醋酸-醋酸钠缓冲液配制
配制醋酸钠-醋酸缓冲液的靠谱方法

Method of making Sodium acetate-Acetic acid Buffer参考书:Essential Laboratory Mathematics: Concepts and Applications for the Chemical首先0.2M(mol/L)是指醋酸钠加上醋酸的mol/g之和所以设c(HAc)为Xmol/L,则c(NaAc)为(0.2-X)mol/L.(欲配得溶液中)然后,这两个浓度不论在初始配制和配得溶液中须满足下面方程:例中要求pH=5.2,Ka是HAC乙酸的解离常数,查表。
此处pKa=-logKa,常数,为4.75则5.2=4.75+log((0.2-X)/X)所以c(NaAC)/c(HAc)=2.82X+2.82X=0.2解X=0.052mol/L,所以c(HAc)为0.052mol/L,c(NaAC)为0.15mol/L.需要mHAc =cM=0.052*60=3.12g/L,通常为液体,密度1.05g/mL. 配1L需要体积2.97mL.mNaAc=cM=0.15*82=12.3g/L若是三水醋酸钠,M=136=20.4g/L所以要配制1L缓冲液,需要20.4g 三水醋酸钠,2.97mL无水乙醇。
定容至1000mL红尘紫陌,有轰轰烈烈的昨日,也有平淡如水的今天。
在生活平平仄仄的韵脚中,一直都泛着故事的清香,我看到每一寸的光阴都落在我的宣纸上,跌进每一个方方正正的小楷里,沉香、迷醉。
秋光静好,窗外阳光和细微的风都好,我也尚好。
不去向秋寒暄,只愿坐在十月的门扉,写一阙清丽的小诗,送给秋天;在一杯香茗里欣然,读一抹秋意阑珊,依着深秋,细嗅桂花的香馥,赏她们的淡定从容地绽放。
听风穿过幽幽长廊,在平淡简约的人生中,把日子过成云卷云舒,行云流水的模样,过成一幅画,一首诗。
有你,有我,有爱,有暖,就好。
在安静恬淡的时光里,勾勒我们最美的今天和明天。
醉一帘秋之幽梦,写一行小字,念一个远方,痴一生眷恋。
ABTS法测酶活

ABTS 法测酶活
1、先配制0.1mol/L 的醋酸-醋酸钠缓冲液(pH =4.0);
2、再配制0.5mmol/L 的ABTS ;(0.5mmol/L ABTS :0.27434g ABTS 加入到1L 纯水中溶解即可。
(分子量为548.67))
3、在无菌的环境中提取1mL 的粗酶液,放入EP 管内;
4、用离心机对其离心(8000转2分钟),取上一定量的上清液,用醋酸-醋酸钠缓冲液进行稀释一定的倍数;
5、取一定量的ABTS 试剂,和稀释后的酶液分别在不同的试管内进行水浴(40℃,10min );也将比色皿冲洗干净放在干燥箱里,温度调到40℃;
6、尽量保持在40℃的温度下混合ABTS 和稀释后的酶液(比例1:1),当两种液体混合时开始计时,记录下第30s 和90s 两个时间点分光光度计的显示数(λ=420nm );
7、定义1 个酶活力单位用每分钟1μmol 的ABTS 被转化所需的酶量。
(原理是ABTS 被Lac 氧化,氧化产物的消光系数ε为3.6×104(mol/L )-1·cm -1),所以酶活的换算按照下列公式:
t 10
6.31043
∆∆⨯⨯⨯D 酶液总体积反应液总体积。
醋酸缓冲溶液的配制与计算

醋酸缓冲溶液配制醋酸盐缓冲液(pH3.5) 取醋酸铵25g,加水25ml溶解后,加7mol/L盐酸溶液38m l,用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示),用水稀释至100ml, 即得。
醋酸-锂盐缓冲液(pH3.0) 取冰醋酸50ml,加水800ml混合后,用氢氧化锂调节pH值至3.0,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.6) 取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml, 即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.7) 取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60~80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.8) 取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5) 取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml, 即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.6) 取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解,用冰醋酸调节pH值至4.6,再加水稀释至100ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH6.0) 取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml 溶解后,加水稀释至500ml,即得。
醋酸-醋酸钾缓冲液(pH4.3) 取醋酸钾14g,加冰醋酸20.5ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸铵缓冲液(pH4.5) 取醋酸铵7.7g,加水50ml溶解后,加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml,即得。
醋酸-醋酸铵缓冲液(pH6.0) 取醋酸铵100g,加水300ml使溶解,加冰醋酸7ml,摇匀,即得。
以上是中国药典中收录的,当然也可以自己设计浓度,pH,但是注意低于3以后醋酸缓冲容量就小了。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)](在此,C(HAc)指醋酸的浓度,C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5(1.8乘10的-5次方),PKa=-lgKa=4.75,将PH=5.5代入,可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L,或是C(HAc)=0.2mol/L等。
常用缓冲溶液的配制方法

常用缓冲溶液的配制缓冲液组成 缓冲液pH值缓冲液配制方法乙醇-醋酸铵 3.7取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L 氢氧化铵溶液调节pH值至3.7,用水稀释至1000ml。
甲酸-氢氧化钠 3.7取95g甲酸和氢氧化钠 40g于500 ml水中,溶解,稀释至1000ml。
六次甲基四胺-盐酸 5.4取六次甲基四胺40g溶于200 cm3水中, 加浓盐酸10 cm3,稀释至1 dm3。
氨-氯化铵 8.0取氯化铵1.07g,加水使溶解成100ml,再加稀氨水调节pH值至8.0。
氨-氯化铵 9.2取氯化铵 54g溶于水中,加浓氨水63 ml,稀释至1000ml。
氨-氯化铵 10.0取氯化铵5.4g,加水20ml溶解后,加浓氯溶液35ml,再加水稀释至100ml。
硼砂-氯化钙 8.0取硼砂0.572g与氯化钙2.94g,加水约800ml溶解后,用1mol/L 盐酸溶液约2.5ml调节pH值至8.0,加水稀释至1000ml。
硼砂-碳酸钠 ~11.0取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml;另取硼砂1.91g,加水使溶解成100ml。
临用前取碳酸钠溶液973ml 与硼砂溶液27ml,混匀。
硼酸-氯化钾 9.0取硼酸 3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml使溶解,再加0.1mol/L氢氧化钠溶液210ml。
邻苯二甲酸氢钾-盐酸 2.9取500g邻苯二甲酸氢钾溶于500 ml水中,加浓盐酸80ml,稀释至1000ml。
醋酸盐 3.5取醋酸铵25g,加水25ml溶解后,加7mol/L盐酸溶液38ml,用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示),用水稀释至100ml。
醋酸-醋酸钠 3.6取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml。
醋酸-醋酸钠 3.7取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60~80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml。
常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。
配制方法如下:- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。
-根据所需pH值,按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。
2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。
配制方法如下:- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。
-具体配制时,根据所需pH值,按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。
3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。
配制方法如下:- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。
-具体配制时,根据所需pH值,按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。
4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。
配制方法如下:- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。
-根据所需pH值,按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。
5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。
配制方法如下:- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。
-根据所需pH值,按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。
以上是一些常见的缓冲溶液配制方法,具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。
在配制缓冲溶液时,一定要注意使用高纯度的试剂,并按照配制方法进行准确的实验操作。
PBS,BR,醋酸醋酸钠,铁氰化钾缓冲液的配制

PBS缓冲液的配制PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4,81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 9285.9 90106.0 87.712.36.1 85156.2 81.518.56.3 77.522.56.4 73.526.56.5 68.531.56.6 62.537.56.7 56.543.56.8 51496.9 45557.0 38627.1 33677.2 28727.3 23777.4 19ml81ml7.5 16847.6 13877.7 10.50.57.8 8.591.57.9 7938.0 5.394.7BR缓冲液的配制伯瑞坦-罗宾森(Britton-Robinson)是由磷酸、硼酸和醋酸混合成,向其中加入不同量的氢氧化钠可以组成pH范围很宽的缓冲溶液,pH1.8~11.9Britton-Robinson缓冲溶液(H3PO4-HAc-H3BO3).Britton2Robinson (BR)缓冲溶液用0. 04 mol/L磷酸、硼酸和醋酸配制而. 成,使用时用0.2 mol/L NaOH溶液在酸度计上调至所需pH值。
酸碱缓冲溶液的计算及配制

酸碱缓冲溶液的计算及配制酸碱缓冲溶液是化学分析和仪器分析中应用最为广泛的试剂溶液之一。
虽然任何分析方法和标准中都有缓冲溶液的配制方法,但实际工作中(包括科研实验中)根据PH值要求,因地制宜地配制某种缓冲溶液,仍然具有很实用的意义。
附件是本人最近编写的“酸碱缓冲溶液计算”软件中的一部分,侧重于:指定PH值、溶液总浓度和总体积,用弱酸(或强酸弱碱盐)的浓溶液或固体、弱碱(或强碱弱酸盐)的浓溶液或固体来混合配制缓冲溶液的用量计算(计算称取的质量、量取的溶液体积)。
一、软件界面及用法演示此Flash包含在附件中,也可以在软件的“操作演示”中弹出。
界面如下打开软件后,请及时在PH、PKa、C(总)、V(总)四个文本框中输入数据,它们分别对应于(1)要配制的PH值(如醋酸缓冲溶液,配成PH5.0(2)弱酸或共轭酸的酸离解常数的负对数如醋酸为4.74,氨缓冲体系,可以查到氨的碱离解常数PKb=4.74,则共轭酸铵根的PKa=14.00-4.74=9.26,都可以查表得到。
(3)缓冲溶液的总浓度(混合液中共轭酸碱的浓度和,例如:0.10MHAc+0.15M NaAc,则总浓度为0.25M,当然,一类情况是给定总浓度,不给各自的浓度)(4)缓冲溶液的总体积(最终配成的体积)下部分的四个绿色框是计算后自动填充的数据,右上角的绿色框也是自动生成的共轭酸碱的摩尔比。
中间的M(弱酸)为弱酸的式量,M(弱碱)为弱碱的式量,这七个框的数据都是自动填充的。
你要做的工作就是:要计算弱酸固体,就单击“计算酸m”,会弹出提示和输入框,根据提示,你输入对应的式量即可,同理,要计算弱酸的体积,就单击“计算酸V”,在弹出的提示和输入框中输入浓度值即可,弱酸的固体或溶液也如此炮制,剩下的计算和填充由软件来完成。
温馨提示:我在软件中设置了一个定时器,每5秒钟检查一次你的PH、PKa、C(总)、V(总)是否都输入了数据,如果没有输入完全,就会自动弹出一个提示框,告知请你输入(因为软件等着计算呢),如果你还没有来得及输入它就弹出来,你只要按下“确定”,在它退出后,你再输入数据,再弹出来时,你再按下“确定”,继续输入数据,输完四个数据,它就不再弹出!虽然它的弹出有点“讨厌”,不过,你就不会忘记该做的工作了。
醋酸-醋酸钠缓冲液配制

醋酸-醋酸钠缓冲液
取醋酸钠,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液
取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60~80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液
取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液
取醋酸钠18g,加冰醋酸,再加水稀释至1000ml,
即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液
取醋酸钠,加水50ml使溶解,用冰醋酸调节pH值至,再加水稀释至100ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液
取醋酸钠,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加水稀释至500ml,即得。
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醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.6)
取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.7)
取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60~80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.8)
取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5)
取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,
即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.6)
取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解,用冰醋酸调节pH值至4.6,再加水稀释至100ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH6.0)
取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加水稀释至500ml,即得。