实验室用液体配制

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重量法稀释溶液公式

重量法稀释溶液公式

重量法稀释溶液公式
操作步骤
1、计算:n=m/M , c=n/v ,ρ=m/v
例:实验室用密度为1.18g/mL,质量分数为36.5%,浓盐酸配制250ml,0.3mol/L的盐酸溶液。

v=m/p=(0.25*0.3*36.5)/(36.5%*1.18)
2、称量或量取:固体试剂用分析天平或电子天平(为了与容量瓶的精度相匹配)称量,液体试剂用量筒。

3、溶解:将称好的固体放入烧杯,用适量(20~30mL)蒸馏水溶解。

4、复温:待溶液冷却后移入容量瓶。

5、转移(移液):由于容量瓶的颈较细,为了避免液体洒在外面,用玻璃棒引流,玻璃棒不能紧贴容量瓶瓶口,棒底应靠在容量瓶瓶壁刻度线下。

6、洗涤:用少量蒸馏水洗涤烧杯内壁2~3次,洗涤液全部转入到容量瓶中。

7、初混:轻轻摇动容量瓶,使溶液混合均匀。

8、定容:向容量瓶中加入蒸馏水,液面离容量瓶颈刻度线下1~2cm时,改用胶头滴管滴加蒸馏水至液面与刻度线相切。

9、摇匀,盖好瓶塞反复上下颠倒,摇匀,如果液面下降也不可再加水定容。

10、由于容量瓶不能长时间盛装溶液,故将配得的溶液转移至试剂瓶中,贴好标签。

实验室溶液配制

实验室溶液配制

实验室所需溶液配制1.费休氏试液,购买;2.氢氧化钠溶液,C=0.01mol/l;氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体0.4g溶于200ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;3.中性红溶液,C=1%;准确称取中性红固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;4.溴百里香酚蓝溶液,C=1%;准确称取溴百里香酚蓝固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;5.碘化钾溶液,C=10%;准确称取KI固体50g溶于50ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;6.硫代硫酸钠溶液,C=0.1mol/l;硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体15.811g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;7.硫酸溶液,C=2mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体108.78ml稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;8.淀粉溶液,C=0.5%;准确称取可溶性淀粉0.5g,溶于50ml水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;9.铬酸钾溶液,C=50g/L;准确称取铬酸钾固体50g,溶于500ml水中,并在1000ml容量瓶中定容,搅拌下逐滴加入10%的硝酸银溶液,直至溶液出现棕红的悬浮物为止.静置1昼夜,用干净的滤纸漏斗过滤即可,不一定用饱和硝酸银溶液,用10%硝酸银溶液即可.配制方法:1克硝酸银+10毫升纯水溶解,置于棕色瓶中;10.氯化钠基准试剂,C=0.1mol/l,氯化钠分子量58.5,准确称取氯化钠固,5.85g溶于500ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;11.硝酸银溶液,C=0.1mol/l,硝酸银分子量169.87,准确称取硝酸银固体8.49g溶于200ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液,用前采用基准氯化钠试剂10标定,需保存于棕色试剂瓶中;12.酚酞指示剂,C=0.1%,准确称取酚酞固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;13.氯化钡溶液,C=10%,准确称取氯化钡固体10g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;14.乙醇溶液,C=1%,准确移取乙醇AR1ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;15.盐酸标准溶液,C=1mol/l,分子量36.46,D154=1.2039.11%,1.1529.57%、1.1020%、1.0510.17%;准确量取39.11%盐酸77.68ml或称取93.216g,稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;16.甲基橙指示剂,C=0.1%,准确称取甲基橙固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;17.邻苯二甲基二辛酯DOP标准液C=100ppm配制:用1ml移液管移取1mlDOPAR加入250ml容量瓶中,并用二氯甲烷稀释至250ml定容,摇匀即可得DOP浓度为4000ppm溶液;用5ml移液管移取浓度为4000ppmDOP溶液2.5ml,加入100ml 容量瓶中,用二氯甲烷稀释至100ml,摇匀即可得浓度为100ppmDOP溶液;18.钼酸铵溶液的配制,C=5%,准确称取钼酸铵固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;19.硫酸溶液,C=10mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体543.9ml稀释与300ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;20.氢氧化钠溶液,C=5%,准确称取氢氧化钠固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;21.氯化亚锡溶液,C=10%,准确称取氯化亚锡固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,溶液配置完成后向其中投入锡粒一颗并保存于大口瓶中;22.二氧化硅贮备液,1ml相当于1.0mg二氧化硅:准确称取分析纯硅酸钠4.730g分子式Na2SiO3·9H2O,分子量284.22溶于200ml蒸馏水中,并与1L容量瓶中定容,保存于塑料瓶中;23.二氧化硅工作液,C=20ppm,用移液管移取二氧化硅贮备液20ml与1L容量瓶中定容,即可得上述浓度溶液,保存于塑料瓶中;24.硫酸溶液,C=1mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体54.4ml或称取100.096g稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;25.硫代硫酸钠溶液,C=0.05mol/l,硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体7.9055g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;26.硼酸溶液,C=2%,准确称取硼酸固体2g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,保存于塑料大口瓶中;27.氢氧化钠溶液,C=40%,准确称取硼酸固体40g,溶于50ml蒸馏水中,冷却后在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,保存于塑料大口瓶中或胶塞玻璃瓶中;=1.2039.11%,1.1529.57%、28.盐酸溶液,C=0.05mol/l,分子量36.46,D1541.1020%、1.0510.17%;准确量取39.11%盐酸3.884ml或称取4.661g,稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;29.甲基红乙醇溶液,C=1%,准确称取甲基红固体1g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;30.溴甲酚绿乙醇溶液,C=1%,准确称取溴甲酚绿固体1g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;31.甘油水溶液,C=2%,准确移取甘油AR2ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;32.盐酸溶液,C=6mol/l,分子量36.46,D15=1.2039.11%,1.1529.57%、1.1020%、41.0510.17%;准确量取39.11%盐酸466.08ml或称取559.296g,稀释与300ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;33.氢氧化钠溶液,C=6mol/l,氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体240g溶于500ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;34.氢氧化钠溶液,C=1mol/l,氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体40g溶于500ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;。

实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表

实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表

实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1MTri-HCl□组份浓度1MTri-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1.称量121.1gTri置于1L烧杯中。

2.加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4约70mL7.6约60mL8.0约42mL4.将溶解定容至1L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tri溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5MTri-HCl□组份浓度1.5MTri-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTri置于1L烧杯中。

2.加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3.用浓盐酸调pH值至8.8。

4.将溶液定容至1L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tri溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10某TEBuffer□组份浓度100mMTri-HCl,10mMEDTA(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1MTri-HClBuffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500mMEDTA(pH8.0)20mL2.向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3.将溶液定至1L 后,高温高压灭菌。

4.室温保存。

4、3M醋酸钠□组份浓度3M醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1.称取40.8gNaOAc3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2.加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3.加入去离子水将溶液定容至100mL。

4.高温高压灭菌后,室温保存。

5、PBSBuffer□组份浓度137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4□配制量1L□配置方法1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。

实验室溶液配制

实验室溶液配制

实验室所需溶液配制1.费休氏试液,购买;2.氢氧化钠溶液,C=0.01mol/l。

氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体0.4g溶于200ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;3.中性红溶液,C=1%。

准确称取中性红固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;4.溴百里香酚蓝溶液,C=1%。

准确称取溴百里香酚蓝固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;5.碘化钾溶液,C=10%。

准确称取KI固体50g溶于50ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;6.硫代硫酸钠溶液,C=0.1mol/l。

硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体15.811g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;7.硫酸溶液,C=2mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体108.78ml稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;8.淀粉溶液,C=0.5%。

准确称取可溶性淀粉0.5g,溶于50ml水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;9.铬酸钾溶液,C=50g/L。

准确称取铬酸钾固体50g,溶于500ml水中,并在1000ml容量瓶中定容,搅拌下逐滴加入10%的硝酸银溶液,直至溶液出现棕红的悬浮物为止.静置1昼夜,用干净的滤纸漏斗过滤即可,不一定用饱和硝酸银溶液,用10%硝酸银溶液即可.配制方法:1克硝酸银+10毫升纯水溶解,置于棕色瓶中;10.氯化钠基准试剂,C=0.1mol/l,氯化钠分子量58.5,准确称取氯化钠固,5.85g溶于500ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;11.硝酸银溶液,C=0.1mol/l,硝酸银分子量169.87,准确称取硝酸银固体8.49g溶于200ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液,用前采用基准氯化钠试剂(10)标定,需保存于棕色试剂瓶中;12.酚酞指示剂,C=0.1%,准确称取酚酞固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;13.氯化钡溶液,C=10%,准确称取氯化钡固体10g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;14.乙醇溶液,C=1%,准确移取乙醇(AR)1ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;15.盐酸标准溶液,C=1mol/l,分子量36.46,D154=1.20(39.11%),1.15(29.57%)、1.10(20%)、1.05(10.17%)。

实验室常用液体配制标准操作规程

实验室常用液体配制标准操作规程

常用液体配制标准操作规程(SOP)国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心二〇〇八年九月修订目录一、细菌培养系统(责任人:郑子峥)二、DNA操作系统(责任人:罗文新、陈瑛炜)三、蛋白质操作系统(责任人:李少伟、顾颖、潘晖榕)四、细胞培养相关(责任人:程通、张涛)五、单克隆抗体制备系统(责任人:陈毅歆、)六、EIA系统(责任人:葛胜祥、熊君辉)一、细菌培养系统1、LB培养基:每1000mL加分析纯NaCl 10g ,蛋白胨10g,酵母粉5g,用ddH2O 配制,再用10M NaOH调pH至7.4(1000mL一般加450ul),高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。

2、固体培养基:LB培养基中加入琼脂至1.5%,高压蒸汽灭菌15min后使用。

3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠(Ap):注射用氨苄青霉素钠(粉末)50g溶于500ml无菌去离子水中,溶解后分装入4ml灭菌的EP管,全程超净工作台内操作,避免染菌,分装后-20度保存,培养细菌时做1000×使用。

注:如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的,溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。

4、2.5%(g/V)硫酸卡那霉素(Kan)注射用硫酸卡那霉素(液体)通常是2ml/支,内含0.5g卡那霉素。

取25支药剂(50ml),加入450ml无菌去离子水中,分装入4ml灭菌的EP管,全程超净工作台内操作,避免染菌,分装后-20度保存,培养细菌时做1000×使用。

注:如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装,溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。

5、细菌培养:配制相应抗性培养基,每试管倒入3~4ml培养基(卡那霉素抗性培养采用标记试管),无菌牙签挑取单克隆至试管中,于37℃,220rpm 培养。

剩余培养基做好抗性和日期标记,置于4℃保存。

6、化学感受态制备:1)原理::细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态,这时的菌细胞称为感受态细胞(Competent cell)。

配制溶液的方法有

配制溶液的方法有

配制溶液的方法有
配制溶液的方法主要有以下几种:
1. 固体溶解法:将固体溶质加入到溶剂中,通过搅拌和加热使其溶解。

这是最常用的配制溶液的方法,比如将盐加入水中配制盐水。

2. 溶液稀释法:当需要调整溶液浓度时,可以通过溶液稀释的方法进行。

将已有的浓溶液取出一部分,加入适量的溶剂使其稀释,从而得到所需浓度的溶液。

3. 液体混合法:将两种或多种溶液混合在一起,通过计算混合前后的溶质浓度和容积,可以得到所需浓度的溶液。

这种方法常用于配制某些特定浓度的试剂液。

4. 稀酸稀碱稀化法:将浓度较高的酸、碱加入到大量的水中,通过稀化的方法得到所需浓度的酸碱溶液。

这种方法常用于配制实验室中的常用酸碱溶液。

5. 水合物溶解法:有些化合物具有结晶水,通过将结晶体加入到水中,可以得到溶解度较高的溶液。

这种方法常用于配制一些含水合物的溶液。

在配制溶液时,需要注意以下几点:
1. 需要准确称量溶质和溶剂,以保证溶液浓度的准确性。

2. 溶质的溶解度和溶剂的性质需要考虑,确保溶解度足够高,否则溶质不易溶解或溶液浓度无法满足需求。

3. 在溶质溶解过程中,可以适当加热或搅拌促进其溶解,但需注意加热时避免溶液溢出或溶质分解。

4. 配制过程中,需要注意实验室安全,避免对身体和环境造成伤害。

总之,配制溶液的方法多种多样,具体选择哪种方法要根据实际情况和需求确定。

在操作过程中,需要严格控制溶质和溶剂的量,充分考虑溶液的浓度和溶解度,以确保得到所需浓度的溶液。

同时还需注重实验室安全,遵守操作规范,保证人身安全和环境保护。

实验室常用液体配制标准操作规程

v1.0 可编辑可修改常用液体配制标准操作规程(SOP)国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心二〇〇八年九月修订目录一、细菌培养系统(责任人:郑子峥)二、DNA操作系统(责任人:罗文新、陈瑛炜)三、蛋白质操作系统(责任人:李少伟、顾颖、潘晖榕)四、细胞培养相关(责任人:程通、张涛)五、单克隆抗体制备系统(责任人:陈毅歆、)六、EIA系统(责任人:葛胜祥、熊君辉)一、细菌培养系统1、LB培养基:每1000mL加分析纯NaCl 10g ,蛋白胨 10g,酵母粉5g,用ddH2O 配制,再用10M NaOH调pH至(1000mL一般加450ul),高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。

2、固体培养基:LB培养基中加入琼脂至%,高压蒸汽灭菌15min后使用。

3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠(Ap):注射用氨苄青霉素钠(粉末)50g溶于500ml无菌去离子水中,溶解后分装入4ml灭菌的EP管,全程超净工作台内操作,避免染菌,分装后-20度保存,培养细菌时做1000×使用。

注:如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的,溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。

4、%(g/V)硫酸卡那霉素(Kan)注射用硫酸卡那霉素(液体)通常是2ml/支,内含卡那霉素。

取25支药剂(50ml),加入450ml无菌去离子水中,分装入4ml灭菌的EP管,全程超净工作台内操作,避免染菌,分装后-20度保存,培养细菌时做1000×使用。

注:如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装,溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。

5、细菌培养:配制相应抗性培养基,每试管倒入3~4ml培养基(卡那霉素抗性培养采用标记试管),无菌牙签挑取单克隆至试管中,于37℃,220rpm 培养。

剩余培养基做好抗性和日期标记,置于4℃保存。

6、化学感受态制备:1)原理::细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态,这时的菌细胞称为感受态细胞(Competent cell)。

实验室溶液配制技巧

实验室溶液配制技巧-标准化文件发布号:(9556-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII实验室溶液配制技巧液体溶液配制可以说是实验室分析人员最基础的一门技术,也是每天工作中的必选项。

液体溶液的配置包括溶质的计算、移液、定容等基础操作,还包括一些混合溶液的前后加入顺序及利用一些试剂自身的化学性质,掌握了溶液配制的技巧,可以大大缩短配置时间,提高实验效率。

我们都知道,溶液是由至少两种物质组成的均一、稳定的混合物,被分散的物质(溶质)以分子或更小的质点分散于另一物质(溶剂)中。

溶液是混合物。

种类分为:一般溶液和标准溶液。

一般溶液只是专指液体溶液。

一般溶液的配制过程1.计算:计算配制所需固体溶质的质量或液体浓溶液的体积。

2.称量:用托盘天平称量固体质量或用量筒或移液管量取液体体积。

3.溶解:在烧杯中溶解或稀释溶质,恢复至室温(如不能完全溶解可适当加热)。

检查容量瓶是否漏水。

4.转移:将烧杯内冷却后的溶液沿玻璃棒小心转入一定体积的容量瓶中(玻璃棒下端应靠在容量瓶刻度线以下)。

5.洗涤:用蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒2~3次,并将洗涤液转入容器中,振荡,使溶液混合均匀。

6.定容:向容量瓶中加水至刻度线以下1~2cm处时,改用胶头滴管加水,使溶液凹面恰好与刻度线相切。

7.摇匀:盖好瓶塞,用食指顶住瓶塞,另一只手的手指托住瓶底,反复上下颠倒,使溶液混合均匀。

8.装瓶,贴签。

举例:配制500mL,L碳酸钠溶液步骤及注意事项所需的仪器:烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、分析天平、药匙、量筒步骤:第一步:计算:所需碳酸钠的质量=**106=克;第二步:称量:在天平上称量克碳酸钠固体,并将它倒入小烧杯中;第三步:溶解:在盛有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量蒸馏水,用玻璃棒搅拌,使其溶解;第四步:移液:将溶液沿玻璃棒注入500mL容量瓶中;第五步:洗涤:用蒸馏水洗烧杯2~3次,并倒入容量瓶中;第六步:定容:倒水至刻度线1~2cm处改用胶头滴管滴到与凹液面平直;第七步:摇匀:盖好瓶塞,上下颠倒、摇匀;第八步:装瓶、贴签;误差分析:固体药品的称量与液体药品的量取是否准确;把溶液向容量瓶中转移,溶液洒了;未洗涤烧杯和玻璃棒;用待配液润洗了容量瓶;定容时水加多了或加少了;定容时未平视刻度线。

5几种溶液配制方法


三 、实验原理 1 、乙酸和乙醇在浓硫酸作用下发生酯化反应,生成乙酸乙酯 和水
浓H2SO4
CH3COOH+CH3CH2OH
CH3COOH+CH3CH2OH
2 、生成的乙酸乙酯沸点低,不溶于水,密度比水小,有特殊 的香气 四 、实验仪器和药品 大试管、试管、单孔塞、量筒、分液漏斗、小烧杯、橡皮管、 铁架台、石棉网、试管夹、煤气灯、火柴,、温度计、乙酸 (无水)、乙醇(无水)、浓硫酸、碳酸钠(固体)
四 、实验仪器和药品 1、仪器:大试管、单孔塞、集气瓶(4只)、橡皮管、弹簧 夹、铁架台、试管夹、煤气灯、燃烧匙、水槽、火柴,木条 (或线香) 2、药品:二氧化锰、氯酸钾、木条、细铁丝
五 、实验步骤 1 、按图搭建装置,检查气密性。 2、 制取并收集四集气瓶氧气(氯酸钾6g;二氧化锰2g)。 3 、完成余烬木条在氧气中复燃的实验。 4 、完成硫在氧气中燃烧的实验。 5 、完成铁丝在氧气中燃烧的实验。
五、 实验步骤 方法1: (1)按图1装配仪器 (2)在试管中加入6ml乙醇和4ml醋酸,缓缓加入4ml浓硫酸 (3)在试管中加入碎瓷片后,将试管放在沸水浴中加热5min (4)用滴管将上层清液取出,用饱和碳酸钠溶液洗涤 方法2: (1)按图2装配仪器 (2)在试管中加入6ml乙醇和4ml醋酸,缓缓加入4ml浓硫酸 (3)在试管中加入碎瓷片后,用小火加热 (4)将馏出的液体加入饱和碳酸钠溶液,用分液漏斗分离出上 层清液
实验一 几种常见溶液的配制
配制溶液是中学化学的基本实验技能。初中化学要求学 生能学会配制一定质量百分比浓度的溶液,高中化学则要求学 生能够掌握配制一定物质的量浓度的溶液。本实验将帮助师范 生重温配制一定浓度常见溶液的过程,体验实验过程中的操作 要点,为未来指导学生实验打好基础。

实验室试剂配制及实验方法

PBS缓冲液的配制(1PBS)NaCl 8gKCL 0.2gNa2HPO4 1.44gKH2PO4 0.24g调pH至7.4,加去离子水至1000ml,放于4℃备用。

Hank's 液用于冲洗动物组织和细胞,具有等渗和一定的酸性缓冲能力。

本实验中使用的是无钙、无镁Hank's 液(又称D- Hank's液),具体配方如下:NaCl 8.00gKCl 0.40gNa2HPO4.12H2O 0.134gNaHCO3 0.35g1%酚红 2ml加去离子水至 1000ml10磅高压灭菌10分钟,0-4℃储存备用。

使用前将调pH至7.2-7.4。

胰酶 (0.25%)NaCl 8gKCl 0.4g柠檬酸钠(5H2O) 1.12g磷酸二氢钠(2H2O) 0.056g碳酸氢钠 1g葡萄糖 1g胰酶 2.5g加去离子水至 1000ml用滤器过滤除菌,分装后放于-20℃备用。

大肠杆菌感受态细胞的制备按分子克隆实验指南中的氯化钙法制备感受态细胞。

以无菌的接种环取冻存的JM83菌种划线接种于LB琼脂平板上,37℃温箱培养过夜。

次日挑取生长好单个菌落接种于5ml LB 培养液中37℃振荡培养过夜。

取1ml过夜培养液接种到100ml LB液体培养基中,37℃剧烈振荡培养2-3小时使OD600达到0.4左右。

在无菌条件下将细菌培养物倒入灭菌后冰预冷的离心管中,冰浴10分钟,4℃1600g离心10分钟后尽弃上清。

加入100ml冰预冷的0.1mol/L的CaCl2溶液重新悬浮沉淀的细胞,在冰浴中放置30分钟,4℃1600g离心10分钟后尽弃上清。

加入10ml冰预冷的0.1mol/L的CaCl2溶液再次悬浮沉淀的细胞,加入终浓渡为15% 灭菌的甘油,混匀后分装为200 μl/管,直接用于转化或置-70℃冰箱保存备用。

CEF细胞制备取10日龄的SPF鸡胚,先后用碘酒棉和酒精棉消毒气室部位,无菌取出鸡胚,用Hank's液洗涤胚体,去头、四肢和内脏,剪成2mm大小的组织块,用0.25%胰酶溶液(4ml/胚)在37℃水浴中消化12分钟左右,然后倒掉胰酶,用不含血清的Hank's液洗涤2~3次后,再加入适量的营养液(DMEM),吹打分散细胞,用6层纱布过滤,制成每毫升含活细胞数106-107个的细胞悬液,分装为5 ml/60mm平皿,制成CEF单层细胞。

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抗体稀释液牛血清白蛋白1gNaN3 0.08g30% Triton 1ml(PBS)定容PBS(1x)100ml驴血清封闭液血清5-10mlNaN3 0.05g30% Triton 0.5ml(PBS)定容PBS(1x)100m抗原稀释液A 18ml+B 82 ml5双蒸水1000ml ,PH=6封片液Na2CO3 0.689gNaHCO3 1.554g溶于50ml 双蒸水50ml 甘油加热混合抗原修复液A:柠檬酸2.1g----100ml ddH2OB:二水柠檬酸三钠14.7g-----500mlA 18ml+B 82ml+900mlddH2O--------1L(PH=6.0)Neurobasal Mediaglutamine, 1%penicillin/streptomycin, 10 ng/mL platelet-derivedgrowth factor, 10 ng/mL FGF, and 2% B27BRDUBrdU is a brominated analog of thymidine.STABILITY / STORAGE AS SUPPLIED:BrdU should be stored at -0°C and desiccated. If properly stored, it will have a shelf-life of two years.SOLUBILITY / SOLUTION STABILITY:Sigma routinely tests the solubility at 50 mg/mL in 1 M ammonium hydroxide yielding a clear colorless solution. It can be dissolved in water at a concentration of up to 10 mg/mL. It is also soluble in DMF, DMSO and water (with heat) at 50-100 mg/mL.Solutions at neutral pH should be stable for at least 6 months when stored frozen at -20°C. APPLICATIONS:BrdU is selectively incorporated into cell DNA at the S phase of cell cycle. The use of BrdU as a thymidine analog has made possible the identification of DNA synthesis in suspensions of cells, cell smears and tissue sections. The incorporation of BrdU into DNAin place of thymidine is discussed by A.L. Givan.BrdU at 0.16 to 500 μg/mL of cell culture media produced inhibition of growth of KD cells (rabbit kidney cells). Effective inhibition at concentrations greater than 1.0 μg/mL was observed.6 It is i ncorporated, in vivo, by injecting 10-100 mg/kg at 10 mg/mL in saline intraperitoneally.7 It is also incorporated into bone marrow cells in culture at a final concentration of 10 μM at 37C for one hour. For incorporation to occur, the BrdU must be phosphorylated in the cell by thymidine kinase. FITC-conjugated second antibodies can be used with antibodies specific for BrdU (Sigma product B2531) which will make "new" DNA fluoresce green; denatured DNA can be stained with propidium iodide and will fluoresce red.PeproTech细胞因子和重组蛋白溶解必读来源:美国PeproTech(派普泰克)公司中国代表处大家知道,PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉,这使得运输非常便捷,只要常温即可。

而且,细胞因子和蛋白冻干粉非常稳定,在-20o C或-80o C条件下可保存数年。

冻干粉在使用前需进行溶解,然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。

溶解步骤非常关键,因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活,这也是很多用户在实际使用中经常遇到的问题。

应该如何进行正确的溶解呢?下面我们以Recombinant Human IL-4 (重组人IL-4,产品编号:200-04)的说明书为例,对细胞因子或蛋白的溶解方法进行详细的阐述。

拿到重组人IL-4的说明书后,您会发现有一段关于Reconstitution(重悬)的叙述,这段内容含有溶解相关的所有信息。

1. Centrifuge the vial prior to opening第 1 步:开盖前离心试剂管PeproTech的细胞因子或蛋白冻干粉装盛在塑料管中,为无菌包装。

冻干粉在运输过程中可能会因颠簸而漂散并粘贴于管壁或管盖上,所以在打开塑料瓶盖前,需将冻干粉通过离心收集到管底,以便用很小体积的液体即可将冻干粉完全溶解。

有很多用户会问一个问题,即应该用多少转速、多长时间离心试剂管,才能达到良好的收集效果?答:有些小型高速离心机(多为进口品牌)的面板上有一个Spin键,按了此键后,离心机会自动快速上升到其最大速度(10000rpm或12000rpm),上升到最高点后速度即刻下降,直至停止旋转,整个过程大约30s。

这个Spin键足以很好的将细胞因子或蛋白收集到管底。

但有些实验室没有这样的高速离心机,只有最高转速为4000-4500rpm的离心机。

这种情况下,需3000-3500rpm离心5min,也能达到类似的效果。

2. Reconstitute in water to a concentration of 0.1-1.0 mg/ml. Do not vortex.第 2 步:用无菌水重悬至 0.1-1.0 mg/ml ,不可振荡。

这个步骤即为溶解步骤,非常重要。

1) 一定要用推荐的溶液重悬(或溶解)冻干粉用于溶解细胞因子或蛋白的溶液千差万别。

此例中的重组人IL-4需用水溶解,而重组人IL-2 (产品编号:200-02)则需用100mM Acetic Acid (醋酸)溶解,重组人TGF-beta1 (产品编号:100-21)需用10mMCitric Acid (柠檬酸),pH3.0溶解,重组人FGF-basic(产品编号:100-18B)需用5mMTris,pH7.6溶解,重组人FGF-10(产品编号:100-26)需用5mMSodium Phosphate(磷酸钠),pH7.4溶解,重组IL-13(产品编号:200-13)需用20mMMHCl溶解。

(注:即使同一重组细胞因子或蛋白,不同批次的溶解方法也可能有所不同,因此上面的叙述仅供参考。

具体应该如何溶解应以相应批次的官方说明书为准)。

后续的文章中将对各种溶解液的配制方法进行详细的阐述,望继续关注。

经常有用户会问,为什么会有这么多种溶解方法?答:我们知道,蛋白的溶解性与很多因素有关,其中比较重要的是pH值和离子强度。

PeproTech的细胞因子或重组蛋白在出厂前均经严格测试,说明上所标明的溶解液是能够将该细胞因子或重组蛋白完全溶解的液体。

如果您所用的溶解液的pH值和离子强度与说明书中所标明的不符,很多时候会造成细胞因子或重组蛋白不能完全溶解或者根本无法溶解,这样所配得的细胞因子或重组蛋白必然活性不够或丧失。

有不少用户没注意说明书上的描述,而是根据习惯,直接用PBS或培养液(1640或DMEM等)等溶解细胞因子或蛋白的冻干粉。

这样做可以吗?答:有时可以,要看具体情况。

PeproTech的大多数细胞因子或蛋白冻干粉的溶解液不是PBS,此时千万不能用PBS或培养液直接来溶解,具体原因在上面已经叙述过。

而有部分细胞因子,如重组人KGF(产品编号:100-19)和重组人FGF-23(产品编号:100-52)等,说明书上的溶解液即为1x PBS,此时用PBS溶解完全没问题,那么用培养液溶解也是可以的,不过最好还是用先用PBS溶解,然后再用培养液稀释。

2) 一定要溶解到指定的浓度。

蛋白在一定的浓度范围内可以保持良好的稳定性,这个范围就是说明书上所标明的浓度范围,该例为0.1-1.0 mg/ml。

这个浓度范围对于不同的细胞因子或重组蛋白是不同的。

如重组人FGF-6(产品编号:100-30)为0.5-1.0mg/ml,而重组人Activin B(产品编号:120-15)则一定要是0.5mg/ml。

高于或低于该浓度范围会有什么问题呢?答:首先,细胞因子或蛋白会不稳定,即很容易出现活性下降的现象。

其次,高于这个浓度范围,可能会超过该蛋白的最大溶解浓度,即蛋白无法完全溶解。

再者,高于或低于该浓度范围,蛋白可能会出现聚集(aggregation),最终结果还是部分蛋白未溶解,导致蛋白活性的减弱。

3) 一定不能振荡(vortex)。

这里所说的振荡是指用涡旋仪进行快速振荡。

有用户会问,若想保证溶解液与冻干粉充分混匀,以实现细胞因子或重组蛋白的完全溶解,该怎么办呢?答:多数细胞因子或重组蛋白的冻干粉是非常容易溶解的,一般我们用移液枪的枪头轻吹几下,即可使细胞因子或重组蛋白完全溶解。

对于不易溶解的细胞因子或蛋白,PeproTech会在说明书中进行备注(Note)。

如在重组人IL-13(产品编号:200-13)的说明书中您会看到:Slow to dissolve (缓慢溶解),在重组人IL-11(产品编号:200-11)的说明中会看到: This solution is slow to dissolve.(该溶液溶解缓慢)。

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