低温贮藏李子细胞壁酶活性变化对果胶降解的影响
果品速冻保藏技术

果品速冻保藏技术一、果品速冻原理果品腐败变质的主要原因是微生物(细菌、酵母和霉菌)的生长繁殖和果品内部酶活动引起的生化变化。
因此抑制微生物及酶的活性是果品保藏的主要手段。
许多试验资料表明,低温可以抑制微生物和酶的活性,一般细菌在-5~-10℃,酵母在-10~-12℃,霉菌在-15~-18℃下生长极为缓慢,故而控制温度在-10℃以下,可以有效抑制微生物的活性。
但对于酶而言,不少酶耐冻性较强,如脂肪氧化酶、催化酶、过氧化酶、果胶酶等在冻结的果品中仍继续活动,只有将温度控制在-18℃以下,酶的活性才受到较大的抑制。
通过快速冷冻在短时间内排除果品的热量,迅速达到-18℃以下,使果品细胞内外形成大小均匀的冰结晶,从而控制微生物和酶的活性,大大降低果品内部的生化反应,较好地保持了果品的质地、结构及风味,达到长期保藏的目的。
二、果品速冻工艺原料→分选→洗涤→去皮去核→切分→加糖→包装→冻结→装箱→冻藏操作要点:1、原料:用于速冻的果品应具备以下几个特性:第一,具有突出的风味和色泽,耐贮性和加工适应性(耐热、抗氧化、抗褐变、机械化操作性能)好;第二,质地坚实,解冻时很少变软、变松、变烂;第三,解冻时果汁流失少。
适于速冻的果品有草莓、桃、樱桃、苹果、梨、葡萄、西瓜、李、杏、黑莓、醋栗、杨莓、荔枝、龙眼等。
但必须选择适于加工的优良品种,在适宜的成熟度采摘。
2、分选:根据标准选择大小均匀、形态完整、新鲜饱满、成熟度适宜的果子,剔除病、虫、伤、烂及生青果和畸形果。
3、洗涤:通过漂洗槽洗去果实表面的泥沙、尘土及污物。
为了除去果皮上附着的农药,可用0.5-1%盐酸浸洗后以水冲净,对质地柔软的果品如草莓、葡萄、西瓜等可用万分之五的高锰酸钾消毒5-10分钟。
4、去皮、去核、切分:有些水果需去皮、去核,如板栗、桃、苹果等。
去皮常用的方法是机械去皮(如苹果、梨等)。
机械去皮是利用旋皮机配合手工将果皮削去,去皮时用力均匀,既削去果皮又尽量少带果肉,去皮后的果实应立即投入1%食盐+0.1%柠檬酸液中护色。
温度和pH对果胶酶活性的影响

一、课题目标简述果胶酶的作用;检测果胶酶的活性;探究温度和pH对果胶酶活性的影响以及果胶酶的最适用量;搜集有关果胶酶应用的资料。
二、课题重点与难点课题重点:温度和pH对果胶酶活性的影响。
课题难点:果胶酶的最适用量。
三、课题背景分析随着生活水平的提高,水果几乎成为人们生活中的必需品,果汁饮料也深受人们的喜爱。
将水果制成果汁,不仅有利于解决水果丰收季节的产、销、运输和保存等多方面的问题,而且提高了水果的附加值,满足了人们不同层次的需要。
课题背景从与社会的联系、与学生生活的联系入手,引入课题研究。
教师在教学过程中,可以以本地某种水果的生产、贮存、加工和运输为素材,让学生做一个简单的估算,从而认识到果汁加工的经济效益。
例如,可以让学生计算生产一升苹果汁大约需要多少斤苹果,苹果与苹果汁的价格相差多少;等等。
此外,教师还可以联系学生已有的关于酶的知识,引导学生认识果胶酶的特性及其作用。
四、基础知识分析与教学建议知识要点:1.果胶酶的作用;2.酶的活性的定义;3.影响酶活性的因素;4.果胶酶的用量。
教学建议:关于果胶酶作用的教学,教师可以先展示图4-1,介绍植物细胞壁的成分和细胞与细胞之间的胞间层成分,说明这些成分对果汁制作的影响,从而引出果胶酶在果汁生产过程中的作用。
图4-1 植物细胞壁及细胞之间胞间层的成分五、实验安排及注意事项本课题的研究建立在必修模块“探究影响酶活性的条件”的基础之上,与必修模块的探究的不同之处主要体现在两个方面:一是酶的活性不是通过定性分析而是通过定量分析来进行探究的;二是本课题并不仅仅满足于探究温度和pH对酶活性的影响,还探究了果胶酶的最适用量,对生产实践具有指导意义。
本课题可用3~4课时。
其中,探究温度对果胶酶活性的影响的实验可以参考下面的教学思路进行。
在实际的操作过程中,还需要注意下列事项。
1.与其他工业用酶基本相同,果胶酶的适宜温度范围也比较宽泛,因此,可以选用10 ℃作为温度梯度,设置的具体温度为10 ℃、20 ℃、30 ℃、40 ℃、50 ℃和60 ℃等,也可以尝试以5 ℃作为温度梯度。
在1℃下贮藏结合1-MCP处理能缓解涩柿冷害

2019年第36卷第09期科技动态•试验I伞国果就岛息树,以研究对花芽形成的影响。
结果表明,在12~21°C范围内,随着温度升高,枝条生长增加,但在夏末(8月),无论温度条件如何,枝条都会停止生长。
温度的显著下降总是会导致生长立即停止。
在田间条件下,生长停止和花芽分化开始于8月1日左右。
与21C相比,低温(12~15C)显著提高了两个品种的开花,这可能是因为低温抑制夏季的花芽形成,但刺激随后的花芽分化过程。
这些结果与之前的回归分析结果一致,表明挪威西部峡湾地区田间甜樱桃产量与上一年8—9月的温度之间存在密切的正相关关系,与上一年7月的温度存在负相关关系。
此外,塑料大棚防雨栽培中温度控制不好对第二年的开花和产量产生负面影响。
(周洲/摘译)徐香猕猴桃茎段快繁培养基需要不同浓度激素配比据《落叶果树)2019年第4期《徐香猕猴桃茎段快繁技术研究》(作者王建萍等)报道,为了研究不同浓度激素配比对徐香猕猴桃茎段培养的影响,取1年生健壮枝条的茎段做外植体,接种到不同配方的诱导培养基上,生长50天左右,转移到增殖培养基上,待苗增殖到一定数量后,转接到生根培养基上生根后炼苗,再移栽至不同基质中。
结果表明,最佳初代培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+ZT0.5mg/L+NAA0.05mg/L,成活率达90%;最佳增殖培养基为MS+6-BA0.5mg/ L+IAA0.2mg/L+GA30.1mg/L,第5代增殖系数达6.8;生根率最高的培养基为1/2MS+IBA 0.1mg/L+NAA0.1mg/L,培养30天左右,生根率达100%,平均每株生根5.8条;最佳移栽基质是蛭石+草炭土,成活率达90%。
(王世明/摘录)富平尖柿最适采收期据《果树学报)2019年第8期《采收期对富平尖柿生理特性的影响》(作者魏园园等)报道,为了探索采收期对柿的生理代谢影响,寻找其最佳采收期,提高果品商品品质,以富平尖柿为试材,采用对比试验法,于10月13日开始,每间隔5日,采收一次柿果,直至11月3日,共采收5个批次,调查了不同采收期采收的柿果的色泽、单果质量、硬度、水分、可溶性固形物含量、呼吸强度、总单宁、可溶性单宁、聚合单宁、原果胶、可溶性果胶、乙醇、乙醛含量及果胶酶、乙醇脱氢酶、多酚氧化酶(PPO)的活性变化,分析了不同采收期对柿的理化品质指标和生理特性影响。
延缓水果变质的化学妙招

延缓水果变质的化学妙招水果是我们日常饮食中不可或缺的一部分,它们富含维生素、矿物质和纤维素等营养物质,对于保持身体健康起着重要的作用。
然而,由于水果的新鲜度较低,容易变质,导致我们无法充分享用它们的营养价值。
为了延缓水果变质的过程,化学妙招成为了一种可行的方法。
本文将介绍几种常见的化学妙招,帮助我们延缓水果变质,保持水果的新鲜度和营养价值。
一、抑制酶活性的方法水果变质的主要原因之一是酶的活性。
酶是一种催化剂,能够加速水果中的化学反应,导致水果的褐变和变质。
为了延缓水果的变质过程,我们可以采取抑制酶活性的方法。
1. 温度控制:酶的活性受温度的影响较大,一般情况下,酶的活性在低温下较低,因此将水果存放在低温环境中,如冰箱中,可以有效地抑制酶的活性,延缓水果的变质过程。
2. 酸碱调节:酸碱度对酶的活性也有一定的影响。
一些水果在酸性环境下,酶的活性较低,因此可以通过在水果表面喷洒柠檬汁等酸性物质,调节水果的酸碱度,抑制酶的活性,延缓水果的变质。
二、抑制微生物生长的方法水果变质的另一个主要原因是微生物的生长。
微生物是水果表面的常见污染源,它们会分解水果中的营养物质,导致水果变质。
为了延缓水果的变质过程,我们可以采取抑制微生物生长的方法。
1. 清洗消毒:在食用水果之前,我们应该将水果进行充分的清洗和消毒。
清洗可以去除水果表面的污垢和微生物,消毒可以杀灭水果表面的细菌和病毒,减少水果变质的可能性。
2. 抗菌剂处理:一些抗菌剂可以有效地抑制微生物的生长,延缓水果的变质过程。
例如,将水果浸泡在含有抗菌剂的溶液中,可以杀灭水果表面的细菌和病毒,保持水果的新鲜度。
三、包装保鲜的方法包装是延缓水果变质的常见方法之一。
适当的包装可以减少水果与外界环境的接触,降低水果的呼吸速率,延缓水果的变质过程。
1. 真空包装:将水果放入真空袋中,抽出袋内的空气,可以减少水果与氧气的接触,降低水果的呼吸速率,延缓水果的变质。
2. 气调包装:在包装袋中注入适量的气体,如二氧化碳和氮气,可以改变水果的气氛组成,减缓水果的呼吸速率,延缓水果的变质。
1-mcp处理对“巫山脆李”低温贮藏期果实品质及细胞壁成分的影响

ZHAO Qian,FANG Bo* ,NIU Ying (Chongqing Academy of Agriculture Sciences, Chongqing 401329, China)
Abstract: [ Objective] The study aimed to preliminarily explore the softening mechanism and quality changes of fruits during the cold stor
可溶性果胶含量的上升,从而推迟果实软化。【结论J1-MCP处理对“巫山脆李”在低温冷藏条件下有较好的保鲜效果,具有商业
应用价值。
关键词:1-甲基环丙烯(1-MCP);巫山脆李;果实品质;细胞壁成分
中图分类号:S379
文献标识码:A
Effects of 1 -MCP Treatment on Fruit Quality and Cell Wall Components of 4 Wushan' Plum Fruits During Cold Storage
收稿日期:2019 - 07 - 02 基金项目:重庆市社会事业与民生保障科技创新专项重点研发 项目"脆李品种筛选与采后冷链技术研发应用” (cstc2017shmszdyfX0014));重庆市农业科学院青年创新团队项目"特色果树 种质创新与釆后技术研究” (NKY-2019QC08) 作者简介:赵 倩(1991-),女,重庆合川人,硕士研究生,主要 研究方向为果树育种、栽培及采后生理,E-mail :1156842971 @ qq. com; *为通讯作者:方 波,E-mail: fb0211 @ hotmail. como
果实变软的原理

果实变软的原理果实变软的原理是由果实内部细胞的结构变化和生物学过程共同作用的结果。
当果实成熟后,内部细胞开始经历一系列的生理和生物化学变化,导致果实变得柔软。
首先,果实成熟过程中的一种重要变化是果实细胞的脱水。
成熟果实的细胞膨大,内部水分逐渐减少。
这是因为果实在成熟期间经历了呼吸作用,通过消耗氧气和释放二氧化碳,使果实内部产生热量,导致水分蒸发。
脱水过程使得果实内部的细胞间隙增大,并降低了果实的硬度。
其次,果实成熟会引发细胞壁的降解。
细胞壁是由纤维素、半纤维素、木质素等多种复杂的多糖和蛋白质组成的。
当果实成熟后,一些酵素开始被激活并分解细胞壁的多糖和蛋白质,导致细胞壁结构的破坏和变薄。
这使得果实表面的细胞组织松散,增加了果实的柔软度。
此外,果实成熟过程中还会发生果胶的降解。
果胶是存在于果实细胞间隙中的一种多糖类物质,具有黏性和胶状状态。
在果实成熟过程中,果胶酶这种酶类开始分解果胶分子,导致果胶结构的破坏。
果胶分子的降解使果实内部的细胞间隙增大,果实变得更加松软。
最后,果实成熟还涉及平衡激素的作用。
植物体内存在着多种激素,其中乙烯是果实成熟的关键激素之一。
当果实发育到一定阶段时,植物体内的乙烯水平会显著升高,促使果实变软。
乙烯可以通过促进果胶酶和细胞壁酶的产生来加速果实的软化。
此外,其他激素如激动素和赤霉素也参与了果实成熟和软化的过程。
综上所述,果实变软是由果实内部细胞的脱水、细胞壁和果胶的降解以及激素的相互作用所致。
这些生物学过程共同导致果实变得柔软。
了解果实变软的原理对于果实的储存、保鲜和加工具有重要意义。
不同模拟流通温度对桃果实硬度和糖酸品质的影响

不同模拟流通温度对桃果实硬度和糖酸品质的影响刘慧,吕真真,杨文博,张春岭,刘杰超,焦中高*(中国农业科学院郑州果树研究所,河南郑州 450009)摘 要:为了研究常温、冷链、断链3 种流通方式对桃果实品质的影响,在模拟3 种流通方式的温度环境下对桃果实进行贮藏,分析模拟流通过程中的桃果肉硬度、细胞壁果胶和糖酸含量及其组成的变化情况。
结果表明,桃果实采后的贮运品质受流通温度的影响显著。
模拟常温环境中流通的桃果实在4 d内即失去商品价值;恒定低温的流通条件(模拟冷链流通)可以保证桃果实在贮运期和货架期的良好品质;而模拟断链流通组的桃果实由于在贮藏过程中经历了包装、出入库等环节的温度升高,在进入货架期后果实品质快速下降,货架期第2天的果肉硬度(2.14 g/cm2)、蔗糖含量(46.48 mg/g)和苹果酸含量(3.13 mg/g)显著低于模拟冷链流通组(P<0.05)。
桃果实采后冷链流通过程应尽量避免贮运环节断链造成的温度变化,研究结果可为果蔬冷链流通系统的完善提供参考。
关键词:桃果实;模拟流通;温度;硬度;糖酸Effect of Simulated Circulation Modes at Different Temperatures on Firmness, Sugar and Acid Composition of Peach Fruit LIU Hui, LÜ Zhenzhen, YANG Wenbo, ZHANG Chunling, LIU Jiechao, JIAO Zhonggao*(Zhengzhou Fruit Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou 450009, China) Abstract: In order to study the effects of three circulation modes of room temperature, cold chain and broken-off cold chain on the quality of peach fruit, the fruit were stored under temperature conditions simulating each circulation mode. Changes in flesh firmness, the contents of cell wall pectin, soluble sugars and titratable acids, and sugar and organic acid composition were analyzed during the simulated circulation process. The results showed that the fruit quality was significantly affected by the circulation temperature. The commodity value was lost within four days in the simulated room temperature environment. The constant low temperature condition (simulated cold chain circulation) could well maintain the fruit quality during storage and shelf life. However, the quality of peach fruit in the simulated broken-off chain circulation condition rapidly decreased after entering the shelf life period due to the increase in temperature at various stages such as packaging and warehouse-in/warehouse-out during storage. The flesh firmness (2.14 g/cm2), sucrose content (46.48 mg/g) and malic acid content (3.13 mg/g) were significantly lower than those in the simulated cold chain circulation group on the 2nd day of shelf life (P < 0.05). The fluctuation of circulation temperature caused by broken-off cold chain during the transportation and storage of peaches should be avoided as much as possible. These results will be helpful for the improvement of the cold chain circulation systems for vegetables and fruits.Keywords: peach fruit; simulated circulation modes; temperature; firmness; sugars and acidsDOI:10.7506/spkx1002-6630-20200512-138中图分类号:TS255.36 文献标志码:A 文章编号:1002-6630(2021)09-0199-07引文格式:刘慧, 吕真真, 杨文博, 等. 不同模拟流通温度对桃果实硬度和糖酸品质的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(9): 199-205.DOI:10.7506/spkx1002-6630-20200512-138. 收稿日期:2020-05-12基金项目:河南省基础与前沿技术研究计划项目(122300410125);中国农业科学院科技创新工程专项(CAAS-ASTIP-2019-ZFRI);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(1610192017723)第一作者简介:刘慧(1984—)(ORCID: 0000-0001-6106-2270),女,副研究员,硕士,研究方向为果品贮藏与加工。
果胶酶澄清苹果汁的误差分析

果胶酶澄清苹果汁的误差分析
果胶酶是一种能催化果胶分解的酶,常用于果汁加工过程中清澈苹果汁中的浑浊物质。
误差分析是对使用果胶酶进行苹果汁澄清过程中可能存在的误差进行分析和评估。
常见的误差分析包括以下几个方面:
1. 酶活性误差:果胶酶的活性受温度、pH值、酶浓度等因素的影响,不同批次的果胶酶活性会有差异,因此在使用过程中需要进行活性测定并进行修正。
2. 反应温度误差:果胶酶的活性受温度影响较大,过高或过低的温度都会影响酶的活性和效果。
因此,在使用过程中需要控制好反应温度,提高澄清效果。
3. 反应时间误差:果胶酶催化果胶分解需要一定的反应时间,但过长或过短的反应时间都会影响澄清效果。
因此,在使用过程中需要根据实际情况进行反应时间的优化。
4. 原料的差异:不同批次的苹果品种、成熟度、鲜度等差异会影响果胶的含量和结构,从而影响果胶酶的催化效果。
因此,在使用果胶酶进行澄清前,需要对原料进行充分的质量检查和筛选。
综上所述,果胶酶在澄清苹果汁过程中可能存在的误差主要包括酶活性误差、反应温度误差、反应时间误差和原料差异等因素。
为了获得更好的澄清效果,需要合理选择酶的活性、控制好反应温度和时间,并对原料进行充分质量检查和筛选。
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低温贮藏李子细胞壁酶活性变化对果胶降解的影响梁洁玉,朱丹实,赵丽红,葛永红,曹雪慧,冯叙桥,励建荣(渤海大学食品科学研究院,渤海大学化学化工与食品安全学院,辽宁省食品安全重点实验室,辽宁锦州 121013)摘要:细胞壁酶活性变化对果胶降解及果实软化影响较大。
本文以“半边红”李子为原料,研究0 ℃和10 ℃低温贮藏时果胶物质和主要细胞壁多糖降解酶(PE, exo-PG, endo-PG, EG)活性变化,通过相关性研究阐明细胞壁酶活性对果胶降解的影响。
结果表明,低温贮藏时,四种细胞壁降解酶活性变化各不相同,较低的温度能够在一定程度上抑制各酶活性。
0℃和10℃温度贮藏时,PE活性变化在5d之后显著差异,exo-PG活性变化在整个贮藏期差异显著。
0℃和10℃贮藏李子endo-PG和EG活性在前10 d贮藏过程中变化差异均不明显。
endo-PG和EG活性变化趋势接近,且endo-PG活性峰值出现比EG晚。
相关性分析表明,原果胶和SSP与WSP含量变化显著负相关;PE活性与AS P和HSP含量变化显著正相关,PG对原果胶和SSP向WSP转化的过程中起到较为重要的作用。
EG对李子果胶降解的影响作用不大。
关键词:李子;果胶;细胞壁酶;降解;软化文章篇号:1673-9078(2015)5-212-218 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.5.034 Effect of Changes in Cell Wall Enzyme Activity on Degradation of Pectinduring Low-temperature Storage of PlumLIANG Jie-yu, ZHU Dan-shi, ZHAO Li-hong, GE Y ong-hong, CAO Xue-hui, FENG Xu-q iao, LI Jian-rong (Research Institute of Food Sci ence, Bohai Universi ty; College of Chemi stry, Chemi cal Engineering and Food Safety, Bohai University; Food Safety Key Lab of Liaoning Province, Jinzhou 121013, China) Abstract: Changes in cell wall enzyme activity are known to significantly affect pectin degradation and fruit softening. Changes in the pectin content and activity of cell wall polysaccharide-degrading enzymes (PE, exo-PG, endo-PG, and EG) during low-temperature storage (0 ℃and 10 ℃) of “b anbianhong” plum were investigated in this study. Correlation analysis was carried out to explore the effect of cell wall enzyme activity on pectin degradation. The results showed that the changes in the activities of four cell wall enzymes were different during low-temperature storage, indicating that lower temperatures inhibited enzyme activity to a certain extent. PE activity showed significant difference after 5 days storage under 0 ℃and 10 ℃, while significant differences were found in exo-PG activity during the entire storage period. When the plum was stored at 0 ℃and 10 ℃, activities of endo-PG and EG did not show significant difference during the first 10 days and the trend of changes in endo-PG activity was similar to that of EG, however, the peak value of endo-PG activity appeared later than that of EG. The results of correlation analysis between pectin content and cell wall enzyme activity showed that protopectin and SSP cont ent showed a significant negative correlation with WS P content. The activity of PE exhibited a significant positive negative correlation with ASP and HS P content. Thus, PG played an important role in the conversion process from protopectin and SSP to WS P, while EG played a minor role on the degradation of pectin in plums.Key words: plum, pectin, cell wall enzyme, degradation, softening软化是果实成熟和贮藏期间的主要变化之一,虽然可提高果实的风味和口感,但是会降低其抗病性,缩短果实的贮藏期,影响商品价值。
细胞壁组分的鉴收稿日期:2014-07-06基金项目:辽宁省食品安全重点实验室开放课题(LNSAKF2011026);辽宁省食品质量与安全优秀教学团队项目(SPCX12)通讯作者:朱丹实(1978-),女,讲师,研究方向为农水产品贮藏加工;冯叙桥(1961-),男,教授,博士,研究方向为果蔬贮藏保鲜技术与质量安全定及表达蛋白的特性和活性是分析果实软化过程的重要方法[1]。
果胶溶解性的变化是果实软化显著特征之一,在相关酶的作用下,使细胞壁发生降解。
多项研究表明,果实软化受纤维素和半纤维素的分解代谢[2~3]影响并不大。
对果实软化过程的果胶溶解性变化的研究表明[4~6],果实成熟软化过程中原果胶和碱溶性果胶不断降解,含量下降,而水溶性果胶含量不断升高,且分子量不断减小。
对冬枣软化过程中研究发现[7],果胶酯酶(PE)与冬枣快速衰老的启动有关,而多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性在低温下受到抑制。
对杏果实采后研究表明[8],果胶酶活性升高促进了果胶的降解,水溶性果胶和离子型果胶含量的升高是杏果实软化的主要原因。
苹果成熟过程中果胶降解的相关酶的活性与乙烯的产生密切相关,与果胶自身的结构的变化关系不大[9]。
因此有必要针对不同水果原料,来研究果胶降解过程及其影响因素。
此外,细胞壁酶的活性及果胶的降解除了受到果实自身酶系统作用有关,还会受到外界环境条件的影响。
李子(Prunus salicina Lindl),是蔷薇科植物李树的果实。
“半边红李子”因果实向阳面呈紫红色,背面呈绿色而得名,是辽宁地区特色的品质之一。
“半边红李子”成熟于6~9月,采后品质劣变迅速,不耐贮藏。
本文通过研究两种低温贮藏条件下“半边红”李子果胶物质及主要细胞壁酶活性的变化,探讨李子在贮藏过程中软化过程及主要影响因素,为明晰李子软化机制提供理论借鉴。
1 材料与方法1.1 材料与仪器设备半边红李子(Prunus salicina Lindl. banbianhong),锦州北镇果园采摘后运回实验进行预冷。
挑选个体大小一致,无机械损伤、病虫害等,成熟度均为八成熟(约80%转红)的果实进行实验。
TA-XT-PLUS(SMS)质构仪,超技仪器有限公司;Sorall Bbiofuge Stators (THERMO)冷冻高速离心机,THERMO SCIENTIFIC;SHA-2冷冻水浴恒温振荡,金坛市瑞华仪器有限公司;UV-255紫外-可见分光光度计,岛津仪器(苏州)有限公司;PL303电子天平,梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;FE20实验室PH 计,梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;DK-98-IIH 电热恒温水浴锅,天津市泰斯特仪器有限公司;TDL-5-A低速大容量离心机,上海安亭科学仪器厂;MIR254低温恒温培养箱SANYO;乌氏粘度计。
1.2 实验方法1.2.1 样品处理将预冷挑选进行实验的李子分别存放在0 ℃和10 ℃的低温恒温培养箱中,每4 d取果皮和离果核2 mm之间的果肉组织,经过-80 ℃冷冻后测定细胞壁酶活性和不同溶解性果胶含量,以分析李子果实软化的1.2.2 果实硬度的测定每个温度处理随机取5个李子样品,用TA-XT- PLUS(SMS)质构仪进行穿刺实验分析李子在贮藏过程中硬度变化。
测定参数设置如下:探头P/2,测试速度1 mm/s,测试距离5 mm。
1.2.3 果胶酯酶(PE)、多聚半乳糖醛酸酶(PG)和葡聚糖苷酶(EG)活性测定参考Zhou等[10]的实验方法,略有改动。
取60 g 冷冻的果肉组织,加入60 mL冷的12%的聚乙二醇和0.2%的NaHSO4溶液在冰浴中研磨呈匀浆。
匀浆在13000×g,4 ℃条件下离心10 min,然后用冷的0.2%的NaHSO4溶液洗涤沉淀。
将沉淀按质量平均分成3份,来提取PE,exo-PG,endo-PG和EG。
对于PE,将滤渣悬浮到20 mL 7.5%(m/V)NaCl溶液中,用0.75%的EDTA溶液调节pH为6.5,在4 ℃下放置10 min,离心后收集上清液作为酶提取液。
对于exo-PG 和endo-PG,将沉淀在20 mL冷的含有0.5 mol/L NaCl 的50 mmol/L的醋酸钠缓冲溶液(pH 5)在4℃下振荡1 h,离心后将上清液用50 mmol/L的醋酸钠缓冲液(pH 5)按1:1的比例稀释,作为测定exo-PG和endo-PG活性的酶提取液。