大学课件 遗传病分析4
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2024版遗传学课件全部完整版
遗传学课件全部完整版目录•遗传学基本概念与原理•染色体与遗传信息传递•遗传变异与进化论基础•单基因遗传病分析与诊断方法•多因子复杂性状和数量性状遗传学基础•现代遗传学技术应用与发展趋势CONTENTSCHAPTER01遗传学基本概念与原理遗传学定义及研究领域遗传学定义研究生物遗传信息传递与表达规律的科学。
研究领域包括基因的结构、功能、表达调控，以及生物遗传变异、遗传重组、遗传进化等方面。
遗传物质基础：DNA与RNADNA脱氧核糖核酸，生物体主要的遗传物质，存在于细胞核中。
RNA核糖核酸，参与蛋白质合成过程，存在于细胞质中。
基因基因型表现型生物个体所携带的全部基因组合。
生物个体在特定环境条件下所表现出来的性状特征。
0302 01基因、基因型和表现型控制生物性状的基本遗传单位，位于DNA分子上。
分离定律和自由组合定律，揭示了生物遗传的基本规律。
孟德尔遗传规律揭示了基因在染色体上的线性排列及连锁遗传现象。
摩尔根染色体遗传理论揭示了DNA 作为遗传物质的结构基础，推动了分子遗传学的发展。
DNA 双螺旋结构发现及遗传学发展揭示了人类基因组的组成和功能，为医学、生物科学等领域提供了重要的基础数据。
人类基因组计划及意义遗传规律及其发现历程CHAPTER02染色体与遗传信息传递染色体结构与功能染色体的化学组成主要由DNA和蛋白质组成，其中DNA是遗传信息的携带者，蛋白质则对DNA起到保护和稳定的作用。
染色体的形态结构染色体在细胞分裂过程中呈现不同的形态，包括丝状、棒状等。
其结构可分为着丝粒、臂、端粒等部分。
染色体的功能染色体是遗传信息的载体，通过复制、转录和翻译等过程，将遗传信息传递给下一代。
同时，染色体也参与细胞的分裂和生长过程。
DNA复制过程及特点DNA复制的过程DNA复制是一个半保留复制的过程，包括解旋、合成子链、连接等步骤。
在复制过程中，DNA双链解开成单链，以每条单链为模板合成新的子链。
DNA复制的特点DNA复制具有高度的准确性和稳定性，能够确保遗传信息的正确传递。
遗传病的调查与分析幻灯片
遗传病的调查与分析幻灯 片
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几种遗传方式的比较
遗传方式 隔代、连 续遗传
常染色体 隔代遗传 隐性遗传
常染色体 连续遗传 显性遗传
X染色体隐
选择生女孩
D 并指症
常染色体显 Tt×tt 性遗传病
产前基因诊断
2021-12
苍南中学
一、什么叫遗传病？ (由遗传物质改变引起的人类疾病)
1.单基因遗传病
包 括
2.多基因遗传病
3.染色体异常遗传病
2021-12
苍南中学
2.理由是：由图中I1和I2生出II5，可知该病为显 性遗传病；若基因位于X染色体上，则I1的基因 型为XAY,其生出的女儿一定都是（XAX—）患病的，
与题义不符合。故为常染色体显性遗传病
2021-12
苍南中学
下图为某家系遗传病的遗传图解， 该病可能是 A B D
A.常染色体显性遗传病 B.常染色体隐性遗传病 C.X染色体隐性遗传病 D.细胞质遗传病
双亲性状 父母
正常×正常 正常×患病 患病×正常 患病×患病 合计
家庭 正常 正常 患病 患病 数目 男孩 女孩 男孩 女孩
195 90 80 10 15
80 25 30 15 10
60 26 24 6
4
335 0 0 160 175
670 141 134 191 204
2021-12
苍南中学
该病的遗传方式？说出简要推理过程： 1.常染色体显性遗传病。
评分说明：写出表格标题（1分） 写出父母性状四种可能的组合（1分） 写出子女的性状类型（1分） (3)被调查的家庭数目较少（1分）
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几种遗传方式的比较
遗传方式 隔代、连 续遗传
常染色体 隔代遗传 隐性遗传
常染色体 连续遗传 显性遗传
X染色体隐
选择生女孩
D 并指症
常染色体显 Tt×tt 性遗传病
产前基因诊断
2021-12
苍南中学
一、什么叫遗传病？ (由遗传物质改变引起的人类疾病)
1.单基因遗传病
包 括
2.多基因遗传病
3.染色体异常遗传病
2021-12
苍南中学
2.理由是：由图中I1和I2生出II5，可知该病为显 性遗传病；若基因位于X染色体上，则I1的基因 型为XAY,其生出的女儿一定都是（XAX—）患病的，
与题义不符合。故为常染色体显性遗传病
2021-12
苍南中学
下图为某家系遗传病的遗传图解， 该病可能是 A B D
A.常染色体显性遗传病 B.常染色体隐性遗传病 C.X染色体隐性遗传病 D.细胞质遗传病
双亲性状 父母
正常×正常 正常×患病 患病×正常 患病×患病 合计
家庭 正常 正常 患病 患病 数目 男孩 女孩 男孩 女孩
195 90 80 10 15
80 25 30 15 10
60 26 24 6
4
335 0 0 160 175
670 141 134 191 204
2021-12
苍南中学
该病的遗传方式？说出简要推理过程： 1.常染色体显性遗传病。
评分说明：写出表格标题（1分） 写出父母性状四种可能的组合（1分） 写出子女的性状类型（1分） (3)被调查的家庭数目较少（1分）
多基因遗传病(现代遗传学与疾病)ppt课件
PKU患者、携带者和正常人 PAH的活性
AA
数量性状(quantitative trait)：
多基因遗传的性状或疾病的变异在一个群体 中的分布是连续的，不同个体之间的差异只 有数量上的差异，没有质的不同。
8 0 7 0 6 0 5 0130 4180
变异数
140 150 190 200
160
170
76
80
精神分裂症 冠心病
0.5~1.0 2.5
10~15 7 2~5 4 4
男性先证者2 女性先证者10
80 65
糖尿病（青少年型） 0.2 (成年型） 2～3 脊柱裂 无脑儿
先天性幽门狭窄
75 35
0.3 0.5
0.3
60 60
75
三、多基因病例
• 1.唇裂 • 2.精神分裂症 • 3.神经管缺陷
神经管缺陷
• 因胚胎发育早期,神经管闭合缺陷而产生。由于神经管 的关闭过程自颈下段开始，分别向头、尾两端同时进 行，因此关闭较晚的部位如枕部及腰骶部发生畸形的 机会较多。神经管缺陷包括： • （1）颅骨裂产生的脑膜的膨出，无脑畸形，露脑畸形 等。 • （2）脊柱裂产生的脊膜膨出，脊髓脊膜膨出，隐性脊 柱裂等。
第四章 多基因遗传病
(disease of polygenic inheritance)
一些遗传性状或遗传病的遗传基础不是一个主基因， 而是多对基因。每对基因彼此之间没有显性与隐性之 分，而是共显性。这些基因对遗传性状形成的作用是 微小的，所以也称为微效基因 (minor gene)。但是 ，多对基因累加起来，就可以形成一个明显的表型效 应，即累积效应。上述遗传性状的形成，除受微效基 因的影响外，也受环境因素的作用。这种性状的遗传 方式称为多基因遗传 。由这种遗传方式传递的疾病 称为多基因遗传病。 近几年的研究表明，在多基因病的遗传基础中， 除微 效基因外，还有一些主基因的参与，而且与环境因素相 互作用，所以这类疾病又称为复杂疾病。
遗传病的诊断治疗和预防分析(共83张PPT)
第32页，共83页。
PCR的步骤
①DNA变性(95℃)
②退火（37-55℃,引物与互补单链结合）
③延伸（72 ℃Taq酶催化合成DNA ） ①→③循环25-30次，理论上可使目的基因
扩增几十万倍乃至上百万倍。
第33页，共83页。
5.基因诊断的应用 在感染疾病中的应用 （1）病毒——乙肝病毒（HBV）， 检测乙肝病毒DNA分子。
第42页，共83页。
七、皮纹分析
远端 近端
大鱼际
第43页，共83页。
50% 21三
体患者； 80%猫叫 综合症患 者为通贯手
第44页，共83页。
八、产前诊断
产前诊断（宫内诊断）：胎儿出生前，对其在子宫内发
育是否正常进行的诊断。
1.产前诊断的适应症
第45页，共83页。
摩尔根和表妹玛丽
生育三个子女，两个女儿莫名 其妙的痴呆，儿子智障。
第60页，共83页。
第61页，共83页。
第62页，共83页。
二、遗传病的群体普查
1.遗传病的普查
对某一地区（或人群）进行遗传病的普查，以便掌握人群遗传病的种类、分布、 遗传方式及发病率，了解各种遗传病对人群的危害程度，为制定预防措施提供科学 依据。
2.普查人群 （1）样本大小适宜：1‰—1%，至少10万人。 （2）代表性要强：不同年龄、不同职业、不同生活环境。
第13页，共83页。
三、系谱分析
（三）系谱分析的步骤 1.绘制系谱，通过分析确定是否属于遗传病。 2.若是遗传病，确定遗传类型：单基因病？多基因病？染色体病？ 3.若单基因病，确定遗传方式；确定家系各成员基因型。 4.估计可疑携带者及子女发病风险。
5.对家系有风险成员提出合理建议和意见。
PCR的步骤
①DNA变性(95℃)
②退火（37-55℃,引物与互补单链结合）
③延伸（72 ℃Taq酶催化合成DNA ） ①→③循环25-30次，理论上可使目的基因
扩增几十万倍乃至上百万倍。
第33页，共83页。
5.基因诊断的应用 在感染疾病中的应用 （1）病毒——乙肝病毒（HBV）， 检测乙肝病毒DNA分子。
第42页，共83页。
七、皮纹分析
远端 近端
大鱼际
第43页，共83页。
50% 21三
体患者； 80%猫叫 综合症患 者为通贯手
第44页，共83页。
八、产前诊断
产前诊断（宫内诊断）：胎儿出生前，对其在子宫内发
育是否正常进行的诊断。
1.产前诊断的适应症
第45页，共83页。
摩尔根和表妹玛丽
生育三个子女，两个女儿莫名 其妙的痴呆，儿子智障。
第60页，共83页。
第61页，共83页。
第62页，共83页。
二、遗传病的群体普查
1.遗传病的普查
对某一地区（或人群）进行遗传病的普查，以便掌握人群遗传病的种类、分布、 遗传方式及发病率，了解各种遗传病对人群的危害程度，为制定预防措施提供科学 依据。
2.普查人群 （1）样本大小适宜：1‰—1%，至少10万人。 （2）代表性要强：不同年龄、不同职业、不同生活环境。
第13页，共83页。
三、系谱分析
（三）系谱分析的步骤 1.绘制系谱，通过分析确定是否属于遗传病。 2.若是遗传病，确定遗传类型：单基因病？多基因病？染色体病？ 3.若单基因病，确定遗传方式；确定家系各成员基因型。 4.估计可疑携带者及子女发病风险。
5.对家系有风险成员提出合理建议和意见。
《医学遗传学课件：遗传病诊断》
医学遗传学课件：遗传病 诊断
本课件将详细介绍遗传病的诊断方法和相关概念，帮助您了解遗传病的种类、 传播方式以及诊断和治疗的最新进展。
什么是遗传病？
遗传病是由基因突变引起的疾病，可以在家族中遗传传递。它们可以影响个 体的生长、发育以及特定器官或系统的功能。
遗传病的种类
单基因遗传病
由单个基因突变引起的疾病， 如囊性纤维化和血友病。
遗传病的诊断方式
1 临床表型观察
通过观察患者的临床表现来 判断是否可能患有遗传病。
2 家族史调查
了解患者的家族史，寻找可 能存在的遗传病传递模式。
3 实验室检测
使用遗传学分析技术，如基因测序和染色体分析，来确认遗传病的诊 断。
Hale Waihona Puke 遗传病的基因诊断遗传病基因检测
通过对个体的基因进行分析，确定是否携带与特定疾病相关的突变。
遗传病的遗传咨询
遗传咨询师通过分析患者的家族史和遗传测试结果，提供有关遗传病风险和传递方式的专业建议。
多基因遗传病
多个基因突变相互作用导致 的疾病，如高血压和糖尿病。
染色体异常遗传病
染色体结构或数量异常引起 的疾病，如唐氏综合征和性 染色体异常。
遗传病的传播方式
遗传病可通过自身遗传（单基因或多基因遗传）、染色体异常遗传、孟德尔 遗传和环境及非遗传因素引起。
遗传病的发病率
遗传病的发病率因遗传方式、家族史和环境因素而异。一些遗传病较常见， 如先天性心脏病，而其他较罕见，如囊性纤维化。
本课件将详细介绍遗传病的诊断方法和相关概念，帮助您了解遗传病的种类、 传播方式以及诊断和治疗的最新进展。
什么是遗传病？
遗传病是由基因突变引起的疾病，可以在家族中遗传传递。它们可以影响个 体的生长、发育以及特定器官或系统的功能。
遗传病的种类
单基因遗传病
由单个基因突变引起的疾病， 如囊性纤维化和血友病。
遗传病的诊断方式
1 临床表型观察
通过观察患者的临床表现来 判断是否可能患有遗传病。
2 家族史调查
了解患者的家族史，寻找可 能存在的遗传病传递模式。
3 实验室检测
使用遗传学分析技术，如基因测序和染色体分析，来确认遗传病的诊 断。
Hale Waihona Puke 遗传病的基因诊断遗传病基因检测
通过对个体的基因进行分析，确定是否携带与特定疾病相关的突变。
遗传病的遗传咨询
遗传咨询师通过分析患者的家族史和遗传测试结果，提供有关遗传病风险和传递方式的专业建议。
多基因遗传病
多个基因突变相互作用导致 的疾病，如高血压和糖尿病。
染色体异常遗传病
染色体结构或数量异常引起 的疾病，如唐氏综合征和性 染色体异常。
遗传病的传播方式
遗传病可通过自身遗传（单基因或多基因遗传）、染色体异常遗传、孟德尔 遗传和环境及非遗传因素引起。
遗传病的发病率
遗传病的发病率因遗传方式、家族史和环境因素而异。一些遗传病较常见， 如先天性心脏病，而其他较罕见，如囊性纤维化。
医学遗传学遗传性疾病的病例分析过程课件
通过பைடு நூலகம்例分析，我们可以根据患者的病史、遗传学测试和家族调查结果，给 出准确的诊断和个性化的治疗方案，为患者提供更好的医疗服务和生活质量。
3. 进行遗传学测试
通过遗传学测试，如基因检测、染 色体分析，确认疾病的遗传性质。
患者信息收集和分析
详细病史
收集患者的详细病史，包括疾病起始时间、症状描述、治疗记录等。
体格检查
进行全面的体格检查，观察患者是否存在特定的体征或异常。
实验室检查
进行实验室检查，例如血液生化分析、遗传学测试等，以获得更多的诊断线索。
遗传学测试和诊断
基因检测
通过基因检测，可以检测遗 传突变，并确定与疾病相关 的基因变异。
染色体分析
利用染色体分析技术，观察 染色体的结构和数量，发现 染色体异常与疾病之间的关 联。
遗传咨询
提供遗传学测试结果解读和 遗传风险评估，为患者和家 人做出科学决策。
遗传性疾病的家族调查
通过家族调查，我们可以了解患者家族中是否存在其他患有相同疾病或相关 疾病的成员，有助于确定疾病的遗传模式和风险评估。
医学遗传学遗传性疾病的 病例分析过程课件
通过医学遗传学病例分析，我们可以深入研究遗传性疾病的发病机制，从而 为患者提供更好的诊断和治疗方案。
本课件将介绍病例分析的目的和重要性，基本步骤，患者信息收集和分析， 遗传学测试和诊断，遗传性疾病的家族调查，分子遗传学技术，以及病例分 析结果和讨论。
病例分析的目的和重要性
病例分析是研究遗传性疾病的一种重要方法，旨在了解疾病的发生机制、遗 传模式和相关因素，为患者提供精准的诊断和治疗方案。
病例分析的基本步骤
1
2. 建立家族调查
2
探索患者家族中是否存在其他患有
3. 进行遗传学测试
通过遗传学测试，如基因检测、染 色体分析，确认疾病的遗传性质。
患者信息收集和分析
详细病史
收集患者的详细病史，包括疾病起始时间、症状描述、治疗记录等。
体格检查
进行全面的体格检查，观察患者是否存在特定的体征或异常。
实验室检查
进行实验室检查，例如血液生化分析、遗传学测试等，以获得更多的诊断线索。
遗传学测试和诊断
基因检测
通过基因检测，可以检测遗 传突变，并确定与疾病相关 的基因变异。
染色体分析
利用染色体分析技术，观察 染色体的结构和数量，发现 染色体异常与疾病之间的关 联。
遗传咨询
提供遗传学测试结果解读和 遗传风险评估，为患者和家 人做出科学决策。
遗传性疾病的家族调查
通过家族调查，我们可以了解患者家族中是否存在其他患有相同疾病或相关 疾病的成员，有助于确定疾病的遗传模式和风险评估。
医学遗传学遗传性疾病的 病例分析过程课件
通过医学遗传学病例分析，我们可以深入研究遗传性疾病的发病机制，从而 为患者提供更好的诊断和治疗方案。
本课件将介绍病例分析的目的和重要性，基本步骤，患者信息收集和分析， 遗传学测试和诊断，遗传性疾病的家族调查，分子遗传学技术，以及病例分 析结果和讨论。
病例分析的目的和重要性
病例分析是研究遗传性疾病的一种重要方法，旨在了解疾病的发生机制、遗 传模式和相关因素，为患者提供精准的诊断和治疗方案。
病例分析的基本步骤
1
2. 建立家族调查
2
探索患者家族中是否存在其他患有
第四章多基因遗传病
第一节 掌握多基因遗传病特点（讲授） 一、 多基因遗传和单基因遗传区别
单基因遗传： 1、 一对基因起决定作用 2、 一对基因有显隐性称质量性状遗传 3、 群体中变异是不连续，呈三个峰：
4、 主基因为主要决定。 5、 有一定遗传遗传方式。
多基因遗传：
1、 2对以上基因共同作用结果。 2、 各对基因之间均为共显性，每个基因作用微小称 微效基因，有累积效应称数量性状遗传。 3、 群体中变异是连续的呈单峰，正态分布：
4、 变异受遗传因素和环境因素双重影响。 5、 无规律有特点
二、 多基因遗传特点 1、 两个极端变异（纯种）的个体杂交后，子代都是中间 类型，由于受环境因素影响，子代也有一定变异范围。 2、 两个子1（中间类型）个体杂交后，子2代大部分也是中 间类型。由于多对基因的分离和自由组合以及环境因素的影响， 子2代的变异范围比子1代更为广泛，有时会出现接近极端变异的 个体。 3、 在一个随机，杂交的群体中，变异范围很广泛，但是大 多数个体接近于中间类型，极端变异个体很少，在这些变异的产 生中多基因基础和环境因素都有作用。如：皮肤颜色，两对基因 控制。黑色A.B,白色A',B'
群体发病率较低即阈值较高那个性别的个体罹患，则患者亲属 的再显风险较高。例如先天性幽门狭窄，人群中男性发病率高于女 性，男性发病率为0.5%，女性发病率为0.1%。此病男性发病率是女 性的5倍，即男性发病阈值低于女性。男性患者的儿子发病率是5.5 %，女儿的发病率是2.4%。如为女性患者，其儿子的发病率达到 19.4%，女儿的发病率达到7.3%。以上说明了女性患者比男性患者 有更多的致病基因。多基因遗传病是一种数量性状，所以呈现出以 上的特点。它不象单基因遗传病那样相对比较容易认识，所以必须 根据上述特征和数据进行具体分析
专题4 遗传规律与人类遗传病 系统大概念——基因的分离和重组产生多种多样的基因组合
提示：自交后代中耐盐∶不耐盐＝3∶1的植物，其亲本只有一条染色体上导 入了耐盐基因；自交后代中耐盐∶不耐盐＝15∶1的植物，其亲本的两条非同 源染色体上导入了耐盐基因。 3．若基因型为AaBb的个体测交后代出现四种表型，但比例为21∶4∶4∶21，试 解释出现这一结果的可能原因：__________________________________。
4．果蝇翅膀的形状有卷翅和正常翅，由常染色体上的一对等位基因控制。研 究表明卷翅基因具有如下遗传特性：卷翅基因为显性，并且有纯合致死效 应。现有卷翅雄果蝇、正常翅雌果蝇和正常翅雄果蝇，请设计实验证明卷 翅基因的遗传特性。(要求：写出杂交方案并预期实验结果)
提示：让卷翅雄果蝇与正常翅雌果蝇杂交得到F1，再让F1中卷翅雌、雄果 蝇相互交配(或F1中卷翅雌果蝇与亲代卷翅雄果蝇杂交)，F2果蝇出现卷翅∶ 正常翅＝2∶1，则证明卷翅基因为显性，并且有纯合致死效应。
提示：A、a和B、b两对等位基因位于同一对同源染色体上，减数分裂时部分 初级性母细胞发生片段互换，产生四种类型的配子，其比例为21∶4∶4∶21。
4．在自然人群中，男性的红绿色盲患者多于女性，原因是_________________ ________________________________________________________________。 提示：红绿色盲是伴X染色体隐性遗传病，男性只有一条X染色体，只要X染 色体上有红绿色盲基因，就表现为红绿色盲；女性有两条X染色体，两条X染 色体上同时具有红绿色盲基因时，才会患红绿色盲。
(三)两对等位基因相关的遗传现象 1．自由组合正常(以A、a和B、b两对基因为例)
[微点拨] n对等位基因控制的性状遗传
①若自交后代出现(3∶1)n的性状分离比(或其变式)，或测交后代出现 (1∶1)n的性状分离比(或其变式)，则说明这n对等位基因控制的性状遗传遵 循自由组合定律，反之也成立。
4．果蝇翅膀的形状有卷翅和正常翅，由常染色体上的一对等位基因控制。研 究表明卷翅基因具有如下遗传特性：卷翅基因为显性，并且有纯合致死效 应。现有卷翅雄果蝇、正常翅雌果蝇和正常翅雄果蝇，请设计实验证明卷 翅基因的遗传特性。(要求：写出杂交方案并预期实验结果)
提示：让卷翅雄果蝇与正常翅雌果蝇杂交得到F1，再让F1中卷翅雌、雄果 蝇相互交配(或F1中卷翅雌果蝇与亲代卷翅雄果蝇杂交)，F2果蝇出现卷翅∶ 正常翅＝2∶1，则证明卷翅基因为显性，并且有纯合致死效应。
提示：A、a和B、b两对等位基因位于同一对同源染色体上，减数分裂时部分 初级性母细胞发生片段互换，产生四种类型的配子，其比例为21∶4∶4∶21。
4．在自然人群中，男性的红绿色盲患者多于女性，原因是_________________ ________________________________________________________________。 提示：红绿色盲是伴X染色体隐性遗传病，男性只有一条X染色体，只要X染 色体上有红绿色盲基因，就表现为红绿色盲；女性有两条X染色体，两条X染 色体上同时具有红绿色盲基因时，才会患红绿色盲。
(三)两对等位基因相关的遗传现象 1．自由组合正常(以A、a和B、b两对基因为例)
[微点拨] n对等位基因控制的性状遗传
①若自交后代出现(3∶1)n的性状分离比(或其变式)，或测交后代出现 (1∶1)n的性状分离比(或其变式)，则说明这n对等位基因控制的性状遗传遵 循自由组合定律，反之也成立。
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• 如此反复，在同一反应体系中可重复高温变性、低温复 性和DNA合成这一循环，使产物DNA重复合成，并且 在重复过程中，前一循环的产物DNA可作为后一循环的 模板DNA而参与DNA的合成，使产物DNA的量按2n方 式扩增。经过25～35个循环，DNA扩增倍数可达106～ 109。
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• 预变性：94℃5min • 循环： 94℃变性30s
56℃退火30s 30个循环 72℃延伸30s • 末次延伸：72℃ 5min • 4 ℃保存
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注意事项
• 由于PCR技术非常敏感，可使一个DNA分 子得以扩增，装有PCR试剂的微量离心管 打开之前，应先在微量离心机上作瞬时离 心使液体沉积于管底。
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实 验 原 理
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实验目的
本实验以所提出的全血基因组DNA 为模板，以线粒体基因上一段核苷酸为 引物，扩增出924bp的扩增产物。学习并 掌握PCR 反应的基本原理与实验技术。
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器材和试剂
器材 PCR扩增仪，旋涡振荡器，台式离心机， 加样枪及枪头等
4、取沉淀， 加0.8ml无水乙醇悬浮沉淀，颠倒混匀； 装入离心纯化柱，12000r/min离心×1min，弃乙醇 液；
5、空柱再12000r/min离心×1min，进一步弃乙醇液； 6、取离心好的纯化柱套入一干净的1.5ml离心管中，加
入100ul TE缓冲液于纯化树脂上（不能粘在管壁上）， 室温下放置3min，12000r/min离心×2min。
• 最好在加完所有其它反应成分后才加模板 DNA，加模板DNA时不要形成喷雾。
• 若用没有热盖的PCR扩增仪，则需在反应 体系中加入液体石蜡等矿物油封闭体系以 防止反应过程中液体的蒸发。
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遗传病的分析4 基因组DNA提取与PCR扩增技术
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一、基因组DNAห้องสมุดไป่ตู้取
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实验目的
• 基因组DNA的制备是基因分析的前提。 • 本实验要求掌握基因组DNA提取的基本方
法。
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原理
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注意事项
• 一般情况下，纯净的DNA OD260/OD280比值 约为1.8，RNA为2.0。若样品中含蛋白质，则比 值下降，必要时需重新抽提。若DNA的比值 <1.75，则加入SDS至0.5%；
• 从核酸中去除蛋白质时，常用到酚：氯仿等体 积混合液。氯仿的作用是使蛋白质变性并有助 于水相和有机相的分离；
• DNA用TE溶解，可增加DNA的稳定性，便于长 期保存。
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二、PCR扩增技术
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实验原理
• 多聚酶链反应（PCR）技术的原理类似于 DNA的天然复制过程。可简述为：
• 在微量离心管中加入适量缓冲液，加入微 量模板DNA，四种脱氧核苷酸（dNTP）， 和耐热Taq聚合酶及两个合成的DNA引物， 并有Mg2+存在。
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原理
基因组DNA提取试剂盒：在高盐的状 态下，DNA纯化树脂专一性地吸附DNA； 而在低盐或水溶液状态下，DNA被洗脱下 来。
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器材与试剂
• 台式高速离心机、天平、水浴恒温箱、移 液枪、塑料离心管等
• 试剂盒（纯化树脂、GN结合液、漂洗液、 无水乙醇、离心纯化柱 ）、TE缓冲液
DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形 式存在的。核酸与蛋白质之间的结合力包括离子 键、氢键、范德华力等，破坏或降低这些结合力 就可把核酸与蛋白分开。
DNA、RNA所含有的嘌呤环和嘧啶环的共轭 双键具有吸收紫外光的性质，吸收高峰在260nm 处，所以，可用紫外分光光度法测定DNA的浓度。
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实验原理
• 加热使模板DNA在高温下（94℃）变性，双链解链，这 是所谓变性阶段。
• 降低溶液温度，使合成引物在低温（56℃）与模板DNA 互补退火形成部分双链，这是所谓退火阶段。
• 溶液反应温度升至中温（72℃），在Taq酶作用下，以 四种dNTP为原料，引物为复制起点，模板DNA的一条 双链在解链和退火之后延伸为两条双链，这是延伸阶段。
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器材与试剂
试剂： 1、PCR试剂盒： （Taq DNA 聚合酶、 dNTP 、Mg＋＋等 ） 2、引物 1（68kb上游） 引物 2（69kb下游） 3、无菌ddH2O 4、模板DNA：为本次实验所提出的全血基因组 DNA
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操作
1、将全血轻轻混匀，转移0.5ml全血到1ml纯化树脂中， 颠倒混匀5-6次，室温，3min。其间要颠倒混匀1次， 5000r/min离心×3sec；
2、取沉淀，加1mlGN结合液悬浮沉淀，颠倒混匀， 5000r/min离心×3sec；
3、取沉淀，加0.5ml漂洗液纯化树脂2次，颠倒混匀， 5000r/min离心×3ecs；
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操作
• 无菌ddH2O • Taq酶等 • 引物1（68） • 引物2 （69） • 模板DNA
21.5ul 25ul 0.6ul 总体积50ul 0.9ul 2ul
混匀后，离心5000r/min×1min，置PCR仪
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操作
PCR扩增的设定：
设置PCR扩增仪的热盖温度为100℃
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• 预变性：94℃5min • 循环： 94℃变性30s
56℃退火30s 30个循环 72℃延伸30s • 末次延伸：72℃ 5min • 4 ℃保存
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注意事项
• 由于PCR技术非常敏感，可使一个DNA分 子得以扩增，装有PCR试剂的微量离心管 打开之前，应先在微量离心机上作瞬时离 心使液体沉积于管底。
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实 验 原 理
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实验目的
本实验以所提出的全血基因组DNA 为模板，以线粒体基因上一段核苷酸为 引物，扩增出924bp的扩增产物。学习并 掌握PCR 反应的基本原理与实验技术。
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器材和试剂
器材 PCR扩增仪，旋涡振荡器，台式离心机， 加样枪及枪头等
4、取沉淀， 加0.8ml无水乙醇悬浮沉淀，颠倒混匀； 装入离心纯化柱，12000r/min离心×1min，弃乙醇 液；
5、空柱再12000r/min离心×1min，进一步弃乙醇液； 6、取离心好的纯化柱套入一干净的1.5ml离心管中，加
入100ul TE缓冲液于纯化树脂上（不能粘在管壁上）， 室温下放置3min，12000r/min离心×2min。
• 最好在加完所有其它反应成分后才加模板 DNA，加模板DNA时不要形成喷雾。
• 若用没有热盖的PCR扩增仪，则需在反应 体系中加入液体石蜡等矿物油封闭体系以 防止反应过程中液体的蒸发。
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遗传病的分析4 基因组DNA提取与PCR扩增技术
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一、基因组DNAห้องสมุดไป่ตู้取
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实验目的
• 基因组DNA的制备是基因分析的前提。 • 本实验要求掌握基因组DNA提取的基本方
法。
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原理
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注意事项
• 一般情况下，纯净的DNA OD260/OD280比值 约为1.8，RNA为2.0。若样品中含蛋白质，则比 值下降，必要时需重新抽提。若DNA的比值 <1.75，则加入SDS至0.5%；
• 从核酸中去除蛋白质时，常用到酚：氯仿等体 积混合液。氯仿的作用是使蛋白质变性并有助 于水相和有机相的分离；
• DNA用TE溶解，可增加DNA的稳定性，便于长 期保存。
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二、PCR扩增技术
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实验原理
• 多聚酶链反应（PCR）技术的原理类似于 DNA的天然复制过程。可简述为：
• 在微量离心管中加入适量缓冲液，加入微 量模板DNA，四种脱氧核苷酸（dNTP）， 和耐热Taq聚合酶及两个合成的DNA引物， 并有Mg2+存在。
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原理
基因组DNA提取试剂盒：在高盐的状 态下，DNA纯化树脂专一性地吸附DNA； 而在低盐或水溶液状态下，DNA被洗脱下 来。
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器材与试剂
• 台式高速离心机、天平、水浴恒温箱、移 液枪、塑料离心管等
• 试剂盒（纯化树脂、GN结合液、漂洗液、 无水乙醇、离心纯化柱 ）、TE缓冲液
DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形 式存在的。核酸与蛋白质之间的结合力包括离子 键、氢键、范德华力等，破坏或降低这些结合力 就可把核酸与蛋白分开。
DNA、RNA所含有的嘌呤环和嘧啶环的共轭 双键具有吸收紫外光的性质，吸收高峰在260nm 处，所以，可用紫外分光光度法测定DNA的浓度。
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实验原理
• 加热使模板DNA在高温下（94℃）变性，双链解链，这 是所谓变性阶段。
• 降低溶液温度，使合成引物在低温（56℃）与模板DNA 互补退火形成部分双链，这是所谓退火阶段。
• 溶液反应温度升至中温（72℃），在Taq酶作用下，以 四种dNTP为原料，引物为复制起点，模板DNA的一条 双链在解链和退火之后延伸为两条双链，这是延伸阶段。
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器材与试剂
试剂： 1、PCR试剂盒： （Taq DNA 聚合酶、 dNTP 、Mg＋＋等 ） 2、引物 1（68kb上游） 引物 2（69kb下游） 3、无菌ddH2O 4、模板DNA：为本次实验所提出的全血基因组 DNA
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操作
1、将全血轻轻混匀，转移0.5ml全血到1ml纯化树脂中， 颠倒混匀5-6次，室温，3min。其间要颠倒混匀1次， 5000r/min离心×3sec；
2、取沉淀，加1mlGN结合液悬浮沉淀，颠倒混匀， 5000r/min离心×3sec；
3、取沉淀，加0.5ml漂洗液纯化树脂2次，颠倒混匀， 5000r/min离心×3ecs；
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操作
• 无菌ddH2O • Taq酶等 • 引物1（68） • 引物2 （69） • 模板DNA
21.5ul 25ul 0.6ul 总体积50ul 0.9ul 2ul
混匀后，离心5000r/min×1min，置PCR仪
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操作
PCR扩增的设定：
设置PCR扩增仪的热盖温度为100℃