乙酸钠溶液(3molL,pH5.2)
实验室常用缓冲液配置方案

实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:1 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
pH值。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量:1 L配制方法:3. 将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度:1.5 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4)3 M 醋酸钠(pH5.2)组份浓度:3M 醋酸钠配制量:100ml配制方法:1.称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后,室温保存。
5)PBS Buffer组份浓度:137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4配制量:1 L配制方法:3. 滴加浓盐酸将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
4. 高温高压灭菌后,室温保存。
实验室常用溶液的配制

实验室常用溶液的配制1.30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。
加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。
用Nalgen e滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的p H值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。
【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。
称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。
可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。
一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallin ckrodt),搅拌过夜,然后用What man 1号滤纸过滤以纯化之。
在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。
2.40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。
继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。
3.放线菌素D溶液【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。
放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。
【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。
乙酸乙酸钠缓冲溶液ph计算公式

乙酸乙酸钠缓冲溶液ph计算公式乙酸乙酸钠缓冲溶液pH计算公式缓冲溶液是指能够维持溶液pH值稳定的一种溶液。
在实验室中,乙酸乙酸钠缓冲溶液是常见的一种缓冲体系。
乙酸乙酸钠缓冲溶液的pH值可以通过一个简单的公式来计算。
乙酸乙酸钠缓冲溶液主要由乙酸和乙酸钠组成,乙酸是弱酸,乙酸钠是其盐。
在溶液中,乙酸可以与水分解产生乙酸根离子(CH3COO-)和H+离子,而乙酸钠可以与水分解产生乙酸根离子和Na+离子。
乙酸的离解方程式如下:CH3COOH ⇌ CH3COO- + H+乙酸钠的离解方程式如下:CH3COONa ⇌ CH3COO- + Na+在乙酸乙酸钠缓冲溶液中,乙酸和乙酸根离子相互转化,维持了溶液中乙酸根离子和乙酸的浓度比例,从而维持了溶液的pH值稳定。
乙酸乙酸钠缓冲溶液pH计算公式如下:pH = pKa + log ([A-]/[HA])其中,pH为溶液的pH值,pKa为乙酸的酸解离常数的负对数,[A-]为乙酸根离子的浓度,[HA]为乙酸的浓度。
pKa值是乙酸的一个重要参数,它表示了乙酸的酸性强弱。
pKa值越小,乙酸的酸性越强。
在实验中,我们可以通过测定乙酸和乙酸钠的溶液的pH值,然后利用公式计算出pKa值。
乙酸乙酸钠缓冲溶液的pH值可以通过改变乙酸和乙酸钠的浓度比例来调节。
当乙酸和乙酸根离子的浓度相等时,溶液的pH值等于乙酸的pKa值。
当乙酸根离子的浓度大于乙酸的浓度时,溶液呈碱性;当乙酸根离子的浓度小于乙酸的浓度时,溶液呈酸性。
乙酸乙酸钠缓冲溶液的pH值计算公式可以帮助我们预测和调节溶液的酸碱性,对于化学实验和生物实验中的pH控制非常重要。
通过合理选择乙酸和乙酸钠的浓度比例,我们可以制备出不同pH值的缓冲溶液,用于各种实验和研究领域。
总结一下,乙酸乙酸钠缓冲溶液pH计算公式为pH = pKa + log ([A-]/[HA]),其中pKa为乙酸的酸解离常数的负对数,[A-]为乙酸根离子的浓度,[HA]为乙酸的浓度。
溶液各种配制

附录:常用试剂配制及应用一、常用缓冲液、试剂的配制碳酸盐缓冲液(Carbonate-Bicarbonate Buffer)由于碳酸盐pH值偏碱,因此,常用于pH>9的缓冲液配制(附表1)。
附表1. 0.2 mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.2~10.7)磷酸缓冲液(Phosphate Buffers,PB)磷酸盐是使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa 值,PO4:pKa1=2.12,pKa2=7.21;所以用它们配制的缓冲液,pH 范围最宽。
NaH2HPO4:pKa1=7.21,pKa2=12.32。
Na2另外,磷酸盐还有钾盐分子形式,一般来说,低温时钠盐难溶,钾盐易溶,因此,配制细胞培养用试剂时常常添加钾盐试剂,但若配制十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用钠盐而不能用钾盐,因为SDS会与磷酸钾生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸缓冲液的优点为:①可配制成不同离子强度的缓冲液;②适用pH缓冲范围较宽;③受温度影响缓冲液pH值变化较小;④离子强度对缓冲液pH影响较小,如0.1mol/L缓冲液稀释10倍其pH变化小于0.1。
磷酸缓冲液的缺点是:①磷酸盐易与钙离子(Ca2+)、镁离子(Mg2+)及重金属离子结合生成不溶的沉淀物;②可能干扰某些生物化学反应过程,如对某些酶的催化活性具有一定程度的抑制作用。
NaH2PO4的pH值偏酸性,可用作pH<4的缓冲液。
Na2HPO4的pH值偏碱性,可用作pH>10的缓冲液。
而pH=6~8的中性缓冲液是更常用的缓冲液,需要NaH2PO4与Na2HPO4两种磷酸盐混合配制(附表2)。
附表2. 0.2 mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.2)磷酸盐缓冲溶液(Phosphate-buffered saline, PBS)磷酸盐缓冲液是在磷酸缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压,因此,PBS适用于做细胞缓冲液,常用PBS配制如下。
实验室常用溶液的配制

实验室常用溶液的配制1.30%丙烯酰胺溶液(100ml)【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'—亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中。
加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml.用Nalgene滤器(0。
45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7。
0,置棕色瓶中保存于4℃温度.【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。
称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。
可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料.一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0。
2体积的单床混合树脂(MB—1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。
在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸,因此大于1年的溶液应该被丢弃.2.40%丙烯酰胺(用于DNA测序,1L)【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’—亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。
继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
置棕色瓶中保存于室温.【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。
3.0。
1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液(1ml)【配制方法】在0。
8ml蒸馏水中溶解60mg ATP,用0。
1mol/L NaOH调至pH值至7。
0,用蒸馏水稀释1ml【注意】分装成小份保存于—70℃4.10mol/L乙酸铵溶液(1L)【配制方法】把770g乙酸铵溶解于800ml蒸馏水中,加水稀释至1L后过滤除菌。
在4°C 储存。
【注意】乙酸铵是热不稳定的。
不要高压灭菌。
5.10%过硫酸铵溶液(10ml)【配制方法】把1g过硫酸铵溶于8ml蒸馏水中,用蒸馏水补足体积至10ml。
Tris-HCl、HEPES缓冲液区别知多少

在生物实验中经常会用到缓冲液,缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。
最常用到的缓冲液有很多,比如说磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液以及氨基酸缓冲液等等。
不同的缓冲液差别液很大,今天就来聊聊Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的区别。
Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液优缺点
1、Tris-HCl缓冲液
Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂,其本身为弱碱,常用有效pH在“中性”范围,Tris-HCl缓冲液:pH=7.5~8.5;Tris-磷酸盐缓冲液:pH=5.0~9.0。
1)Tris-HCl缓冲液优点
碱性较强,可以只用这一种缓冲液配置由酸到碱的范围pH缓冲液;对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
2)Tris-HCl缓冲液缺点
pH受浓度影响较大,稀释10倍,pH变化大于0.1
温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.4
2、HEPES缓冲液
HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。
1)HEPES缓冲液优点:
在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的pH值,并对细胞无毒性作用。
2)HEPES缓冲液缺点:
在高浓度时对一些细胞可能有毒,与其他缓冲剂相比价格略贵。
PMSF及常用试剂的配制方法

P M S F英文全称:Phenylmethanesulfonylfluoride中文名称:苯甲基磺酰氟分子式:C7H7FO2S分子量:174.19CAS号:[329-98-6]PubChem号:4784结构示意图:分类:15)PMSF,1.PMSF3.PMSF值为8.0时,)例称量(PMSFPMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。
pH值为8.0时,20μmmol/lPMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。
用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L),分装成小份贮存于-20℃。
如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。
常用试剂的配制:1、30%丙烯酰胺(1)配制方法:将29G丙烯酰胺和1gN,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中,加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml,用Nalgene滤器(0.45um孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置之不理棕色瓶中保存于室温。
(2)说明:小心丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收,其作用具螺积性。
称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。
可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。
一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman1号滤纸以纯化之。
在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酸和双丙烯酸。
2、10%过滤酸铵(1)配制方法:把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周。
3、1mol/L氯化钙(1)配制方法:在20ml纯水中(Milli-Ce水或相当级别的水)溶解54gCacl2?6H2O用0.22um滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮存于-20℃。
质粒浓缩步骤

质粒浓缩:Vml①Vml 1×TAE或水②2V ml③混匀④离心,最大转速10min⑤取上清⑥1/10V ml NaAc(pH 5.2)⑦4Vml 冰醋酸⑧置于-20℃,10min⑨离心,最大转速10~15min10.弃上清11.70%酒精洗两次(最大转速),酒精要吸干(离心两次,第一次倒干净,第二次空转吸净)12.室温晾干13.水溶,计算好体积,与加入的其余物质吻合1. 加入1/10 体积的乙酸钠(3 mol/L ,PH=5.2)于DNA 溶液中充分混匀,使其最终浓度为0.3 mol/L;2. 加入2 倍体积用冰预冷的乙醇混合后再次充分混匀置于- 20℃中15~30 分钟;3. 12,000 g 离心10 分钟,小心移出上清液,吸去管壁上所有的液滴;4. 加入1/2 离心管容量的70%乙醇,12000g 离心2 分钟,小心移出上清液,吸去管壁上所有的液滴;5. 于室温下将开盖的EP 管的置于实验桌上以使残留的液体挥发至干;6. 加适量的ddH2O 溶解DNA 沉淀。
浓缩原理:首先,向酶切体系添加1/10体积浓度为3M的NaAc,混匀后,整个体系的Na+浓度就是0.3M(生理盐水的Na+浓度大约为0.15M)。
这么多的Na+均匀地分散到DNA表面,屏蔽掉DNA链上PO4-的负电荷,有利于DNA链的压缩。
否则的话,PO4-彼此排斥,DNA就不容易聚集。
接着,向整个体系添加2倍体积的无水乙醇。
乙醇和水的互溶性很好,加进去后,乙醇就把DNA表面的水膜夺走。
换句话说,水和乙醇混去了,原本溶解在水中的DNA只好被挤了出来。
第一步加入的Na+平衡了PO4-的电荷,被挤出来的DNA就轻易堆积在一起了。
经过离心(12,000 rpm × 5 min),被挤出来的DNA就全部被甩到了离心管底部。
把上清倒掉,剩下DNA。
然而,这时的DNA不纯,还混有酶切体系留下来的盐分,以及变性了的酶。
酶变性了,量也不多,不用清除。
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乙酸钠溶液(3mol/L,pH5.2)
简介:
乙酸钠也称醋酸钠、NaAc ,是常规分子生物学试剂。
NaAc(3mol/L,pH5.2)主要由3M NaAc 组成,调pH5.2,常用于DNA 乙醇沉淀等。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、根据实验具体要求操作。
注意事项:
1、 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
相关:
编号 名称 R00737 R00737 Storage NaAc(3mol/L,pH5.2) 100ml 500ml RT
使用说明书 1份 编号 名称 DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)
NH0042 SSC 缓冲液(10×,pH7.0)
NR0001 DEPC 处理水(0.1%)
PW0111 Super ECL Plus 超敏发光液
R00017 EDTA 溶液(0.5mol/L,pH8.0)
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。