间充质干细胞生物及临床应用 PPT课件
(完整)胎盘间充质干细胞的分离和培养 2016.07.21
胎盘间充质干细胞的分离，原代与继代培养及鉴定刘亭2016.7。
21目录前言 (2)1分离制备PMSC组织的选取 (4)2脐带，胎盘MSC的分离与纯化 (6)2.1胎盘组织的获取，存储与清洗 (6)2-2 脐带，胎盘MSC的分离及纯化方法 (7)3 原代培养和继代培养 (11)3—1培养基 (11)3-2培养密度 (12)3-3培养条件 (13)3—4换液 (13)3—5 传代培养 (13)3—6细胞形态与生长速度 (14)3—7 MSC的冻存与复苏： (14)4细胞表面抗原检测 (14)5生长曲线 (15)6细胞周期 (15)7分化潜能 (15)参考文献 (15)附件1不同实验室从脐带血,脐带和胎盘等各组织中分离MSC的方法.. 16脐带血 (16)脐带 (17)羊膜 (19)绒毛膜 (19)蜕膜层 (20)胎盘 (21)整体灌注法 (22)附件2 背景知识 (22)附件3 PMSC实验所需试剂 (23)前言干细胞（Stem cell，SC）是一种能够自我更新且未分化并可分化成两个或两个以上其它品系的细胞。
在一定的条件下，干细胞能够分化成为多种成熟细胞类型。
按照来源和分化潜能不同，干细胞可分为胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESC）和成体干细胞(Adult stem cell，ASC）两类。
胚胎干细胞来源于早期的胚泡和胚胎内层的细胞群，并且具有向3个胚层细胞分化的能力.但是胚胎干细胞应用时产生的免疫排斥、体内实验中引发肿瘤生成以及所涉及的伦理问题等影响并制约了临床应用。
成体干细胞形成于原肠胚形成后的胎儿和成体组织,早期研究认为，成体干细胞主要分化为其来源组织的细胞类型。
然而，近几年来的很多研究表明，成体干细胞具有能够分化成为除来源以外的其他胚层组织的能力。
间充质干细胞(Mesenchymal stem cell， MSC）又称为基质干细胞，是属于成体干细胞的一种，最早从骨髓中分离而来。
脂肪间充质干细胞定义
脂肪间充质干细胞定义
脂肪间充质干细胞（Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells，ADSCs）是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞，它们来源于人体脂肪组织。
这些细胞在特定的诱导条件下，可以分化成多种细胞类型，如脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞、心肌细胞、神经细胞和内皮细胞等。
因此，脂肪间充质干细胞在再生医学、组织工程和细胞治疗等领域具有广泛的应用前景。
脂肪间充质干细胞的主要特点包括：1）易于获取，来源丰富，可从人体脂肪组织中提取；2）具有较强的增殖能力和多向分化潜能；3）免疫原性低，不会引起明显的免疫排斥反应；4）具有抗炎、抗凋亡和促进组织修复的能力。
在医学应用方面，脂肪间充质干细胞已被用于治疗多种疾病，如心血管疾病、糖尿病、神经系统疾病、自身免疫性疾病和皮肤损伤等。
通过将这些细胞移植到患者体内，可以促进受损组织的修复和再生，从而改善疾病症状。
然而，脂肪间充质干细胞的应用仍面临一些挑战和限制，如细胞分化机制尚未完全阐明、细胞来源和质量的不稳定性、以及移植后的细胞存活和分化等问题。
因此，未来需要进一步深入研究脂肪间充质干细胞的生物学特性和分化机制，以优化细胞培养和移植技术，提高其在医学应用中的疗效和安全性。
总之，脂肪间充质干细胞作为一种具有广泛应用前景的细胞类型，在再生医学和细胞治疗等领域发挥着重要作用。
随着科学技术的不断进步和研究的深入，相信这些细胞将在未来为人类健康事业做出更大的贡献。
骨髓间充质干细胞 骨形成标志物
骨髓间充质干细胞骨形成标志物骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是一类具有多向分化潜能和自我更新能力的干细胞，在体内广泛存在于骨髓、脂肪组织、胎盘等多个组织中。
它们不仅可以分化为骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞等成骨细胞，还具有抗炎、免疫调节、创伤修复等多种生物学功能。
因此，MSCs在组织工程、再生医学和临床治疗等领域具有广阔的应用前景。
骨形成标志物是用来评估骨形成过程中相关细胞活性和功能的指标。
常用的骨形成标志物有碱性磷酸酶（ALP）、骨骼特异性碱性磷酸酶（BALP）、骨钙素（OCN）、骨形态发生蛋白（BMP）等。
这些标志物的表达水平可以反映骨细胞的分化和骨形成的程度。
研究表明，MSCs具有较高的骨形成潜能。
在适当的诱导条件下，MSCs可以分化为成骨细胞，并表达一系列骨形成标志物。
碱性磷酸酶是成骨细胞常见的表面标志物，其在骨细胞分化过程中起到重要的催化作用。
BALP是碱性磷酸酶的骨骼特异性亚型，其表达水平可以直接反映成骨细胞的分化程度。
OCN是一种由成骨细胞合成和分泌的蛋白质，是成骨细胞功能活性的重要指标。
BMP是促进骨细胞分化和骨形成的重要因子，在MSCs向骨细胞分化过程中起到关键的调控作用。
研究发现，MSCs在体外培养条件下，通过特定的生长因子和细胞因子的刺激，可以诱导其向成骨细胞分化，并表达骨形成标志物。
例如，将MSCs培养在含有骨形成相关因子（如BMP-2、BMP-7等）的培养基中，可以明显促进MSCs向成骨细胞分化，并增强其表达骨形成标志物的能力。
MSCs还具有抗炎和免疫调节的功能。
炎症反应是骨损伤和骨疾病发生发展的重要环节，而MSCs可以通过抑制炎症因子的产生和调节免疫细胞的活性，减轻炎症反应，促进骨修复和再生。
研究表明，MSCs分泌的细胞因子能够抑制炎症介质的产生和释放，减轻炎症反应，促进受损组织的修复。
同时，MSCs还可以调节免疫细胞的活性，抑制免疫反应的过度，减少免疫介导的骨破坏，并促进骨形成。
间充质干细胞：生物学性状和潜在临床应用
作 为 临 床 组 织 再 生 而 将 基 质细 胞 系 统用 于 直 接 骨 化 ， 们 人 发现 移 植 在 明 胶 海绵 的 骨 髓 问 党 质 戚 纤 维 细 胞 可用 于修 补 颅 面骨 发 育 障 碍 ＝分 离 自长 骨 的大 鼠 间 充 质干 细 胞 ， 扩增 培 养 经 并植 ＾ ＨＡ／＇Ｐ后 能 修 补 同 基 因 鼠 类 的胫 骨 严 重 变 形 ； 似 Ｃ ｌ 相 的 由 ｘ射 线 和 组 织 学 评 价 的 骨 再 生 过 程 ． 是 用 牯 附 分 子 则
脂 肪 系 的 基 本 条件 。选 择 性 阻 断 Ｂ ＭＰ受体 １ Ｂ型 （ ＭＰ 一Ｂ Ｂ Ｒ１） 导致 向 脂 肪 系 分 化 ． 表 明 Ｂ Ｋ １ 这 ＭＰ 一 Ｂ的 表 选 是 间 充 质 干 细 胞 向成 骨 系 分 化 的 条件 相 反 ． ＭＰ Ａ 过 渡 表 达 剐 阻 断 脂 肪 Ｂ Ｒ１ 系 分化 而提 高成 骨 系分 化 ， 表 明 Ｂ 这 ＭＰ受 体 暂 时 表 达 或缺 失 可 能 对 问 充 质 干细 胞分 化 为 成 骨细 胞 还 是 脂 肪 细 胞 上 起 关 键
细胞。
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干细胞与抗衰老的秘密 ppt课件
2020/12/12
1目录Biblioteka 01海南博鳌生命科学研发院
02
永葆年轻的秘密
03
什么是干细胞
04
干细胞的应用
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
2020/12/12
5
海南博鳌生命科学研发院实验室
2020/12/12
6
专利技术
海南博鳌金荣生命科学研发院通过全球范围内的顶尖专家潜心研发出了： 细胞再生医学、免疫力评估、基因检测、生命银行、细胞免疫疗法等一 套成熟稳定的精准医疗技术。目前在这些领域已授权和已公示的相关国 家发明专利21项，实用新型专利36项。
几乎每个人都希望自己能够永远年轻。
古今中外，有很多名流显贵花费了大量的人力和物力希望 找到能让自己青春永驻的“神药”。
在西方神话里的吸血鬼，靠每晚吸食年轻女子的血液，可 以不死不老，永葆青春。
这种耸人听闻的传闻，现在，真的已经进入了科学研究。
25
2020/12/12
2016年，首次人类的 “换血” 实验尝试进行...
再生：细胞衰老 1.自体干细胞分化为新生细胞 2.自体干细胞促进休眠干细胞苏 醒
清除：细胞变异
1.提高免疫功能清除变异细胞 2.增加免疫细胞清除变异细胞
12
子宫内膜 骨髓 肌肉
2020/12/12
骨及软骨
干细胞
脂肪
乳牙
珍惜您的干细胞！
13
干细胞-最安全的抗衰老新技术
干细胞 PPT课件
1998 Thomson等建立第一个人胚胎干细胞系 1996 克隆羊Dolly诞生
2000s 很多报道表明成体干细胞具有可塑性 2001 美国Advanced Cell Technology公司的科学家首次采用克隆技
术培育出人类早期胚胎（6个分裂球） 2004-2005 韩国研究者黄禹锡(Hwang Woo-suk)声称利用体细胞核
② 胚胎生殖细胞（Embryonic germ cells，EG）：来自胎 儿性腺的原生殖细胞；
③ 胚胎肿瘤细胞（Embryonic Carcinoma Cells, EC）：来 自畸胎瘤，但为非整倍体细胞。
19
胚胎生殖细胞（Embryonic germ cells，EG） 指来自于5-10周龄的胚胎性腺区的早期生殖细胞。
在发育后期，性腺区发育成睾丸或卵巢，原始生殖细 胞（primordial germ cell，PGC）产生精子或卵子。
胚胎肿瘤细胞（Embryonic Carcinoma Cells, EC） 是来源于恶性畸胎瘤的一种多潜能干细胞。畸胎瘤
是由机体内幼稚生殖细胞发生变异而形成的肿瘤。恶 性畸胎瘤内既含有各种各样分化成熟的组织，还含有 一些未分化的、能不断增殖的干细胞，因其形态和发 育潜能都类似胚胎细胞，而且是恶性的，故称其为胚 胎肿瘤细胞。
来自自体的干细胞治疗不会产生免疫反应
肿瘤形成率相对较低
遗传改造较难（由于细胞数量少，而且难于 培养），可采用细胞融合进行基因治疗。 异体移植需考虑配型
已用于临床治疗（如治疗白血病和淋巴瘤）16
根据分化潜能分类
1.全能干细胞（Totipotent stem cell） 2.多潜能干细胞（Pluripotent stem cell） 3.多能干细胞（Multipotent stem cells） 4.单能干细胞（Unipotent stem cell）
干细胞及行业概述ppt课件
• 3） 下游细胞治疗以医院为主体，判断政策放开后中游企业会向下 游扩张。目前从事细胞治疗的医院主要为部队医院，如北京302 医 院等、海军总医院、武警总医院等。
• 随着干细胞科普知识的普及，新生儿干细胞存储市场有望达到百300 亿规模。我国目前每年新生儿数量约1700 万人，其中城市新生儿数 量不低于30%，随着二胎政策的放开，预计5 年后每年新生儿数量 将达到2010 万左右。 随着近年来干细胞科普知识的广泛普及、干 细胞治疗政策的放开，我们判断新生儿储存干细胞的比例将逐渐提 升。假设10%储存干细胞，则市场空间为2万RMB/例*1700 万例 ×10%=340 亿/年。
干细胞概念股有哪些？ 干细胞概念股盘点
•
仟源医药（300254）:绝地转型,扬帆起航。自从限抗政策执行以来,公司原有主业抗生素受到抑制,但自2013
年已企稳;并购海力生和保灵集团,进入儿童产品和孕妇保健品领域;2014年收购杭州恩氏基因,进入基因保存以及环
境污染物检测业务。
•
北陆药业（300016）:主业稳健增长，战略布局细胞治疗与基因检测。进军细胞治疗领域，培育新利润贡献:
干细胞基础知识及行业概述
干细胞（stem cell）
• 未分化的 • 自我更新的 • 无限增殖（长期体外培养） • 多向分化潜能
干细胞的应用
药品开发
体外培养组织中 干细胞新药物的 实验研究 更快的药物 开发
培养队能干细胞 组织/细胞的治疗
研究开发
控制细胞分化的基 因程序是什么？
知识的快速获 得
骨髓
紫鑫经营。第二代基因测序仪技术主要是与中科院北京基因组研究所合作，目前基因测序仪仍处于研发试生产阶
干货间充质干细胞功能及应用
路漫漫其修远兮, 吾将上下而求索
Annu Rev Pathol 2011;6457-478
无处不在
牙髓
外周血
脐带
MSC
胸腺 羊膜
路漫漫其修远兮, 吾将上下而求索
骨髓
脂肪
脐带血
富含MSC的人体组织
路漫漫其修远兮, 吾将上下而求索
图片来自网络
年龄与骨髓MSC含量的变化
路漫漫其修远兮, 吾将上下而求索
路漫漫其修远兮, 吾将上下而求索
稳定性评价
P30
Although hUC-MSCs with genomic alterations do not undergo malignant transformation, periodic genomic monitoring and donor management focusing on genomic stability are recommended before these cells are used for clinical applications. (Cell Death Dis 2013;4e950)
稳定性评价
微生物
• 病毒 • 细菌 • 支原体
辅料素
• 内毒素 • 胎牛血清残留
生产工艺
稳定性评价
P14
P18 Array-CGH and cytogenetic analyses showed that BM-MSCs expanded in vitro did not show chromosomal abnormalities. Telomerase activity and hTERT transcripts were not expressed in any of the examined cultures and telomeres shortened during the culture period. (Cancer Res 2007;67(19):9142-9149)