关于布鲁氏菌试管凝集试验课件
器材与试剂
虎红平板凝集抗原、被检血清、清洁脱脂 玻片或有凹形孔的玻片、0.1ml吸管或微量 加样器、混合棒或牙签
试验方法
在玻片上加0.03ml被检血清，然后加入虎 红平板抗原0.03ml，充分混匀，在5分钟内 观察结果。
(四) 结果判定
有二种方法，第一种是，出现可见的凝集反应就判为阳 性；
血清学检查既可协助早期诊断，还可 确定是IgM抗 体，可以用凝集试验或抗人球蛋白试 验检测．
感染３周后，患者血清中出现IgG抗体， 可以用补体结合试验，荧光抗体或 ELISA检测．
虎红平板的凝集反应（RBPT）
原理
该试验又称为班氏孟加拉红平板凝集 试验。由于所用的抗原是酸性 （PH3.6—3.9）带色的抗原，该抗原 与被检血清作用时能抑制血清中的IgM 类抗体的凝集活性、检查出的抗体是 IgG类，因此提高了该项反应的特异性。
遵守操作规程：所用的器材要清洁、干燥，试剂 的加量一定要正确，放入温箱的温度和时间都要 按要求，否则都影响结果。每份血清和抗原均要 有对照。
高渗盐水作凝集反应，一般浓度在10~12%，一 般切记人血清不能用高渗盐水。
作凝集反应时，有个别血清会出现前带现象，即 稀释度低的血清管内(或血清量多的格)不发生凝 集，而稀释度高的管内(或血清量少的格)出现凝 集，这叫做前带现象。如果某血清在平板凝集反 应中出现了前带现象，那么做试管反应时应多做 几个管，多采用几个稀释度。
此法简便、快速、容易操作，适于基层大面积检 疫；
此法有一定敏感性，检查牛的阳性率稍高于绵羊、 山羊。
因为在酸性环境下IgM活性受抑，该法主要是检 查IgG类凝集抗体，所以特异性较好，与补体结合 试验、二巯基乙醇（2-ME）试验和抗球蛋白 （Coomb’s0）试验有较高的吻合率。
该法受制备抗原时条件影响较大，所以每批制备 抗原应予以检查、标化方可应用。
“++++”完全凝集，上清液100%清亮
“+++” 几乎完全凝集，上清液75%清亮 “++”显著凝集，上清液50%清亮 “+” 微量凝集，液体25%清亮 “-” 无凝集，液体不清亮 确定每份血清滴度是以出现“++”及以上的
凝集现象的最高血清稀释度
诊断标准
没有进行过菌苗接种的人、畜血清试验的标准是： 人、牛、马、鹿、骆驼等大家畜血清为1：
对照管的制作: 抗原对照（适当稀释的抗原加石碳酸盐水） 被检血清对照 阴性对照（阴性血清稀释后加抗原） 阳性对照（阳性血清稀释到原有滴度加抗原）
然后将试验管和对照管充分 混匀后，放于37℃温箱中 20-22小时后取出，在室温 下放置2个小时，以比浊管 为标准判定结果。
结果的判定
判定比浊管的制备:每次试验须配制比浊 管作为判定的标准依据.
100%
0.75
75%
0.50
50%
0.25
25%
0.00
0%
标记
++++ +++ ++ ＋ －
结果记录
根据各管中上层液体的清亮程度记录结果， 特别是50%清亮度（++）对判定结果关系 较大，一定要与比浊管对比判定
血清对照为清亮透明无沉淀,抗原对照为均 匀混浊在两种对照管都成立的情况下，才 可判定试验管，否则应重做。对沉淀需要 经验判定。
操作步骤
加入抗原:先以0.5%石碳酸生理盐水将抗原原液做 适当稀释（一般是作1:10稀释）,稀释后的抗原加 入各稀释的血清管（第一管不加，作为血清对 照）,每管0.5毫升,混匀。加入抗原后，第二管至 第五管每管总量为1毫升，从第二管起血清稀释度 分别为1:25 1:50 1:100 1:200，从第一管再吸出 0.5毫升，剩1毫升。
关于布鲁氏菌试管凝 集试验
免疫学基础
由于布鲁氏菌培养的营养条 件苛刻而且时间长，所以布 鲁氏菌的血清学诊断越来越 受到重视。
主要是根据相应抗原抗体可以
在体外发生特异性结合并呈现可见 反应的原理,用已知抗原(或抗体)检 测体液中未知的抗体(或抗原).由于 试验时通常是用患者血清作为待检 材料,所以检测抗原抗体的体外试 验又称为血清学试验或血清学反应.
试管凝集试验
1897年莱特氏等(Wright)与其同 事发现患该病的病人血清与马尔 他细菌的培养物产生了凝集现象， 遂称之为莱特氏凝集反应，成了 迄今常用的血清学诊断方法之一。
设备及试剂
试管凝集抗原 被检血清 0.5%的石碳酸生理盐水 吸管 试管 试管架 孵箱
操作步骤
被检血清的稀释:一般情况下,每份血清用5支小试 管,第一管加入2.3毫升石碳酸生理盐水,第二管不 加，第三、四、五管各加入0.5毫升.用1毫升吸 管吸取被检血清0.2毫升,加入第一管中,混匀。混 匀后, 以该吸管吸取第一管中血清加入第二和第 三管各0.5毫升，以该吸管将第三管混匀，并吸 取0.5毫升加入第四管,依次稀释到第五管,混匀后 从第五管吸出0.5毫升弃去.如此稀释后,从第二管 起血清稀释度分别为1:12.5 1:25 1:50 1:100
另一种用“+”表示凝集程度按下列标准用加号记录反应 强度：
++++：出现大的凝聚片或小的粒状物，液体完全透明， 100%凝集
+++：有明显的凝聚片，液体几乎完全透明，75%凝集 ++：有可见的凝集片，液体不甚透明，50%凝集 +：液体混浊，只有少量粒状物，25%凝集 -：液体均匀混浊
评价
100( ++)及以上者为阳性，1：50(++)为可疑。 猪、羊(绵羊、山羊)、犬等小家畜血清在1：
50(++)及以上者为阳性，1：25(++)为可疑。 对可疑反应的人和动物应在10-25天内重复检查，
以便进一步确定诊断。
影响试验结果的因素及注意事项
受检血清应新鲜、无溶血、无污染，存放血清处 温度不能超过10℃，采血后应于3—4日内进行检 查，因放置时间过长可能会导致血清效价降低。
配制方法是:取本次试验用的抗原稀释液 （一般1:10）5-10毫升，加入等量的 0.5%石碳酸生理盐水作倍比稀释，按下 表配制比浊管
比浊管的配制
试管凝集反应标准比浊管配制
管号 抗原稀释液（ml） 生理盐水（ml） 透明度
1 2 3 4 5
0.00 0.25 0.50 0.75 1.00
1.00
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布鲁氏菌试管凝集试验共37页文档
▪
26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
▪
27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
▪
28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
▪
29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
谢谢！
37
布鲁氏菌试管凝集试验
26、机遇对于有准备的头脑有特别的 亲和力 。 27、自信是人格的核心。
28、目标的坚定是性格中最必要的力 量泉源 之一， 也是成 功的利 器之一 。没有 它，天 才也会 在矛盾 无定的 迷径中 ，徒劳 无功。- -查士 德斐尔 爵士。 29、困难就是机遇。--温斯顿．丘吉 尔。 30、我奋斗，所以我快乐。--格林斯 潘。
布鲁氏菌试管凝集试验
然后将试验管和对照管充分 混匀后，放于37℃温箱中 20-22小时后取出，在室温 下放置2个小时，以比浊管 为标准判定结果。
结果的判定
判定比浊管的制备:每次试验须配制比浊
管作为判定的标准依据. 配制方法是:取本次试验用的抗原稀释液 （一般1:10）5-10毫升，加入等量的 0.5%石碳酸生理盐水作倍比稀释，按下 表配制比浊管 比浊管的配制
试管凝集试验
1897年莱特氏等(Wright)与其同 事发现患该病的病人血清与马尔 他细菌的培养物产生了凝集现象， 遂称之为莱特氏凝集反应，成了 迄今常用的血清学诊断方法之一。
设备及试剂
试管凝集抗原 被检血清 0.5%的石碳酸生理盐水 吸管 试管 试管架 孵箱
操作步骤
评价
该方法特异性较好，敏感性也高，因此适 用于检疫和临床诊断。 由于该试验有时出现前带现象和封闭现象， 所以有时也出现假阴性结果，必要时和其 它方法联合应用。
抗原抗体反应的特点
抗原抗体结合的特异性
抗原抗体结合的基础是抗原决定簇与抗体 的抗原结合部位之间 的反应.这种反应是专 一性的.例如:布氏杆菌只能与布氏杆菌抗体 相结合,而不能与痢疾杆菌抗体相结合.
评价
此法简便、快速、容易操作，适于基层大面积检 疫； 此法有一定敏感性，检查牛的阳性率稍高于绵羊、 山羊。 因为在酸性环境下IgM活性受抑，该法主要是检 查IgG类凝集抗体，所以特异性较好，与补体结合 试验、二巯基乙醇（2-ME）试验和抗球蛋白 （Coomb’s0）试验有较高的吻合率。 该法受制备抗原时条件影响较大，所以每批制备 抗原应予以检查、标化方可应用。
布鲁氏菌血清学检验
山西省疾病预防控制中心 张秋香
布鲁氏菌病实验室诊断技术PPT课件
L/O/G/O
布鲁氏菌病实验室诊断技术
1
概述
布氏菌（Brucella）是一个重要的人兽
共患病病原菌，该菌侵入人或动物后可引起 人兽共患的传染—变态反应性疾病，即布氏
菌病（Brucellosis，简称布病），是我国规
定报告的乙类传染病。布病存在于全球200多 个国家和地区，是全球特别是发展中国家面 临的重要的公共卫生问题。
18
19
试管凝集试验
阳性对照：加入1ml的生理盐水使其溶
解（充分溶解使阳性血清的效价发挥 到最大），稀释、加入抗原（方法、步 骤同被检血清样本的操作）。
20
试管凝集试验
结果判定：
血清对照为清亮透明无沉淀，抗原对照为均匀 浑浊，两种对照管成立，才可判定试验管，否 则重做。
人感染布鲁菌的诊断标准：1：100(++)及以上 者为阳性，1：50(++)为可疑。
SAT
被检血清 样本
阳性对照 血清
13
试管凝集试验
抗原的稀释：将试管凝集抗原充分混匀后， 用0.9%生理盐水做10倍稀释，备用。 标准比浊管的制备：为了判定结果准确，应 制备凝集反应标准比浊管，作为判定透明程 度的依据，其配制方法如下：取凝集反应稀 释后的抗原液再作对倍稀释，即2ml稀释抗原 再加2ml盐水，混合后按下表配制。
7
虎红平板凝集试验
5 质量控制 所用器材洁净，试剂标准，并在有效期内
使用，所加剂量必须准确。血清标本不得发生 溶血 6 结果判定
在5min内出现可见的凝集现象为阳性反应 无凝集现象出现为阴性。 7 工作时限要求
个案病例，送检材料2日内完成，大批量样 本不得超过7日。如全血不能及时分离血清，可 冷藏4°C保存，但保存期不得超过3日。血清可 冷冻保存，保存期不得超过2月。
布鲁氏菌病实验室诊断技术
1
概述
布氏菌（Brucella）是一个重要的人兽
共患病病原菌，该菌侵入人或动物后可引起 人兽共患的传染—变态反应性疾病，即布氏
菌病（Brucellosis，简称布病），是我国规
定报告的乙类传染病。布病存在于全球200多 个国家和地区，是全球特别是发展中国家面 临的重要的公共卫生问题。
18
19
试管凝集试验
阳性对照：加入1ml的生理盐水使其溶
解（充分溶解使阳性血清的效价发挥 到最大），稀释、加入抗原（方法、步 骤同被检血清样本的操作）。
20
试管凝集试验
结果判定：
血清对照为清亮透明无沉淀，抗原对照为均匀 浑浊，两种对照管成立，才可判定试验管，否 则重做。
人感染布鲁菌的诊断标准：1：100(++)及以上 者为阳性，1：50(++)为可疑。
SAT
被检血清 样本
阳性对照 血清
13
试管凝集试验
抗原的稀释：将试管凝集抗原充分混匀后， 用0.9%生理盐水做10倍稀释，备用。 标准比浊管的制备：为了判定结果准确，应 制备凝集反应标准比浊管，作为判定透明程 度的依据，其配制方法如下：取凝集反应稀 释后的抗原液再作对倍稀释，即2ml稀释抗原 再加2ml盐水，混合后按下表配制。
7
虎红平板凝集试验
5 质量控制 所用器材洁净，试剂标准，并在有效期内
使用，所加剂量必须准确。血清标本不得发生 溶血 6 结果判定
在5min内出现可见的凝集现象为阳性反应 无凝集现象出现为阴性。 7 工作时限要求
个案病例，送检材料2日内完成，大批量样 本不得超过7日。如全血不能及时分离血清，可 冷藏4°C保存，但保存期不得超过3日。血清可 冷冻保存，保存期不得超过2月。
布鲁氏菌试管凝集试验
在玻片上加0.03ml被检血清，然后加入虎 红平板抗原0.03ml，充分混匀，在5分钟内 观察结果。
(四) 结果判定
有二种方法，第一种是，出现可见的凝集反应就判为阳 性； 另一种用“+”表示凝集程度按下列标准用加号记录反应 强度： ++++：出现大的凝聚片或小的粒状物，液体完全透明， 100%凝集 +++：有明显的凝聚片，液体几乎完全透明，75%凝集 ++：有可见的凝集片，液体不甚透明，50%凝集 +：液体混浊，只有少量粒状物，25%凝集 -：液体均匀混浊
试验。由于所用的抗原是酸性 （PH3.6—3.9）带色的抗原，该抗原 与被检血清作用时能抑制血清中的IgM 类抗体的凝集活性、检查出的抗体是 IgG类，因此提高了该项反应的特异性。
器材与试剂
虎红平板凝集抗原、被检血清、清洁脱脂 玻片或有凹形孔的玻片、0.1ml吸管或微量 加样器、混合棒或牙签
试验方法
试管凝集试验
1897年莱特氏等(Wright)与其同 事发现患该病的病人血清与马尔 他细菌的培养物产生了凝集现象， 遂称之为莱特氏凝集反应，成了 迄今常用的血清学诊断方法之一。
设备及试剂
试管凝集抗原 被检血清 0.5%的石碳酸生理盐水 吸管 试管 试管架 孵箱
操作步骤
血清学检查既可协助早期诊断，还可
确定是否复发或重复感染。 感染1-2周后，患者血清中出现IgM抗 体，可以用凝集试验或抗人球蛋白试 验检测． 感染３周后，患者血清中出现IgG抗体， 可以用补体结合试验，荧光抗体或 ELISA检测．
虎红平板的凝集反应（RBPT）
布鲁氏菌试管凝集试验
整理课件
“++++”完全凝集，上清液100%清亮 “+++” 几乎完全凝集，上清液75%清亮 “++”显著凝集，上清液50%清亮 “+” 微量凝集，液体25%清亮 “-” 无凝集，液体不清亮 确定每份血清滴度是以出现“++”及以上的
凝集现象的最高血清稀释度
整理课件
诊断标准
没有进行过菌苗接种的人、畜血清试验的标准是 ：
人、牛、马、鹿、骆驼等大家畜血清为1：100( ++)及以上者为阳性，1：50(++)为可疑。
猪、羊(绵羊、山羊)、犬等小家畜血清在1： 50(++)及以上者为阳性，1：25(++)为可疑。
对可疑反应的人和动物应在10-25天内重复检查， 以便进一步确定诊断。
整理课件
影响试验结果的因素及注意事项
整理课件
器材与试剂
虎红平板凝集抗原、被检血清、清洁脱脂 玻片或有凹形孔的玻片、0.1ml吸管或微量 加样器、混合棒或牙签
整理课件
试验方法
在玻片上加0.03ml被检血清，然后加入虎 红平板抗原0.03ml，充分混匀，在5分钟内 观察结果。
整理课件
(四) 结果判定
有二种方法，第一种是，出现可见的凝集反应就判为阳 性；
整理课件
作凝集反应时，有个别血清会出现前带现象，即 稀释度低的血清管内(或血清量多的格)不发生凝 集，而稀释度高的管内(或血清量少的格)出现凝 集，这叫做前带现象。如果某血清在平板凝集反 应中出现了前带现象，那么做试管反应时应多做 几个管，多采用几个稀释度。
氯化钠的含量增高对血清反应有明显的影响，盐 的浓度越高，反应的敏感性提高，因此在兽医界 为了克服凝集反应中的阻抑抗体的干扰，对羊血 清采用高渗盐水作凝集反应，一般浓度在 10~12%，切记一般人血清不能用高渗盐水。
“++++”完全凝集，上清液100%清亮 “+++” 几乎完全凝集，上清液75%清亮 “++”显著凝集，上清液50%清亮 “+” 微量凝集，液体25%清亮 “-” 无凝集，液体不清亮 确定每份血清滴度是以出现“++”及以上的
凝集现象的最高血清稀释度
整理课件
诊断标准
没有进行过菌苗接种的人、畜血清试验的标准是 ：
人、牛、马、鹿、骆驼等大家畜血清为1：100( ++)及以上者为阳性，1：50(++)为可疑。
猪、羊(绵羊、山羊)、犬等小家畜血清在1： 50(++)及以上者为阳性，1：25(++)为可疑。
对可疑反应的人和动物应在10-25天内重复检查， 以便进一步确定诊断。
整理课件
影响试验结果的因素及注意事项
整理课件
器材与试剂
虎红平板凝集抗原、被检血清、清洁脱脂 玻片或有凹形孔的玻片、0.1ml吸管或微量 加样器、混合棒或牙签
整理课件
试验方法
在玻片上加0.03ml被检血清，然后加入虎 红平板抗原0.03ml，充分混匀，在5分钟内 观察结果。
整理课件
(四) 结果判定
有二种方法，第一种是，出现可见的凝集反应就判为阳 性；
整理课件
作凝集反应时，有个别血清会出现前带现象，即 稀释度低的血清管内(或血清量多的格)不发生凝 集，而稀释度高的管内(或血清量少的格)出现凝 集，这叫做前带现象。如果某血清在平板凝集反 应中出现了前带现象，那么做试管反应时应多做 几个管，多采用几个稀释度。
氯化钠的含量增高对血清反应有明显的影响，盐 的浓度越高，反应的敏感性提高，因此在兽医界 为了克服凝集反应中的阻抑抗体的干扰，对羊血 清采用高渗盐水作凝集反应，一般浓度在 10~12%，切记一般人血清不能用高渗盐水。
布鲁氏菌试管凝集试验 ppt课件
布鲁氏菌试管凝集试验
6
血清学检查既可协助早期诊断，还可 确定是否复发或重复感染。
感染1-2周后，患者血清中出现IgM抗 体，可以用凝集试验或抗人球蛋白试 验检测．
感染３周后，患者血清中出现IgG抗体， 可以用补体结合试验，荧光抗体或 ELISA检测．
布鲁氏菌试管凝集试验
7
虎红平板的凝集反应（RBPT）
+++：有明显的凝聚片，液体几乎完全透明，75%凝集
++：有可见的凝集片，液体不甚透明，50%凝集
+：液体混浊，只有少量粒状物，25%凝集
-：液体均匀混浊
布鲁氏菌试管凝集试验
12
评价
此法简便、快速、容易操作，适于基层大面积检 疫；
此法有一定敏感性，检查牛的阳性率稍高于绵羊、 山羊。
因为在酸性环境下IgM活性受抑，该法主要是检 查IgG类凝集抗体，所以特异性较好，与补体结合 试验、二巯基乙醇（2-ME）试验和抗球蛋白 （Coomb’s0）试验有较高的吻合率。
血清对照为清亮透明无沉淀,抗原对照为均 匀混浊在两种对照管都成立的情况下，才 可判定试验管，否则应重做。对沉淀需要 经验判定。
布鲁氏菌试管凝集试验
23
“++++”完全凝集，上清液100%清亮
“+++” 几乎完全凝集，上清液75%清亮 “++”显著凝集，上清液50%清亮 “+” 微量凝集，液体25%清亮 “-” 无凝集，液体不清亮 确定每份血清滴度是以出现“++”及以上的
温度：适当提高温度可以增多抗原与抗体的碰撞机会。促 进反应现象加速出现。一般最适温度范围在0-56之间。在 这个范围内，温度低，对反应的促进作用较小，但生成的 复合物不易解离。温度高，对反应的促进作用较大，但生 成的复合物容易解离。实际工作中，多数反应在37进行。 在试验过程中，一般在加温之前，适度的振摇抗原抗体的 混合液，也能增加两者之间的碰撞机会。
布鲁氏杆菌病-PPT精美课件
03
一次（以48H结果为准）。 判定反应标准：阳性反应局部红肿达
04
2x2cm或面积4cm2
皮内变态反应注意事项
保存：布氏菌素于4-10℃冷 暗处.
6
制品浑浊，有摇不散的沉淀，
有异物，安瓶有裂纹，标签 5
不清，过期失效者不可使用。
面积计算：浸润、伪足都属 于测量范围
4
1
部位：要皮内注射，切勿皮下 注射
急性期患者可以产生极 度的毒血症，血小板减 少，心内膜炎。
慢性期患者有精神抑郁不振、表情淡 漠，失眠，烦燥，畏寒喜暖，四肢发 冷，阳萎，遗精，自觉手足发烧。
食欲不振，腹泻，便秘。
主要体征
皮疹：充血性皮疹，出血性紫斑 淋巴结肿大：淋巴结炎，化脓 骨关节变化：关节肿大，关节粘
连，脓肿 肝脾肿大，黄疸 软组织肿胀：筋膜、健膜、关节
3型
3
牛种布氏菌（Br abortus) 1、2、
3、4、5、6、7、9型
4
猪种布氏菌（Br suis)
1、2、
3、4、5型
5
沙漠森林野鼠种布氏菌（Br
neotomae)
6
绵羊附睾种布氏菌（Br ovis)
7
犬种布氏菌（Br canis)
三、布病的发病机理
感染过程：感染过程的形成及临床表现特点，在很大程度上 取决于布氏菌侵入途径、菌量、菌型、毒力和人体的生理状 态。
○ 凡具备1、2和第3项中的任何一项检查阳性即可确定为布病病人。 ○ 对已确诊的慢性布病病人和接种过菌苗的人，应以临床症状为主要依据，血清学试验效
价高低，皮变反应仅供参考。
实验室检查阳性判定标准
病原分离：检出布氏菌
01
试验凝集试验： 1:100（++） 以上
一次（以48H结果为准）。 判定反应标准：阳性反应局部红肿达
04
2x2cm或面积4cm2
皮内变态反应注意事项
保存：布氏菌素于4-10℃冷 暗处.
6
制品浑浊，有摇不散的沉淀，
有异物，安瓶有裂纹，标签 5
不清，过期失效者不可使用。
面积计算：浸润、伪足都属 于测量范围
4
1
部位：要皮内注射，切勿皮下 注射
急性期患者可以产生极 度的毒血症，血小板减 少，心内膜炎。
慢性期患者有精神抑郁不振、表情淡 漠，失眠，烦燥，畏寒喜暖，四肢发 冷，阳萎，遗精，自觉手足发烧。
食欲不振，腹泻，便秘。
主要体征
皮疹：充血性皮疹，出血性紫斑 淋巴结肿大：淋巴结炎，化脓 骨关节变化：关节肿大，关节粘
连，脓肿 肝脾肿大，黄疸 软组织肿胀：筋膜、健膜、关节
3型
3
牛种布氏菌（Br abortus) 1、2、
3、4、5、6、7、9型
4
猪种布氏菌（Br suis)
1、2、
3、4、5型
5
沙漠森林野鼠种布氏菌（Br
neotomae)
6
绵羊附睾种布氏菌（Br ovis)
7
犬种布氏菌（Br canis)
三、布病的发病机理
感染过程：感染过程的形成及临床表现特点，在很大程度上 取决于布氏菌侵入途径、菌量、菌型、毒力和人体的生理状 态。
○ 凡具备1、2和第3项中的任何一项检查阳性即可确定为布病病人。 ○ 对已确诊的慢性布病病人和接种过菌苗的人，应以临床症状为主要依据，血清学试验效
价高低，皮变反应仅供参考。
实验室检查阳性判定标准
病原分离：检出布氏菌
01
试验凝集试验： 1:100（++） 以上
布氏杆菌病PPT课件
1、 败血症: 神志不清，甚至昏迷或休克。白细胞增高，以中性粒细 胞增高显著，进行性贫血；血培养为其他病原菌 2、布病：高热时神志清楚，甚少谵妄。白细胞减少， 淋巴细胞相对增多
鉴别诊断
布病与疟疾相鉴别：
1、疟疾发病时有规律的热型，布病没有 2、布病有运动器官和生殖器官损害，疟疾没有 3、疟疾的末梢血图片可发现疟原虫
• 约50%：出现肝肿大、肝区疼痛，脾多为轻度肿大 • 经口感染：颈部、咽后壁和颌下淋巴结肿大为主 • 接触性传染者：腋下或腹股沟淋巴结，有时腹腔或胸腔淋巴结 • 肿大淋巴结：无明显疼痛，可自行消散 • 化脓：破溃形成瘘管
临床表现
• 急性期经抗菌治疗后，约10%以上复发 • 复发常发生于急性感染后数月（至治疗后2年）
实验室检查
假阴性： 1、潜伏期 2、细菌在局部淋巴结，抗体滴度低 3、慢性期，细菌长期刺激，宿主对抗原不敏感，抗 体滴度低 假阳性：
某些G-菌：巴士、土炕、弯杆菌、大肠杆菌（与布 鲁氏菌有“类属抗原”），但抗体滴度一般阳性及格， 复检阴性，或最多原来水平
实验室检查
PCR检测布氏杆菌DNA：快速、准确作出诊断
发病机制
机制复杂：细菌、毒素及变态反应在发病中起作用
感染过程大致分以下几个阶段 淋巴源性迁徙阶段（原发病灶形成） 菌血症阶段 多发性病灶形成阶段 慢性布病阶段 慢性纤维化阶段
发病机制
1、淋巴源性迁徙 布氏杆菌 淋巴管
局部淋巴结大量繁殖 增生性炎症淋巴结炎
肉芽肿性淋巴结炎 （形成原发病灶）
实验室检查
血象：白细胞计数正常或减少，淋巴或单核细胞增多 部分患者有血小板减少
血沉：血沉增快，以急性期发热患者更为显著 肝功：可出现各种异常改变，但无特异性
鉴别诊断
布病与疟疾相鉴别：
1、疟疾发病时有规律的热型，布病没有 2、布病有运动器官和生殖器官损害，疟疾没有 3、疟疾的末梢血图片可发现疟原虫
• 约50%：出现肝肿大、肝区疼痛，脾多为轻度肿大 • 经口感染：颈部、咽后壁和颌下淋巴结肿大为主 • 接触性传染者：腋下或腹股沟淋巴结，有时腹腔或胸腔淋巴结 • 肿大淋巴结：无明显疼痛，可自行消散 • 化脓：破溃形成瘘管
临床表现
• 急性期经抗菌治疗后，约10%以上复发 • 复发常发生于急性感染后数月（至治疗后2年）
实验室检查
假阴性： 1、潜伏期 2、细菌在局部淋巴结，抗体滴度低 3、慢性期，细菌长期刺激，宿主对抗原不敏感，抗 体滴度低 假阳性：
某些G-菌：巴士、土炕、弯杆菌、大肠杆菌（与布 鲁氏菌有“类属抗原”），但抗体滴度一般阳性及格， 复检阴性，或最多原来水平
实验室检查
PCR检测布氏杆菌DNA：快速、准确作出诊断
发病机制
机制复杂：细菌、毒素及变态反应在发病中起作用
感染过程大致分以下几个阶段 淋巴源性迁徙阶段（原发病灶形成） 菌血症阶段 多发性病灶形成阶段 慢性布病阶段 慢性纤维化阶段
发病机制
1、淋巴源性迁徙 布氏杆菌 淋巴管
局部淋巴结大量繁殖 增生性炎症淋巴结炎
肉芽肿性淋巴结炎 （形成原发病灶）
实验室检查
血象：白细胞计数正常或减少，淋巴或单核细胞增多 部分患者有血小板减少
血沉：血沉增快，以急性期发热患者更为显著 肝功：可出现各种异常改变，但无特异性
布鲁氏菌试管凝集试验
发展
随着免疫学技术的不断进步，布鲁氏菌试管凝集试验在操作简便性、特异性、 敏感性等方面得到了显著提高，为临床诊断和治疗布鲁氏菌病提供了有力支持。
02 试验材料与步骤
试验材料
布鲁氏菌抗原
搅拌棒 试管
试验血清 抗凝剂
试验步骤
1. 将抗凝剂与试验血清混 合，制备待测血清。
3. 用搅拌棒充分搅拌，使 血清和抗原充分混合。
试验应用
01
02
03
诊断布鲁氏菌病
通过检测血清中是否存在 布鲁氏菌抗体，用于诊断 布鲁氏菌病。
监测动物感染情况
对动物进行布鲁氏菌抗体 检测，了解动物感染情况， 评估疾病控制效果。
流行病学调查
通过检测人群中布鲁氏菌 抗体阳性率，了解疾病流 行情况，为防控措施制定 提供依据。
注意事项
血清标本采集
采集血清时，应确保血 液自然凝固，避免溶血
实验安全与防护
个人防护措施
实验操作人员应穿戴符合要求的个人 防护装备，如实验服、口罩、手套等， 以降低感染风险。
废弃物处理
实验过程中产生的废弃物应按照相关 规定进行无害化处理，防止病原微生 物的传播。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
可疑
表示受检血清中存在低滴度的布 鲁氏菌抗体，需要进一步确认。
案例分析
病例一
患者A出现持续高热、多汗、关节疼痛等症状，经过布鲁氏菌试管凝集试验检测 ，结果为阳性，确诊为布鲁氏菌病。经过及时治疗，患者A康复。
病例二
患者B出现类似感冒的症状，经过布鲁氏菌试管凝集试验检测，结果为阴性，排 除布鲁氏菌病的可能性。患者B按普通感冒进行治疗，症状逐渐缓解。
该准则规定了涉及病原微生物的实验活动应当遵守的通用规则，以确保实验操作的安全性。
随着免疫学技术的不断进步，布鲁氏菌试管凝集试验在操作简便性、特异性、 敏感性等方面得到了显著提高，为临床诊断和治疗布鲁氏菌病提供了有力支持。
02 试验材料与步骤
试验材料
布鲁氏菌抗原
搅拌棒 试管
试验血清 抗凝剂
试验步骤
1. 将抗凝剂与试验血清混 合，制备待测血清。
3. 用搅拌棒充分搅拌，使 血清和抗原充分混合。
试验应用
01
02
03
诊断布鲁氏菌病
通过检测血清中是否存在 布鲁氏菌抗体，用于诊断 布鲁氏菌病。
监测动物感染情况
对动物进行布鲁氏菌抗体 检测，了解动物感染情况， 评估疾病控制效果。
流行病学调查
通过检测人群中布鲁氏菌 抗体阳性率，了解疾病流 行情况，为防控措施制定 提供依据。
注意事项
血清标本采集
采集血清时，应确保血 液自然凝固，避免溶血
实验安全与防护
个人防护措施
实验操作人员应穿戴符合要求的个人 防护装备，如实验服、口罩、手套等， 以降低感染风险。
废弃物处理
实验过程中产生的废弃物应按照相关 规定进行无害化处理，防止病原微生 物的传播。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
可疑
表示受检血清中存在低滴度的布 鲁氏菌抗体，需要进一步确认。
案例分析
病例一
患者A出现持续高热、多汗、关节疼痛等症状，经过布鲁氏菌试管凝集试验检测 ，结果为阳性，确诊为布鲁氏菌病。经过及时治疗，患者A康复。
病例二
患者B出现类似感冒的症状，经过布鲁氏菌试管凝集试验检测，结果为阴性，排 除布鲁氏菌病的可能性。患者B按普通感冒进行治疗，症状逐渐缓解。
该准则规定了涉及病原微生物的实验活动应当遵守的通用规则，以确保实验操作的安全性。
凝集试验
2.3 胰蛋白胨琼脂培养基：
胰蛋白胨20克
氯化钠 蒸馏水
葡萄糖
5克
10克
20克
琼脂
1000毫升
先把琼脂放在蒸馏水中加热熔化，然后将上 述其余各成分加入熔化，用纱布脱脂棉过滤， 调pH6.8 ~ 7.0，分装，13磅高压30分钟备用。
二、防止与个人防护 1 防止经皮肤感染、粘膜感染和呼吸道 感染
结果分析：共检样品多少,其中阳性多少,可疑多少,阴性多少 备 注（使用方法）:使用方法,使用试剂厂家及批号 检验人员： 复核人： 年 月 日
试管凝集反应试验原始结果记录表
稀 释 度 编号 1 2 3 1 2 3 阳性 对照 阴性 对照
1:50
1:100
1:200
1:400
4 5
# -
# -
# -
# -
布鲁氏菌病试管凝集反应试验（牛）
1 血清稀 释度
0.5% 石 炭酸生 理盐水 被检血 清或阳 阴性血 清对照 总 量 加抗原 （1：20）
2 1:100
3 1:200
4 1:400
5 1:800
-
n
1:50
1.2
0.5
0.75
0.5
0.5
0.5
0.5
弃去 0.5
0.05
弃去 0.25
0.5
0.5
0.5
3.2.3.8 将0.5ml 20倍稀释的抗原加入已 稀释好的各血清管中，并振摇均匀，羊 和猪的血清稀释则依次变为1:25 ; 1:50 ; 1:100和1:200，牛、马和骆驼的血清稀释 度则依次变为1:50 ; 1:100；1:200和1:400。 大规模检疫时也可只用2个稀释度，即牛、 马、骆驼用1:50 和1:100，猪、山羊、绵 羊和狗用1:25 和1:50 。