T 淋巴细胞相关肿瘤免疫疗法

3.2 CAR-T 的临床应用

通常通过结合抗 CD3抗体、共刺激抗 CD28抗体或共培 养患者自体或供者的外周血单核细胞来激活和扩 增 T 淋 巴细胞或病毒特异性 T 淋巴细胞。CAR-T 在血 液系统 恶性肿瘤的治疗中发挥着重要作用，通过靶向 CD19抗 原治疗急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性淋巴 细胞白 血病（CLL）和多发性骨髓瘤，以 CD19或 CD20为 靶 抗原治疗淋巴瘤，通过以 Lewis Y 抗原或 CD33为靶抗 原治疗急性髓系白血病（AML）。 虽然 CAR-T 疗法在根除血液系统恶性肿瘤中具有临床 疗效，但对实体瘤的治疗仍有待突破。CAR-T 靶向 实 体肿瘤抗原受到较多限制。实体肿瘤微环境给 CAR-T 带来了许多问题，包括纯粹的物理/解剖学屏障、肿瘤 衍生的可溶性因子和细胞因子以及抑制免疫反应的免疫 细胞等。
3 CAR-T 疗法 3.1 CAR-T 的作用与结构
1989年，学者们首次提出将肿瘤单克隆抗体的单链 可变区与 TCR 结合，再将编码嵌合抗原受体（CAR） 的基 因插入 T 淋巴细胞，修饰后的 T 淋巴细胞经体外 扩增和 纯化后回输至体内，被 CAR 修饰的 T 淋巴细 胞不仅靶向 肿瘤细胞表面特异性抗原，也使其在主要 组织相所述，T 淋巴细胞相关肿瘤免疫疗法免疫检查点疗 法和 CAR-T 在临床前与临床研究中取得了良好的 成效。 多个肿瘤免疫治疗药物，尤其是针对 CTLA-4、 PD-1和 PD-L1这 3个靶标的肿瘤免疫治疗药物被各研 究机构和 医药企业作为研发热点肿瘤免疫疗法通过诱导自身免疫 系统对 抗肿瘤，但多种因素影响 T 淋巴细胞对肿瘤的识 别，造 成肿瘤免疫逃逸。Stonen E 等提出了“外包免 疫反应” 这一新概念，为肿瘤免疫疗法带来了重大突破， 提出即 使患者的 T 淋巴细胞不能识别肿瘤细胞，异体 T 淋巴细 胞也可能对肿瘤进行识别和抵抗。虽然肿瘤免疫 疗法 总体还在起步阶段，存在一定的局限性，但其在肿 瘤治 疗中是一个非常有前景的研究方向，有望成为攻破 肿瘤 治疗的有效方法。
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2.4 TIM-3
TIM-3是一种在活化的 T 淋巴细胞、NK 细 胞和单核细胞中表达的免疫检查点分子。S-型 半乳糖凝集素 9 （Gal-9）已被确定是 TIM-3的 一个配体，其结合 TIM-3的IgV 域。TIM-3作为 一类 T 淋巴细胞表面抑制性分子， 能够引起肿 瘤与慢性病毒感染过程中 T 淋巴细胞的衰竭， 通过封闭性抗体或干扰 RNA 抑制 TIM-3下游信 号来激活人T淋巴细胞分泌人γ干扰素（IFN-γ） 增加。研究表明，恶性黑色素瘤可通过阻断 TIM-3来逆转 CD4、CD8T 淋巴细胞功能的耗 竭。
PD-1与其配体结合时，在效应阶段的肿瘤 浸润淋巴细胞（TIL）中呈高表达，并用于慢性 抗原暴露时抑制 T 淋巴细胞活性。PD-1的 2个 配体分别为 PD-L1和 PD-L2，PD-L1通过与表 面受 体 PD-1或 CD80分子相互作用，抑制活 化 T 淋巴细胞的信号。PD-L2是 T 淋巴细胞增 殖和干扰素产生的关键。PD-L2可刺激 PD-1受 体信号，导致 T 淋巴细胞耗竭，可通过去除逆 转 PD-1信号暂时抑制 T 淋巴细胞活化和增殖。
有针对性的肿瘤治疗药物目标需要锁定特定的肿 瘤细胞， 以避免对健康组织产生影响。CAR 分子由一个 抗原识别 胞外结构域和一个胞内的信号域组成，胞外部 分通常是一 个针对细胞表面抗原的单链抗体（scFv），而 胞内结构域 由 TCR 复合物和共刺激信号分子合并信号域组成[34]。为了 能够充分激活 T 淋巴细胞活化，需要通 过一系列共刺激受 体蛋白[如 CD28、CD27、CD137（4-1BB）、ICOS 和 CD（OX40）]等联合刺激 TCR 获得抗原识 别信号。
T 淋巴细胞相关肿 瘤免疫疗法
郝圆园
201731830 生物工程
肿瘤免疫疗法是一种通过激发或调动机体免 疫系统来增强肿瘤微环境抗肿瘤免疫力，控制和 杀伤肿瘤细胞的一种治疗方法。近年来，肿瘤免 疫疗法在临床使用中明显延长了黑色素瘤、前列 腺癌和肺癌等肿瘤患者的生存时间，逐渐成为继 手术、放疗和化疗后的第4类肿瘤治疗方法。T 淋巴细胞作为免疫系统最重要的细胞之一，在机 体对抗肿瘤细胞的免疫反应中以间接和/或直接 的方式发挥着重要作用，以 T 淋巴细胞为基础的 肿瘤免疫疗法具有重要的研究意义。
2.1 CTLA-4
CTLA-4又名 CD152，是肿瘤免疫疗法中 第一个具 有临床潜力的免疫检查点。CTLA-4 主要通过与 CD28竞争性结合以及调节 B7-1 （又名 CD80）和 B7-2（又名 CD86）为 T 淋 巴细胞积极传递抑制信号来调节 T 淋巴细胞活 化早期阶段的强度。CTLA-4被认为处于免疫检 查点抑制剂的“领袖”位置，其在幼稚 T 淋巴 细胞活化的初始阶段可阻滞潜在的自身反应性 T 淋巴细胞增殖。临床前研究发现，抑制 CTLA-4可导致 T 淋巴细胞增殖速度加快 1.5～
1 T淋巴细胞在肿瘤免疫疗法中 的作用
T 淋巴细胞、自然杀伤（NK）细胞、细胞 因子诱导的杀伤细胞（CIK）、树突状细胞 （DC）和DC-CIK等细胞均具有一定的抗肿瘤 活性，但机体肿瘤免疫疗法的核心执行者为 T 淋巴细胞。T 淋巴细胞的作用是区分“自我” 和“非自我”的抗原，有助于去除“非自我” 抗原，但可能会过度激活免疫系统并对“自我” 抗原造成损害。因此，应增强 T 淋巴细胞识别 肿瘤相关抗原为“非自我”的潜力并消灭肿瘤 细胞。
的治疗，如原发性脑瘤、脑转移瘤和前列腺恶 性肿瘤等
免疫抑制细胞可产生有利于肿瘤细胞生长的 肿瘤微环境，限制 T 淋巴细胞的功能。决定肿 瘤免疫疗法效果的关键在于能否充分调动 T 淋 巴细胞的功能。以免疫检查点疗法和嵌合抗原 受体 T 细胞免疫疗法（CAR-T）为代表的肿瘤 免疫疗法均能显著提高患者的生存质量，延长 生存期。
T 淋巴细胞分泌的白细胞介素 2（IL-2） 在治疗黑色素瘤中显示出较好的疗效，从而促 进了机体免疫对抗肿瘤的免疫疗法的研究。随 后的研究发现，一些肿瘤特异性抗原存在于不 同类型的肿瘤患者体内，能被 T 淋巴细胞识别， 并特异性杀伤肿瘤细胞。T 淋巴细胞能穿透复 杂的血脑屏障（BBB）， 在整个机体中迁移， 故 T 淋巴细胞对大部分转移性疾病有着理想的 治疗作用。这种有效的组织穿透特性使得 T淋 巴细胞可以用于一般药物难以到达的病灶部位
2 免疫检查点疗法
免疫抑制细胞因子和生物活性分子均可抑 制 T 淋巴细胞功能。T 淋巴细胞、肿瘤细胞与 肿瘤微环境中的其他细胞之间的相互作用可激 活免疫检查点，肿瘤利用免疫检查点通路进行 免疫逃避。因此免疫检查点疗法重点是抑制免 疫检查点的功能。研究发现，仅有 T 淋巴细胞 受体（TCR）信号并不足以产生对外来抗原的 T 淋巴细胞激活，还需要其他分子的参与，即 第二信号共刺激分子的作用。免疫抑制性受体 /配体对或一系列共刺激受体/配体对调控免疫
2.3 LAG-3
LAG-3又名 CD223，是免疫球蛋白（Ig） 超基因家族的一员，在 T 淋巴细胞功能中发挥 多种生物影响，主要表达于活化的CD4和CD8 T 淋巴细胞中。LAG-3结构与CD4表面分子高度 同源，与 CD4一样与 LAG 和 MHCⅡ结合，但 LAG-3的结合更密切。在各种类型的肿瘤中均 可观察到 LAG-3的表达，LAG-3抗体在肿瘤免 疫治疗中有很大的研究潜力。
2倍，IL- 2生产速度加快 6倍。CTLA-4抑制剂 对小鼠卵巢、膀胱、脑肿瘤和纤维肉瘤等均有 具有抗肿瘤作用，而阻断 CTLA-4对 B16黑色 素瘤、SM1乳腺癌、EL4淋巴瘤、M109肺癌和 MOPC-315浆细胞瘤模型均无效。
2.2 PD-1及其配体
PD-1又名 CD279，与 CTLA-4有着相似的 T 淋巴细胞负反馈调节作用，CTLA-4在免疫应答 的早期阶段发挥着不可或缺的作用，而 PD-1和 PD-L1于免疫应答的后期阶段在组织部位发挥作 用以限制 T 淋巴细胞功能。PD-1主要调节正在 进行免疫反应的组织和肿瘤内的效应 T 淋巴细 胞活性。
系统，维持自身免疫攻击和清除肿瘤间的平衡。 免疫检查点为抑制性配受体通路，通常在保持 自我耐受性、调节 T 淋巴细胞反应的幅度和持 续时间以及防止组织损伤方面起着重要作用。 其中，肿瘤免疫逃逸的主要机制为通过免疫检 查点通路逃避识别肿瘤特异性抗原的 T 淋巴细 胞免疫应答。检查点抑制剂的主要目的是解除 免疫系统的抑制，使免疫系统恢复正常功能并 攻击肿瘤细胞。近年来，研究较为透彻的免疫 检查点有 CTLA-4、 PD-1及其配体、LAG-3和 TIM-3。