低氧细胞培养工作站---华仪行(北京)科技有限公司学习资料
细胞培养用的仪器
细胞培养用的仪器
细胞培养用的仪器包括细胞培养皿、细胞摇瓶、细胞计数器、离心机、PCR仪等。
这些仪器的作用分别是：
1. 细胞培养皿：用于细胞培养的实验室器具，一般由玻璃或塑料制成，形状为圆形或方形，用于观察细胞生长和繁殖的情况。
2. 细胞摇瓶：一种用于细胞培养的器具，由玻璃或塑料制成，形状为细长形，内装有细胞和培养基，通过摇晃可以使细胞得到充分的营养和氧气。
3. 细胞计数器：一种用于细胞计数的仪器，可以准确地测定细胞数量，帮助研究人员了解细胞生长和繁殖的情况。
4. 离心机：一种用于分离和纯化细胞的仪器，通过高速旋转将细胞和其他物质分离，可以用于细胞分离、洗涤和浓缩等操作。
5. PCR仪：一种用于DNA扩增的仪器，通过PCR技术可以将特定的DNA片段在短时间内大量扩增，用于基因克隆、突变分析和疾病诊断等领域。
这些仪器在细胞培养实验中是必不可少的，可以帮助研究人员更好地了解细胞生长和繁殖的情况，以及进行基因克隆和疾病诊断等研究工作。
细胞低氧培养条件-概述说明以及解释
细胞低氧培养条件-概述说明以及解释1.引言1.1 概述细胞低氧培养是一种实验技术，通过调节细胞培养条件中的氧气浓度，模拟体内低氧环境，以研究细胞在缺氧条件下的生物学特性和生理功能。
在正常的细胞培养条件下，氧气浓度通常为20，而在体内某些组织或病理状态下，氧气浓度可能会降低。
针对这种低氧环境，细胞低氧培养技术可以提供一种便捷的方法来模拟体内环境，以更好地研究细胞应对低氧环境的生物学反应。
细胞低氧培养条件要求精确控制培养液中的氧气浓度，一般通过混合不同浓度的氮气和空气来实现。
根据研究需求，可以调整氧气浓度在1-20之间，模拟不同程度的低氧环境。
此外，为了保持低氧条件的稳定性，还需要使用密闭的培养系统，并定期检测和调整氧气浓度。
细胞低氧培养条件对于许多研究领域都具有重要意义。
在癌症研究中，低氧环境常常与肿瘤生长、进展和治疗耐药性有关。
通过模拟低氧环境，可以深入了解肿瘤细胞在缺氧条件下的生存机制和代谢适应。
此外，细胞低氧培养条件也对心血管疾病、神经退行性疾病等研究领域具有重要意义，这些疾病在发展过程中常与低氧环境有关。
综上所述，细胞低氧培养条件是一种重要且有效的实验手段，用于研究细胞在低氧环境下的适应机制和生物学特性。
这种技术不仅可以帮助我们更好地理解细胞生命活动的本质，还有助于揭示低氧环境在疾病发展中的作用机制。
因此，掌握和应用细胞低氧培养条件技术对于推动相关领域的研究具有重要的意义。
1.2 文章结构文章结构部分的内容可以参考以下模板：文章结构本文将按照以下结构展开论述细胞低氧培养条件的要点。
首先，引言部分将对本文的概述、文章结构以及目的进行介绍，为读者提供一个整体的框架。
接着，在正文部分将详细讨论细胞低氧培养条件的要点。
主要包括细胞低氧培养条件要点1和细胞低氧培养条件要点2。
最后，在结论部分将对本文进行总结，并对未来研究方向进行展望。
通过这样的结构安排，读者能够清晰地了解细胞低氧培养条件的相关要点，并获得对未来研究的启示。
细胞培养常用设备及实验技巧
细胞培养常用设备及实验技巧常用设备准备室的设备：单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品规（放置消毒过的物品）、包装台。
配液室的设备：扭力天平和电子天平（称量药品）、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。
培养室的设备：液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80℃）、空调、二氧化碳缸瓶、边台（书写实验记录）。
必须放在无菌间的设备：离心机（收集细胞）、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱（孵育培养物）、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱（放置serum和培养用液）。
无菌操作无菌室的灭菌：1.定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.5％过氧乙酸擦拭。
2.CO2孵箱（培养箱）灭菌：先用3‰新洁尔灭擦拭，然后用75％酒精擦拭或者0.5％过氧乙酸，再用紫外灯照射3.实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟4.实验后灭菌：用75％酒精（3‰新洁尔灭）擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台。
实验人员的无菌准备：1.肥皂洗手。
2.穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋3.用75％酒精棉球擦净双手。
无菌操作的演示：1.凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75％酒精擦拭瓶子的外表面2.靠近酒精灯火焰操作。
3.器皿使用前必须过火灭菌4.继续使用的器皿（如瓶盖、滴管）要放在高处，使用时仍要过火。
5.各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。
如吸管不能碰到废液缸。
6.吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。
器械的清洗和消毒玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：1.自来水刷洗，除去灰尘。
2.烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物。
3.刷洗、烘干：12小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干。
氧分析仪日常维修保养
氧分析仪日常维修保养1.清洁仪器：定期清洁仪器是保证准确测量的前提。
可用软布蘸取少量酒精或清洁剂，轻轻擦拭仪器表面和探头。
切勿使用水直接清洗，以免进水导致短路或损坏仪器。
2.校准仪器：准确的测量结果需要经常进行校准。
通常，仪器会配备校准气体供校正使用。
根据仪器说明书，按照指引步骤进行校准。
一般校准频率为每月一次，或根据实际使用情况而定。
3.检查传感器：传感器是仪器的关键部分，用来测量氧气的浓度。
定期检查传感器的状态，确保传感器的表面清洁，没有污渍或氧化物。
如有发现，可使用温和的清洗液进行清洁，并确保彻底晾干后再使用。
4.检查电源：电源是仪器的核心部分，提供仪器运行所需的能量。
检查电源线和插头是否正常，确保电源线不受损。
如果发现线路受损，应及时更换。
此外，保持电源线通风良好，避免遮挡或受热。
5.定期维护：除了日常的清洁和校准，仪器还需要定期进行维护。
这包括更换传感器、滤清器、密封圈等易损件，以及检查仪器内部的电路和连接器是否正常。
根据仪器说明书，参照维护手册的指引进行维护。
6.配件更换：根据仪器需要，及时更换和维修配件。
如传感器老化失效、滤清器阻塞或密封圈破损等。
避免因配件的失效导致仪器的测量结果出现不准确或其他问题。
7.存放和保护：当仪器暂时不使用时，应将其存放在干燥、通风和清洁的环境中，避免阳光直射和潮湿。
定期检查存放环境是否符合要求，以免对仪器的正常运行产生影响。
维修保养时需要注意的事项：1.请严格按照仪器的使用说明进行操作，避免人为失误导致仪器损坏。
2.保持维修保养记录，记录维护时间、维护内容和维护人员等信息，方便追踪维修历史和及时发现潜在问题。
4.当发现仪器出现故障或损坏时，应及时报修或更换，不要擅自进行修理以免进一步损坏。
氧分析仪的维修保养工作对于仪器的正常运行和准确测量结果至关重要，希望上述建议能对您有所帮助。
Electrotek厌氧工作站PPT细胞低氧汇编
※ 影响神经、循环、呼吸系统，造成各种疾病。
ELECTROTEK
低氧生物模型概述
研究低氧的意义： 1、灾害救助
ELECTROTEK
低氧生物模型概述
研究低氧的意义： 2、高原症研究
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低氧生物模型概述
研究低氧的意义： 3、军事医学研究
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低氧生物模型概述
研究低氧的意义： 4、肿瘤研究
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Electrotek厌氧/微需氧工作站特点
1、裸手操作—简捷精确
只需裸露双手就可操作，操作者手腕周围有空气 密封垫，可保持低氧环境，无需影响操作手感的 橡胶手套，极大地提高了操作人员的精细操作。 消除了脚踏开关，去掉了内门设计，能够提供更 大有效工作空间，并最大程度地简化了操作。 使用气体更加节省，操作人员可在数秒内将手伸 入工作台内。
ELECTROTEK
低氧生物模型概述
细胞低氧方法 1、环境低氧 2、低糖、无血清培养（灌流）液 3、与空气隔绝 4、中断呼吸链 氰化物、硫化氢、磷、砷化物 细菌毒素、放射线 通常O2浓度：5%，特殊O2浓度：2% 无血清培养基，低糖培养基
ELECTROTEK
低氧生物模型概述
细胞低氧方法 1、环境低氧 2、低糖、无血清培养（灌流）液 3、与空气隔绝 4、中断呼吸链 由于低氧作用全面而常被采用 应用面狭小，只作特殊细胞低氧研究 试验重现性较差，很少使用 放射性、毒性物质不易获得，使用保管 程序繁琐，很少使用
六面均采用高性能的透明材料，确保操作观察视 野的高通透性及良好的耐用性。 操作孔采用30°斜角的人体工学设计，让操作人 员的双手更加舒适地操作，消除长时间操作而引 起的职业疲劳。 保护剂模块设计专用的支架，便于快速更换。 内部科学合理布局，有效利用每寸空间，绝无任 何操作死角！
细胞培养实验室的设备配置及用途
细胞培养实验室的设备配置及用途以下是一个典型细胞培养实验室的设备配置及其用途：1.生物安全柜：生物安全柜是细胞培养实验室的核心设备，用于提供无菌和安全的实验环境。
生物安全柜分为三个级别，根据需求可以选择不同级别的生物安全柜。
2.培养箱：培养箱是用于维持细胞培养所需的适宜环境条件，例如恒定温度（通常在37摄氏度），适宜的湿度和二氧化碳浓度。
培养箱通常配备有温度、湿度和CO2的控制器，以确保细胞在适宜的培养环境中生长。
3.倒置显微镜：倒置显微镜是观察和检测细胞培养过程中的细胞形态、生长状态和细胞染色等的重要设备。
4.细胞培养罐：细胞培养罐是用来培养细胞的容器，通常分为培养瓶和培养皿两种。
培养罐通常由无菌塑料材料制成，能够提供适宜的培养条件和保护细胞。
5.离心机：离心机用于离心培养细胞和沉淀物，以便进行培养基的更换、细胞分离和沉淀物的收集等操作。
6.显微镜：显微镜用于观察细胞培养的细胞形态、细胞分裂和细胞染色等。
7.细胞离心机：细胞离心机是用于从细胞培养物中分离细胞、细胞沉淀和细胞富集的设备。
8.培养箱温度计和湿度计：用于监测培养箱中的温度和湿度，以保持适宜的培养环境。
9.细菌培养箱：用于细胞培养实验室中的细菌菌种的保存和培养。
10.无菌工作台：无菌工作台是一个封闭的工作空间，提供无菌环境，用于处理无菌操作和培养物的分装、传递和传染性较强的试样的操作。
11.水培养装置：水培养装置用于提供无菌水用于培养细胞。
12.酶消化仪：酶消化仪用于将培养物中的细胞分离成单个细胞，以便后续的实验操作。
13.细胞计数仪：细胞计数仪用于计算培养物中细胞的数量。
14.PCR仪器：PCR仪器用于进行细胞培养实验中的基因表达、基因检测和基因定量等相关实验。
15.洗鼓机：洗鼓机用于将细胞从细胞培养物中剥离，以便后续操作。
细胞低氧培养舱安全操作及保养规程
细胞低氧培养舱安全操作及保养规程细胞低氧培养是一种生命科学中常用的技术，可供研究各种细胞生长和功能的变化，尤其是在心肌、肺、血液、肝脏和肾脏等器官组织中，缺氧环境下的细胞行为更为活跃。
为了保证低氧环境下细胞培养舱的使用安全与长期维护，特制定本规程，希望相关人员严格遵守。
一、细胞低氧培养舱的安全操作1. 细胞低氧培养舱在使用前的注意事项1.确保人员已经完成与低氧培养技术有关的培训，获得低氧操作特批，熟练掌握低氧环境下设备的操作。
2.使用前，应仔细检查低氧培养舱的各个配件是否齐全、完好，如有损坏或缺件应及时与维修人员联系。
3.在操作细胞低氧培养舱时，必须穿戴手套、口罩、防护眼镜，佩戴实验服和安全帽，确保个人身体健康。
2. 细胞低氧培养舱的操作流程1.在进行操作前，必须关闭培养箱电源并打开气源，释放培养箱的压力，等待3-5分钟使氧浓度降至低氧环境。
2.打开培养箱门，将需要操作的物品放入透明的低氧培养皿中，尽量避免皿内出现气泡。
3.将低氧培养皿装入培养板中，并将培养板放入培养舱的舱内，稍微摇晃培养板使低氧培养皿尽量均匀地散布于培养舱中。
4.关闭培养箱门，设定培养舱的温度、湿度、氧气含量等参数，并启动培养箱电源。
5.在操作结束后，应将培养舱的电源关闭，将气源接口拔掉，待气压降至常温后，再打开培养箱门取出低氧培养皿。
3. 细胞低氧培养舱的注意事项1.在进行操作前，应注意确保培养箱的内部清洁，避免污染低氧环境，以免对细胞生长产生不良影响。
2.操作人应尽量避免在低氧环境下打喷嚏、咳嗽、异味等现象，可事先进行防护措施以避免污染环境。
3.在操作时，应注意低氧环境下可能存在的问题，如氧气含量不正确，培养箱内部压力异常等问题，必须及时进行排查和处理，避免对细胞生长产生不良影响。
4.操作结束后，应注意及时清理培养舱内部的水肥、培养皿等物品，保持设备的整洁和卫生。
二、细胞低氧培养舱的保养规程为了确保细胞低氧培养舱的长期运转，减少维修成本和保障样品的稳定性，必须按照下列保养规程进行操作：1.定期检查细胞低氧培养舱的框架、门、电气设备等部分是否有锈蚀、松动、变形等现象，并及时维修或更换部件。
血培养仪器培训之理论部分
血培养仪器培训之理论部分1、原理：微生物在培养瓶中生长产生CO2，CO2激活了包埋在培养瓶底部的荧光物质，荧光物质在发光二级管的照射下被激发出荧光，培养孔位底部的荧光探测器探测到荧光并将数据传递到后部的微处理器，微处理器通过预设的一系列运算模式计算出荧光值；荧光值的强弱与CO2浓度成正比，而CO2浓度又与微生物浓度成正比，这样通过CO2这一中间物质将荧光强度与微生物浓度关联起来，荧光值越强，微生物浓度越高，反之亦然。
2、培养瓶种类：三类七种培养瓶1）标准瓶：标准需氧瓶（血站、血液中心用）标准厌氧瓶（血站、血液中心用）2）树脂瓶：树脂需氧瓶（医院临床用）树脂厌氧瓶（医院临床用）树脂儿童瓶（医院临床用）树脂的功能：1．树脂最大的功能是吸附抗生素。
树脂瓶中有两种树脂，白色的叫阳离子交换树脂，褐色的叫共价吸附树脂，一个起化学吸附作用，一个起物理吸附作用，通过这两种吸附作用，树脂可以在极短的时间内将标本中抗生素的浓度降至接近于零的水平2．裂解血细胞。
如果裂解的是红细胞，可以将红细胞中的营养物质释放出来供微生物生长利用，其原理跟血平板与巧克力平板的关系一样；如果裂解的是白细胞，可以将被白细胞中吞噬的微生物释放出来，提高阳性检出率。
3．为微生物生长提供了广大的附着表面。
树脂用肉眼看表面是光滑的，但在高倍镜下观察表面是坑洼不平的、镂空的，打个比方就像一个核桃，如果将一个树脂瓶中所有树脂的表面积展开，可达5个标准足球场的面积。
4．涂片染色镜检时不会对观察背景造成干扰。
由于树脂本身无色透明、染色时又不着色，因而在涂片染色镜检时不会对观察背景造成干扰，从而避免了实验室初学者对观察结果产生误判。
3）含溶血素瓶：含溶血素厌氧瓶1. 厌氧瓶不仅可以培养厌氧菌还能培养兼性厌氧菌。
2. 研究数据表明有16%的链球菌和17%的肠杆菌科的细菌仅对厌氧瓶报阳，如果不用厌氧瓶就会对这部分微生物造成漏检。
含溶血素分枝杆菌/真菌培养瓶1. BD所有的需氧瓶都能培养真菌，之所以要用这一专业的真菌瓶是为了培养苛养的真菌，比如丝状真菌。
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低氧细胞培养工作站
超凡卓越!
简洁、高效、实用
低氧研究案例细胞生长
经证实，减少培养箱内氧气含量水平可以增强干细胞和祖细胞繁殖率。
实验结果发现，低氧
状态下细胞每阶段的平均扩增约为9倍，而相反在氧气含量为20%的条件下，细胞每阶段的扩增只
有5倍（Fig. 1A）。
在超过6周的培养中，在低氧（470,000 vs 16,000）环境中hMSCs 细胞扩增近30倍（Fig. 1B）。
而hMSCs细胞在低氧环境下培养，5天内在低氧状态下细胞扩增数量和常氧状态下扩
增数量并没有显著的区别，但是到第7天两者的细胞数量有了显著区别（Fig. 1C）。
时间（天）
Fig 2水在空气和氧气中细胞的初级增长
基因表达
Figi. （A）第7天时细胞数量(B) hMSCs 细胞扩增(C) P4 hMSC 增长曲线图(n=4; *p<0.05) 细胞数（logio）
1DUS
in
10
・H
Q'
4 7
its?
fe 4( Lure
在空气和氧气中细胞的初级增长
在仅一天的低氧培养（H:N=1.3）后hMSCs （ Fig. 3A and B ）中Oct ・4 mRNA 水平升高，该数据在随后的3・7天内持续显 著升高，第5天达到峰值（H:N=4.2）。
我们早期的研究观察到低氧 hMSCs 中Oct ・4值
较高，并且在氧气含量为
1・5%时，培养的胚胎干细胞也可得到相似结果。
Oct ・4表达增强是胚胎干细
胞多能性试验中一种确定的指示剂。
该推论也可适用于成人干细胞群。
N
H
14
7
14
7
Oct-4
GAPDH
» MO VM
Fig 3
（ A ）在常氧（N ）和缺氧（H ） P4 hMSCs 状态下Oct ・4表达。
（B ） Oct ・4和HIF ・2a （n=4 ; ★数据
显示高于第0天；数据显示高于第1天）与qPCR 表达等级的相尖性。
分化和细胞形态
逬行缺氧培养（Fig.4A 和B ）时，联接蛋白43水平明显升高。
使用膨胀介质进行单层培养11天时，在低氧hMSCs 中 观察到联接蛋白43表达增长显著。
（Fig. 4E 和F ）
Ctfirlrsili U
Fig 4.常氧状态（A ）和缺氧状态（B ）下联接蛋白43的表达。
hMSCs 相位对比图像显示在培养过程中细胞形态的变化。
在常氧（
11
E ）和低氧（
F ）状态下。
低氧 高氧气
高二氧化碳正常碳氧产
低氧细胞培养工作站
有效控制培养箱内氧气和二氧化6炭，适用于任何反应
箱 品特点：氧气控制 独立二氧化碳控制 隔绝污染
数值记录（记忆卡）中控系统编程（可选）
5CM-O2CO2 GCM-O2E
/3.12kg 0.82kg 0%/0.1 〜30% 0~100%/0.1~100%
:0%/0.1~20% 不适用
40-123%/ 0-100% -40-123%/0-100%
解析度 0.1%
02
控制允差 设定值范围
+/-0.2%内范围在0・
30%内增量 0.1%
不适用
C02控制允羌 不适用
不适用
02
精确度 +/- 2% FSD @ 20C （68F ） ,1bar 压
力，应用气体2.5%的
甲醛体积
不适用
C02
精确度 不适舟
温度/湿度/精确度* +/-0.4 C , +/-3.0% RH
+/-0.4 C , +/-3.0%
RH
+/-0.4 C , +/-3.0%
RH
+/-0.4 C , +/-3.0%
RH 运行温度范围 -20-50C
02传感器寿命 1年
不适用
1年
1年
数据保存（USB
内存） 有 中央监视器（可选） 有
功率 85-264VAC / 50W 气压 0.8 bar(12psi)~ 1bar(15psi)
优化的自控能力 可选：所有EXL 导航仪均配有温度传感器和湿度传感器。
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安装案例：R&D中心细胞疗法。