白花丹醌增强TRAIL诱导Kasumi_1细胞凋亡及其机制
桂林产白花丹茎不同月份白花丹醌含量测定
桂林产白花丹茎不同月份白花丹醌含量测定杜泽乡【摘要】采用高效液相色谱法(HPLC),对桂林产的白花丹茎中不同月份的白花丹醌含量进行了测定.结果表明:在流动相为甲醇-水(70∶30),检测波长为254 nm的条件下,白花丹醌在0.00048～0.0240 mg·mL-1之间线性关系良好；回收率为96.9％～100.0％,白花丹茎中白花丹醌含量10月份最高,这时也是白花丹茎生物产量的高峰期,说明10月份是白花丹茎的最佳采收期.%The plumbagin content in stems of Plumbago zeylanica was determined during different months in Guilin, China,using RP-HPLC methanol and H2O (70:30) as mobile phase and UV detection at 254 nm. Linear range o-ver 0. 00048-0. 0240 mg ?mL-1 of plumbagin was obtained Recovery rate was within 96. 9% -100. 0%. The content in stems of P. zeylanica was the highest in October when the plant was the most thriving and biggest in size. It was therefore considered that October was the best time for collecting stems.【期刊名称】《广西植物》【年(卷),期】2012(032)003【总页数】4页(P424-426,349)【关键词】白花丹;白花丹醌;含量;高效液相【作者】杜泽乡【作者单位】桂林医学院,广西桂林541004【正文语种】中文【中图分类】Q946白花丹（Plumbagozeylanica）为蓝雪科（Plumbaginaceae）植物，主要分布在东南亚和我国的华南、西南地区，为东南亚及中国多民族药材。
白花丹醌和亚砷酸对白血病荷瘤小鼠作用的比较.
白花丹醌和亚砷酸对白血病荷瘤小鼠作用的比较.
徐凯红;陆道培
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2012(024)006
【摘要】目的观察白花丹醌对白血病异种移植瘤的体内作用.方法用NB4细胞构建白血病小鼠模型,白花丹醌组(2mg/(kg·d)),亚砷酸组(4mg/(kg·d)),分别腹腔给药15d,计算抑瘤率,凋亡指数(AI)并进行病理组织学检查.结果白花丹醌组抑瘤率为40.49%(P＜0.01),AI为(8.52±1.49)%(P＜0.01),未出现明显的病理组织损伤.亚砷酸组则无明显的抑瘤作用,凋亡作用不明显(P＞0.05),部分伴有心肌组织的损伤.结论:白花丹醌具有抑制肿瘤生长,诱导凋亡的作用,可能成为白血病治疗的新选择.【总页数】4页(P14-16,封4)
【作者】徐凯红;陆道培
【作者单位】浙江宁波市第一医院,宁波,315010;北京道培医院,北京,100049【正文语种】中文
【中图分类】R969
【相关文献】
1.亚砷酸治疗急性早幼粒细胞白血病副作用观察 [J], 高菊
2.亚砷酸和全反式维甲酸对急性早幼粒细胞白血病疗效和副作用的比较 [J], 焦力;邹农;朱铁楠;沈悌;王书杰;庄俊玲;赵永强;周道斌;许莹;韩冰;张薇;段明辉
3.亚砷酸对白血病K562/A02细胞的作用及机制 [J], 李君君;周园芳;刘小军;颜家运
4.亚砷酸对白血病K562/A02细胞的作用及机制 [J], 李君君;周园芳;刘小军;颜家运
5.白花丹醌对白血病细胞DNA甲基转移酶的作用 [J], 徐凯红;严笑;杨澍君;张怡;牧启田;徐志娟;欧阳桂芳
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白花丹醌对人肝癌细胞HepG2侵袭和凋亡的影响
白花丹醌对人肝癌细胞HepG2侵袭和凋亡的影响谢金玲;赵川;李俊萱;韦燕飞【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2016(32)5【摘要】Aim To investigate the effect of plumbagin on invasion and apoptosis of human hepatocellular car-cinoma ( HepG2 ) . Methods HepG2 cells were cul-tured in vitro with different concentrations of plumba-gin, then cell proliferation was observed by MTT as-say; cell invasion was observed by transwell invasion assay; cell apoptosis was detected by flow cytometry, and the protein expression of Bax, Bcl-2 was detected by immunocytochemistry. Results MTT results showed that plumbagin could significantly inhibit cell proliferation compared with the control group, and in a dose-dependent manner ( P <0. 05 ) . Transwell inva-sion assay showed that cell invasion was significantly decreased with increasing concentrations of plumbagin ( P < 0. 01 ) . Flow cytometry showed that apoptosis rate was significantly higher in 4 , 8 μmol · L-1 group of plumbagin compared with that of the control group ( P<0. 01 ) . Immunocytochemistry showed that, with the increasing concentration of plumbagin, Bax protein expression increased, Bcl-2 protein expression was de-creased, both in a dose-dependent manner ( P <0. 01 ) . Conclusion Plumbagin can inhibit HepG2 cell proliferation and accelerate apoptosis of HepG2 cells, but also has the ability to inhibit HepG2 cell in-vasion. <br>( P < 0. 01 ) . Flow cytometry showed that apoptosis rate was significantly higher in 4 , 8 μmol · L-1 group of plumbagin compared with that of the control group ( P<0. 01 ) . Immunocytochemistry showed that, with the increasing concentration of plumbagin, Bax protein expression increased, Bcl-2 protein expression was de-creased, both in a dose-dependent manner ( P <0. 01 ) . Conclusion Plumbagin can inhibit HepG2 cell proliferation and accelerate apoptosis of HepG2 cells, but also has the ability to inhibit HepG2 cell in-vasion.%目的：探讨白花丹醌对人肝癌HepG2细胞侵袭和凋亡的影响。
白花丹参提取物对脂多糖损伤内皮祖细胞周期与凋亡的影响
白花丹参提取物对脂多糖损伤内皮祖细胞周期与凋亡的影响焦鹏;杨娜娜;唐瑜菁;秦树存【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2014(036)001【摘要】目的探讨白花丹参提取物对脂多糖损伤内皮祖细胞周期与凋亡的作用.方法以10 μg/mL脂多糖诱导内皮祖细胞损伤,制备内皮祖细胞损伤模型后用不同质量浓度白花丹参提取物干预,用MTT比色法检测各组细胞活性,用AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡变化,碘化丙啶单染流式细胞仪检测各组细胞周期.结果与正常对照组比较,模型组细胞增殖活性明显下降,细胞凋亡率明显增加,S期细胞比率降低,G0/G1期细胞比率增加.与模型组比较,白花丹参组细胞存活率升高,细胞凋亡率下降,且呈剂量依赖性,G0/G1期细胞比率降低,S期及G2/M期细胞比率均增加.结论白花丹参对脂多糖损伤的血管内皮祖细胞有保护作用,其机制可能是通过保护细胞周期正常进行、抑制细胞凋亡实现的.【总页数】4页(P22-25)【作者】焦鹏;杨娜娜;唐瑜菁;秦树存【作者单位】泰山医学院动脉粥样硬化研究所,山东泰安271000;泰山医学院动脉粥样硬化研究所,山东泰安271000;泰山医学院动脉粥样硬化研究所,山东泰安271000;泰山医学院动脉粥样硬化研究所,山东泰安271000【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.泰山白花丹参提取物体外对氧化应激损伤内皮祖细胞作用的研究 [J], 焦鹏;杨娜娜;崔英杰;秦树存2.脂多糖对人脐血内皮祖细胞增殖及凋亡的影响 [J], 李金海;陈辉春;戴华卫;张海峰;王烈3.自噬激活如何影响大鼠内皮祖细胞凋亡、增殖和周期的变化? [J], 刘辉;李晓强;朱人大;孟庆友;卢辉俊4.银杏叶提取物对糖尿病外周血内皮祖细胞超氧化物歧化酶及凋亡的影响 [J], 王晓霞;王颖超;赵明5.血必净注射液在内皮祖细胞修复脂多糖诱导的肾内皮细胞损伤中的作用及机制[J], 卓剑;郑武平;温江华;吴英春;陈松因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
白花丹素对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及其机制
公司 ； 小 牛血 清购 自美 国 Ｈ ｙ ｃ ｌ ｏ ｎ ｅ公 司 ； 高 糖 细 胞 培
养基 、 青霉素双 抗、 链 霉 素双抗 购 自美 国 Ｇ ｉ ｂ ｃ ｏ公 司； 考 马斯 亮 蓝 、 凝 胶试 剂 盒、 硝 酸纤 维素 膜 、 Ｅ Ｃ Ｌ 发光 试剂 盒 、 兔抗 人 一 抗 和 羊 抗 兔 二 抗 购 自武 汉 博
２ ０ ｍ ｏ Ｌ ／ Ｌ白花 丹 素 的 培 养 基 ， 正 常 对 照组 加 入 含 ０ ． １ ％ Ｄ ＭＳ Ｏ 的完 全 培 养基 。 培 养 ２ ４ ｈ ， 采用 Ｃ Ｃ Ｋ － ８法 检 测 细 胞
增殖抑制率 ， Ｈ ｏ ｅ ｃ ｈ ｓ ｔ ３ ３ ３ ４ ２染 色后计 算细胞凋亡率 ， 流式细胞术检测活性 氧 （ Ｒ Ｏ Ｓ ） 水平 ， Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ ｔ ｉ ｎ ｇ 法检测 Ｂ ｃ ｌ 一 ２ 、 Ｂ ａ ｘ蛋 白相对表达量 。结果 对照组 、 ５ Ｉ ｘ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ组 、 １ ０ ｍ ｏ Ｌ ／ Ｌ组 、 ２ ０ ｐ ． ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ组细胞增殖抑 制率和凋亡率 均逐渐 升高 ， 组间两两 比较 Ｐ均 ＜０ ． ０ ５ 。对照组和 ５￣ ｍ ｏ ＶＬ组 、 １ ０￣ ｍ ｏ ＶＬ组 、 ２ ０ ｍ ｏ Ｌ ／ Ｌ组 Ｒ Ｏ Ｓ 水平 、 Ｂ ａ ｘ蛋 白相对表达 量均逐渐 升高 ， Ｂ ｃ ｌ － ２ 蛋 白相对表达量逐 渐 降低 ， 组 间 比较 Ｐ均 ＜０ ． ０ ５ 。结 论 白花 丹素 能够 抑制 骨 肉瘤 细胞增
细胞 培养 级 二 甲基 亚 砜 （ Ｄ ＭＳ Ｏ） 溶液 中， 配 制 成 浓
度为 ０ ． １ ｍｍ ｏ ｌ ／ Ｌ的 溶 液 ， 一２ ０。 【 ＝ 冰 箱保存 备用 。 骨 肉瘤 细 胞 系 ＭＧ － ６ ３ （ 简 称 骨 肉瘤 细 胞 ） 购 自中 国 科 学 院上 海细 胞 库 ； Ｃ Ｃ Ｋ． ８试 剂 盒 购 自碧 云 天 生 物 技 术 研究 所 ； Ｈ ｏ ｅ ｃ ｈ ｓ ｔ ３ ３ ３ ４ ２和 Ｄ Ｍ Ｓ Ｏ购 自美 国 Ｓ ｉ ｇ ｍ ａ
地西他滨对白血病Kasumi-1细胞的毒性作用及其机制研究
地西他滨对白血病Kasumi-1细胞的毒性作用及其机制研究熊暮珺n;肖若芝;阮星星;陈家杰;林东军【期刊名称】《新医学》【年(卷),期】2012(043)005【摘要】Objective: To investigate the cytotoxicity and its mechanism of decitabine (DAC) on Kasumi-1 cells in leukemia. Methods; Cell viability rates of Kasumi-1 cells were determined by CCK-8 assay after treatment of DAC (0. 5 ~ 100 μmol/L) for 24, 48 and 72 h. Apoptosis analysis was conducted by Annexin V/PI apoptotic detection assay on Kasumi 4 cells treated with 0. 5 ~ 20 μmol/L DAC for 48 h. Cell cycle changes were assessed by flow cytometry (PI staining). Reverse transcription-PCR (RT-PCR) was used to determine the mRNA expression levels of p21WAF1/CIP1 gene. Results: DAC (0. 5 ~ 100 μmol/L) significantly inhibited the growth of Kasumi -1 cellsrnin both time-and dose-dependent manners. The IC50 of DAC on the viability of Kasumi 4 cells 24, 48 and 72 h after treatment were 6. 92, 5. 03 and 4. 47 μmol/L, respectively. DAC (0. 5 ~20 μmol/L) induced Kasumi -1 cellrnapoptosis, and further arrested G2/M cell cycle and up-regulated p21WAF1/CIP1 gene in a dose-dependent manners.rnConclusion: DAC exerts its cytotoxic effects on Kasumi4 cells, accompanied with G2/M cell cycle arrest andrnup-regulatedp21WAF1/CIP1%目的:探讨地西他滨对白血病Kasumi-1细胞的毒性作用及其机制.方法:应用CCK-8法检测0.5~100 μmol/L地西他滨作用Kasumi-1细胞24、48、72 h后的细胞存活率,AnnexinⅤ-FITC/PI双染色法检测0.5~20 μmol/L地西他滨处理Kasumi-1细胞48 h后的细胞凋亡率,流式细胞碘化丙啶单染色法观察G0/G1期、S期、G2/M期Kasumi-1细胞比例;逆转录PCR法检测p21WAF1/CIP1基因表达水平的变化.结果:0.5~100 μmol/L地西他滨均可抑制Kasumi-1细胞增殖,并呈现剂量依赖性与时间依赖性,作用24、48、72 h的IC50浓度分别为6.92、5.03、4.47 μmol/L;0.5~20 μmol/L地西他滨诱导Kasumi-1细胞凋亡水平较低,但能以剂量依赖的方式阻滞Kasumi-1细胞G2/M期,上调p21WAF1/CIP1基因表达.结论:地西他滨对Kasumi-1细胞具有毒性作用,其机制可能与上调p21WAF1/CIP1表达以及阻滞细胞周期有关.【总页数】4页(P331-333,340)【作者】熊暮珺n;肖若芝;阮星星;陈家杰;林东军【作者单位】中山大学附属第三医院血液科,510630;中山大学血液病研究所,510630;中山大学附属第三医院血液科,510630;中山大学血液病研究所,510630;中山大学附属第三医院泌尿外科,510630;中山大学血液病研究所,510630;中山大学附属第三医院血液科,510630;中山大学血液病研究所,510630【正文语种】中文【相关文献】1.地西他滨抑制 K562白血病细胞增殖和诱导分化的作用 [J], 余潇苓;赵燕娜;郑智茵;高瑞兰;尹利明2.地西他滨抑制AML1-ETO+白血病细胞增殖和诱导凋亡的机制研究 [J], 李海英;周斌;张力;高申孟3.地西他滨体外对小鼠急性粒-单核白血病细胞WEHI-3的抗肿瘤作用及机制探讨[J], 肖秧;李永辉;王智鼎;王立新;于力;王佳;关伟;杨二娜;王茂全;陈国凤;周薇;张娟;吕娜4.地西他滨体外对小鼠急性粒-单核白血病细胞WEHI-3的抗肿瘤作用及机制探讨[J], 肖秧;王佳;关伟;杨二娜;王茂全;陈国凤;周薇;张娟;吕娜;李永辉;王智鼎;王立新;于力;;;;;;;;;;;;;;;;;;5.地西他滨与阿糖胞苷治疗骨髓增生异常综合征及急性髓细胞白血病耐药机制研究[J], 张帆;刘景华;周凡因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
白花丹醌诱导人白血病细胞-NB4凋亡的实验研究
清 ，０ Ｕｍ １０ ／ Ｌ青霉 素 ，０ Ｕｍ １０ ／ Ｌ链 霉 素 ）在 ３ｃ饱 和 要 ８ 到达 高峰 ， 图 ２ ， ７ｃ ｈ 见 。
丹 醌 作 用 的 细胞 经 裂 解 ， 蛋 白（ ２ ０ ｇ 与底 物 取 约 ０１） ｘ
２ ｈ
４ ｈ
８ ｈ
１ ２
ｔｈ ６
３％ 避 光 温 育 ４ ， 自 动 酶 标 仪 （ｈｒ ｏ 芬 兰 ） ７ ｈ全 Ｔ ｅｍ ， ４ ５ ｍ读 取 吸 光 度 值 （ ， 算 比值 （ 物 作 用 ０ｎ ） 计 药
塑 主亘垦 查２１年 ２ 盒 ０２ 第２卷第１期 Ｚｅａ ＴＷ （ｏ ２ 。０ ０２ ０ ｈ ｉｇ Ｉ Ｍ Ｖ１ ． １） ｊｎ Ｊ Ｃ ． Ｎ １２ ２
度 为 ＩＩ Ｏ Ｍ。兔 抗人 Ｃ ｓａｅ ８ Ｂｄ Ｂ ａｔ 多克 隆 ＮＢ ｘ ａｐ ｓ一 、 ｉ 和 — ｃ ｎ ｉ ４凋 亡 。 为 了 解 凋 亡 的 分 子 机 制 ， 测 ｃ ｓ 检 ａ—
ｐ ｕ ａ ｉ ｆ ｃ ，ａ ｄ ｅ ｔ — ｅ ｅ ｔ ｒ ｐ ｔｗａ ｏ ｐ ｐ ｏ ｉ ｌ ｍｂ ｇ ｎ ｅ ｆ ｔ ｎ ｄ ａｈ ｒ ｃ ｐ ｏ ａ ｈ ｙ ｆ ａ ｏ ｔｓｓ ｅ ｗｉ ｂ ｎ ｍｕ ｅ ｌ ｅ ａ ｉ ｏｔ ｎ ｖ ｎ ｉ ｔ ｅ ｌ ｍｂ ｇｎ ｉ ｄ ｃ ｄ ｌ ａ ｏ ｔｓｓ ｐ ｏ ｅ ｓ ｏ ｅ ｋ ｍｉ ｅｌ． ｐ ｐ ｏ ｉ ｒ ｃ ｓ ｆ ｌｕ ｅ ａ ｃ ｌ ｓ
组 ） 对 照组 ） ／ Ａ（ 。实 验重 复 ３ 。 次
白花丹素对白色念珠菌和新生隐球菌的抗真菌活性及其作用机制研究
白花丹素对白色念珠菌和新生隐球菌的抗真菌活性及其作用机制研究白花丹素对白色念珠菌和新生隐球菌的抗真菌活性及其作用机制研究引言：念珠菌和隐球菌是人类常见的病原真菌之一，它们广泛分布于自然环境中，并且常寄生在人体的皮肤、口腔和生殖道等部位。
念珠菌感染通常引起皮肤、口腔和阴道等部位的感染，而新生隐球菌则常成为免疫功能低下患者（如艾滋病、器官移植等）致命感染的原因之一。
抗真菌药物的研发和发现对于控制这些病原真菌的传播和感染具有重要意义。
本研究旨在探究白花丹素对白色念珠菌和新生隐球菌的抗真菌活性及作用机制，为寻找新的抗真菌药物提供理论和实验基础。
材料与方法：1.实验材料：白花丹素、白色念珠菌菌株、新生隐球菌菌株。
2.抗真菌活性测定：采用体外抗真菌活性测定法，将白色念珠菌和新生隐球菌孢子接种于含有白花丹素的琼脂平板中，观察菌落的生长情况。
3.效应机制研究：通过观察白花丹素与真菌细胞的相互作用，探究其作用机制。
4.统计分析：采用SPSS软件对实验结果进行统计分析。
结果：1.抗真菌活性测定显示，白花丹素浓度越高，对白色念珠菌和新生隐球菌的抑制作用越强。
当白花丹素浓度达到一定程度时，对菌落生长的抑制达到极大。
2.细胞实验观察发现，白花丹素可以引起真菌菌丝形态的异常变化，导致真菌细胞发育受阻。
3.进一步研究发现，白花丹素对真菌细胞的膜系统具有破坏作用，导致真菌细胞的溶菌酶和胆固醇的合成受阻。
4.通过统计分析，得出白花丹素对白色念珠菌和新生隐球菌的抗真菌作用具有显著差异。
讨论：本研究结果表明，白花丹素具有一定的抗真菌活性，对白色念珠菌和新生隐球菌具有明显的抑制作用。
其作用机制可能与白花丹素对真菌细胞的膜系统破坏有关，导致真菌细胞发育异常。
然而，仍需进一步研究白花丹素对其他病原真菌的抗真菌活性和作用机制。
此外，还需要研究白花丹素在体内的抗真菌活性和毒性，为其临床应用提供可靠的依据。
结论：白花丹素对白色念珠菌和新生隐球菌具有一定的抗真菌活性，其作用机制可能与破坏真菌细胞膜系统有关。
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体（ DR4 和 DR5） 结合而激活凋亡信号转导途径，从 2． 1 Wright 染色观察细胞形态学变化 取不同药 而诱导肿瘤细胞凋亡［1］。白花丹醌是中药白花丹的 物处理组的细胞，甩片固定后滴加瑞氏染液染1 min，
主要活性成分，具有广泛的 药 理 活 性，包 括 抗 菌 消 加等量 pH 6. 4 的磷酸盐缓冲液轻轻晃动玻片，均匀 炎、抗生殖、抗凝等作用［2，3］。研究发现，白花丹醌也 静置 5 min，显微镜下观察形态变化。
具有明显的抗肿瘤作用，能够抑制 K562、Raji、Jur- 2． 2 CCK － 8 比色法检测细胞抑制率 将细胞悬液
kat、NB4 等白血病细胞系以及宫颈癌和肝癌等实体 以 RPMI － 1640 培养液洗涤并调整细胞密度至 5 × 瘤细胞系的生长和增殖［3 － 5］。Kasumi － 1 是培养自 108 cells / L，加入 96 孔培养板中，每孔 200 μL。分别
和医科大学天津血研所王建祥教授馈赠，用含 20% V 和 PI（ 操作按说明书进行） ，避光放置 1 h，流式细
胎牛血清的 RPMI － 1640 培养液在 37 ℃ 、5% CO2 、 胞仪（ FACS Caliber，BD） 检测，Cell Quest 软件进行数
饱和湿度下的孵育箱中培养，取对数生长期的细胞 据分析。Annexin V 阳性且 PI 阴性的细胞为早期凋
威胁患者长期生存的主要 问 题。本 研 究 旨 在 探 讨 续孵育 3 h 后选择 450 nm 波长测定各孔的吸光度（ A）
TRAIL 及其联合白花丹醌体外诱导 Kasumi － 1 细胞 值。以该组复孔的平均值作为该组细胞的 A 值，并计
凋亡的作用，为此类患者的治疗寻找新的治疗方法。 算细胞生存率： 细胞生存率（ % ） = （ 实验 A － 空白 A） /
人 t（ 8； 21） 急性髓系白血病患者的细胞系，为体外研 以不同的药物剂量作为 1 组，每组均设 3 个复孔及 1
究该类型白血病的良好模型。尽管伴 t（ 8； 21） 急性 个对照孔，对照孔加入空白对照组的细胞。药物作用
髓系白血病患者相对预后良好，复发和耐药仍然是 12、24、48、72 h 后，每孔加入 CCK － 8 20 μL，温箱中继
中国病理生理杂志 Chinese Journal of Pathophysiology 2011，27（ 3） ： 481 － 487 ［文章编号］ 1000 － 4718（ 2011） 03 － 0481 － 07
·481·
白花丹醌增强 TRAIL 诱导 Kasumi － 1 细胞凋亡 及其机制*
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（ TNF － related 4 μmol / L 的白花丹醌作用 12 h、24 h） 和空白对照组
apoptosis － inducing ligand，TRAIL） 是 TNF 超家族成 （ 不加任何药物） 。
员之一，是一种Ⅱ型膜蛋白，通过与其特异性死亡受 2 方法
［ABSTRACT］ AIM： To investigate the effect of plumbagin and tumor necrosis factor － related apoptosis － inducing ligand （ TRAIL） on the apoptosis of leukemic Kasumi － 1 cells． METHODS： Kasumi － 1 cells were treated with plumbagin alone，recombinant soluble TRAIL（ rsTRAIL） alone or the combination of plumbagin with rsTRAIL to induce apoptosis． The cell proliferation was analyzed by CCK － 8 assay． Apoptosis was determined by flow cytometry with Annexin Ⅴ /PI double staining and TUNEL staining． The expression of DR4 and DR5 at mRNA level was measured by real － time PCR． The expression of signal transduction proteins，such as DR5，caspase － 3，caspase － 8，caspasep － 9，Bid，Bax and c － FLIP was detected by Western blotting． RESULTS： Both rsTRAIL and plumbagin induced the apoptosis in Kasumi － 1 cells，and combination of plumbagin with rsTRAIL enhanced the apoptosis． The ratios of Annexin V － positive Kasumi － 1 cells were （ 27. 7 ± 2. 9） % ，（ 25. 6 ± 3. 1） % and （ 52. 1 ± 3. 3） % in 100 μg / L rsTRAIL group，2 μmol / L plumbagin group and the combination group，respectively，and the positive rate in combination group was significantly higher than those in other 2 groups． TUNEL assay demonstrated that the number of apoptotic cells in combination group was higher than that in the cells treated with rsTRAIL or plumbagin alone． Plumbagin up － regulated the expression of DR5 at mRNA level in Kasumi － 1 cells，and up － regulation of DR5，activation of caspase － 8 and down － regulation of c － FLIP at protein level were detected in the cells treated with plumbagin alone and the combination of plumbagin with rsTRAIL． CONCLUSION： Plumbagin enhances TRAIL － induced apoptosis in Kasumi － 1 cells by up － regulating DR5，activating caspase － 8 and down － regulating c － FLIP．
DR5 的表达。（ 5） Western blotting 发现白花丹醌单独作用及其联合 rsTRAIL 应用时上调 DR5、激活 caspase － 8 和下
调 c － FLIP 表达。结论： 白花丹醌具有增强 TRAIL 诱导 Kasumi － 1 细胞凋亡的作用，其机制与 DR5 上调、caspase
变化。结果： （ 1） 白花丹醌和 rsTRAIL 单独应用均可抑制 Kasumi － 1 细胞的生长，联合应用可增加对 Kasumi － 1 细
胞的生长抑制率且呈时间和剂量依赖性（ P ＜ 0. 05） 。（ 2） rsTRAIL（ 100 μg / L） 和白花丹醌（ 2 μmol / L） 单用及其联
－ 8 激活和 c － FLIP 下调有关。
［关键词］ Kasumi － 1 细胞； 细胞凋亡； 白花丹醌； 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体； 基因，DR5； 基因，DR4
［中图分类号］ R363
［文献标识码］Βιβλιοθήκη Adoi： 10． 3969 / j． issn． 1000 － 4718． 2011． 03． 012
1 材料
材料和方法
A（ 对照 A － 空白 A） × 100% ，实验重复 5 次。 2． 3 Annexin V / PI 双染色检测细胞凋亡率 不同 药物剂量作用细胞 12 h 后，分别取 1 × 106 个不同用
1． 1 细胞系与主要试剂 Kasumi － 1 细胞由中国协 药组细胞用 PBS 洗涤 2 次，加入 FITC 标记 Annexin
合使用诱导 Kasumi － 1 细胞 Annexin V 阳性细胞百分率分别为（ 27. 7 ± 2. 9） % 、（ 25. 6 ± 3. 1） % 和（ 52. 1 ± 3. 3） % 。
（ 3） TUNEL 法检测发现联合应用组较单用组凋亡细胞显著增多。（ 4） 实时定量 PCR 检测发现白花丹醌可以上调
［KEY WORDS］ Kasumi － 1 cells； Apoptosis； Plumbagin； Tumor necrosis factor － related apoptosis － inducing ligand； Genes，DR5； Genes，DR4
［收稿日期］2010 － 11 － 15
制。方法： 采用 WST － 8 （ CCK － 8） 比色法测定 rsTRAIL、白花丹醌单独和联合应用对 Kasumi － 1 细胞的生长抑制
率； 用流式细胞术、TUNEL 法观察并且检测凋亡率； 实时定量 PCR 检测白花丹醌作用后 DR4 和 DR5 mRNA 水平变
化； Western blotting 法检测单独应用及联合应用后 DR5、caspase － 3、caspase － 8、caspase － 9、Bid、Bax 及 c － FLIP 的