洋葱多糖及其含量的测定
洋葱水溶性多糖的提取工艺_傅冬和
网络出版时间：2013-01-21 10:49网络出版地址：/kcms/detail/43.1183.TS.20130121.1049.042.html洋葱水溶性多糖的提取工艺Study on the extraction technology of onion water solublepolysaccharides傅冬和1,2张影1 曾婷玉1李恒彪1FU Dong-he1,2ZHANG Ying1ZENG Ting-yu1 LI Heng-biao1（1.国家植物功能成分利用工程技术研究中心，湖南长沙410128；2.湖南农业大学园艺园林学院植物资源工程系，湖南长沙410128）(1. National Research Center of Engineering &Technology for Utilization of Botanical Functional Ingredients, NaturalProducts, Changsha, Hunan 410128, China; 2. Plant Resource and Engineering Department of College of Horticulture andGardening, Hunan Agricultural University, Changsha, Hunan 410128, China)摘要：通过正交试验设计以期获得洋葱中水溶性多糖的最佳提取工艺。
以新鲜洋葱为原料，采用水提法提取洋葱水溶性多糖，以提取温度、提取时间、料液比和提取次数为考查因素，比较各因素对洋葱水溶性多糖提取率的影响。
结果表明：水提法提取洋葱水溶性多糖的最佳工艺参数为提取时间3.0 h，提取温度80 ℃，液料比1︰12(m︰V)，提取次数3次。
在该提取条件下洋葱水溶性多糖提取率可达到3.697%。
关键词：洋葱；水溶性多糖；水提法；提取工艺Abstract ：Onion water soluble polysaccharides were extracted from fresh onion with hot water by orthogonal design. The effects of extractiontime, extraction temperature, water -to-solid ratio and extraction time were studied. The experiment was carried out to determine optimal technicsparameter of extraction. The results showed that the optimal condition was determined as extraction time of 3.0 hours, extraction temperature of80 ℃, water -to-solid ratio of 1:12(m︰V) and extraction times of 3 . Under this condition, the test content of onion water soluble polysaccharideswas 3.697%.Key words: onion；water soluble polysaccharides；water extraction method; extraction technics洋葱是一种特色蔬菜，被称为“蔬菜皇后”，是典型的药食同源植物，产量高，活性成分丰富。
多糖含量的测定方法
多糖含量的测定方法有多种，以下列举其中几种常用的方法： 1. 酚硫酸法：将样品与酚硫酸反应生成稳定的紫色化合物，通过测定紫色化合物的吸光度来确定多糖含量。
2. 蒽酮-硫酸法：样品经热水溶解后，乙醇沉淀，除去其他可溶性糖及杂质的干扰，用热水溶解沉淀物并稀释定容。
此法操作简便，测定速度快，可用于多糖的实时快速测定和定性分析。
3. 刚果红显色法：在一定条件下，刚果红显色剂能与乙酰甘露聚糖生成有色复合物，而不与麦芽糖糊精、蔗糖和葡萄糖等发生明显的显色反应。
由此可以建立定量分析芦荟多糖含量的刚果红显色分光光度法。
此外，还有其他方法如色谱法、光谱法等也可以用于多糖含量的测定。
具体使用哪种方法需要根据实验目的、样品性质和实验条件等因素进行选择。
洋葱多糖的提取工艺改进
洋葱多糖的提取工艺改进黄爱民,马林,杨华,廖丹葵,黄祖强(广西大学化学化工学院,广西南宁530004)摘要 [目的]改进洋葱多糖的提取工艺。
[方法]采用热水浸提法提取洋葱水溶性多糖,采用正交试验考察了提取时间、提取温度和固液比对洋葱多糖得率的影响;并在此基础上考察了超声波外场强化对洋葱多糖提取的影响。
[结果]热水浸提法提取洋葱水溶性多糖的最佳工艺为:提取时间为4h ,提3次共计12h ,提取温度60e ,料液比为1B 30,此时洋葱多糖得率为4.034%。
在上述最佳提取条件下,超声波外场强化处理频率为59k H z ,功率为112W,超声时间为30m in ,多糖得率可达6.05%,提取时间减少4h 。
超声波外场强化处理有助于洋葱多糖提取效率的提高。
[结论]该研究为洋葱多糖提取工艺的改进提供了理论依据。
关键词 洋葱多糖;正交试验;提取;外场强化中图分类号 R 284.2 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2010)10-05113-02Research on Extracti on M etho ds of Pol ysacchari de fro m On i on HUANG A -i m i n et al (School of Che m istry and Che m ical Eng i neeri ng ,Guangx iUn i versit y ,N ann i ng ,Guangxi 530004)Abstract [Objecti ve]To m i prove the ex tracti on technol ogy o f po l ysacchar i des fro m oni on .[M et hod]The extracti on methods of polysaccha -ride fro m oni on were studied by ort hogonal experm i entsw it h hotw ater extraction met hod .The eff ect factors i ncl uding extracti on tm i e ,te mpera -ture and the rati o of so li d -li qui d on t he ex tracti on ra t e w ere i nvesti gated .Further m ore ,t he ultrasoni c assisted extracti onm et hodswas i nvesti ga -ted to promote the ex tracti on ra t e .[R es ult]The optm i u m extracti ng process of pol ysacchar i de from on i on w it h hotwa t er extraction methodw as sho w ed as follo w ing :ex tracti ng 3tm i es ,4h every tm i e ,ex tracti ng te mperature at 60e ,t he ratio o f so li d -liqui d at 1B 30,and t he extracti on rate of po l ysaccharide w as up to 4.034%.U si ng the optm i u m ex tracti ng process above ,ultrason i c frequency at 59k H z ,power at 112W and ex tracti on tm i e i n 30m i nutes ,the ex traction ra t e o f pol ysacchar i de was up to 6.052%w it h t hese ultrasoni c outfiel d i ntensify i ng conditi ons .The extracti on tm i e o f the ultrasonic assi sted ex tracti on methodsw as a l so decreased by 4h .Outfi e l d i nt ensif y i ng ultrasound treat ments coul d i n -crease i n t he effici ency of extracti ng polysacchari de fro m onion .[Conclusi on]T hese res ults prov i ded t he t heoretic basi s for the extracti on tech -nology of polysacchari des fro m onion .K ey words Onion po l ysacchar i de ;Extracti on ;O rt hogonal tes;t O utfiel d intensif y i ng作者简介 黄爱民(1970-),女,壮族,广西天等人,硕士,讲师,从事生化制药和制药工程的研究。
洋葱多糖的水浸提取工艺条件研究
Ｇ ｉＺ ＵＯ Ｍｅ ＨＡＯ Ｊｎ ￣Ｗ ＡＮＧ Ｎａ， Ｉ ＮＧ Ｐ ｎ ， ｉ ｇ， Ｌ Ａ ｅ ｇ
（． ｅａｔ ｅｔ ｆ ｏｄ ｃ ｎｅ Ｔａｊ ｇｉ ｌ ｒ Ｃ ｌ ｇ ， ｉｎ ｎ３０ ８ ， ｈ ａ ２Ｔａｊ ｓｔｔ ｏ Ｆｏ １Ｄ ｐｒ ｎ ｏ ｉ ｃ ， ｉ ｉ Ａ ｒ ｕｔ ｅ ｏ ｅｅ Ｔａｊ ０ ３ ４ Ｃ ｉ ；． ｉ ｉ Ｉ ｔｕｅ ｆ ｏｄ ｍ ｏＦ Ｓ ｅ ｎｎ ｃ ｕ ｌ ｉ ｎ ｎ ｎｎ ｉ
ｔｍｐ ｒｔ ｒ ｎｄ ｅ ｔａ ｔｏ ｉ ． ｅ ｏ ｔ ｕ ｐ ｏ ｅ ｓ ｐ ｒ ｍ ｅｅ ｓａ ｅ ｒｔｏ ｏ ｏ ｉ ｌｑ ｉ ２ ｅ ｅ ａｕ ｅ ａ ｘｒ ｃｉｎ ｔｍｅ Ｔｈ ｐ ｉ ｍ ｒ ｃ ｓ ａ ａ ｔｒ ｒ ａｉ ｆｓ ｌ ｍ ｄ－ ｉ ｕ ｄ １：５，ｅ ｔａ ｔｏ ｘ ｒｃ ｉｎ ｔｍｐ ｒｔ ｒ ０ ｏ ａ ｄｅ ｔａ ｔ ｎｔｍｅ５ｈ． ｄ ｒｔ ｅ ｅｃ ｎ ｉ ｏ ｓ ｔ ｅｅ ｔａ ｔｏ ｉｌ ｐｔ ．４％ ． ｅ ｅ ａｕ ｅ７ Ｃ ｎ ｘ ｒｃ ｉ ｉ Ｕｎ ｅ ｓ ｏ ｄｔ ｎ ． ｈ ｘｒ ｃｉ ｎｙｅｄ ｉ ｕ ｏ４５ ｏ ｈ ｉ ｓ
洋葱 多糖 得 率 可达 到 ４ ４ ． ％。 ５ 关 键 词 ： 葱 ； 浸提 取 ； 洋 水 多糖
Ｓｔ ｄｙｏ ｈｅＥｘ ｒ ｃ ｉ ｎ Ｃｏ ｄｉｉ ｎ ｆＣｏ ｉｉ ｎ ｆＯｎ ｏ ｌ ｓ ｃ ｈ ｒｄｅｂ ａ ｅ ｔａ ｔｏ ｕ ｎ ｔ ｔ ａ ｔｏ ｎ ｔｏ ｓｏ ｎｄ ｔｏ ｓｏ ｉ ｎ Ｐｏ ｙ ａ ｃ ａ ｉ ｙＷ ｔ ｒＥｘ ｒ ｃ ｉ ｎ
基础 研 究
食品研究与开发
Ｆ ｏ ｓａ ｃ ｄ Ｄｅ ｅ ）ｍｅ ｔ ｏ ｄ Ｒｅｅ ｒ ｈ Ａｎ ｖ ｈｐ ｎ
黑洋葱粗多糖的提取及降血糖作用研究_宁月宝
［2］ 宁 月宝，汪芳芳，杜志强，等． 固态发酵黑洋葱挥发 性 物 质 的 GC － MS 测定［J］． 食品研究与开发，2014，35（ 21） ： 93 － 96．
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［8］ 李凤林，余蕾． 玉米须黄酮的提取及其降糖作用［J］． 中国食品 添加剂，2009（ 3） ： 121 － 124．
的降血糖作用，并与黑洋葱汁的降血糖作用进行对比。结果表明： 黑洋葱粗多糖和黑洋葱汁均能有效
对抗四氧嘧啶诱发小鼠的高血糖，其中黑洋葱粗多糖的效果较黑洋葱汁更明显。说明黑洋葱粗多糖
对四氧嘧啶致高血糖模型小鼠有降血糖作用。
DOI:10.13881/ki.hljxmsy.2016.1303
洋葱，别 名 玉 葱、葱 头，为 百 合 科 葱 属 植 物 的 鳞 茎。临床医学和研究证明，洋葱具有消炎抑菌、活血 化淤、防癌抗癌、利尿、降血糖以及预防心血管疾病等 生理药用 价 值，是 非 常 好 的 食 疗 产 品［1］。 黑 洋 葱 是 利用新鲜的洋葱经过一定的预处理后置于恒温恒湿 箱中让其自然发酵一定时间后制成的食品［2］。洋葱 发酵成黑洋葱后，刺激性气味降低，水分、脂肪显著降 低，微量元素显著提高，蛋白质、糖、维生素等则至少 为普通洋葱的 2 倍以上。目前，国内外还没有充分对 黑洋葱粗多糖的降血糖作用进行研究。
洋葱水溶性粗多糖的提取工艺优化
洋葱水溶性粗多糖的提取工艺优化作者：李萍胡矗垚舒展张兰闫静坤汪青青来源：《天津农业科学》2017年第03期摘要：采用水提醇沉法提取洋葱水溶性粗多糖，以粗多糖提取率和多糖含量的综合评分为指标，利用正交试验优化提取工艺。
结果表明：最佳提取工艺条件为时间3 h，料液比1∶30 g·mL-1，温度90 ℃，物料粉碎度0.25～0.40 mm（筛孔径），在此条件下粗多糖提取率达到5.886%，多糖含量为54.547%。
影响粗多糖提取效果的因素次序为：温度>料液比>物料粉碎度>时间，温度的变化对粗多糖提取效果具有显著影响。
相同提取条件下，紫皮洋葱粗多糖提取率比黄皮洋葱高出1.681%，多糖含量比黄皮洋葱高出21.429%，紫皮洋葱更适用于粗多糖的提取且营养价值更高。
总之，水提醇沉法提取洋葱水溶性粗多糖，成本低廉，操作简便，易实现工业化生产。
关键词：洋葱；水溶性粗多糖；水提醇沉；提取率；多糖含量；工艺优化中图分类号：文献标识码： DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2017.Optimization of Extraction Process of Water-soluble Crude Polysaccharide from OnionLI Ping， HU Chuyao， SHU Zhan， ZHANG Lan， YAN Jingkun， WANG Qingqing（College of Basic Science， Tianjin Agricultural University， Tianjin 300384， China）Abstract：Water extraction and ethanol precipitation method were applied to extract water-soluble crude polysaccharide from onion. Orthogonal experiment was used to optimize extraction process with the integrated score of the extraction rate of crude polysaccharide and polysaccharide content as index. The eesults showed that the optimum extraction conditions were as follows：extraction time 3 h， ratio of material to solvent 1∶30 g？mL-1， extraction temperature 90 ℃，powder granularity of the material was 0.25～0.40 mm， and under these conditions the extraction rate could reach 5.886% and the polysaccharide content was 54.547%. Factors affecting the extraction effect of crude polysaccharide were in the order of extraction temperature> ratio of material to solvent> powder granularity of the material> extraction time， and the extraction temperature had a significant effect on extraction effect. Water-soluble crude polysaccharide extracted from purple onion contained higher extraction rate and polysaccharide content with 1.681% and 21.429% improvement than that from yellow onion， respectively， which indicating that purple onion was more suitable for the extraction of crude polysaccharide and contained higher nutritional value. In conclusion，water extraction and ethanol precipitation method to extract water-soluble crude polysaccharide from onion was simple to operate and easy to realize industrial production with low cost.Key words：onion；water-soluble crude polysaccharide；water extraction and ethanol precipitation；extraction rate；polysaccharide content；process optimization植物多糖是存在于植物細胞中的一类大分子物质，具有广泛的生理活性，其中以水溶性多糖最为重要[1]。
洋葱的实验报告
洋葱的实验报告引言洋葱是一种常见的蔬菜，在厨房中被广泛使用。
除了被用作调味品和食材外，洋葱还具有许多健康益处。
本实验旨在探究洋葱的化学成分、营养价值以及与人体健康相关的实验结果。
实验目的1.分析洋葱中的化学成分2.探究洋葱的营养价值3.了解洋葱与人体健康的关系实验步骤1. 洋葱的化学成分分析洋葱含有挥发性油脂、糖类、有机酸、无机盐和挥发性硫化合物等成分。
为了分析洋葱的化学成分，我们采用了以下步骤： - 提取洋葱的挥发性油脂：将洋葱切碎并加入无水醋酸钠溶液中，通过蒸馏的方法提取洋葱中的挥发性油脂。
- 检测洋葱中的糖类和有机酸：使用层析色谱法检测洋葱中的糖类和有机酸的含量。
- 分析洋葱中的无机盐：通过火焰原子吸收光谱法分析洋葱中的无机盐含量。
- 检测洋葱中的挥发性硫化合物：采用气相色谱法检测洋葱中的挥发性硫化合物的种类和含量。
2. 洋葱的营养价值分析洋葱富含维生素C、维生素B6、叶酸、纤维素和矿物质等营养物质。
为了分析洋葱的营养价值，我们采用了以下步骤： - 分析洋葱中维生素C的含量：使用分光光度计测定洋葱中维生素C的含量。
- 检测洋葱中的维生素B6和叶酸：采用高效液相色谱法检测洋葱中维生素B6和叶酸的含量。
- 分析洋葱中的纤维素含量：使用纤维素酶法测定洋葱中的纤维素含量。
- 检测洋葱中的矿物质：采用原子吸收光谱法检测洋葱中的矿物质含量。
3. 洋葱对人体健康的影响洋葱具有抗氧化、抗菌、降血压和降血糖等功效，对人体健康有积极影响。
本实验中，我们采用以下方法来研究洋葱对人体健康的影响： - 测定洋葱提取液的抗氧化活性：使用自由基清除法或DPPH方法测定洋葱提取液的抗氧化活性。
- 测定洋葱提取液的抗菌能力：通过对不同类型的细菌进行抗菌实验，评估洋葱提取液的抗菌能力。
- 检测洋葱对血压的影响：采用血压测定仪测定洋葱提取液对血压的影响。
- 检测洋葱对血糖的影响：使用血糖仪测定洋葱提取液对血糖的影响。
洋葱中多种农残的检测(SPE-GCMS)
洋葱中多种农残的检测（SPE-GC/MS ）使用QueChERS 方法 (部件号：60105-210，60105-206，60105-203)样品制备15g 样品，加入15mL 含1%醋酸的乙腈溶液，缓慢加入Thermo QueChERSextraction ，剧烈震摇5min ，室温下3000rpm 离心5min ，取上层11mL 。
初级净化上层11mL 溶液加入Thermo QueChERS initial clean-up 管中，剧烈震摇2min ，室温下3000rpm 离心5min 。
取上清夜5mL ，40℃下氮气吹干1小时。
残留重溶在1mL 正己烷/丙酮9:1中。
再次净化取1mL 溶液，加入Thermo QueChERS final clean-up 管，剧烈震摇5min ，室温下3000rpm 离心5min ，取上层液体进样。
GC/MS 方法色谱柱Thermo Scientific TraceGOLD TG-35MS ，30m ×0.25mm ID ，0.25µm 货号26094-1420温度程序40℃（保持1.5min ），25℃/min 到150℃， 5℃/min 到225℃（保持7.5min ），25℃/min 到290℃（保持12min ）载气He 流速1mL/min 进样量2µL 分流比不分流，290℃检测MS结果1.GC/MS色谱图Figure 3：Total ion chromatogram of full scan data for 50ng/g of pesticidesin onion matrix Figure 4：Total ion chromatogram of the MS/MS analysis of 50ng/g pesticides in onion matrix食品安全应用772.LOD和LOQ：45种农残在洋葱中的LOQ在5-78ng/g。
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[作者简介] 李茵萍(1973-),女,实验师,主要从事有机分析化学研究。
化学测定方法洋葱多糖及其含量的测定李茵萍1,昆杜斯!托合塔森2,孙 莲3(1 新疆师范大学生命与环境科学学院,乌鲁木齐 830054;2 新疆师范大学教务处,乌鲁木齐 830054;3 新疆医科大学药学院,乌鲁木齐 830054)[摘要] 目的:对洋葱中的多糖进行提取与测定。
方法:采用超声法对洋葱中的多糖进行提取,并采用苯酚-硫酸法[1],测定其多糖的含量。
结果:多糖的含量为43%,平均回收率为98 5%,RS D =2 5%。
结论:结果表明,采用超声波提取洋葱中的多糖,提取时间短,此方法比用沸水提取的方法简单,快速,灵敏度高。
[关键词] 洋葱;超声波;多糖;分光光度法[中图分类号] O 657 3 [文献标识码] A [文章编号] 1004-8685(2006)03-0300-02 洋葱,百合科植物,多年生草本,具有强烈的香气。
又名玉葱、葱头,鳞茎大[2]。
随着近年来人们对绿色天然食品的崇尚,我们对洋葱多糖进行了测定,洋葱是一种在我国广泛种植的植物,多糖含量丰富。
洋葱除含一般营养素外,还含有杀菌利尿降脂降压抗癌等生物活性物质。
近年来医学临床和研究证明,洋葱具有多种较高的生理药用价值,在营养食疗上被推崇为多功能的降脂降压抗癌的营养保健食品。
我们初次利用超声波提取洋葱中的水溶性多糖,超声波提取是一种利用外场介入强化提取过程,具有被浸提的活性物质活性不被破坏,提取时间短,收率高,条件温和等优点。
并采用了分光光度法测定其含量。
1 材料与方法1 1 仪器与试剂旋转蒸发仪RE -52A 型(上海安亭生化仪器厂);KQ 3200DB 超声波发生器(昆山电子有限责任公司);721E 型分光光度计(上海光谱仪器有限公司);真空干燥D ZF -6030(上海一恒);电子分析天平(瑞士梅特勒);葡萄糖(AR,105∀干燥至恒重);洋葱(市售新疆的哈密白皮,洗净晾干粉碎后过40目筛);其他试剂均为分析纯。
2 实验部分2 1 葡萄糖标准溶液的制备精密称取105∀干燥至恒重的葡萄糖标准品29 4mg ,置250m l 容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,配制成浓度为0 1176mg /m l 的标准溶液,闭光保存。
2 2 5%苯酚试剂的制备取苯酚100g ,加入0 1g 铝片和0 05g N a 2CO 3,在176∀~178∀,常压蒸馏,空气冷凝,得白色针状结晶,称取重蒸馏苯酚12 6g ,置250m l 棕色容量瓶中,取水稀释至刻度,摇匀,闭光保存。
2 3 标准曲线的绘制精密吸取葡萄糖标准溶液0 25、0 5、0 75、1 00、1 25m ,l 置于25m l 的具塞试管中,分别加水至1 5m ,l 再分别加入5%苯酚试剂2 0m ,l 混匀。
加浓H 2S O 46 5m ,l 混匀冷却至室温,置于40∀水浴中放置30m i n ,取出冷却至室温,加水稀释至10m ,l 混匀。
在490n m 处测定吸光度[3],得回归方程:A =0 0145+62 687C ,r =0 9998。
2 4 洋葱多糖的提取与精制称取干燥过40目筛的洋葱粉末100g ,用95%乙醇回流提取40m i n ,除去脂溶性成分和色素等,残渣挥干后于烧杯中加水700m ,l 于90∀超声提取30m i n ,提取3次,过滤后,合并滤液于旋转蒸发仪减压浓缩至200m ,l 加入95%乙醇至含醇量为80%,静置于4∀过夜,倾出上清液,分离,得到粗多(上接第299页)[参考文献][1]管正大 医学检验临床意义手册[M ] 北京:人民军医出版社,1994 176-177[2]杨敏,宋晓锐,罗宗铭 蛋白质分析方法新进展[J ] 广州化工,2000,28(4):121-123[3]扬睿,刘绍璞 某些分子光谱分析法测定蛋白质的进展[J] 分析化学,2001,29(2):232-241[4]曹秋娥,李祖碧,王加林,等 偶氮胭脂红B 与血清蛋白质相互作用的光度法研究及其分析应用[J] 分析化学,2002,30(2):222-226[5]马卫兴,许兴友,周燕,等 水溶苯胺蓝与蛋白质结合反应的研究及应用[J] 理化检验-化学分册,2004,40(10):601-602 [6]张永花,胡秋娈 变色酸2B 光度法测定血清蛋白质的研究[J]洛阳师范学院学报,2005,24(2):55-58[7]P rez-Ru i z T ,M art nez -Lozano C ,To m s V ,e t a l Deter m i nati on ofprot ei ns i n s eru m by fl uorescence quench i ng of ros e be ngal usi ng the stoppe d-fl o w m i xi ng technique[J] Anal ys,t 2000,125(3):507-512 [8]B rad f ord MM A rap i d and sens i ti ve m ethod for the quan titation ofm icrogra m quantities of p rot e i n utili z i ng the pri n ci p l e of protei n -dye b i nd i ng[J] Anal B i oche m,1976,72(1-2):248-254(收稿日期:2005-11-05)糖,将粗多糖溶解于热水中,用sevag e 除蛋白(氯仿#正丁醇=4#1),萃取18次后,取水层,并用活性碳进行脱色,脱色后的溶液加95%乙醇至含醇量达80%,静置4∀过夜,离心,分离,沉淀用无水乙醇,丙酮,乙醚依次洗涤3次,室温下减压干燥至恒重,即得浅棕色的洋葱精制多糖[4]。
2 5 换算因子的测定精密称取干燥至恒重的洋葱多糖14 7mg ,定容于100m l 容量瓶中配成浓度为0 147m g /m l 的洋葱多糖溶液。
精密吸取此液1 0m ,l 按2 3项操作,于490n m 处测定吸光度值,根据回归方程求出多糖供试液中葡萄糖浓度,按下式计算换算因子[5],测得f=1 61(n =6)f=W /(C ∃D )W 为多糖的质量(g );C 为多糖稀释液中葡萄糖的浓度(g /L);D 为多糖的稀释因素。
2 6 样品溶液的制备及测定精密称取洋葱粉末0 2008g 于100m l 容量瓶中,加水80m ,l 于90∀超声提取30m i n ,过滤于另一100m l 容量瓶中,残渣用少量蒸馏水洗涤多次,合并后稀释至刻度,摇匀。
准确吸取此溶液25m l 于100m l 容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,按2 3项操作,于490n m 处测定吸光度值,并按下式计算多糖含量,样品中多糖的含量为43%(n =4)。
多糖含量(%)=CD f/WW 为供试液的质量(g);C 为供试液中葡萄糖的浓度(g /L);D 为供试液中的稀释因素;f 为供试液的换算因子。
2 7 精密度试验精密吸取对照溶液1 0m ,l 10份,同2 3项操作,结果RSD =2 32%。
2 8 稳定性实验准确吸取样品溶液1 0m ,l 按2 3项操作,于490n m 处测定吸光度值,每隔30m i n 测定吸光度值,连续8h ,测定结果表明,该显色反应稳定。
2 9 回收率测定(采用加标回收法)准确吸取多糖样品溶液0 5m l 共12份,分为4组,每组3份,第1组为本底样品,于第2、3、4组分别加入浓度为0 1176m g /m l 的标准入标准葡萄糖溶液0 25、0 75、1 25m ,l 按2 3项操作,测定回收率,计算得平均回收率为98 5%,RSD =2 5%(n =9)。
3 讨论3 1 最佳测定波长的选择精密吸取葡萄糖标准溶液1m l 按2 3项操作之后,在400~610nm 围内进行扫描,结果见图1所示,在波长为490n m 处有最大吸收,以此作为测定波长。
图1 不同波长对吸光度的影响3 2 超声波提取对多糖产率的影响如图2所示,相同的温度条件下,采用不同时间超声波提取和常规水提取得的多糖产率不同,超声波提取10、20、30、40m i n 的产率为20 4%、34 2%、43%、42%,采用水提2h 的产率为32 4%,超声波提取30m i n 得到的多糖产率最高,所以采用超声提取。
3 3 沉淀多糖对乙醇浓度的选择超声波提取的滤液浓缩至200m ,l 平均分成5份,分别加入95%乙醇至含醇量达50%、60%、70%、80%、90%,实验结果如图3示,实验数据表明80%的乙醇对多糖的沉淀效果最好,多糖的含量最高[6]。
图2 不同时间条件对超声波及水提洋葱多糖的影响图3 不同浓度的乙醇对洋葱多糖的沉淀实验结果4 小结从实验结果来看,使用超声波提取洋葱中的多糖,在相同的温度条件下,超声提取时间要明显优于沸水提取的时间,这主要是由超生震荡引起的。
不同浓度的乙醇对洋葱多糖的沉淀也是影响多糖产率的因素之一。
本实验方法准确度和精密度较高,时间短,提取率高。
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