三七总皂苷中代表性皂苷含量测定方法学的建立及稳定性研究
三七总皂甙的液相色谱分析及其稳定性研究
ｌ ｅ ｐｒ ｕｅ ｂｔｈ ｔ ａ ｇ ａ ｙ ｅｔ ｄｒｈ ｒ ｇ ｉ ａｄ ｉ ｅ ， ｒ ｕ ． ｈ ｃ ｔ ｔ ｆ ｍ ｏ ｍ ｅ ｔ ， ｕ ｔ ｗ ｓ ｒ ｔ ａ ｃ ｅ ｕ ｅ ｔ ｓｏ ａ ｄ ｎ ｇ ｎ Ｊａ ｒ ｒ ｅ ｎ ｎ ｏ Ｐ． ｗｔ ａｒ ａ ｅｌ ｆ ｄｎ ｅ ｔｎ ｃ ｈ ｈｔ ｆ ｔ ｅ Ｉ ｏ ｅ ｅ ｗ ｓ ｅｒ ｓｄ ａ ｙ ２５ ａ ｄｃ ａｅ ｂ ｎ ｒ ３ ．％ ｅ ｙ ｅｌ Ｄ 盘一 — ． 《 苓 １ ０∞ ａ ｐ ｆ ｄｂ １ ．％ ａ １０℃ ． Ｃ ｎｌ ｉ ｈ ｔ ￣ｎ ｎｔ ／ ｅ ａ ｓ ｂ ｄｒｈ ｅｋ ｃ ｄ ｅｋ ａ ｄ ｏ ｎ ｒ ｔ Ｈｏ３ ｎ ５ ｔ０ ａ ｙ２ １ｏｃ ｓ ｎ ｅ ｏ ｌ ａ ｉ ｏ Ｐ． ｏ ｇ ￣ ｎ ｗ ｓ ｔ ｌ ｕ ｅ ｔ ｗ ａ ｉ ａ ａ ｓ ａ ｗ ｔ ￣ ａ ｕ ｏ Ｊ ｔａｓ ｎ ｆ Ｔ ｏ ｒ ｇ ａ ｅ ｎ ｅ ａｄｎ ｗ ｂ ｅｎ ｌ ａ －
摘要 ［ 目的 ］ 建立 三七总皂 甙的液相 色谱定 量分析方 法 ， 究 三七 总皂甙 的稳定性 。［ 研 方法 ］以三 七总皂甙 为考察指标 ， 采用 高效 液相 色谱 法 ， 探讨 不同 ｐ Ｈ值 、 温度对三七 总皂甙稳 定性 的影 响。 色谱条 件如 下 ： 色谱 柱 为 Ｉｏ ｓ ｌ ４ ６啪 ｘ ５ ｍ， Ｃｍ ｉＣ （ ． ａａ ｌ ８ ２０ ｍ ５胛 ） 流速 为 １ Ｄ ； ． ０ ｍ／ ｉ； 测波长为 １７ｉ； 温为 室温 ， ｌｍｎ检 ９ ｍ 柱 ｒ 采用二 元梯度洗 脱 ， 流动相 为 乙腈 一水。［ 结果 ］三七 总皂 甙液相 色谱 定量 方法具 有较 强 的针 对性 和准确性 。三七总皂 甙在 ｐ Ｈ值 ＞ ， 温 条 件 下 ， ４低 比较 稳 定 ， 而在 强 酸 高 温 下 受影 响 较 大 ， ｐ 在 Ｈ值 为 ３时， 皂 甙含 量 降低 约 总 ３．％ ， １０ｑ 下， ２５ 在 ０ Ｃ 总皂甙含量 降低约 １．％。［ ２５ 结论 ］ 三七 总皂甙在 弱酸弱碱 ， 温条件 下 ， 低 比较稳定 ， 而在 强酸 高温下 受影 响 大。 关键词 三七 ； 总皂甙 ； 高效 液相 色谱 ； 稳定性 中 图分 类号 Ｓ ６． 文 献标识码 Ａ ５７２ ６ ３ 文章编号 ０１ — ６１２０）３ ０９３ ０ ５７ ６１（Ｏ９ １— ５７ — ２
HPLC-ELSD 法测定三七总皂苷中三七皂苷R1 、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量
HPLC-ELSD 法测定三七总皂苷中三七皂苷R1 、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量【摘要】目的：采用高效液相-蒸发光散射检测器法（HPLC-ELSD ）测定免疫佐剂—三七总皂苷中三七皂苷R 1、人参皂苷Rg 1、人参皂苷Rb 1的含量。
方法：色谱柱DiscoveryC 18，(250mm ×4.6mm, 5μm)；采用梯度洗脱，流动相为水-乙腈；流速：1.0mL/min ；柱温30℃；结果: 三七皂苷R 1 5.19％，人参皂苷Rg 132.19％，人参皂苷Rg 141.28％，三种皂苷含量之和为75.77% 结论：该方法简便、快速、重现性好，可用于三七总皂苷的质量控制。
【关键词】高效液相色谱-蒸发光散射检测器，三七总皂苷，三七皂苷R1 、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1Determination of Notoginsenoside R1，Ginsenoside Rg1 and Ginsenoside Rb1 in PNS by HPLC-ELSDAbstract：Objective: To develop an HPLC-ELSD method for the content determination of notoginsenosideR1，ginsenoside Rg1 and ginsenoside Rb1 in PNS. Method: The analysis was carried out on a Discovery C18column (250mm×4.6mm, 5μm) with the mobile phase consisting of acetonitrile-water by gradient elution. The detector drift tube temperature was set at 30℃ and the flow rate was 1.0mL/min. Results: The recoveries for notoginsenoside R1，ginsenoside Rg1 and ginsenosideRb1 were 5.19% ，32.19% and 41.28%，The total content of three saponins in PNS by the HPLC-ELSD is 75.77%. Conclusion:The developed method is simple，rapid，replicable，and can be used for the quality control of PNS.Key words：HPLC-ELSD; PNS Notoginsenoside R1 Ginsenoside Rg1 Ginsenoside Rb1三七总皂苷( Panax notoginseng saponins，PNS)是中药三七的主要成分，具有扩张血管、降低心肌耗氧量和抑制血小板凝集等药理作用，目前主要应用于心脑血管系统疾病[1]。
三七中皂苷成分及其药理作用的研究进展
三七的主要成分有皂苷类、多糖、黄酮类、挥发油类、氨基酸类以及无机物和油脂等，有关文献指出，皂苷类以及多糖和挥发油类成分是应用在多数中药免疫增强剂中的主要活性成分。
1.1皂苷的成分
皂苷是皂苷元、糖以及糖醛酸等构成的一种复杂苷类化合物。三七的总皂苷作为三七提取物中的活性成分其总含量能够达到三七化学成分的百分之八到百分之十二。当前，能够从三七植物的不同部位中提取的单体皂苷成分就有70多种，在其根部能够分离得到41种，根茎部位13中以及果梗部位能够分离得到12中，同时其果实和种子等部位能够获得9种。单体皂苷的主要成分划分为达玛烷型的20（S）-原人参二醇和20（S）-原人参三醇两种类型，同时其多种单体皂苷中所蕴含的成分与人参中的皂苷成分一样，比如人参皂苷中的Rb1、Rb2、Rb3、Re、Rc、F2、七叶胆苷IX、七叶胆苷XⅦ以及人参皂苷Re、Rg1、Rg2、Rh1。其与人参中存在的明显区别是在三七中并没有出现含有齐墩果酸型皂苷。同时三七也有一些特有的皂苷类成分，比如三七皂苷R1、R2、R4、R6、以及Fa等。以下是对皂苷的不同部位成分进行一个简单的总结。
1.1.4三七花蕾皂苷
经过探究三七花蕾皂苷的主要成分，分离出十种化合物，并且使用光谱方法对其中的6中构成进行确定，发现除了认识皂苷=Rc外，胡萝卜苷以及三七皂苷Fe、认识皂苷Rb3以及绞股蓝皂苷-IX等四种都是第一次在花蕾中分离获得的化合物。
2.药理作用
2.1对中枢神经系统的作用
2.1.1镇静
三七地上部位具有抑制中枢神经的功能其有镇静以及安定和提高休眠质量的功效。三七总皂苷能够有效的减少动物的自主活动令其表现出奇特的镇静功能，同时具有协助中枢抑制药物的效果，其功效主要是经过降低突出体谷氨酸的含量来达到。
2.2.3减低血脂，防止动脉粥样硬化
三七中皂苷成分及其药理作用的研究进展
三七中皂苷成分及其药理作用的研究进展一、本文概述三七，又名田金不换，是五加科人参属多年生草本植物，以其根部入药，具有散瘀止血、消肿定痛的功效，被广泛应用于中医临床。
三七中皂苷成分丰富，是其主要药效物质基础。
近年来，随着现代分离分析技术的进步，三七皂苷的研究取得了显著进展，对三七皂苷的种类、结构、含量以及药理作用等方面有了更深入的认识。
本文旨在综述三七中皂苷成分的研究进展，探讨其药理作用及其机制，为三七的进一步开发利用提供理论依据。
本文首先对三七中皂苷成分的提取分离方法进行了概述，包括传统的水提、醇提方法以及现代的色谱分离技术等。
随后，对三七皂苷的结构特点和分类进行了详细阐述，重点介绍了各类皂苷的代表成分及其结构特征。
在药理作用方面，本文综述了三七皂苷在止血、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、神经保护等方面的药理作用及其机制，并对其临床应用前景进行了展望。
通过对三七中皂苷成分及其药理作用的研究进展进行综述，本文旨在为三七的深入研究和开发利用提供理论支持，同时也为相关药物研发提供新的思路和方向。
二、三七中的皂苷成分三七，作为一种传统中药材，因其独特的药理作用而受到广泛关注。
在三七的众多化学成分中，皂苷类成分尤为引人瞩目。
皂苷是一类具有复杂结构的化合物，它们广泛存在于植物界，特别是在许多药用植物中发挥着重要作用。
三七中的皂苷成分主要包括人参皂苷、三七皂苷等。
人参皂苷是三七中含量较高的一类皂苷，具有多种药理活性。
研究表明，人参皂苷具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种作用，对心血管系统、神经系统等都具有保护作用。
其中，人参皂苷Rg1和Rb1是人参皂苷中的代表性成分，它们在三七中的含量较高，也是三七药理作用的主要贡献者。
除了人参皂苷外，三七中还含有一定量的三七皂苷。
三七皂苷是三七特有的皂苷类成分，具有独特的药理作用。
研究表明，三七皂苷具有抗血栓形成、抗心肌缺血、抗脑缺血等作用，对心脑血管疾病具有较好的治疗效果。
三七中还含有其他多种皂苷类成分，如三七皂苷R三七皂苷R2等。
三七中总皂苷的含量测定
Ｃｏ ｅ ｔ Ｄｅ ｅ ｍｉ ｔｏ ｏ ｔ ｌ ａ ｎ ｎｓ ｉ ｎｐａ ｔ ｇ ｎ ｅ ｇ ｎｔ ｎ ｔ ｒ ｎａ ｉ ｎ ｆ Ｔｏ ａ Ｓ ｐｏ ｉ ｎ Ｐａ ｘ ｎｏ ｏ ｉ ｓ ｎ
Ｇ ｏ Ｚｊ Ｈ ａ ｇ Ｒ ｑａ ｇ ｕ ｉ ， ｕ ｎ ｕ ｉ ｅ ｉ ｅ ｎ
ｍｅｈ ｄ ｔ ｏ ｗａ ｕ ｅ Ｒｅ ｕｌｓ Ｔｈ ｏ ｉ ｌ ｏ ｖ ｎ ｗａ ａ ｈｙ ｒ ｓ ｓ ｓ ｄ． ｓ ｔ ｅ ｐｔｍａ ｓ ｌ ｅ ｔ ｓ ｎ ｄｏｕ ｍｅｈ ｎ １ ｎ ｔｅ ｏｎｅ ｔ ｆ ｏａ ｓ ｐ ｎ ｎ ｗａ ｌ 、 ｔａ ｏ ．ａ ｄ ｈ ｃ ｔｎ ｏ ｔｔｌ ａ ｏ ｉ ｓ ｓ ３％ ２ ｐｒｄ ｔ ｏ ｕｃ Ｒ】Ｃｏ ｌ ｉ ｎ Ｔ ｍｅ ｈ ｄ ｓ ｉ ｌ ． ｎ ｓ ｏ ｃｅ ｒｙ ｄｒ ｃｉ ｎ ｏ ｆ ｒｈ ｒ ｔ ｄ ｏ ｓ ｐｏ ｉｓ 、 ｎｃｕｓｏ ｈｅ ｔ ｏ ｉ ｓｍｐ ｅ ａ ｄ ｈ ｗｓ ｌａｌ ａ ｉｅ ｔｏ ｆ ｒ ｕｔ ｅ ｓｕ ｙ ｎ ａ ｎｎ 、 Ｋ ｅ ｗｏｒ ｙ ｄｓ： ｎ ａ ｎ ｔ ｇｎ ｅ ｔｔ ｌ ａ ｏ ｉ ｓ ｃ ｎｅ ｄｅｅ ｍｉａ ｉｎ Ｐａ ｐ ｘ ｏ ｏ ｉｓ ｎ；ｏａ ｓ ｐ ｎ ｎ ； ｏ ｔｎｔ ｔｒ ｎ ｔｏ ｗｉｈ ｈ ｓａ ｄａｄ ｔ ｔｅ ｔｎ ｒ
精密移取对照品溶 液 ３ ，Ｏ ９ ，２ ，５ ，８ Ｌ 分别置 ６支 ０ ６ ，０ １０ １０ １Ｏ ，
干 燥 具 塞 试 管 中 ， 浴挥 干溶 剂 。 水 同时 另 吸 取 三 七 的 不 同 溶 剂 提取 液 １ Ｌ 定容 至 ２ Ｌ 吸取 ６ Ｌ 分别 加 入新 配 制 的 ５ 香草 醛 一 ， ｍ ５ｍ ， Ｏ ， ％ 冰 醋 酸 溶 液 ０ ２ 、 氯 酸 ０ ８ｍ ， ６ ℃ 恒 温 水 浴 加 热 １ ｉ， ． 高 ｍＬ ． Ｌ 于 Ｏ ５ｍｎ 取 出 ， 水 冷 却 ２ｍｎ 加 冰醋 酸 ５ｍ ， 流 ｉ， Ｌ 摇匀 ， 为 供试 品溶 液 ， 随 作 以 行 试 剂 为 空 白 。 别 吸取 对 照 品溶 液 和 供 试 品溶 液 ， 紫 外 可 见光 分 用 分光 光 度 计 在 １０ ０ ｍ波 长 范 围 内进 行 扫 描 。 外 光 谱 吸 收图 ０ —９０ｎ 紫
高效液相色谱法同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rg1、Re、Rb1与三七皂苷R1含量
高效液相色谱法同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rg1、Re、Rb1与三七皂苷R1含量一、本文概述Overview of this article本文旨在探讨高效液相色谱法（HPLC）在测定三七总皂苷中主要活性成分——人参皂苷RgRe、Rb1以及三七皂苷R1含量的应用。
三七，作为传统中药材，具有广泛的应用价值和药理作用，其中人参皂苷和三七皂苷是其主要的药效成分。
通过准确测定这些成分的含量，对于三七的质量控制、药效评价以及临床用药指导具有重要意义。
This article aims to explore the application ofhigh-performance liquid chromatography (HPLC) in the determination of the main active ingredients in total saponins of Panax notoginseng - ginsenoside RgRe, Rb1, and Panax notoginseng saponin R1 content. Sanqi, as a traditional Chinese medicinal herb, has extensive application value and pharmacological effects, among which ginsenosides and Sanqi saponins are its main medicinal components. Accurately determining the content of these components is of greatsignificance for the quality control, efficacy evaluation, and clinical medication guidance of Panax notoginseng.高效液相色谱法作为一种高效、灵敏的分离分析技术，在中药材及其制剂的成分分析中具有广泛的应用。
三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进
作者简介:冯亮(1980-),男,正攻读药剂学专业的博士学位。
3通讯作者(C orrespondent author ),jxh1013@三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进冯 亮,蒋学华3,叶利民(四川大学华西药学院,四川成都610041)摘要:目的 用薄层扫描法(T LSC )和高效液相色谱法(HP LC )测定三七总皂苷中人参皂苷Rb 1(Rb 1)、人参皂苷Rg 1(Rg 1)和三七皂苷R 1(R 1)3种主要成分的含量,并对两种方法进行比较,为修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。
方法 T LSC 法用正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)上层溶液为展开剂,27%硫酸无水乙醇溶液为显色剂,测定波长λs =535nm ,λR =460nm ;HP LC 法用C 18色谱柱,以乙腈-水线性梯度洗脱,0min (25∶75)～15min (45∶55);流速1.5ml ・min -1;测定波长200nm 。
结果 T LSC 法测得三七总皂苷原料中Rb 1、Rg 1、R 1的含量分别为31.07%、23.30%、9.35%;HP LC 法测得三七总皂苷原料中Rb 1、Rg 1、R 1含量分别为30.46%、22.65%、5.83%。
结论 HP LC 法能将多种皂苷很好地分离并检测,简便快速,减少了误差。
其准确度和测定结果的稳定性均优于T LSC 法。
关键词:薄层扫描法;高效液相色谱法;三七总皂苷;人参皂苷Rb 1;人参皂苷Rg 1;三七皂苷R 1中图分类号:R927文献标识码:A文章编号:1006-0103(2006)02-0187-03Improvement of determination method of the main components in Panax notoginseng saponionsFE NGLiang ,J I ANG Xue -hua 3,YE Li -ming(West China School o f Pharmacy ,Sichuan Univer sity ,Chengdu 610041,China )Abstract :OBJECTIVE T LSC and HP LC were adopted to determine the contents of ginsenoside Rb 1,ginsenoside Rg 1and sanchinoside R 1in Panax notoginseng saponions.And results of the tw o methods were compared ,which could provide the basis of revising the determination method in quality standard.METH ODS T LSC has been established with the upper layer of the mixture of butanol -ethyl acetate -H 2O (4∶1∶5)as developing s olvent ,and 27%sulphuric acid ethanol s olution as coloring reagent ,λs =535nm ,λR =460nm.HP LC was adopted with C 18column ,acetonitrile -H 2O (25∶75at 0min and 45∶55at 15min ,linear gradient elution )was used as m obile phase and detective wave 2length was set at 200nm.The flow rate was 1.5ml ・min -1.RESU LTS The content of ginsenoside Rb 1,ginsenoside Rg 1and sanchinoside R 1in Panax notoginseng saponions determined by T LSC was 31.07%,23.30%and 9.35%;and that determined by HP LC was 30.46%,22.65%and 5.83%,respectively.CONC L USION HP LC could separate and determine various components in Panax notoginseng saponions and determine them.Its accuracy and stability are better than T LSC.K ey w ords :T LSC ;HP LC ;Panax notoginseng saponions ;G insenoside Rb 1;G insenoside Rg 1;Sanchinoside R 1C LC number :R927Document code :AArticle I D :1006-0103(2006)02-0187-03 三七是五加科人参属植物Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen 的干燥根;含有皂苷、多糖、氨基酸等多种化学成分。
总皂苷含量测定方法的稳定性分析
１ 引 言
白英为茄科植物的干燥全草 ， 性微寒 ， 味苦。具有清热解毒 ， 祛风化痰， 祛风除湿等功 效。药理研究显示白英中总皂苷在体内外具有一定的抗肿瘤作用 ［ ］ １ 。因此 ， 准确地测定 白 英中总皂苷含量对评 价 白英药材质量具有重要意义。在测定 白英 中总皂苷含量 的方法 中 ［ ］ 以总皂苷含量作为质量特性 ， ２， 选定盐酸浓度 （ ｏ Ｌ ，乙醇体积分数 （ ） 水解 时间 ｍｌ ） ／ ％ ， （） ｈ 作为三个影响因子。测定的总皂苷含量值越大 ， 表明总皂苷的提取越准确 ， 因此 ， 我们
摘 要 本文利 用 Ｇ Ｌ算法 ， 通过权衡五项指标 ， 白英 中总皂苷含量的测定方法进行稳 定性分析 ， 到 了稳 对 得 Ｇ Ｌ算法 稳 定性分析 总皂苷含量
定 中心， 使得 能够更为准确地测定 白英中总皂苷含量。
关键 词
Ｓ ａ ｉ ｔ ａ ｙ ｉ ｆｔ ｓ ｙ Ｍ ｅ ｈ ｄ ｏ ｔ ｌＳ ｐ ｎ ｎ ｔ ｂ ｌ ｙ Ａｎ ｌ ｓｓ ｏ ｈｅ Ａｓ ａ ｉ ｔ ｏ ｆ Ｔｏ ａ ａ ｏ ｉ ｓ
它， 复杂系统往往具有非线性性 ， 非均匀性［ ］ 因此 ， ３， 我们应该认识一个指标的合理的一面，
也要 看 到其不 足 的一 面 ， 用多 个 指标 ，就可 相互 补 充 ， 成 其 刻 画复 杂 系统 的任务 ，即 利 若 完
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三七总皂苷中代表性皂苷含量测定方法学的建立及稳定性研究陆 燕，潘 旭（北京积水潭医院中药房，北京 100035）[摘要] 目的： 建立同时测定三七总皂苷中三七皂苷R 1、人参皂苷Rg 1和人参皂苷Rb 1三种成分的含量测定方法，并对其各种状态下的稳定性进行研究。
方法：以乙腈-水系统作为流动相，采用高效液相-梯度洗脱法，同时测定三七总皂苷中三种成分的含量，并考察方法的专属性、线性、精密度和回收率；测定四种pH 值溶液中三种皂苷成分的稳定性以及在高温、高湿和强光照射条件下，三七总皂苷粉末中三种皂苷成分的稳定性。
结果：方法学验证结果显示，在选定的梯度洗脱条件下，方法专属性良好，三种皂苷可有效分离和定量；在各自的线性范围内线性良好；精密度RSD 值均小于2%；三种皂苷的平均回收率分别为（98.98 ± 0.60）%、（98.86 ± 0.34）%和（100.19 ± 0.64）%，方法准确性良好。
稳定性研究结果显示，在溶液状态下，三种皂苷的稳定性趋势基本一致，稳定性与pH 值密切相关，在pH 1.2溶液中药物迅速降解，24 h 含量即降低了约80%；而在pH 4.5溶液、pH 6.8溶液以及水中，三种成分的稳定性均良好，24 h 内含量未发生明显变化；而在三七总皂苷粉末中，三种代表性皂苷对湿、热和光照均不敏感，10 d 内含量基本保持稳定；但是在高湿条件下，粉末有一定的吸湿性。
结论：所建立的液相方法准确、可靠，溶液状态下三七皂苷R 1、人参皂苷Rg 1和人参皂苷Rb 1的稳定性与pH 密切相关，随pH 的降低稳定性变差，而在固体状态下则稳定性良好。
[关键词] 三七皂苷R 1；人参皂苷Rg 1；人参皂苷Rb 1；稳定性；梯度洗脱[中图分类号] R917 [文献标识码] A [文章编号] 1672 – 8157(2014)02 – 0088 – 04Study on the methodology establishment of content determination and stability of representative saponins in Panax notoginseng saponinsLU Yan, PAN Xu (Dispensary of Traditional Chinese Medicine, Beijing Jishuitan Hospital, Beijing 100035, China )[ABSTRACT] Objective: The HPLC method for simultaneous determination of notoginsenoside R 1, ginsenoside Rg 1 andginsenoside Rb 1 in Panax notoginseng saponins (PNS) was established to study the stability of the saponins under different states.Methods: Acetonitrile-water system was used as the mobile phase, and the method specificity, linearity, precision, recovery werestudied. The stability of the three saponins in different pH solutions and solid state was evaluated. Results: The results of methodvalidation showed good specificity, effective separation and quantification, as well as good linearity of the three saponins in their linear range. The precision RSD values were less than 2%, average recovery rates were (98.98 ± 0.60)%, (98.86 ± 0.34)% and (100.19 ± 0.64)% for the three saponins respectively. The stability results showed that the stability of the three saponins was closely related to the pH value under the solution state, with rapid degradation about 80% in 24 h in pH 1.2 solutions and little degradation in the other test medium. In the solid powder state, the stability of saponins was good under the experimental high temperature, high humidity and highlight conditions, while a little moisture absorption was found in the high humidity conditions. Conclusion: The HPLC method was reliable. Stability of three saponins was closely related to the pH value of solution, while they were stable under solid state.[KEY WORDS] Notoginsenoside R 1; Ginsenoside Rg 1; Ginsenoside Rb 1; Stability; Gradient elution[作者简介] 陆燕，女，主管药师，主要从事临床药学工作。
E-mail ：caojie2002@[4] 董小青，刘丽英，陈虹，等.土槿乙酸抗白色念珠菌的敏感性及作用机理的电镜研究[J].天津药学，2008，20（2）：1-3.[5] 刘丽英，刘涛，毕文超，等.白色念珠菌的生长曲线和世代时间测定[J].武警医学院学报，2009，18（3）：230-231.[6] 刘丽英，陈虹，李雪青.高效液相色谱法测定白色念珠菌细胞膜麦角甾醇的含量[J].天津药学，2013，25（1）：1-3.[7] 万昆，张奕奕，周成合，等.抗真菌药物氟康唑研究新进展[J].中国抗生素杂志，2012，37（1）：8-15，20.[8] 刘京晶，黄文华，吕明亮，等.HPLC 法测定不同品种及段木栽培灵芝子实体中麦角甾醇含量[J].中药材，2011，34（2）：187-190.（收稿日期：2013-12-04 修回日期：2014-01-14）三七总皂苷（Panax notoginseng saponins，PNS）是中药三七的主要有效成分，在心血管系统、神经系统及免疫系统等多方面具有良好的药理作用，临床应用广泛，具有良好的新药开发价值[1-4]。
其中，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1是公认的代表性成分，有文献[5-7]报道其单用或合用具有较好的抗老年痴呆作用。
结合该病症的用药特点，我们拟将之作为组方的主要成分，尝试开发缓释微丸，以期减少给药次数，提高用药顺应性。
本文将以三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1作为代表性成分，对三七总皂苷在各种条件下的稳定性情况进行全面的研究，以便于对进一步的制剂开发和制剂工艺的选择提供参考。
关于三七总皂苷的含量测定，目前有多种条件，主流方法均为液相色谱法，但由于流动相组成和梯度的不同，出峰时间上存在较大的差异。
我们在《中国药典》方法的基础上，调整了流动相梯度，在保证良好分离的前提下，使各皂苷出峰时间明显提前，提高了工作效率，在本研究中也对该方法进行了方法学验证。
1 仪器与试药Agilent 1260高效液相色谱仪（包括四元泵、VWD 检测器，美国Agilent公司）；BP125D电子天平（赛多利斯科学仪器北京有限公司）；DHG-9140A电热恒温鼓风干燥箱（北京陆希科技有限公司）；DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器（郑州长城科工贸有限公司）；GXZ智能型光照培养箱（宁波江南仪器厂）。
三七皂苷R1（中国药品生物制品检定所，纯度95.9%，批号110745-200617)；人参皂苷Rg1（中国药品生物制品检定所，纯度96.3%，批号110703-201027）；人参皂苷Rb1对照品（中国药品生物制品检定所，纯度92.6%，批号110704-200921）；三七总皂苷（云南金泰得三七产业股份有限公司，批号20080402）；乙腈为色谱纯（Fisher公司）；纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司）；浓盐酸、浓硫酸、无水乙酸钠、氢氧化钠（北京化学试剂有限公司）；冰醋酸、磷酸二氢钾（天津市光复科技发展有限公司）；甲醇等其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Diamonsil C18柱（250 mm × 4.6 mm，5 μm）；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，进行梯度洗脱，0 ~ 6 min A相比例为20%，25 min时A相比例变为40%，而30 min时则回到20%，并保持此比例5 min；流速：1.0 mL·min-1；检测波长：203 nm；进样量：20 μL；柱温：30 ℃。
2.2 溶液的制备2.2.1 对照品溶液 精密称取三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1对照品各约10 mg，分别置3个10 mL容量瓶中，甲醇溶解并定容至刻度，作为储备液，冷藏保存。
精密量取各储备液1 mL，分别至10 mL容量瓶中，甲醇稀释至刻度，摇匀，配制成浓度均约为100 µg·mL-1的对照品溶液。
分别取上述3种储备液一定体积，至同一容量瓶中，甲醇稀释至刻度，摇匀，作为混合标准品溶液。
2.2.2 供试品溶液 取一定量三七总皂苷样品，精密称定，置25 mL量瓶中，加入甲醇，超声处理使溶解，稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.3 方法学验证2.3.1 专属性实验 主要目的是考察在选定的液相条件下，各种对照品、溶媒等的出峰是否存在相互干扰。