显微操作技术荧光显微镜技术的特点和应用课件
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荧光显微镜的基本原理及应用PPT课件
个性化定制
未来荧光显微镜的发展将更加注重个性化定制，根据不同 领域和不同需求，定制特定的光学系统和成像方案，以满 足不同用户的需求。
06 参考文献
参考文献
参考文献1
介绍荧光显微镜的基本原 理，包括激发光、发射光 和滤色片的原理和作用。
参考文献2
介绍荧光显微镜的应用， 包括生物学、医学、化学 等领域的应用案例和效果。
荧光显微镜的基本原 理及应用ppt课件
目录
CONTENTS
• 荧光显微镜简介 • 荧光显微镜的基本原理 • 荧光显微镜的应用 • 荧光显微镜的优缺点 • 荧光显微镜的发展趋势与未来展望 • 参考文献
01 荧光显微镜简介
荧光显微镜的发展历程
01
02
03
荧光显微镜的起源
19世纪末，科学家开始研 究荧光现象，并尝试将其 应用于显微镜中。
多色观察
荧光显微镜可以同时观察多个 荧光标记物的表达，通过不同 的荧光颜色来区分不同的标记 物。
非破坏性
荧光显微镜观察样本时不会对 样本造成破坏，因此可以观察
同一样本的不同层面。
缺点
01
02
03
04
光毒性
荧光显微镜需要使用高强度光 源来激发荧光，长时间观察会
对样本造成光毒性损伤。
光漂白
荧光标记物在受到高强度激发 光照射时容易发生光漂白，导
环境化学
荧光显微镜用于检测环境中的有害物 质和污染物。例如，利用荧光标记的 探针检测水体中的重金属离子或有机 污染物。
04 荧光显微镜的优缺点
优点
高灵敏度
荧光显微镜能够检测到非常微 弱的荧光信号，因此可以用于
观察低浓度的荧光标记物。
高对比度
荧光显微镜能够通过选择合适 的激发和发射波长，获得高对 比度的荧光图像。
未来荧光显微镜的发展将更加注重个性化定制，根据不同 领域和不同需求，定制特定的光学系统和成像方案，以满 足不同用户的需求。
06 参考文献
参考文献
参考文献1
介绍荧光显微镜的基本原 理，包括激发光、发射光 和滤色片的原理和作用。
参考文献2
介绍荧光显微镜的应用， 包括生物学、医学、化学 等领域的应用案例和效果。
荧光显微镜的基本原 理及应用ppt课件
目录
CONTENTS
• 荧光显微镜简介 • 荧光显微镜的基本原理 • 荧光显微镜的应用 • 荧光显微镜的优缺点 • 荧光显微镜的发展趋势与未来展望 • 参考文献
01 荧光显微镜简介
荧光显微镜的发展历程
01
02
03
荧光显微镜的起源
19世纪末，科学家开始研 究荧光现象，并尝试将其 应用于显微镜中。
多色观察
荧光显微镜可以同时观察多个 荧光标记物的表达，通过不同 的荧光颜色来区分不同的标记 物。
非破坏性
荧光显微镜观察样本时不会对 样本造成破坏，因此可以观察
同一样本的不同层面。
缺点
01
02
03
04
光毒性
荧光显微镜需要使用高强度光 源来激发荧光，长时间观察会
对样本造成光毒性损伤。
光漂白
荧光标记物在受到高强度激发 光照射时容易发生光漂白，导
环境化学
荧光显微镜用于检测环境中的有害物 质和污染物。例如，利用荧光标记的 探针检测水体中的重金属离子或有机 污染物。
04 荧光显微镜的优缺点
优点
高灵敏度
荧光显微镜能够检测到非常微 弱的荧光信号，因此可以用于
观察低浓度的荧光标记物。
高对比度
荧光显微镜能够通过选择合适 的激发和发射波长，获得高对 比度的荧光图像。
荧光显微镜分析课件
染色体染色实验
总结词
通过荧光染色技术，观察染色体的结构和数目。
详细描述
采用荧光染料对染色体进行染色，在荧光显微镜下观察染色体的形态、数目和分布，可用于研究染色 体变异、基因定位和遗传疾病等。
荧光原位杂交实验
总结词
通过荧光原位杂交技术，检测特定基因 在染色体上的位置。
VS
详细描述
利用荧光标记的探针与染色体上的特定基 因进行杂交，在荧光显微镜下观察杂交信 号的位置和强度，可用于基因定位、染色 体变异分析和遗传疾病诊断等。
荧光显微镜分析课件
目录 CONTENTS
• 荧光显微镜简介 • 荧光显微镜的基本原理 • 荧光显微镜的操作方法 • 荧光显微镜的实验技术 • 荧光显微镜的实验案例
01
荧光显微镜简介
定义与特点
定义
荧光显微镜是一种利用特定波长 的光激发细胞内或组织内的荧光 物质，从而观察细胞或组织的结 构和功能的显微镜。
重要意义。
05
荧光显微镜的实验案例
细胞核染色实验
总结词
通过荧光染色技术，观察细胞核的结构和分布。
详细描述
采用荧光染料对细胞核进行染色，在荧光显微镜下观察细胞核的形态、大小、分 布以及染色质结构，可用于研究细胞分裂、基因表达和疾病诊断等。
线粒体染色实验
总结词
通过荧光染色技术，观察线粒体的结 构和功能。
荧光共定位技术
荧光共定位技术是一种利用两种或多种 荧光染料标记细胞内不同组分，通过观 察它们的空间位置关系来研究细胞结构
和功能的技术。
通过高分辨率的荧光显微镜观察，可以 清晰地看到不同组分在细胞内的具体位
置和相互关系。
荧光共定位技术广泛应用于生物学、医 学和化学等领域，对于研究细胞内分子 相互作用和细胞生物学特性等方面具有
荧光显微镜的原理和使用方法ppt(共25张PPT)
荧光显微镜是荧光显微术的基本装置，利用特定波长的光激发荧光物质发出可见荧光供检视。其结构主要包括光源、滤色镜系统和二向色镜等关键部件。光源采用高压汞灯，能发出强紫外光和蓝光，具有光亮度大、光度稳定的特点。滤色镜系统包括激发滤色镜和阻断滤色镜，分别用于提供最佳波段的激发光和阻断或吸收光路中的激发光或某些波长较短的光线。二向色镜则位于光路中，起到透射长波光线和反射短波光线的作用。根据照明方式的不同，荧光显微镜分为落射式和透射ห้องสมุดไป่ตู้两种，常用的是落射式荧光显微镜，其特点是光源通过物镜落射于样品，激发的荧光再通过物镜进入目镜供观察。整体而言，荧光显微镜的结构设计使其能够高效、准确地捕捉和分析荧光信号，为科学研究提供了有力工具。
显微操作技术 荧光显微镜技术的特点和应用.26页PPT
Thank you
显微操作技术 荧光显微镜技术的特点 和应用.
51、没有哪个社会可以制订一部永远 适用的 宪法， 甚至一 条永远 适用的 法律。 ——杰 斐逊 52、法律源于人的自卫本能。——英 格索尔
53、人们通常பைடு நூலகம்发现，法律就是这样 一种的 网，触 犯法律 的人， 小的可 以穿网 而过， 大的可 以破网 而出， 只有中 等的才 会坠入 网中。 ——申 斯通 54、法律就是法律它是一座雄伟的大 夏，庇 护着我 们大家 ；它的 每一块 砖石都 垒在另 一块砖 石上。 ——高 尔斯华 绥 55、今天的法律未必明天仍是法律。 ——罗·伯顿
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂，怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿
显微操作技术 荧光显微镜技术的特点 和应用.
51、没有哪个社会可以制订一部永远 适用的 宪法， 甚至一 条永远 适用的 法律。 ——杰 斐逊 52、法律源于人的自卫本能。——英 格索尔
53、人们通常பைடு நூலகம்发现，法律就是这样 一种的 网，触 犯法律 的人， 小的可 以穿网 而过， 大的可 以破网 而出， 只有中 等的才 会坠入 网中。 ——申 斯通 54、法律就是法律它是一座雄伟的大 夏，庇 护着我 们大家 ；它的 每一块 砖石都 垒在另 一块砖 石上。 ——高 尔斯华 绥 55、今天的法律未必明天仍是法律。 ——罗·伯顿
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂，怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿
荧光显微镜的原理和使用方法课件
荧光显微镜的原理和使用方法课 件
目录
• 荧光显微镜简介 • 荧光显微镜的原理 • 荧光显微镜的使用方法 • 荧光显微镜的维护与保养 • 荧光显微镜的应用实例
01
荧光显微镜简介
荧光显微镜的发展历程
01
02
03
荧光显微镜的起源
19世纪末，随着光学和化 学的发展，荧光显微镜开 始出现。
荧光显微镜的发展
荧光灯泡表面不可直接触摸，清洁时 应使用软布或手套。
清洁载物台
用干燥的软布擦拭载物台，避免污渍 和划痕。
荧光灯泡的更换与保养
更换荧光灯泡
当荧光灯泡亮度降低或出现闪烁时，应更换荧光灯泡。更换时应关闭电源，并按照说明书正确操作。
保养荧光灯泡
荧光灯泡应在低电流下使用，避免频繁开关灯，以延长使用寿命。
常见故障排除与维修
20世纪初，荧光显微镜技 术逐渐成熟，并广泛应用 于生物学、医学等领域。
荧光显微镜的改进
随着科技的进步，现代荧 光显微镜在分辨率、成像 质量、自动化等方面不断 得到提升。
荧光显微镜的基本组成
光源
发出特定波长的光，激 发样品中的荧光物质。
滤色片
选择性地透过特定波长 的光，阻挡其他波长的
光。
物镜
将样品中的荧光图像放 大，并传递给目镜或摄
电源故障
检查电源插头是否松动，电源线 是否破损。如有问题，应更换电
源线或修理电源插座。
图像模糊
可能是镜头污染或载物台移动造成 的。应清洁镜头和载物台，确保其 表面干净无痕。
荧光灯泡不亮
可能是灯泡损坏或电路故障。应检 查灯泡是否正常，如有问题应更换 ；同时检查电路是否正常，如有故 障应及时维修。
05
荧光显微镜的调试
目录
• 荧光显微镜简介 • 荧光显微镜的原理 • 荧光显微镜的使用方法 • 荧光显微镜的维护与保养 • 荧光显微镜的应用实例
01
荧光显微镜简介
荧光显微镜的发展历程
01
02
03
荧光显微镜的起源
19世纪末，随着光学和化 学的发展，荧光显微镜开 始出现。
荧光显微镜的发展
荧光灯泡表面不可直接触摸，清洁时 应使用软布或手套。
清洁载物台
用干燥的软布擦拭载物台，避免污渍 和划痕。
荧光灯泡的更换与保养
更换荧光灯泡
当荧光灯泡亮度降低或出现闪烁时，应更换荧光灯泡。更换时应关闭电源，并按照说明书正确操作。
保养荧光灯泡
荧光灯泡应在低电流下使用，避免频繁开关灯，以延长使用寿命。
常见故障排除与维修
20世纪初，荧光显微镜技 术逐渐成熟，并广泛应用 于生物学、医学等领域。
荧光显微镜的改进
随着科技的进步，现代荧 光显微镜在分辨率、成像 质量、自动化等方面不断 得到提升。
荧光显微镜的基本组成
光源
发出特定波长的光，激 发样品中的荧光物质。
滤色片
选择性地透过特定波长 的光，阻挡其他波长的
光。
物镜
将样品中的荧光图像放 大，并传递给目镜或摄
电源故障
检查电源插头是否松动，电源线 是否破损。如有问题，应更换电
源线或修理电源插座。
图像模糊
可能是镜头污染或载物台移动造成 的。应清洁镜头和载物台，确保其 表面干净无痕。
荧光灯泡不亮
可能是灯泡损坏或电路故障。应检 查灯泡是否正常，如有问题应更换 ；同时检查电路是否正常，如有故 障应及时维修。
05
荧光显微镜的调试
显微操作技术 荧光显微镜技术的特点和应用解读
2.细胞壁研究
荧光显微技术在植物细胞学中应用的一个突出 方面,是用于鉴定细胞壁成分,研究壁形成和再生, 以及壁在植物发育过程中和环境影响下性质的变化 观察细胞壁的方法很多,如用专一的染料染色 或利用纤维素的偏振光性质等。现在国外常用的方 法是荧光增白剂染色,在4QOnm左右的激发光照射下 观察细胞壁(纤维素)所产生的绿色荧光来判断细胞 壁的有无
• 它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，可发出不 同颜色的荧光，与DNA结合量少发绿色荧光，与 RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有 膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。 因此，在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常 细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光。
体外培养的肝癌细胞吖啶橙荧光染色
荧光显微镜技术的特点和应用
荧光显微镜的种类
• 透射式 ●落射式
• 和传统显微技术相比,荧光显微技术具有以下优点:
(1)荧光显微镜所用光源的波长比传统显微镜光源的 波长短1/2,因此荧光显微镜的分辨能力超出了传 统显微镜的分辨率的极限 (2)荧光显微镜技术具有高度灵敏性和专一性.它所 用染料的量是极其微小的,只相当于传统显微技术 中染料消耗量的几千分之一.
• 活体染色 vital staining 将无毒或毒性较小 的某种染料注入动物体内,可被机体内某些 组织或细胞所摄取,称为活体...
影响荧光的因素 1. pH的影响 带有酸性或碱性官能团的大多数芳香族化合物 的荧光一般都与溶液PH值有关，例如：在pH=7-12 的溶液中苯胺以分子形式存在，会发出蓝色荧光； 而在pH<2或pH>13的溶液中苯胺以离子形式存在， 都不会发出荧光。 同时所用酸的种类也影响荧光的强度，例如： 奎宁在硫酸溶液中的荧光比在盐酸中的要强。
荧光显微镜PPT课件
度、荧光效率
.
11
荧光显微镜的种类
透射式
落射式
.
12
荧光显微镜的主要部件
透射式
• 汞灯光源 • 激发滤色镜 • 暗场聚光镜 • 吸收滤色镜
落射式
• 汞灯光源 • 激发滤色镜 • 分色镜 • 吸收滤色镜
.
13
暗视野照明方式
聚光镜中央有档 光片，使照明光 线不直接进入物 镜，只允许被标 本反射和衍射的 光线进入物镜， 因而视野的背景 是黑的，物体的 边缘是亮的。
优点： • 检出能力高 • 对细胞的刺激小 • 能进行多重染色 用途： • 物体构造的观察 • 荧光的有无、色调比较进行物质判别 • 发荧光量的测定对物质定性、定量分析
.
4
什么是荧光 ?
物质中的电子吸收光的能量由低能状态转 变为高能状态，再回到低能状态时释放出的光。
即：物质吸收短波光，发射出的长波光。
.
Immersion objective with specimen
20
透射荧光显微镜
优点：
• 由于用了暗场聚光镜，激发光不能进入物镜，因 此容易形成暗的背景，得到良好的反差。 • 由于上述同样的原因，任何物镜都可用于观察。 • 用低倍物镜时，比反射荧光显微镜更亮。
.
21
透射荧光显微镜
缺点：
• 必须正确调整聚光镜中心和高度，否则不能获得明亮的荧 光像。 • 由于暗视场聚光镜焦距限制，不能使用厚的载玻片。 • 视场照明区不能过大，否则容易使荧光标本荧光色衰褪。 • 厚的或不透明的标本不适用。
water or oil immersion objective medium (water or oil) specimen
Light source
.
11
荧光显微镜的种类
透射式
落射式
.
12
荧光显微镜的主要部件
透射式
• 汞灯光源 • 激发滤色镜 • 暗场聚光镜 • 吸收滤色镜
落射式
• 汞灯光源 • 激发滤色镜 • 分色镜 • 吸收滤色镜
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13
暗视野照明方式
聚光镜中央有档 光片，使照明光 线不直接进入物 镜，只允许被标 本反射和衍射的 光线进入物镜， 因而视野的背景 是黑的，物体的 边缘是亮的。
优点： • 检出能力高 • 对细胞的刺激小 • 能进行多重染色 用途： • 物体构造的观察 • 荧光的有无、色调比较进行物质判别 • 发荧光量的测定对物质定性、定量分析
.
4
什么是荧光 ?
物质中的电子吸收光的能量由低能状态转 变为高能状态，再回到低能状态时释放出的光。
即：物质吸收短波光，发射出的长波光。
.
Immersion objective with specimen
20
透射荧光显微镜
优点：
• 由于用了暗场聚光镜，激发光不能进入物镜，因 此容易形成暗的背景，得到良好的反差。 • 由于上述同样的原因，任何物镜都可用于观察。 • 用低倍物镜时，比反射荧光显微镜更亮。
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透射荧光显微镜
缺点：
• 必须正确调整聚光镜中心和高度，否则不能获得明亮的荧 光像。 • 由于暗视场聚光镜焦距限制，不能使用厚的载玻片。 • 视场照明区不能过大，否则容易使荧光标本荧光色衰褪。 • 厚的或不透明的标本不适用。
water or oil immersion objective medium (water or oil) specimen
Light source
荧光显微镜的基本使用方法课件PPT
1、 该镜可作为明视场显微镜使用，也可作为荧光 显微镜使用，根据需要，做相应的附件连接，开启 相应的电源。禁止乱调设置，以免影响他人正常使 用。 2、 作为明视场显微镜使用；A、接通电源后，打开 显微镜底座前的电源开关，按光亮需要调节底座右 侧的滑竿。B、根据需要，调节底座光栅和聚光器 光栅及其高度，可获得最佳的图象效果。C、需要 图片，要把镜体上的相应拉杆拉到绿线位子。按下 相应附件上的照相按扭。 3、 作为荧光显微镜使用；A、先关闭荧光通道，再 打开荧光激发器电源，等待15分钟。B、等待期间 ，打开显微镜光源，找到需要观察的样品，选用合 适的物镜，调整焦距。C、关闭显微镜光源，打开 荧光通道。D、需要图片，要把镜体上的相应拉杆 拉到绿线位子。按下相应附件上的照相按扭。
off.
When the hour counter on the power supply unit indicates this value, set the main switch to “O ” (OFF) and wait for more than 10
minutes before replacing the mercury burner.
• 组织内含有的奎宁、四环素等药物也呈现一定的 荧光。
• 嗜中性粒细胞中脱氢酶辅酶呈现一定的荧光。
荧光素 DAPI AMCA Hoechst 33258 FITC Acridine Orange Acridine Yellow CY3 TRITC Propidium Iodide
激发波长 372 350 365 490 490 470 552 541 530
分色镜
实验原理
荧光显微镜的光路及主要部件
光源 激发光挡片 激发滤色镜 分色镜 发射滤色镜
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PPT学习交流荧光测定技术测量DNA,是荧光显微技术和 细胞光度技术相结合的产物,标志着前者由定性向 定量测定发展.
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7
吖啶橙
• 3，6－（二甲胺基）吖啶盐酸盐，分子式 C17H19N3 · HCl · ZnCl₂, 分子量438.12g/mol, 是一种荧光色素，其检测激发滤光片波长488nm, 阻断滤光片波长515nm。
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15
荧光增白剂染色
• 荧光增白剂和细胞壁成分有强烈亲和力,当前常用 的荧光增白剂有ST,M2R,VBL.ST开始被用于显示 细菌,放线菌与真菌的细胞壁,在粘菌材料中,它被证 明与纤维素和几丁质有亲和力
• 胼胝质是一种以β-1,3键结合的葡聚糖。在植物的 筛管代谢、配子体发育等生命活动中发挥着重要 的调节作用，其合成、分解直接关系植物正常的 生长代谢过程。
同时所用酸的种类也影响荧光的强度，例如：奎 宁在硫酸溶液中的荧光比在盐酸中的要强。
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2.温度的影响
温度对荧光强度的影响较敏感。溶液温度下降时， 介质的粘度增大，荧光物质与分子的碰撞也随之减 少，去活化过程也减少，则荧光强度增加。相反， 随着温度上升，荧光物质与分子的碰撞频率增加， 使去活化几率增加，则荧光强度下降。
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DAPI
染色原理： DAPI 为一种荧光染料，可以穿透细胞膜与细胞
核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，可以产生 比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，对双链 DNA的染色灵敏度要高很多倍。显微镜下可以看到 显蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效 率高(几乎为100 %) ，且对活细胞无毒副作用。
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• 活体染色 vital staining 将无毒或毒性较小的某种
染料注入动物体内,可被机体内某些组织或细胞所 摄取,称为活体...
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影响荧光的因素
1. pH的影响
带有酸性或碱性官能团的大多数芳香族化合物的 荧光一般都与溶液PH值有关，例如：在pH=7-12 的溶液中苯胺以分子形式存在，会发出蓝色荧光； 而在pH<2或pH>13的溶液中苯胺以离子形式存在， 都不会发出荧光。
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3
• (3)荧光显微镜能够直接显示细胞内的生物化学成 分,并且显示的彩色效果很明亮,极易观察,极易进行 定量分析,而且能以极低浓度的染料检测出含量极 微的物质.
• (4) 随着新的荧光染料的发明,可不断扩大被测物质 的范围.
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4
• 生物学材料，有各种产生荧光:
1.自发荧光:或原发荧光
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• 胼胝质是一种以β-1,3键结合的葡聚糖。在植物的 筛管代谢、配子体发育等生命活动中发挥着重要 的调节作用，其合成、分解直接关系植物正常的 生长代谢过程。
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3细胞生活力测定
• 荧光素双醋酸酯（FDA）是一种常用的培养动植物细胞以 及植物细胞原生质体的生活力鉴定染料，其染色机理也利 用了死活细胞在代谢上的差异：FDA本身不产生荧光，也 无极性，能自由渗透出入完整的细胞膜。当FDA进入活细 胞后，被细胞内的脂酶分解，生成有极性的、能产生荧光 的物质——荧光素，该物质不能自由透过活的细胞膜，积 累在细胞膜内，因而使有活力的细胞产生绿色荧光；而无 活力的细胞因不能使FDA分解，而无法产生荧光
细胞组织中自然存在的某些物质可被激发产生 荧光
2.诱发荧光
材料中的某些物质经一定的化学处理后，可转 化为荧光色团，由此被诱发产生荧光。最常见的 是甲醛诱发蛋白质中所含的芳香乙胺基团转化为 荧光色团。戊二醛也能诱发荧光
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5
• 3荧光染料染色：
应用含荧光色团的物质作为染料，使与生物组 织中和该物质有特殊亲和力的成分相结合，即可 被激发荧光。这类染料称为荧光染料或荧色素。 许多常规染色剂(如刚果红、曙红、碱性品红、水 溶性苯胺蓝等)兼有荧光染料的性能
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体外培养的肝癌细胞吖啶橙荧光染色
可见含DNA的细胞核显示黄绿色荧光，含RNA的细胞质显示橘红色荧光
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11
DAPI
• DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与 DNA强力结合的荧光染料，最大吸收波长为 358nm，最大发射波长为461nm。
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13
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14
2.细胞壁研究
荧光显微技术在植物细胞学中应用的一个突出 方面,是用于鉴定细胞壁成分,研究壁形成和再生,以 及壁在植物发育过程中和环境影响下性质的变化
观察细胞壁的方法很多,如用专一的染料染色或利 用纤维素的偏振光性质等。现在国外常用的方法是 荧光增白剂染色,在4QOnm左右的激发光照射下观 察细胞壁(纤维素)所产生的绿色荧光来判断细胞壁的 有无
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• 它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，可发出 不同颜色的荧光，与DNA结合量少发绿色荧光， 与RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料 具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA 染色。因此，在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透 过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧 光。
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8
吖啶橙
• 染色原理:吖啶橙可对细胞中的DNA和RNA同时染 色而显示不同颜色的荧光。其激发峰为492nm， 荧光发射峰为530nm（DNA）、640（RNA）， 它与双链DNA的结合方式是嵌入双链之间，而与 单链DNA和RNA则由静电吸引堆积在其磷酸根上。 在蓝光（502nm）激发下，细胞核发亮绿色荧光 （约530nm），胞质RNA发橘红色荧光 （>580nm）。
荧光显微镜技术的特点和应用
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1
荧光显微镜的种类
• 透射式
●落射式
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2
• 和传统显微技术相比,荧光显微技术具有以下优点:
(1)荧光显微镜所用光源的波长比传统显微镜光源的 波长短1/2,因此荧光显微镜的分辨能力超出了传 统显微镜的分辨率的极限
(2)荧光显微镜技术具有高度灵敏性和专一性.它所 用染料的量是极其微小的,只相当于传统显微技术 中染料消耗量的几千分之一.