荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程
荧光显微镜操作说明书

荧光显微镜操作说明书欢迎使用我司生产的荧光显微镜。
为了能够准确并顺利地操作该设备,我们为您提供了以下的操作说明书。
请仔细阅读并按照步骤进行操作,以确保获得最佳的观察效果。
1. 安装与准备1.1 确保在操作荧光显微镜之前,您已经将其安放在一个平稳的台面上。
确保设备的底部有足够的空间,并保持周围环境整洁,避免灰尘、湿气和其他杂物对设备的影响。
1.2 使用专用的电源线将荧光显微镜连接到稳定的电源插座上。
1.3 确保荧光灯泡已正确安装,轻轻旋紧螺丝,使用调节凸轮进行灯泡亮度的调节。
2. 样本准备2.1 在操作荧光显微镜之前,准备好待观察的样本。
样本可以是细胞、组织切片、荧光染料等。
确保样本已经标记或染色,以与荧光显微镜的工作原理相符。
2.2 使用移液管将样本滴到盖玻片上,并轻轻覆盖一个玻璃片或载玻片。
确保样本层均匀薄且没有气泡。
3. 荧光显微镜操作步骤3.1 打开荧光显微镜的电源开关,并将放大倍数调至最低。
3.2 调节聚焦旋钮,使样本清晰地呈现在目镜中。
3.3 通过调节荧光滤光片,选择适当的荧光波长进行观察。
3.4 使用荧光显微镜配套的光源控制器来调节荧光灯的亮度。
3.5 通过调节眼PIE镜,使左右目镜成像重叠,获得清晰的三维像。
4. 荧光显微镜的功能与特点4.1 荧光显微镜具备普通显微镜的观察功能,同时能够通过荧光染色技术研究生物样本。
4.2 荧光显微镜的激发光源与观测光路相分离,可以有效地抑制杂散光的干扰,提高观测质量。
4.3 荧光显微镜配备多种滤光片和滤镜,可选择不同波长的激发光源和观测光源进行观察与记录。
4.4 荧光显微镜配备数字相机接口,可方便地连接到计算机进行图像采集和分析。
5. 注意事项5.1 使用前请仔细熟悉该设备的使用说明,并遵循安全操作规范。
5.2 操作荧光显微镜时,请注意保持实验环境的整洁和无尘,确保样本不受外界污染。
5.3 荧光显微镜操作结束后,将其电源开关关闭,并确保设备处于干燥通风的环境中。
LeicaDM4B荧光显微镜操作规程操作步骤

Leica DM4B荧光显微镜操作规程一.操作步骤1.打开电源,连接电脑(DM4B确认USB白色数据线连接好电脑背后口)2.放好样本,找到合适视野,从低倍到高倍观察(物镜转盘),调好焦距。
3.液晶屏说明-每次机器启动都会保留最上次操作设置4.STATUS为目前机器状态--TL表示目前是透射光状态5.AP-孔径光栏,视场光栏,光强显示在状态中,通过机身左侧键盘控制6.BF-明场,正常染色的样品,用的比较多7.PH-相差观察方法-适应于透明非染色薄样品,有些样慢反射会反射亮光8.FL-荧光-呈现荧光的效果,适用细胞特异性染色效果/机身左侧下部TL/IL点击切换明场和荧光切换,或直接点击软件切换二.拍照摄取步骤1.确认数码CCD和电脑连接线是否连接;(注意显微镜镜先开机再开软件)2.明场状态下观察样品请调节合适的照明【充足的合理曝光可以调节显微镜照明或曝光时间。
可用目镜盖盖住目镜以避免日光灯影响-有一横线】3.把三目镜筒如果有拉杆(需要把拉杆拉到拍照位置,一般往外拉)4.确认选择软件中摄取界面的MIC显微镜控制面板部分5.白平衡设置选择自动白平衡;一般自动曝光(如果反应慢是样品照明不足,可增加照明-切换到手动,超过0.5秒是相机需时间照明)6.饱和度一般150,伽马值一般玻片0.6(明场状态),荧光或其他状态可以适当拉高去除背景噪音(每次使用完需要回复正常值,避免其它人留意)7.调整完毕,选择采集图像三.图像处理步骤可以后期进行图像各种处理,如曝光,剪切,注释等等四.图像分析步骤图像分析,添加标尺(图像浏览边上第1个图标点开),注意要合并原图添加注释等等保养与维护:D需要经常通电使用,注意湿度,否则需放到干燥器里封闭保存2.除湿机如有条件尽量长期开放,每天清空水箱3.防尘,每段工作期之后,应用软质防尘罩罩住,以避免显微镜和附属设备染灰尘。
灰尘和松放的污粒,可用软毛刷或不掉毛心棉布除掉。
顽固性的污物可用一块于净的棉布上普通水溶液、汽油或酒精擦掉。
荧光显微镜的使用流程

荧光显微镜的使用流程一、介绍在生物科学领域中,荧光显微镜是一种常用的工具。
它利用荧光现象来观察和研究细胞、组织和生物分子。
本文将介绍荧光显微镜的使用流程,包括前期准备、显微镜的操作步骤、关键技巧和常见问题解答。
二、前期准备在使用荧光显微镜之前,需要进行一些前期准备工作,以确保顺利进行观察和实验。
2.1 样本准备首先,需要准备好要观察的样本。
样本可以是细胞、组织切片或荧光标记的蛋白质等。
对于细胞样本,可以在培养皿中直接观察或使用刀片将其固定在载玻片上。
对于组织切片,需要进行固定、切片和染色等处理。
2.2 荧光染色荧光显微镜通过荧光标记物来观察样本。
因此,在观察前需要对样本进行荧光染色。
常用的荧光染料有荧光素、荧光素二异硫氰酸酯(FITC)等。
根据需要选择适当的染料,并根据染料的使用说明进行染色操作。
2.3 防护措施在进行荧光显微镜观察时,应注意个人防护。
戴上实验手套和口罩,避免接触染料和其他有害物质。
同时,确保显微镜和工作台的清洁,以避免样本污染和数据误差。
三、荧光显微镜的操作步骤荧光显微镜的操作步骤通常包括调节显微镜参数、调节荧光镜片和观察样本等。
3.1 调节显微镜参数在使用荧光显微镜前,需要调节显微镜的参数。
首先,打开显微镜,并调节光源亮度合适。
然后,调节物镜,使样本图像清晰可见。
最后,根据需要选择合适的荧光滤光片,并将其插入显微镜中。
3.2 调节荧光镜片荧光镜片是荧光显微镜中一个重要的部件。
在观察时,需要根据染料的特性来选择合适的荧光镜片。
常用的荧光镜片有单色荧光镜片、双色荧光镜片和三色荧光镜片等。
调节荧光镜片可以增强荧光信号和减少背景噪音。
3.3 观察样本当显微镜参数和荧光镜片设置好后,可以开始观察样本。
将染色好的样本放置在载玻片上,并用夹片封闭。
然后,将载玻片放置在显微镜的样本台上,并通过调节焦距和聚焦仪调整样本的焦平面。
最后,通过目镜观察样本,并使用涂片或液晶板记录图像。
四、关键技巧使用荧光显微镜的过程中,有一些关键技巧可以帮助提高观察效果和数据质量。
荧光显微镜操作规程

荧光显微镜操作规程《荧光显微镜操作规程》一、前言荧光显微镜是一种非常重要的实验设备,广泛应用于生物学、医学、药理学等领域。
正确的操作规程对于保护设备、获得准确的实验结果至关重要。
二、操作流程1. 开机准备a. 打开荧光显微镜主机电源,并等待显微镜系统启动。
b. 打开冷光源电源,并调节冷光源亮度至合适的水平。
2. 样本装载a. 使用无尘布擦拭玻璃载玻片,避免留下灰尘或污渍。
b. 将待观察的样本制备好并滴在载玻片上,然后将载玻片放置在载玻片架上。
c. 用载玻片夹固定好载玻片架,并将载玻片架放入样本台。
3. 调焦与光学设置a. 使用目镜观察载玻片上的样本,并调节物镜至合适的倍数。
b. 根据实验要求,选择合适的荧光染色方法,并设定荧光滤光片组。
c. 调节焦距直至样本清晰可见。
4. 图像采集a. 启动相机软件,并调整图像采集参数,如曝光时间、增益等。
b. 点击图像采集按钮,获得所需图像。
5. 关机步骤a. 先关闭冷光源电源,再关闭荧光显微镜主机电源。
b. 将载玻片架及夹子取下,并清理样本台及载玻片架。
c. 将荧光滤光片组调整至初始状态,并关闭目镜保护罩。
三、注意事项1. 操作前务必确认设备无损坏,并严格按照操作规程进行操作。
2. 使用荧光染色药剂时,需注意其对人体的有害性,并做好防护措施。
3. 在操作过程中,要避免碰撞或摔落设备,保护光学部件。
4. 操作完毕后,需要及时清洁设备并保存好各种配件。
以上就是荧光显微镜操作规程的主要内容,希望能对使用者的实验工作有所帮助。
荧光显微镜荧光显微镜(Fluorescencemicroscope)及其操作

荧光显微镜荧光显微镜(Fluorescencemicroscope)及其操作荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。
它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。
是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。
原理编辑本段回目录某些物质经一定波长的光(如紫外光)照射后,物质中的分子被激活,吸收能量后跃迁至激发态;当其从激发态返回到基态时,所吸收的能量除部分转化为热量或用于光化学反应外,其余较大部分则以光能形式辐射出来,由于能量没能全以光的形式辐射出来,故所辐射出的光的波长比激发光的要长,这种波长长于激发光的可见光部就是荧光(fluorescence)。
所谓荧光就是某些物质在一定波长光(如紫外光)的照射下、在极短时间内所发出的比照射光波长更长的可见光。
由此可见,被照射物质产生荧光必须具备以下两个条件:①物质分子(或所特异性结合的荧光染料)必须具有可吸收能量的生色团;②该物质还必须具有一定的量子产率和适宜的环境(如溶剂、pH、温度等)。
荧光显微术是利用荧光显微镜结可发荧光的物质进行观测的一种实验技术。
某些物质在一定短波长的光(如紫外光)的照射下吸收光能进入激发态,从激发态回到基态时, 就能在极短的时间内放射出比照射光波长更长的光(如见光),这种光就称为荧光。
有些生物体内的物质受激发光照射后可直接产生荧光, 称为自发荧光(或直接荧光),如叶绿素的火红色荧光和木质素的黄色荧光等。
有的生物材料本身不能产生荧光,但它吸收荧光染料后同样却能发出荧光,这种荧光称为次生荧光(或间接荧光),如叶绿体吸附吖啶橙后便可发出桔红色荧光。
荧光显微镜具特殊光源(多为紫外光光源),提供足够强度和波长的激发光,诱发荧光物质发出荧光。
在视场中所所观察到的图像,主要是样品的荧光映像。
(一)光源现在多采用200W的超高压汞灯作光源,它是用石英玻璃制作,中间呈球形,内充一定数量的汞,工作时由两个电极间放电,引起水银蒸发,球内气压迅速升高,当水银完全蒸发时,可达50~70个标准大气压力,这一过程一般约需5~15min。
荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程【可编辑范本】

发布时间:2011-06—15荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程荧光显微镜是光学显微镜中的一种。
ﻫ关键字:荧光显微镜使用方法ﻫ荧光显微镜操作规程荧光显微镜使用荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程1 ﻫ。
用窗帘遮蔽光线,关闭房间内的灯光,除去显微镜的防尘罩,确保显微镜灯室通风良好、无遮盖。
装上汞灯灯箱,并转动灯箱卡圈上的拨杆,将灯箱与镜臂连接。
2。
将汞灯灯箱的电源插头插入荧光电源箱后的插座,再将荧光电源箱的插头插入220V外接电源.3.打开电源开关,电压表显示出电源电压,如电源电压波动不大于额定电压值的±5%,即可按下启动开关点燃汞灯,如因天气太冷或电压不稳定等原因,一次启动未点燃汞灯,可以多揿动几次。
待超高压汞灯弧光达到稳定状态并达到最大发光效率,即可开始工作。
ﻫ 4. 灯泡的调中:(1)任选一块标本放在载物台上。
ﻫ(2)转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移出光路,转动滤色片组转换手轮,将紫光(V)或蓝光(B)或绿光(G)激发滤色片组转入光路,并将10×荧光物镜转入光路。
(3)调节粗微调手轮,将标本像调焦清晰。
(4)前后推动垂直照明器右边的聚光镜调焦推杆,使视场光栏成像清晰,转动视场光栏拨杆将视场光栏收小,调节视场光栏调中螺钉使视场光栏居中,然后再将视场光栏开至最大。
ﻫ(5)转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移入光路,前后调节灯箱上的聚光镜拨杆,使汞7)调整反光镜水平(灯的弧光在视场内成像清晰。
ﻫ(6)调整灯箱上的灯泡水平调节螺钉和垂直调节螺钉,使汞灯的弧光居中。
ﻫ调节螺钉和垂直调节螺钉,使光源的反射像与汞灯的弧光分开。
5。
荧光观察:ﻫ(1)将荧光染色标本放到载物台上。
ﻫ(2)(8)转动聚光镜旋钮把聚光镜移出光路,此时视场照明均匀。
ﻫ将10×平场物镜或40×荧光物镜转入光路,调节载物台纵横移动手轮,将标本移入光路。
(3)转动滤光片转换拨轮,将荧光染色标本所需要的激发滤光片组转入光路。
2.荧光显微镜的使用方法与注意事项

荧光显微镜的使用方法与注意事项1、打开显微镜电源。
2、需要使用荧光才开启荧光光源,开启汞灯需要记录打开和关闭的时间。
提示:两次开启汞灯的时间必须间隔半小时以上,打开汞灯后,必须半小时后方可关闭。
3、擦拭镜头:擦拭目镜和物镜。
在长纤维脱脂棉签顶端蘸上无水乙醇,从中央部分开始,采用螺旋渐进的方式轻轻逐步擦到边缘。
提示:①无需经常将物镜/目镜拆下来清理擦拭,日常使用时仅需用脱脂棉签及擦镜纸配合无水乙醇擦去油污即可,只有遇到顽固污渍时才应将物镜拆卸清理。
擦拭镜头时,动作应轻柔,不能过于用力,以避免损坏镀膜层。
②留意擦镜纸的两个面,纹路是不同的:其中一面是粗糙的,另一面更光滑些,要使用更光滑的那一面来清洁。
一般不建议用干的擦镜纸直接擦拭,同样可能划伤镜头。
4、放置样本,正置显微镜将样本放至物镜下方,倒置显微镜将样本放至物镜上方。
提示:显微镜样本一定要保持干净,如有盖片样本,一定要干净干燥,以免样本上的试剂污染物镜。
免疫荧光染色用抗荧光淬灭剂封片。
HE染色、免疫组织化学染色、高尔基染色等用中性树脂封片。
5、选择适合于自己实验的物镜放大倍数,由低到高进行观察。
6、选取实验相应方案,如光强,shutter,明场/DIC等。
切换滤光片,将荧光染色标本所需的激发滤光片组转入光路。
提示:选择与荧光染色标本相应滤色块。
如UV——DAPI,hochest等(镜下观察为蓝色);蓝光——FITC,Alex488等(镜下观察为绿色);绿光——Alex555,Cy3等(镜下观察为红色)。
7、实验结束,关闭电源。
提示:①显微镜使用过程中,镜体、灯箱及电源等位置应无遮挡或覆盖,以免影响散热从而损耗显微镜寿命。
显微镜使用完后,等灯箱部分冷却后,再盖上防尘罩。
②显微镜包含很多光学部件,避免显微镜碰撞,以保护光学系统。
显微镜属精密仪器,如需搬动,拆修,请联系专业人员。
荧光显微镜使用说明书

荧光显微镜使用说明书1. 引言荧光显微镜是一种高级显微镜,它通过荧光染料和荧光体来观察生物样本。
本说明书将向用户介绍荧光显微镜的基本操作和注意事项。
2. 设备使用前的准备在开始使用荧光显微镜之前,请确保以下准备工作已经完成:2.1 样本准备- 准备待观察的生物样本,并进行适当的固定和染色处理。
- 使用适当的荧光染料标记待观察的目标结构,比如细胞核或细胞器。
- 确保样本处于干燥且无尘的环境中,以免影响显微镜观察效果。
2.2 显微镜设置- 将荧光显微镜放置在水平且稳定的台面上,避免震动。
- 连接电源线并确保电源稳定。
- 打开显微镜主机,并调节照明系统到适当的亮度。
- 确保镜头已正确安装并调节到焦点位置。
3. 操作步骤3.1 调节荧光滤光片- 根据所使用的荧光染料种类,选择相应的滤光片组合。
请参考荧光染料厂家提供的荧光光谱信息。
- 将滤光片安装到显微镜的滤光器单元上,确保滤光片与光源相匹配。
3.2 焦距调整- 放置已准备好的样本到显微镜的载物台上,并使用载物台调节样本水平位置。
- 通过调节镜头的焦距轮和对焦杆,使样本逐渐变得清晰可见。
3.3 荧光成像- 使用显微镜的放大倍率调节旋钮,逐渐增加放大倍率以观察细节。
- 通过调节显微镜的聚光镜或荧光照明系统,确保样本受到均匀且适当的荧光照明。
- 使用取景器或相机从目镜观察孔观察并记录样本图像。
4. 注意事项- 在操作显微镜时,请务必小心轻放,避免撞击或其他损坏。
- 建议在室温下使用荧光显微镜,避免极端温度或湿度对设备造成不利影响。
- 使用前请确保手部清洁,避免在样本处理过程中引入杂质。
- 镜头润滑剂可能对荧光染料造成负面影响,请避免使用含润滑剂的显微镜油。
- 使用完毕后,请关闭显微镜并拔出电源线。
5. 故障排除如果在使用荧光显微镜过程中遇到问题,请尝试以下解决方案:5.1 样本无法观察到荧光信号- 检查荧光滤光片是否正确安装。
- 检查荧光染料是否已正确标记在待观察的结构上。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程
荧光显微镜是中的一种。
关键字:
荧光显微镜使用方法
荧光显微镜操作规程
荧光显微镜使用
使用方法和荧光显微镜操作规程
1. 用窗帘遮蔽光线,关闭房间内的灯光,除去显微镜的防尘罩,确保显微镜灯室通风良好、无遮盖。
装上汞灯灯箱,并转动灯箱卡圈上的拨杆,将灯箱与镜臂连接。
2. 将汞灯灯箱的电源插头插入荧光电源箱后的插座,再将荧光电源箱的插头插入220V外接电源。
3. 打开电源开关,电压表显示出电源电压,如电源电压波动不大于额定电压值的±5%,即可按下启动开关点燃汞灯,如因天气太冷或电压不稳定等原因,一次启动未点燃汞灯,可以多揿动几次。
待超高压汞灯弧光达到稳定状态并达到最大发光效率,即可开始工作。
4. 灯泡的调中:
(1)任选一块标本放在载物台上.
(2)转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移出光路,转动滤色片组转换手轮,将紫光(V)或蓝光(B)或绿光(G)激发滤色片组转入光路,并将10×荧光物镜转入光路。
(3)调节粗微调手轮,将标本像调焦清晰。
(4)前后推动垂直照明器右边的聚光镜调焦推杆,使视场光栏成像清晰,转动视场光栏拨杆将视场光栏收小,调节视场光栏调中螺钉使视场光栏居中,然后再将视场光栏开至最大。
(5)转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移入光路,前后调节灯箱上的聚光镜拨杆,使汞灯的弧光在视场内成像清晰。
(6)调整灯箱上的灯泡水平调节螺钉和垂直调节螺钉,使汞灯的弧光居中。
(7)调整反光镜水平调节螺钉和垂直调节螺钉,使光源的反射像与汞灯的弧光分开。
(8)转动聚光镜旋钮把聚光镜移出光路,此时视场照明均匀。
5. 荧光观察:
(1)将荧光染色标本放到载物台上。
(2)将10×平场物镜或40×荧光物镜转入光路,调节载物台纵横移动手轮,将标本移入光路。
(3)转动滤光片转换拨轮,将荧光染色标本所需要的激发滤光片组转入光路。
激发滤光片组编号刻在滤片组转换拨轮上。
滤光片选择正确与否,是荧光显微镜能否得到正确应用的关键。
选用滤光片时,必须遵守斯托克斯定律:激发滤光片的透射波长<双色束分离器的透射波长<阻断滤光片的透射波长。
由于激发滤光片、双色束分离器和阻断滤光片,出厂时已按其用途和本身的光学特性进行了严格的组合匹配,在观察和摄影时,只需选择滤光片组即可。
(4)调节粗调手轮,当看清荧光图像轮廓后,再用微调手轮调焦,直至看到清晰的荧光图像。
(5)当需要得到较强的荧光图像时,可转动聚光镜旋钮把聚光镜移入光路,可获得较明亮的荧光图像。
(6)当需要使用40×或100×荧光物镜观察时,应在标本和物镜间加上甘油,油中不能有影响观察的小泡或杂质。
使用时可使甘油慢慢浸润一会儿,然后轻轻左右来回转动物镜转换器以排除气泡。
6. 荧光显微摄影——
由于荧光图像一般均较明场观察暗得多,所以进行荧光显微摄影需要较长的曝光时间,在曝光时应注意避免仪器震动。
荧光显微镜摄影技术对于记录荧光图像十分必要,由于荧光很易褪色减弱,要即时摄影记录结果。
方法与普通显微摄影技术基本相同。
因紫外光对荧光猝灭作用大。