肝炎，其自然史分为HBeAg阳性期和Anti-HBe阳性期。
定量监测能明确出HBeAg向Anti-HBe换的时期，即表现为HBeAgCOI 下降（含量降低）和Anti-HBeCOI下降（含量升高）的过程。
因此，Anti-HBe定量与HBeAg定量联合检测对监测HBV感染的病程及药物的疗效观察有很好的实际意义。
●由前C基因突就株HBV感染所致异型慢性乙肝，由于患者始终不出现HBeAg。
因此，长期监测患者Anti-HBe含量对判断其预后和转归具有十分重要的价值。
5、乙肝核心抗体（Anti-HBc）定量●乙肝病毒由外壳HBsAg和内核HBcAg组成。
乙肝病毒感染期间，一般会产生Anti-HBc，在HBcAg出现后即可从血清中检测到。
偶尔也有Anti-HBc阴性的HBV感染者，多见于免疫抑制的病人。
●在乙肝感染康复者HBsAg携带者中，Anti-HBc可长期存在。
因此，在特殊人群中开展Anti-HBc筛选试验对预防乙肝的传播有重要参考价值。