LA-920的凝胶池与凝胶池座
交叉配血质控品(微柱凝胶法)SOP
交叉配血质控品（微柱凝胶法）标准操作程序（SOP）一、用途本试剂盒用于长春博迅生物技术有限责任公司生产的抗人球蛋白检测卡（12卡/盒）交叉配血实验的室内质量控制。
二、准备工作1、将质控品从冰箱取出后平衡至室温。
2、观察检测卡外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡平衡至室温（18－25℃），再用专用离心机离心5分钟。
三、操作步骤1、取1张微柱凝胶检测卡，取四孔分别标记为组合1、组合2、组合3、组合4；2、交叉配血实验按照组合1（样本4+样本1）、组合2（样本4+样本2）、组合3（样本5+样本1）、组合4（样本5+样本3）进行加样，先加红细胞再加血浆，各1滴（50ul）;3、加样完毕后，专用孵育器孵育15min；4、孵育完毕，专用离心机离心后判读结果。
结果判读样本组合检测结果检测作用组合1 样本4+样本1 + 检测IgM类抗原抗体反应组合2 样本4+样本2 0 检测IgM类抗原抗体反应组合3 样本5+样本1 + 检测IgG类抗原抗体反应组合4 样本5+样本3 0 检测IgG类抗原抗体反应“0”代表阴性，“+”代表阳性。
质控品检测结束后，用户可将检测结果与参考值进行比较，阳性质控结果与预期结果比较出现超过1+凝集强度的差异，或阴性质控出现阳性结果时，均视为失控。
失控后要分析查找原因，必要时重复实验，确认失控原因消除后开展正常检测工作。
特异性、抗原强度及效价：AB型RhD（+）红细胞抗原强度：与抗A、抗B、抗D抗体均发生凝集，无溶血及其他不易分辨现象；与抗A抗体凝集强度≥3+，与抗B抗体凝集强度≥3+，与抗D抗体凝集强度≥3+。
O型RhD（+）红细胞：与抗A、抗B不发生凝集，与抗D发生凝集，无溶血及其他不易分辨现象；与抗D抗体凝集强度≥3+。
RhD（-）红细胞：与抗D不发生凝集，无溶血及其他不易分辨现象。
O血清：与A1型红细胞、B型红细胞均发生凝集，间接抗人球蛋白试验阴性，无溶血及其他不易分辨现象；O血清与A1型红细胞反应，效价≥8，与B型红细胞反应，效价≥8。
pcr技术
正确选择凝胶浓度 对于琼脂糖凝胶电泳，浓度通常在0.5～2％之间，低浓度的用来进行大片段核酸的电泳，高浓度的用来进行小片段分析。低浓度胶易碎，小心操作和使用质量好的琼脂糖是解决办分辨，造成条带缺失现象。
适合的电泳缓冲液 常用的缓冲液有TAE和TBE，而TBE比TAE有着更好的缓冲能力。电泳时使用新制的缓冲液可以明显提高电泳效果。注意电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，PH值上升，缓冲性能下降，可能使DNA电泳产生条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。
电泳的合适电压和温度 电泳时电压不应该超过20V/cm，电泳温度应该低于30℃，对于巨大的DNA电泳，温度应该低于15℃。注意如果电泳时电压和温度过高，可能导致出现条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。特别是电压太大可能导致小片段跑出胶而出现缺带现象。
DNA样品的纯度和状态 注意样品中含盐量太高和含杂质蛋白均可以产生条带模糊和条带缺失的现象。乙醇沉淀可以去除多余的盐，用酚可以去除蛋白。注意变性的NA样品可能导致条带模糊和缺失，也可能出现不规则的DNA条带迁移。在上样前不要对DNA样品加热，用20mM NaCl缓冲液稀释可以防止DNA变性。
1、2 梳板的选用 一般每个制胶模具均配有多个齿型不同的梳板，梳齿宽厚，形成的点样孑L容积较大，用于DNA 片段回收实验等；相反，梳齿窄而薄，形成的点样孑L容积就较小，用于PCR产物、酶切产物鉴定等。梳板的选择主要是看上样量的多少而定，一般来说，上样量小时尽量选择薄的梳板制胶，此时电泳条带致密清晰，便于结果分析。另外，每次制胶时都要注意梳齿与底板的距离至少要1 mm，否则，拔梳板时易损坏凝胶孑L底层，导致点样后样品渗漏。当然，点样孑L的破坏还与拔梳板的时间和方法有关，一般凝胶需冷却30 min以上方可拔梳板，应急的情况下可以将成型的凝胶块放4℃ 冰箱中冷却15 min 左右，拔梳板的方法是将制胶槽放置在电泳槽中的电泳缓冲液中，然后垂直向上慢慢用力，因为有液体的润滑作用，梳板易拔出且不易损坏点样孑L。
coombs试验流程微柱凝胶法
coombs试验流程微柱凝胶法下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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原位凝胶技术技术
原位凝胶技术是一种药物递送系统，它允许药物在特定的生理条件下转化为凝胶状形态，从而实现药物在体内的缓释和靶向给药。
这种技术在药物研发和生物医学工程中具有重要意义。
原位凝胶技术的基本原理是在药物载体（如聚合物）中加入交联剂，这些交联剂在特定条件下（如pH变化、温度变化、光照或酶促反应）会发生交联反应，从而使载体由溶液状态转变为凝胶状态。
这种转变通常是不可逆的，一旦形成凝胶，它就会保持凝胶状直到药物释放完毕或被体内的酶分解。
原位凝胶技术的优点包括：
1. 缓释性：凝胶能够缓慢释放药物，减少用药频率，提高患者依从性。
2. 靶向性：可以通过选择特定的载体和交联剂，实现药物在特定部位的靶向释放。
3. 生物相容性：使用的聚合物通常具有良好的生物相容性，减少免疫反应和毒性。
4. 稳定性：凝胶状形态可以保护药物免受外界环境的影响，如pH、温度和酶的作用。
原位凝胶技术在医药领域的应用广泛，包括但不限于：
- 局部麻醉药：用于减轻疼痛和炎症。
- 抗病毒药物：用于治疗病毒性感染。
- 抗肿瘤药物：用于提高肿瘤内的药物浓度，减少全身副作用。
- 眼药水：用于治疗眼部疾病。
- 皮肤给药：用于治疗皮肤病。
在实际应用中，原位凝胶技术的开发和优化需要考虑多种因素，如聚合物的选择、交联剂的类型和浓度、药物的溶解度、生理条件的变化等。
通过精确控制这些因素，可以实现对药物释放速率和方式的精准调控，从而提高药物的治疗效果。
凝胶色谱柱的使用
凝胶色谱柱的使用一、凝胶色谱柱的使用原理凝胶色谱柱的分离基于分子在柱中的扩散速率差异。
凝胶柱独特的孔隙结构可以使得较小的分子扩散速度更快，从而在柱中落后于分子较大的组分。
分离效果主要依赖于分子与凝胶孔隙的相互作用力，如尺寸排阻作用、电荷作用或亲疏水作用。
根据分子的大小、形状和性质，可以选择不同类型的凝胶色谱柱。
二、凝胶色谱柱的类型1. 托尔伯特柱（Tskgel）：是一种常见的高效凝胶色谱柱，适用于生物大分子的分离和纯化。
根据分子的大小选择不同的托尔伯特柱，包括S、M和G三个系列，具有不同的孔径和分离范围。
2. 超滤柱（Sephacryl）：适用于分子量小于2×10^7道尔顿的生物大分子的分离和纯化。
超滤柱具有较大的孔径，可以快速分离高分子量的物质。
3. 离子交换柱（DEAE Sepharose、CM Sepharose）：用于根据分子电荷选择或分离带有不同电荷的生物大分子。
正离子交换柱（DEAE Sepharose）适用于弱酸的分子，而负离子交换柱（CM Sepharose）适用于弱碱的分子。
4. 亲和层析柱（Protein A、G、L Sepharose）：利用生物大分子与固定在凝胶上的特定结合剂之间的亲和作用进行分离。
常用的亲和层析柱包括Protein A、G和L Sepharose，用于分离抗体或蛋白质。
三、凝胶色谱柱的优缺点1.分离效果好：凝胶柱的孔隙结构可以有效分离不同大小和性质的分子，保证高分离效率和纯度。
2.操作简便：凝胶柱操作相对简单，无需复杂的设备和耗时的准备工作。
3.适用广泛：凝胶柱适用于各种生物大分子的分离和纯化，如蛋白质、抗体、核酸等。
1.分离速度较慢：由于分子在凝胶柱中的扩散速率较慢，分离过程相对缓慢，需要较长的操作时间。
2.不能分离具有相似大小和性质的分子：如果要分离具有相似大小和性质的分子，凝胶柱的分离效果会较差。
四、凝胶色谱柱的实验操作步骤1.准备工作：如准备所需样品、试剂和凝胶柱。
凝胶的种类及性质
凝胶的种类及性质 Document number：WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT凝胶的种类及性质（一）交联葡聚糖凝胶（Sephadex）⑴SephadexG交联葡聚糖的商品名为Sephndex，不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。
例如，G-25为每克凝胶膨胀时吸水克，同样G-200克每克千胶吸水20克。
交联葡聚糖凝胶的种类有G-10，G-15，G-25，G-50，G-75，G-100，G-150，和G-200。
因此，“G”反映，凝胶的交联程度，膨胀程度及分部范围。
⑵SephadexLH-20，是─SephadexG-25的羧丙基衍生物，能溶于水及亲脂溶剂，用于分离不溶于水的物质。
（二）琼脂糖凝胶：商品名很多，常见的有，Sepharose（瑞典，pharmacia），Bio-Gel-A（美国Bio-Rad）等。
琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构，网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。
一般情况下，它的结构是稳定的，可以在许多条件下使用（如水，pH4-9范围内的盐溶液）。
琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化，也不能高压消毒，可用化学灭菌活处理。
（三）聚丙烯酰胺凝胶：是一种人工合成凝胶，是以丙烯酰胺为单位，由甲叉双丙烯酰胺交联成的，经干燥粉碎或加工成形制成粒状，控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶。
交联剂越多，孔隙越小。
聚丙烯酰胺凝胶的商品为生物胶－P（Bio-GelP），由美国Bio-Rod厂生产，型号很多，从P-2至P-300共10种，P后面的数字再乘1000就相当于该凝胶的排阻限度。
（四）聚苯乙烯凝胶商品为Styrogel，具有大网孔结构，可用于分离分子量1600到40，000，000的生物大分子，适用于有机多聚物，分子量测定和脂溶性天然物的分级，凝胶机械强度好，洗脱剂可用甲基亚砜。
三、实验技术（一）层析柱层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。
预测凝胶点的测试方法有
预测凝胶点的测试方法有
1. 洛夫洛仑方法（Loewenstein-Jensen method）：这是一种常用的测试凝胶点的方法。
首先，将待测物（如溶液或化合物）放置在冷却的洛夫洛仑培养基上，并在适当温度下静置一段时间。
若待测物凝固形成凝胶，则可以确定其凝胶点。
2. 平板测试方法（Plate method）：这是一种常见的测试凝胶点的方法。
首先，在平板上均匀涂布待测物，并在适当温度下静置一段时间。
观察涂布物的形态变化，若出现明显的凝胶点，则可以确定其凝胶点。
3. 热台法（Hotstage method）：这是一种利用热台仔细控制温度测试凝胶点的方法。
首先，在热台上放置待测物，并逐渐加热。
观察待测物在不同温度下的形态变化，当出现凝胶点时，可以确定其凝胶点。
4. 光散射方法（Light scattering method）：这是一种利用光散射原理测试凝胶点的方法。
通过向待测物中照射激光，观察光散射的情况。
当待测物凝胶时，光散射强度会显著增加，可以通过测量光散射强度的变化来确定其凝胶点。
需要注意的是，不同的物质可能适用于不同的测试方法。
选择适当的方法取决于待测物的性质以及所需的凝胶点精度。
原位凝胶PPT课件
制备：冷法（4℃） 质评：胶凝温度（目测法，流变学法）
凝胶强度（自制装置） 生物黏附力（体内，体外） 流变学性质（流变图） 体外释放度（有膜，无膜溶出模型） 胶凝时间、膨胀性质、凝胶的形态学、给药部位的组织病理学评价
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进展：研究集中在制备、特性研究、动物实验等 非甾体抗炎药（双氯芬酸钠、布洛芬、酮洛芬） 麻醉药（利多卡因） 甾体抗炎药类（地塞米松磷酸钠） 避孕药（壬苯醇醚） 抗癌药物（5-氟尿嘧啶、甲氨喋呤、紫杉醇）
生胶凝，不需额外添加钙离子
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pH敏感型
1、卡波姆(carbopol) 机制：由于大量羧基基团的存在,可在水中溶解形成低黏度的溶液 在碱性溶液中羧基离子化,负电荷间的排斥作用使分子链膨胀,伸展并相互缠结形成凝胶
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应用 眼用：是制备眼用凝胶的理想辅料，但其酸性较强,不单独用 ＋另一种环境敏感聚合物，如： pH＋温度型聚合物（MC、HPMC、泊洛沙姆）
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常用聚合物及其应用 • 温度敏感型（泊洛沙姆407,纤维素类、聚（N－异丙基）丙烯酸酰胺，木聚糖） • 离子敏感型（海藻酸盐、Gelrite） • pH敏感型（CAP，卡波姆，CS及其衍生物） 温敏型＋离子敏型或pH敏型的联合使用，生物利用度更高
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存在问题及研究热点 问题：刺激性和安全性
的水中,引起聚合物沉降 但由于非水溶剂的毒性,目前这种机制的原位凝胶应用不多
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四、在药剂学中的应用
（一）黏膜给药 1、眼部 特点 • 传统制剂：生物利用度低,经鼻腔被吸收引起不
良反应 • 原位凝胶：生物黏附性及相容性良好；控制药
物释放；便于工业化生产；给药剂量准确，不 易引起不良反应 • 药物：抗细菌类、抗真菌类、抗病毒类、降眼 压类、缩瞳药物、视网膜玻璃体疾病的手术治 疗药物等