固始鸡白细胞介素18全基因的克隆与序列分析
鸡白细胞介素18全长基因的克隆、表达及分子进化分析
收 稿 日期 ：０ ５ ０ — ５ ２ ０ — ６ １
基金项 目： 国家 “６ ” 科 技 研 究 发展 计 划 资 助 （０ －９ — ２ 。 江 省 重 点 科 技 项 目 （ ｌ １２ ６ ）浙 江 省 自然 科 学 基 金 重 ８３高 １ １ｊ９ ０ ）浙 ０ １０ ４ ５ ，
大项 目（ｏＺ ００ ） Ｎ ． Ａ １５
化分析表 明萧 山鸡 儿．８基 因与火鸡 以及家鸭基 因形成一个独立 的分支 。将 萧山鸡 尼一８成熟蛋 白序 Ｊ Ｊ
列插入 ｐ Ｅ Ｔ２载体并在 Ｅｃ ｌ中得到表达 ， Ｇ Ｘ４ ． ｏ ｉ 获得 ４ Ｄ的 Ｇ ＴＩ ｌ ５ｋ Ｓ ． 广 ８融合蛋 白 。 Ｌ 经纯化后 用于制备
多克 隆抗体 。 本研究 对萧山鸡 白细胞介素 ｌ ８的全长基 因进行 了克 隆及表达 ， 并对其分 子进化 进行 了分
２ Ｉｓｔｔ ｏ ｒｖｎｉ ｅｅ ｎｒ ｄｃｎ ，ｈｊ ｎ ｒｖ ｃ ｅ ｂｒｔ ， ａ ｇｈ ｕ３ ０ ２ ， ｈｎ ； ．ｎｔｕｅ ｆ ｅｅｔ ｅＶ ｔ ａｙＭｅ ｉ ｅＺ ｅ ａｇｐｏｉ ｉ ｋｙｌ ｏａ ｒ Ｈ ｎ ｚｏ ０ ９ Ｃ ｉａ ｉ Ｐ ｖ ｉ ｒ ｉ ｉ ｎａ ｌ ａ ｏ ｙ １ ３ Ｍｅ ｉ ｏ ｅｅ ｆ ｈｈｚ Ｕ ｉｅ ｉ ， ｉｊ ｎ ｈｈｚ ８ ２ ０ ， ｈｎ ） ． ｄｃ Ｃ ｌ ｇ ｉｅｉ ｎｖｒ ｔ Ｘ ｎｉ ｇ ｉｅｉ ３ ０ ２ Ｃ ｉ ｌ ａ ｌ ｏＳ ｓ ｙ ａ Ｓ ａ
基 因（ ｅｂ ｎ ｃｅｓ ｎ Ａ ６ ８ ４ ） Ｇ ｎ ａ ｋａｃｓｉ ， Ｙ ２ ６ ８。扩增 片段全长 ５ １ ｐ 共 编码 １７个氨 基酸的前体 蛋 白， 中含 ｏ ９ ， ｂ ９ 其
有表达完整功 能蛋 白所必需 的起始密码子 和终 止密码子。该序 列与国外报道 的鸡 尼一８全长 基因核苷 』 酸序列及推导 的氨基酸序 列的同源性为 ９ ． ％， ８ ９ 只在引导序 列中出现两个 氨基酸残 基的缺失 ， ９ 分子进
鸡自介素-18与鸡α-干扰素融合蛋白克隆及其原核表达载体的构建
测序结果表明获得 了阅读框完整、 连接部位正确的ｍ Ｃ ｈ ｌ Ｌ 一 １ ８ ／ ｍ Ｃ ｈ ｌ Ｆ Ｎ — Ｏ Ｌ 融合分子 Ｄ Ｎ Ａ 。将所克隆 湿性 关 节 炎 等方 面 有着
等细胞 因子 ～ １ ， 增强Ｆ ａ ｓ 介导的细胞毒作用 】 ， 促进 Ｔ 细胞
潜在的应用前景 。Ｉ Ｌ 一 １ ８ 在结构上 与Ｉ Ｌ 一 １ 很相似 ， 但两
表３ １ ０ 种药物的药敏试验结果
［ ２ ］ Ａ ． Ｄ ． 莱曼． 猪病学【 Ｍ】 ． 张文军译． 第 六 版． 北京 ： 北 京 农业 大 学 出版社 ． １ ９ ９ ０ ．
［ ３ 】 吴硕显． 猪的链球菌与链球菌病 Ｉ Ｊ １ ． 养猪 ， ２ ０ ０ ６ ，
（ ５ ） ： ４ ３ — ４ ４ ．
［ ４ ］ 孙顺友． 猪链球菌病的综合诊断与防制［ Ｍ］ ． 畜牧
与 饲料科 学 ． ２ ０ ０ ９ ， ３ ０ （ ２ ） ： １ ７ ７ — １ ７ ８ ． 【 ５ ］ 郑 灵巧 ． 猪 链球 菌研 究 进展 改变 救治 原则 【 Ｊ ］ ． 动 物
医学进 展 ， ２ ０ ０ ９ ， ３ ０ （ ９ ） ： １ ５ － １ ８ ．
３ 结 论
［ ６ ］ 房海 ， 陈翠珍． 畜禽致病性细菌对抗菌类 药物 的体外敏 感 性测定 方法 ［ Ｊ ］ ． 河北 科技 师范学 院学报 ， １ ９ ８ ８ ， ２ （ ２ ） ：
７ ９ － ８ ５ ．
经流行病学， 临床诊断、 实验室诊断及动物接种试验 ，
固始鸭白细胞介素-18全基因克隆与分子进化分析
９． ８８％ ． ９８ ％ ｎ ｃｅ ｔ ｅ ｈ ｍｏｏ ｙ ａ ｄ ９ ． ％ 一９５ ％ ａ ｎ ｃｄ ｈ ｍｏｏ ｔ ｔｅ ｕ ｋ Ｉ － ８ ｇ ｎ ｓ（ ｃ ｅｓ ｎ Ｎｏ ９． ｕ ｌｏｉ ｏ ｌｇ ｎ ７５ ｄ ９． ｍｉｏ ａ ｉ ｏ ｌｇ ｗｉ ｏｈ ｒｄ ｃ Ｌ １ ｅ ｅ ａｃ ｓｉ ． ｙ ｈ ｏ
Ｓ ｐ ２ ０ ｅ． ０ ７
固始 鸭 白细胞 介 素 一 １ ８全基 因克隆 与分 子进化 分 析
陈红 英 １，李 新 生 ，崔保 安 － ，夏 平 安 ・ ， ２ ，赵 丽 －， 方 丽云 － 一
（． １ 河南 农业 大学 牧医 工程学 院 ，河南 郑 州 ４ ０ ０ ；２ 河南 省动物 性食 品安 全重 点实验 室 ，河南 郑 州 ４ ０ ０ ） ５０ ２ ． ５０ ２
ＣＨＥＮ ｎｇ ｙ ｎ ，ＬＩＸｉ — ｈ ｎｇ ，ＣＵＩＢａ ａ ＸＩ Ｐ ｎ ａ ，ＺＨＡＯ 。 ，Ｆ Ｈｏ － ｉ ｇ ’ ｎｓｅ ｏ－ｎ ’ ， Ａ ｉ ｇ－ｎ。 Ｌｉ ＡＮＧ — ｕ 、 Ｌｉｙ ｎ
（ ． ｏ ｌ ｅｏ ｎ ｍａ Ｈｕ ｂ ｎ ｒ ｎ ｔｒ ａｙ Ｈｅ ａ ｒ ｕｔ ｒｌ ｎ ｖ ｒｉ ， ｈ ｎ ｚ ｏ ５ ０ ２ Ｃ ｉａ １ Ｃ ｌ ｇ ｆＡ ｉ ｌ ｓ ａ ｄ ｙ ａ ｄ Ｖｅｅｉ ｒ ， ｎ ｎ Ａｇｉ ｌ ａ ｉｅｓ ｙ Ｚ ｅ ｇ ｈ ｕ ４ ０ ０ ， ｈｎ ； ｅ ｎ ｃ ｕ Ｕ ｔ
鸡白细胞介素18研究进展
安徽农业科学 ，ｏｒａ ｏＡｎｕ Ｊｕｎｌ ｆ ｈｉ
．ｃ．０８ ３ （６ ：７６—６７ Ｓｉ２０ 。６ １ ）６７ ７７
责任编辑
孙红忠
责任校对
况玲玲
鸡 白细 胞 介 索 １ ８研 究 进 展
王宪文 ， 刘兴友 王 岩２杭柏林 ， ，
ｔｏ ｆＩＮ－￣ｍｍａｗ ｉｈｈ ｓｔｅｅ ｅ ｔ ｎ ｏ ｎｉｉｆｃｉｎ ｐ ｍｏｉｇｇｏ ｈ， ｖｌｉｇｉ ｉｎ ｔ ｉ ｉｎ ｏ Ｆ ｔ ｈ ｃ ａ ｈ ｆ ｃｉ ｆａ ｔ ｎｅ ｔ ， ｒ ｏ — ｏ ｏ ｔ ｒｗｔ ｉ ｏｖｎ ｎ ｎ ａ ｍｍｕ ｅｒｓｏ ｓ ｓｔ ｎ ｎ ｅ ｎ ｅ ｐ ｎｅ ｏｍｉｒｂａ ｎｅ ｔ ｎ ｐｅ ｅ ｉｇｔｅｉ— ｃｏ ｉｌｉｆ ｉ ｒｃ ｄｎ ｈ ｎ ｃ ｏ
ｃ ｄ ｉ ａ ｉｅ ｗ 山 ａｍｏｅ ￣ａ ｗｅｇ ｔ ｆ ． Ｄａ．ｈ ｌｃ ｒ ｉｈ ２ ０ ｋ ｏ３ ｔｅＮ－ｅｍｉａ ９ ａ ｎ ｃｄｐ ｐｉｅｄ ｔｒ ｎ ｎｒｃ ｌ ａ ｉｔｉｕｉｎｏ １，１ ａ１ｌ ８Ｃ ｉｄ ｃ ｅ ｒ— ｔｒ ｎ ｌ２ ｍｉｏａ ｉ ｅ ｔ ｅｅｍｉｅｉｔａ ｅＭ ｒｄｓｒｂ ｔ ｆ Ⅱ ８． ｌ ａ ｎ ｕ ｅ￥ｃ ｄ ｏ Ｃｌ ，１ ｎ ｅ
ｄ ｃｏ ｆ ｏ ｌｌｒ ｄｈ ｎ ｒｌｌＴｌｅｒｓｏｓｓＡ ｌｉｍｌｅａｊｖｎｓ Ｃ ｌ－８ｉ ｉ ｔｏｔ ｎａｏ， ｏｅｖｒａｄｉｃｌｉｄｃ ｎｅ ｅｔ ｅａ— ｕｔ ｎｏｂ ｔ ｃ ｌ ａ ｕ ￣ａ ｉｉ ｎ ｐｎｅ ．ｓａ ｌ ｄｕａｔ，ｈＬ １ ｉ ｈｅ ｕ ａ ｎ Ｄ ａ ｅ ｌｍ ｌ ｌ ｓｍｍｍ ｓｉ ｌｔ ｍ ｒｏｅ， ａｌｎｕ ｅ ｃ ｉ ｍ ｒ ｎ ｔ ａ ｆ ｖ ｎ
ｔ— ｌ Ｏ ｎｌｌａ ｅ ｐ ｎ ｅ ｉ ｈ ｃ ｅ ｉ ｔ ｌ ｒ ｉｌ ｌ ｅ ｒ ｓ ｓ ｃ ｉ ｋ ｎ． Ｕｌ ｎｌ ｏ ｎ Ｋｅ ｗｏ ｄ Ｃｈ Ｌ １ Ｉ Ｎ－ Ａｎ ｉｉｆ ｔｏ ｙ ｒ ｓ Ｉ － ８；Ｆ ｙ； ｔ ｎ ｅ ｉｎ — ｃ
鸡IL—18和IFN—γ协同抗病毒机制分析
鸡IL—18和IFN—γ协同抗病毒机制分析作者：李晓婷宋佰芬王歆桐王梦瑶余崴马金柱于立权崔玉东来源：《安徽农学通报》2017年第11期摘要：禽病毒性疾病如禽传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease，IBD）一直困扰着养禽业的健康、快速发展。
在其他抗病毒感染的药物效果不理想时，有必要应用细胞因子制剂来改善机体免疫并提高抗病毒能力。
已证明，鸡白细胞介素18（Chicken interleukin-18，ChIL-18）和鸡干扰素γ（Chicken interferon，ChIFN-γ）对多种病毒感染具有抑制作用。
为了研究新型细胞因子制剂，该实验分析了鸡白细胞介素18（Chicken interleukin-18，ChIL-18）和鸡干扰素γ（Chicken interferon，ChIFN-γ）以及二者混合后的抗病毒机制。
ChIL-18和ChIFN-γ蛋白注射雏鸡后7d内，应用试剂盒检测雏鸡体内血清中细胞因子的变化情况。
利用鸡外周血单核细胞分析ChIL-18和ChIFN-γ对细胞内NO、几种Toll样受体（Toll-like receptors，TLR）及下游信号通路的影响。
实验结果表明，混合组蛋白可刺激雏鸡血清中产生高水平IL-6，IL-12，及IL-17。
混合组蛋白可以诱导巨噬细胞中NO的分泌水平显著升高，TLR 2、TLR 3、TLR 4和MHC-II的表达量升高，MAPK和NFκB信号通路被激活。
综上结果表明，ChIL-18和ChIFN-γ以及二者协同可诱导机体对病毒感染产生有效的防御作用，为新型细胞因子制剂的研究提供参考。
关键词：鸡白细胞介素18；鸡干扰素γ；抗病毒；免疫调节中图分类号 S855.3 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2017）11-0040-07Synergistic Antiviral Mechanism of Chicken IL-18 and IFN-γLi Xiaoting1 et al.（1College of Animal Science and Technology，Heilongjiang Bayi Agricultural University，Daqing 163319，China）Abstract：The healthy and rapid development of poultry industry was troubled by avian viral diseases such as Infectious Bursal Disease（IBD）. With other anti-viral drug effect is not ideal，it is necessary to use cytokine preparations to improve the immune system and improve the anti-virus ability. Chicken interleukin-18 （ChIL-18）and chicken interferon gamma（ChIFN-γ）have been shown to inhibit a variety of viral infections. In order to study the novel cytokine preparations，the effects of ChIL-18 and ChIFN-γ and th e two mixed antiviral mechanism was analyzed. The results of this laboratory had showed that ChIL-18 and ChIFN-γ can inhibit IBDV proliferation in chickens，especially with the mixed group，which indicates that the mixed group has better antiviral effect. Within 7 days after ChIL-18 and ChIFN-γ injection of chickens，the kit was used to detect the changes of cytokines in the chicks. The effects of ChIL-18 and ChIFN-γ on intracellular NO，several Toll-like receptors （TLR）and downstream signaling pathways were analyzed by using peripheralblood mononuclear cells of chickens. The results showed that the levels of IL-6，IL-12 and IL-17 in the serum stimulated by mixed group ware significantly different from those in the PBS group. Mixed group proteins could induce NO production，the expression levels of TLR2，TLR3，TLR4 and MHC-II were increased and MAPK and NFκB signaling were activated. These results indicated that the mixed group had a better theoretical basis for antiviral ability，ChIL-18 and ChIFN-γ，both of which could induce the body to produce effective defense against virus infection and provide reference for the study of new cytokine preparations.Key words：Chicken interleukin 18；Chicken interferon γ；Antiviral；Immunoregulation1957年，Isaacs和Lindenmann在研究流感病毒的干扰现象时发现了一种与病毒干扰作用有关的活性物质，命名为干扰素（interferon，INF）[1]。
鸡白细胞介素18成熟蛋白的原核表达及抗体间接ELISA方法的建立
好的稳定性 、 重复性和特异性 ， 为下一步单抗的筛选鉴定奠定 了必要的基础 。
关键词 ： 白细胞介索 １ 鸡 ８成熟蛋 白（ Ｃ Ｉ ８ ； ｍ ｈＬ一１ ） 原核表达 ； 白纯化 ； 蛋 间接 Ｅ ＩＡ ＬＳ 中圈分类号 ： ５ ３ Ｑ ０ 文献标识 号 ： Ａ 文章编 号 ：０ １ ４ ４ （０ ２ ０ ００ — ５ １０ — ９ ２ ２ １ ）４— ０ ５ ０
Ｐｒ ｋ ｒ ｏ ｉ ｐ ｅ ｓｏ ｆＣｈ ｃ ｅ Ｌ 一１ ａ ｕ ｅ Ｐｒ ｔ ｉ ｎ ｎ ｏ ａ ｙ ｔｃ Ｅｘ ｒ ｓｉｎ ｏ ｉ ｋ ｎ Ｉ Ｍ ｔ ｒ ｏ ｅｎ Ｇｅ ｅ ａ ｄ ８ Ｅｓａ ｌ ｈ ｅ ｔｏ ｎ ｒ ｃ ｔ ｂ ｉ ｍ ｎ ｆＩ ｄｉｅ ｔＥＬＩ Ａ ０ Ｓ ｒ ｍ ｔｂ ｄ ｔｃ ｉｎ ｓ Ｓ ｆ ｒ、ｅ ｕ Ａｎ ｉ ｏ ｙ Ｄｅ ｅ ｔｏ
Ｉ ｇ Ｇ辣根过氧化物酶 结合 物最佳稀释 比例为 １ １ ０抗 原抗 体最佳 结合 时间是 １５ｈ 血清 与二抗最 适反 ： ２０ ， ０ ． ，
应时间为 １ 。阴性 、 ｈ 阳性血清的判定标准为 ： 被检样本 的 Ｏ Ｄ值是一 组阴性样本 Ｏ Ｄ值 的２或 ３倍且 Ｏ ４ ≥ Ｄ５ ｏ ０５ 即为阳性 ， 以 ＰＮ表示 ， ５＜ Ｎ＜ ． ．， 比值 ／ １ Ｗ ． ２０为可疑 ， ＷＮ＜ ． 为 阴性 。本试验 结果证 明该 方法具 有 良 １５
山东 农 业 科 学
２ １ ，４ ４ ： ９ ０ ２４ （ ）５—
Ｓａｄｎ ｇｉｕｔ ａ Ｓｉ ｃｓ ｈｎｏｇＡ ｒ ｌｒｌ ｃｅ ｅ ｃ ｕ ｎ
鸡 白细 胞 素 １ 熟 蛋 白的 原 核 表 达 ８成 及 抗 体 间 接 Ｅ ＩＡ方 法 的 建 立 ＬＳ
苏倩倩 ， 李恩扩 ， 张海 滨 ， 周 霞 ， 胡敬东
鸡白介素18成熟肽基因原核表达及抗血清的制备
鸡 白介素 １ ８成熟肽基 因原核 表达及抗血清 的制备
张 海玲 ， 多 良。 培欣 冉 ，刘 ，闫丽 辉 曹殿 军 ，
（＿ 国 农业 科 学 院 哈 尔 滨 兽 医研 究 所 兽 医 生 物技 术 国 家重 点实 验 室 ， 尔 滨 １ ００ ；２ 新 疆 农 业 大 学 动 物 １中 哈 ５０１ ． 医学 学 院 ， 鸟鲁 木 齐 ８０ ５ ） ３ ０ ２
摘 要 ： 用 Ｐ Ｒ 技 术 从 含 鸡 Ｉ 一８ 长基 因质 粒 扩 增 出编 码 鸡 Ｉ ８成 熟 蛋 白基 因 ， 克 隆 于 ｐ Ｒ Ｅ ＨＴ Ｃ Ｉｌ 全 Ｉ １ 亚 Ｐ Ｏ Ｘ ａ
原核表达载体上 ， 重组质粒转化大肠杆菌感受态 Ｄ ａ中 ， Ｈ５ 随机筛选 到 阳性重组 质粒 ， 经酶切 和测序证 实 目的基
Ａｂ ｔａ ｔ Ｃｈ ｃ ｅ ｉ ８ ｍａ ｕ ｅ ｐ ｏ ｅｎ ｇ ｎ ｓ ａ ｐ ｉ ｅ ｒ ｍ Ｉ １ ｅ ｏ ｂ ｎ ｎ ｌｓ ｄ ｂ ｓｒ ｃ ： ｉｋ ｎ Ｉ １ ｔ ｒ ｒ ｔ ｉ ｅ ｅ ｗａ ｍ ｌ ｉ ｄ ｆ ｏ Ｉ 一 ８ ｒ ｃ ｍ ｉ ａ ｔ ｐ ａ ｍｉ ｙ ＰＣＲ， ｆ
ａ ｄ ｗａ ｕ ｃｏ ｅ ｎ ｏ ｐ ｏ ａｙ ｔ ｘ ｒｓ ｉｎ ｖ ｃｏ ＰＲＯＥＸ Ｈ Ｔａ ａ ｄ ｔ ｅ ｓｔａ ｓｏ ｍｅ ｎ ｏＥ． ｎ ｓ ｓ ｂ ｌ ｎ ｄ ｉｔ ｒ ｋ ｒ ｏ ｅｅ ｐ ｅ ｓｏ ｅ ｔ ｒｐ ｎ ｈ ｎ ｗａ ｒ ｎ ｆ ｒ ｄ ｉ ｔ
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新 疆 农 业 大 学 学 报 ２ ０ ， ９ １ ：ｌ ０ ６ ２ （ ） ～４
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＸｉｊａ ｇＡ ｒｃ ｌ ｒ ｌ ｎｖｒｉ ｏ ｒ ａ ｎ ｉｎ ｇ ｉ ｔ ａ ｉｅｓ ｙ ｏ ｕｕ Ｕ ｔ
鸡白细胞介素18(IL-18)与临床疾病相关性的研究进展
来¨ 。Ｉ Ｌ—ｌ ８的高水 平 与人 和免 疫相关 的疾病 有关 ， 诸如 病毒 、 菌感染 和慢 性 炎 症 ； 用 动 物 实验 ， 制 细 应 抑 Ｉ Ｌ一１ ８的活性 来 治疗 慢 性炎 症 疾 病 如风 湿 性关 节 炎 、 克罗 恩疾病 和 牛皮癣 ， 可作为 一个 新 的治疗 理念 。 ２ ４ Ｉ ８与心脏 疾病 Ｉ ． Ｌ一１ Ｌ—ｌ 心脏 疾 病 中也 扮 ８在 演 了重要 的角 色 。Ｉ Ｌ一１ ８作 为 促 炎 性 因 子 能 诱 导 细 胞 间粘 附分 子 （Ｃ Ｍ 一１ 、 管细 胞 粘 附分 子 和 Ｉ ＩＡ ）血 Ｌ— ｐ的产 生 ， 这些 都与 心脏 功 能 障碍 的发 生有 关 ，Ｌ一 而 Ｉ １ ８的血浆 浓度 与 心脏 功 能 障碍 呈 正 相 关 ¨ 引。高 浓 度 的Ｉ Ｌ—ｌ ８可 以提 高 健 康 妇 女 获 得 心 血 管 疾 病 的几 率㈩ 。 ２５ Ｉ ． Ｌ一１ 肿 瘤 Ｉ ８与 Ｌ—ｌ ２和 Ｉ Ｌ—ｌ ８都是 肿 瘤免 疫 的参 与 者 ，Ｌ一１ Ｉ ８有 抑 制肿 瘤 生 长 的 功 能 。 Ｇ ｎ ａｇ Ｘ ｕ等 发 现在 间质 干细胞 中有腺病 毒 介导 的 Ｉ Ｌ一１ ８ 表达 物可 有效 地抑 制 大 鼠神 经 胶 质 瘤 的 生长 ； 可产 生 Ｉ ８的骨髓 源基 质 细胞 有 协 同 治疗 功 能 ， Ｌ一１ 其是 恶 性 神 经胶 质 瘤 的 过 继 免 疫 疗 法 的 一 个 新 方 法 。Ｉ Ｌ一１ ８ 和 Ｉ ２的血清 水平 与食 管癌 发病 程 度呈 正相 关 ， Ｌ—ｌ 其 可 作为 食管 癌 患 者 的一个 有 用 的 肿 瘤标 记 。Ｍａｋ ｒ Ｊ Ｍｉ ｌ ｆ … ． ｃ ｌ 等 研究 表 明 ，Ｌ一１ ａｅ Ｉ ８获得 了对 抗 癌 因子 的抗性 会降 低与 癌症 细 胞 的 免疫 反 应 ， 免 疫 刺 激 的 但 细胞 因子 Ｉ Ｌ一１ 能增 强 Ｉ Ｆ～ 在 耐药性 肿瘤 细胞 ８仍 Ｎ （ 周血单 核 细胞 ） 外 的产 生 ， 明这 些 免 疫刺 激 因 子可 表 利 于循 环 耐 药 性 肿 瘤 患 者 的 免 疫 疗 法 。Ｍ ｏｆｅ Ｌ ｅｌ ｒ 等 【 究表 明 Ｉ Ｊ 研 Ｌ一１ 产 生 的 沙 门 氏菌 可 以抑 制 皮下 ８ 早 期 肿瘤 的生 长 ， 临床 前 细 胞 因子 产 生 的细 菌有 望 是 肿 瘤 免疫疗 法 的一 种新 的微生 物疗 法 。 ２６ Ｉ ． Ｌ一１ 其 他 Ｉ ８与 Ｌ一１ 参 加 了宿 主 防 御 ， ８还 排 斥 移植 器官 。Ｉ Ｌ一１ 过 促 进 先 天 和后 天 获 得 性 免 ８通 疫 和 促 进 Ｔ ｌ Ｔ ２的反 应 来 增 强 机 体 对 抗 原 的免疫 ｈ 、ｈ 应 答 ， 肾移 植 的免 疫 和免 疫 病 理 的 反应 起 重 要 作用 在 并 促进 肾移 植 的排 斥 ｕ 引。Ｉ Ｌ一１ 仅 与 临床 疾 病有 ８不 关 外 ， 与焦 虑 、 力 、 间学 习 等有 关 。敲 除 Ｉ 还 压 空 Ｌ一１ ８ 的小 鼠与正 常的小 鼠相 比 ， 压 抑程度 显著 、 动程度 其 运 几乎 一样 、 忆力 和探 索 能 力显 著下 降 ， 续 ４ 记 连 ｄ心 室 内注 射 Ｉ Ｌ一１ ８的 已敲除 Ｉ Ｌ一１ ８小 鼠 的学 习记 忆 力也 明显 低 于正 常小 鼠 。Ｉ Ｌ一１ ８可 以引起 食 欲 下 降和 睡 眠而引 发 出其他 疾病 。感染 和 压力 的增大 都会 引起 Ｉ Ｌ一１ ８水 平 的升 高 ：Ｌ—ｌ Ｉ ８可 能 是 调 节 下 丘 脑— 垂 体一 肾上 腺 的参与 者 之 一 ， 可 能在 调 节 中枢 神经 系 也 统担 任一个 重 要角 色 而影 响 微 生 物 、 染病 的感 染 和 传 疾病 发生 。 ¨。 ３ 鸡 Ｉ Ｌ一１ ８的应 用前景
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词：鸡 儿一 基因；克隆； Ｊ ８ 序列分析 文献标识码 ：Ａ
中图分 类号 ：￥５． ８１ １ ３
Ｃｌ ｎ ｎｇ ａ ｅ ｕｅ ｃ ｎ ｌ ｓｓｏ ｏ ｉ ｎｄ ｓ ｑ ｎ ｅ ａ ａ ｙ ｉ ｆｔ Ｇｕｓ ｉｃ ｃ ｎ ｉ ｅ ｌ ｕｋ ｎ １ ｈｅ ｈ ｈｉｋｅ ｎｔ ｒ ｅ ｉ － ８
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第 ３ 卷第 ４期 ４
２０ ０ ８年 ８月
湖南农 业 大学 学报 （ 自然科 学 版）
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ ｕ ａ ｒ ｕｔ ｒ ｌ ｉｅ ｓ ｙ（ ｔｒ ｌ ｃ ｎ ｅ ） ｏ ｒ ａ ｏ ｎ ｎＡｇ ｉ ｌ ａ Ｕｎｖ ｒｉ Ｎａ ａ Ｓ ｉ ｃ ｓ Ｈ ｃ ｕ ｔ ｕ ｅ
（． １ 河南农 业大学 牧医工程学院 ，河南 郑州 ４ ０ ０ ；２河南省动物性食品安全 重点实验室 ，河南 郑州 ４ ０ ０ ） ５０２ ． ５０ ２
要：根据 Ｇ ｎ ａｋ ｅＢ ｎ 发表的鸡 ／ ｃ Ｎ Ｌ１ Ｄ Ａ基因序列 ，自 ８ 行设计 １ 对引物，应用 Ｒ －Ｃ ＴＰ Ｒ技术， 无需用非特异
性免疫原如 Ｃ ｎ Ｐ Ａ等刺激分离 的脾淋 巴细胞 ，直接提取 总 Ｒ ｏ Ａ， Ｈ ＮＡ，扩增 固始鸡 儿．８基 因，并进行 克隆和测 Ｊ 序．测序结果 ：获得 了固始鸡 儿一８基因全序列 ，其大小为 ５ ７ ｂ ；序列 比较分析发现 ，克隆的固始鸡 儿．８基 Ｊ ９ ｐ Ｊ 因与 Ｓ ｈ ｅ ｅ ｃｎ ｉ ｒ报道的鸡 儿一８基因序列核苷酸 同源性为 ９ ．％，有 １个碱基发生非同义变异 ，氨基 酸同源性为 ｄ Ｊ ９８
、ｂ１３４ Ｎ Ｏ． ， ． ４
Ａｕ ． ２ ０ ｇ ０８
文 章 编 号 ： １０ ．０ ２２ ０ ）４０ ７ ． ０ ７１ ３ （０ ８０ ．４ ８０ ４
固始鸡 白细胞介素 １ ８全基 因的克隆与序 列分析
陈红英 ，崔保 安 １ ９金 ． ２ ＊
摘
钺 ’ ，贾艳 艳 ，刘金朋 ，段志 刚
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