双缩脲总蛋白试剂
总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)
总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)简介：总蛋白(Total Protein ，TP)由白蛋白和球蛋白组成。
对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定，一般要基于如下两个假设：1、所有蛋白质分子由纯多肽组成，含氮量的质量百分比为16%；2、体液中含有数百个蛋白质分子，每个分子对测定反应都具有非常相似的特性。
目前常用的方法有：双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。
Leagene 总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的总蛋白含量测定。
双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下，铜离子与肽键形成有色螯合的铜复合物，呈紫色，所产生的颜色密度与参与反应肽键数成比例。
可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长。
双缩脲法测定蛋白浓度兼容性亦很好，不受大部分样本中其他成分的影响，但易受铜离子螯合剂影响。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 离心管或小试管2、 水浴锅或恒温箱3、 比色杯4、 分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、 取蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准中，充分溶解后配制成的蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。
亦可按自己试验要求继续进行稀释，如稀释至1mg/ml 。
特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。
例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取蛋白标准溶解于蔗糖中。
一般也可以用NaCl 或PBS 作为溶解总蛋白标准品的稀释液。
编号 名称TC0547 120T Storage试剂(A): 双缩脲试剂 250ml 4℃ 试剂(B): 蛋白标准 20mg RT 试剂(C): 蛋白标准配制液 5ml RT 试剂(D): 双缩脲空白试剂(备选) 100ml4℃ 使用说明书1份2、样本处理：血清、血浆样本直接取检测。
对于组织样本，按组织质量(g)：生理盐水比例，加入生理盐水或PBS，冰浴下匀浆后，离心，取上清待检。
总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求ruizhengshanda
总蛋白测定试剂盒（双缩脲法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中总蛋白的含量。
1.1产品型号/规格及其划分说明1.2主要组成成分2.1外观2.1.1 外观（液体单试剂）.R应为蓝色透明溶液，无混浊，无未溶解物；.校准液应为浅黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物；.试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.1.2 外观（液体双试剂）a）R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物；b）R2应为蓝色溶液，无混浊，无未溶解物；c）校准液应为浅黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物；d）试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量R和校准液的净含量不少于标示值。
R1、R2和校准液的净含量不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度在主波长540nm, 副波长700nm处（光径1cm），试剂空白吸光度A≤0.20。
2.4分析灵敏度测量1g/L的被测物时，吸光度变化△A≥0.0010。
2.5 线性区间在[10，110]g/L线性范围内，线性相关系数r≥0.990。
在[10,20]g/L范围内，绝对偏差不超过±2g/L；在(20,110]g/L范围内，相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1 重复性重复测定(45±5)g/L、(70±10)g/L和 (100±10)g/L的样品，变异系数CV%≤5%。
2.6.2 批间差相对极差≤5%。
2.7 准确度测定标准物质BW3627-2，测定值与靶值的相对偏差不超过±10%。
2.8 稳定性原包装的试剂盒在（2～8）℃避光保存，有效期为18个月。
试剂盒在规定的储存条件下保存至有效期满后，检测2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项，结果应符合各项目的要求。
总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求lideman
总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中总蛋白含量。
1.1规格试剂（R）5×80mL；7×60mL；5×40mL ；2×100mL；3×400mL；1×20mL。
校准品（选配）：1×3mL。
1.2组成1.2.1试剂组成试剂R（以下简称R），试剂的组成见表1：表1 试剂组成1.2.2校准品的组成：单水平的液体校准品，在水基质中添加牛血清白蛋白，稳定剂<0.1%；定值范围：（40-60）g/L。
2.1 外观液体单试剂：亮蓝色澄清液体。
校准品：无色至浅黄色液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 空白吸光度在37℃、（546 nm±10%范围内的）波长、1cm光径条件下，用去离子水或（生理盐水）作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度应<0.2 ABS。
2.4 分析灵敏度浓度为50g/L时，吸光度变化范围在（0.10- 0.35）之间。
2.5 线性范围在[10-100]g/L线性范围内，线性相关系数r2 ≥0.990。
在（30-100]g/L范围内的相对偏差≤10%；测定结果[10-30]g/L时绝对偏差≤3.0g/L。
2.6 精密度试剂盒测试项目精密度 CV< 3%。
2.7 批间差不同批号之间测定结果的相对极差应< 3%。
2.8 准确度相对偏差：用参考物质作为样本进行检测，测量结果与参考物质靶值的相对偏差应不超过±10%。
2.9稳定性原包装试剂（含校准品），在（2-8）℃下有效期为18个月，取失效期的试剂盒检测其试剂空白、分析灵敏度、线性范围、精密度、准确度应分别符合2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
2.10校准品的溯源性参见附录A。
总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求mairui
2性能指标
2.1外观
试剂1（R1）应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物；
试剂2（R2）应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物；
试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；包装标签文字符号应完整、清晰。
2.2净含量
液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白吸光度
试剂以水为空白在37 ℃ 1 ℃，546 nm 波长条件下，吸光度应小于0.200。
2.4分析灵敏度
当样本浓度为70 g/L 时，吸光度变化应不小于0.150。
2.5线性范围
试剂盒在（2～120）g/L 范围内：
a)线性相关系数r 应不小于0.995；
b)当样本浓度不小于30 g/L 时，线性相对偏差应不超过±6.0%；当样本浓度小于30 g/L 时，线性绝对偏差应不超过±3.6g/L。
2.6测量精密度
2.6.1重复性
变异系数：CV 应不大于 2.0％。
2.6.2批间差
相对极差：R 应不大于 4.5％。
2.7准确度
2.7.1国家标准品测试
测定国家标准品，测定结果与靶值的相对偏差应不超过±5.0% 。
2.7.2质控品测试
测定质控品，测定结果应在靶值范围内。
2.8分析特异性
血红蛋白浓度在250 mg/dL 内、抗坏血酸浓度在30 mg/dL 内、内源性酯浓度在1200 mg/dL 内、结合胆红素在21 mg/dL 内、非结合胆红素浓度均在21 mg/dL 内、葡聚糖（分子量：7w 或4w）浓度在3000 mg/dL 内，对试剂检测结果的偏差影响应在±10 .0%以内。
血清总蛋白测定(双缩脲试剂法)
生物化学实验报告姓名：学号：专业年级：组别：生物化学与分子生物学实验教学中心实验名称血清总蛋白测定（双缩脲试剂法）实验日期2014-11-21实验地点第五实验室合作者指导老师评分教师签名批改日期一、实验目的1、掌握双缩脲测定血清总蛋白的基本原理、操作；2、熟悉血清总蛋白的临床意义；3、了解双缩脲法测定血清总蛋白的特点和注意事项。
二、实验原理（一）：双缩脲反应在碱性溶液中,双缩脲(H2NOC－NH－CONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应。
两分子尿素加热脱氨缩合成的双缩脲（H2N-OC-NH-CO-NH2），因分子内含有两个邻接的肽键，在碱性溶液中可与Cu2+发生双缩脲反应，生成紫红色络合物；蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键（-CO-NH-），同样能在碱性条件下与Cu2+发生双缩脲反应，生成的紫红色络合物，且在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10～120g/L范围内有良好的线性关系。
三、材料与方法：实验材料样品：大牛血清试剂：双缩脲试剂、蛋白质标准液（70g/L）、生理盐水（%）器材：试管、加样枪、刻度吸管、洗耳球设备：1100分光光度计、水浴锅实验步骤取3支试管，做好标记(B空白对照，S标准液，U为待测大牛血清)，按下表操作：加入物（ml） B (空白）S （标准）U（待测）大牛血清（1：10）--蛋白标准液（1：10）--%氯化钠溶液--双缩脲试剂a.各管混匀，观察各试管颜色b.将各试管置于37℃水浴锅中加热20min，观察颜色c.将试管中的液体倒入比色杯中，置于1100分光光度计的样品槽内，在波长540nm，以空白管调零，测S和U管吸的光度。
d.测定结束后，将比色杯中的样品回收进试管依据公式算出结果四、结果与讨论：（一）：实验结果1、实验现象：a、在实验中首先加入双缩脲试剂，再依次加入%氯化钠溶液、蛋白质标准液、相应的大牛血清后溶液没有明显的颜色变化，呈淡蓝色透明状；b、水浴20分钟之后，B试管试管显淡蓝色；S试管和U试管显浅紫色且S试管的颜色比U试管的颜色稍深。
总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求jiuqiang
总蛋白测定试剂盒（双缩脲法）适用范围：用于体外定量测定人血清中的总蛋白含量。
1.1 包装规格
包装规格见表1。
表1 包装规格
1.2 主要组成成分
主要组成成分见表2。
表2 主要组成成分
2.1 外观
试剂为蓝色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；
试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量
试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度
试剂空白：A546nm（主）/A700nm（副）下测定空白吸光度应≤0.3000。
2.4 准确度
使用国际标准物质SRM927，对试剂盒进行测试，其测量结果的相对偏差应不超过±10%。
2.5 分析灵敏度
样本浓度为45g/L时，其吸光度变化在0.0300～0.1100之间。
2.6 线性区间
在[2.0，120.0]g/L区间内，线性相关系数r≥0.995，在[2.0，10.0]g/L区间内测定的绝对偏差应不超过±1.0g/L，在(10.0，120.0]g/L区间内测定的相对偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度
2.7.1 重复性
对高、低两个浓度的血清样本或质控品重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10％。
2.7.2 批间差
随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。
2.8 稳定性
试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为18个月。
在试剂盒有效期满后一个月以内，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。
总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求haomai
总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中总蛋白(TP)的含量。
1.1包装规格序号规格1 试剂1：2×50ml；校准品：1×3ml。
2 试剂1：6×60ml；校准品：1×3ml。
3 试剂1：6×100ml；校准品：1×3ml。
4 试剂1：4×100ml；校准品：1×3ml。
5 试剂1：1×1000ml；校准品：1×3ml。
6 试剂1：5×24ml；校准品：1×3ml。
7 试剂1：10L。
1.2主要组成成分本试剂由试剂1（R1）和校准品（STD）组成试剂1（R1）：氢氧化钠0.6mol/L酒石酸钾钠30mmol/L硫酸铜12mmol/L碘化钾30mmol/L校准品：蛋白质溶液（基质：水溶液；浓度：80g/L）。
2.1 外观试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰；R1为蓝色透明液体，校准品为无色透明液体。
液体试剂不得有沉淀和絮状物。
2.2 装量试剂瓶内液体装量应不少于标示值。
2.3 空白吸光度以生理盐水为样品，在37℃、546nm波长、1cm光径条件下，吸光度≤0.15。
2.4 分析灵敏度浓度为50g/L的样本，吸光度差值△A＞0.06。
2.5 准确性相对偏差应不大于10%。
2.6 重复性重复测试浓度在（70±10）g/L的控制血清，所得结果的重复性（变异系数，CV）应不大于10%。
2.7 线性2.7.1在(10，120)g/L范围内，线性相关系数r应不低于0.990；2.7.2 在(10，40]g/L范围内绝对偏差不超过±4.0g/L；(40，120)g/L范围内相对偏差不超过±10%。
2.8 批间差用三个批号的试剂盒测定同一份样本，试剂盒批间相对极差应不超过10%。
2.9 稳定性试剂盒在2～8℃避光保存，可稳定22个月。
取到效期后的样品检测试剂空白吸光度、分析灵敏度、准确度、重复性、线性范围应分别符合2.3、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。
总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求derui
总蛋白（TP）测定试剂盒
2、性能指标
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。
表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时，在波长546 nm，光径1.0 cm，温度37℃条件下，吸光度≤0.200。
2.3分析灵敏度
试剂盒测试70 g/L被测物时，吸光度变化值≥0.150。
2.4线性范围
2.4.1 试剂盒在30.0～120.0 g/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.995。
2.4.2 在30.0～120.0 g/L 区间（范围）内，线性相对偏差应不超过±6.0%。
2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤2.0%。
2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤5.0%。
2.6准确度
相对偏差（Bias%）应在±5.0%范围内。
2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。
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双缩脲总蛋白试剂
简介：
双缩脲是一种用于分析蛋白质的方法，双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下，铜离子与肽键形成有色螯合的铜复合物，呈紫色。
所产生的颜色密度与参与反应肽键数成比例。
可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长。
双缩脲法测定蛋白浓度兼容性亦很好，不受大部分样本中其他成分的影响，但易受铜离子螯合剂影响，另外，对于血清总蛋白的双缩脲分析，胆红素、脂类、血红蛋白、葡聚糖具有一定干扰作用。
Leagene 双缩脲总蛋白试剂由硫酸铜、酒石酸钾钠、氢氧化钠等组成，在浓度范围内有较好的线性关系，是对蛋白质的精确定量分析试剂。
组成：
自备材料：
1、 酶标仪或分光光度计
2、 96孔板或离心管
操作步骤(仅供参考)：
1、 取蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准(BSA)中，充分溶解后配制成160mg/ml 的蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。
特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。
例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取蛋白标准溶解于蔗糖中。
一般也可以用0.9%NaCl 或PBS 作为溶解BSA 稀释液。
2、 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl 加到96孔板的标准品孔，加稀释液补足。
3、 加适当体积待测蛋白样本到96孔板的样品孔中。
如果标准品稀释液与溶解待测蛋白样本的溶液不同，应在待测蛋白样本孔中加入20μl 稀释液；如果标准品稀释液与溶解待测蛋白样本的溶液相同，无需在待测蛋白样本孔中加入l 稀释液。
4、 各孔加入双缩脲总蛋白试剂。
5、 测定吸光值。
6、 根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。
注意事项： 编号 名称 PT0003 PT0003 Storage 双缩脲总蛋白试剂 100ml 500ml 4℃ 使用说明书 1份
1、待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中，否者待
测蛋白与蛋白标准中所含非蛋白成分不一致，有可能导致测定不准确。
2、待测蛋白和蛋白标准加入双缩脲试剂后，如果发现检测效果不佳，可以室温放置，颜
色会随着时间的延长不断加深。
显色反应也会随温度升高而加快。
如果浓度较低，可以适当延长孵育时间或在较高温度下孵育。
3、测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化，可能的原因
是样品中含有铜离子螯合剂。
4、建议每次测定时都做标准曲线。
因为颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应
的速度和温度有关，所以除非精确控制显色反应的时间和温度，否则如需精确测定宜每次都做标准曲线。
5、如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但应考虑根据比色皿的最小检
测体积。
应按比例适当加大双缩脲试剂的用量使总体积不小于最小检测体积，样品和标准品的用量亦相应按比例放大。
使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
6、检测中发现所有孔都呈暗紫色，可能原因是样品含有还原剂，应适当透析或稀释样品。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
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DC0032 Masson三色染色液
PE0081Tris-HCl缓冲液(1.5mol/L,pH8.8)
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PE0103Acr-Bis(30%,29:1)
PS0009Western及IP细胞裂解液
PT0001BCA蛋白定量试剂盒
PT0013考马斯亮蓝快速染色液
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