贵州蔬菜病毒病主要病毒种类检测

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蔬菜检疫性有害生物的检疫检验及控制

蔬菜检疫性有害生物的检疫检验及控制

蔬菜检疫性有害生物的检疫检验及控制蔬菜作为人们日常饮食中非常重要的一部分,其质量和安全问题备受关注。

蔬菜种植过程中可能会受到各种有害生物的侵害,而这些有害生物会对蔬菜的生长发育和品质安全造成极大的影响。

对蔬菜检疫性有害生物的检疫检验及控制显得至关重要,能有效保障蔬菜生产的质量和安全。

本文将就蔬菜检疫性有害生物的检疫检验及控制进行深入探讨。

一、蔬菜检疫性有害生物的种类和危害蔬菜检疫性有害生物主要包括昆虫、真菌、细菌、病毒等,它们会对蔬菜的生长发育和品质安全造成危害。

1. 昆虫昆虫是蔬菜生长过程中常见的有害生物,有些昆虫会通过叮咬或吸食植物汁液来危害蔬菜,有些昆虫还会传播蔬菜病毒病,对蔬菜产生严重的危害。

2. 真菌真菌是蔬菜病害的主要原因之一,它们会在蔬菜叶片、茎、果实等部位生长繁殖,导致蔬菜出现病斑、腐烂等现象。

3. 细菌部分细菌会导致蔬菜出现病害,例如细菌性软腐病、青霉病等,这些病害会影响蔬菜的贮藏和加工过程。

4. 病毒病毒是蔬菜重要的病原体,它们会引起蔬菜叶片发生症状变异、病斑、卷缩等,严重影响蔬菜的产量和质量。

蔬菜检疫性有害生物的检疫检验是确保蔬菜质量和安全的重要手段,主要包括进口检疫、出口检疫和国内检疫等环节。

1. 进口检疫进口的蔬菜需要进行严格的检疫检验,以确保无有害生物的引入。

检验人员会对蔬菜进行外观检查、取样检验、鉴定鉴别、病原体检测等,对有害生物进行科学鉴定和分析,确保蔬菜的安全性和无公共卫生风险。

针对蔬菜检疫性有害生物的危害,制定科学的控制措施是极为关键的。

1. 生物防治生物防治是一种利用天敌、病原体或其他生物制剂,对有害生物进行综合防治的方法。

可以选择对蔬菜有害的天敌放到蔬菜田间,采用生物制剂进行喷洒,以减少化学农药的使用,降低残留量,保护生态环境。

2. 机械防治机械防治是一种利用物理手段进行防治的方法,例如利用粘虫板、粘虫球等粘虫器具,捕捉和清除害虫,达到控制和防治有害生物的目的。

南方蔬菜常见病虫害诊断与防治技术

南方蔬菜常见病虫害诊断与防治技术

细菌性角斑病:主要分布在 长江流域和华南地区,危害 多种蔬菜,如黄瓜、番茄、 茄子等。
真菌性疫病:广泛分布于南 方地区,常危害瓜类、茄果 类等蔬菜。
病毒病:在南方地区也较为 普遍,常危害十字花科、茄 科等蔬菜。
病虫害发生规律及特点
病虫害的发生与气候条件密切相关。例 如,高温高湿条件下易发生真菌性病害
分子生物学检测
分子生物学检测是一种快速、准确、灵敏的诊断技术,通过检测病原菌的基因序列等特征 ,可以快速准确地诊断真菌性病害。
细菌性病害的诊断
病症识别
细菌性病害的识别通常依赖于病症,如溃疡、萎蔫等。不同种类的细菌性病害会有不同的病症表现,如软腐病、溃疡病等。通过对病症的观察和分析,可以初 步判断是哪种细菌性病害。
防治技术
选用抗病品种;加强栽培管理,如增施有机肥等;使用药剂防治,如使用抗生素或铜制剂进行喷雾防 治。
案例三:南方蔬菜病毒病和线虫病的防治
诊断方法
观察病症表现,如花叶、卷叶等症状; 进行病原检测,如通过电镜观察病毒粒 子或通过分子生物学检测病毒基因组。
VS
防治技术
选用抗病品种;加强栽培管理,如合理灌 溉、增施有机肥等;使用药剂防治,如使 用抗病毒剂进行喷雾防治;物理防治,如 及时清除病株、使用防虫网等措施防止害 虫传播病毒。
南方蔬菜常见病虫害诊断与 防治技术
2023-11-11
目录
• 南方蔬菜常见病虫害概述 • 南方蔬菜常见病害诊断技术 • 南方蔬菜常见虫害诊断技术 • 南方蔬菜病虫害综合防治技术 • 南方蔬菜病虫害防治案例分析
01 南方蔬菜常见病 虫害概述
பைடு நூலகம்
病虫害种类与分布
南方蔬菜常见的病虫害种类 繁多,包括病毒病、细菌性 病害、真菌性病害等。这些 病虫害在南方地区分布广泛 ,对南方蔬菜产业造成严重 影响。

蔬菜农残检测报告

蔬菜农残检测报告

蔬菜农残检测报告
报告编号:CD-2021-1234
检测日期:2021年5月20日
蔬菜种类:青菜、胡萝卜、白菜、西红柿
检测项目:农残检测
检测方法:高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)
检测结果如下:
1. 青菜中检测到以下农残:
- 杀虫剂:氯丹,0.02mg/kg(国家标准限量:0.1mg/kg)
- 杀虫剂:敌草隆,0.05mg/kg(国家标准限量:0.2mg/kg) - 杀虫剂:毒死蜱,未检出(国家标准限量:0.01mg/kg)
2. 胡萝卜中检测到以下农残:
- 杀虫剂:敌草隆,0.03mg/kg(国家标准限量:0.2mg/kg) - 杀虫剂:毒死蜱,未检出(国家标准限量:0.01mg/kg)
- 杀虫剂:毒死蜱,未检出(国家标准限量:0.01mg/kg)
3. 白菜中检测到以下农残:
- 杀虫剂:毒死蜱,0.02mg/kg(国家标准限量:0.01mg/kg) - 杀虫剂:敌草隆,未检出(国家标准限量:0.2mg/kg)
- 杀虫剂:毒死蜱,未检出(国家标准限量:0.01mg/kg)
4. 西红柿中检测到以下农残:
- 杀虫剂:毒死蜱,0.01mg/kg(国家标准限量:0.01mg/kg) - 杀虫剂:敌草隆,0.04mg/kg(国家标准限量:0.2mg/kg)
- 杀虫剂:毒死蜱,未检出(国家标准限量:0.01mg/kg)
总结:
青菜、胡萝卜、白菜、西红柿中检测到的农残含量均符合国家标准限量要求,食用安全。

建议在食用前以适当方式清洗蔬菜,以确保食品卫生安全。

蔬菜主要病毒

蔬菜主要病毒

2、黄瓜绿斑驳花叶病毒病(CGMMV)
严重为害葫芦科作物,为我国的检疫性有害
生物。自然界主要侵染甜瓜、西瓜、黄瓜、 南瓜及瓠瓜等多种葫芦科作物,通过种子和 土壤传播,此外也可通过汁液,农事操作及 叶片接触等方式进行传播。 带毒种子传播是该病毒远距离传播的主要途 径。
病害症状:症状因寄主、环境条件及株系的不同而有差 异,一般会使葫芦科作物的植株生长缓慢、矮化,结 果延迟,严重的导致不孕;叶片出现色斑、水疱及变 形;果实外部通常没有症状或出现色斑,内部果肉往 往出现变色、纤维化及腐烂;有的病株不出现症状而 表现为无症侵染。 1)黄瓜上, 最初新叶上出现黄色小斑点, 随后逐渐发 展为花叶、斑驳和浓绿泡状突起等症状, 叶脉间褪色 呈绿带状。叶片上引起色斑、水泡及变形,使植株矮 化、结果延时,果实大部分黄化或变白并产生黑绿色 水疱状的坏死斑,产量损失达15%;可延缓黄瓜植株 的生长发育,甚至导致不孕。

5、化学防治: TYLCV病毒属双生病毒,到上次为止 尚未有药剂能将其杀灭,但使用病毒抑制剂和激素、 叶面肥及植物营养平衡剂等配方药剂在发病前期使用, 能有效控制病株率上升,并能控制内潜TYLCV 的植株 出现症状,使其正常生长发育,获得良好收成。 寿光筛选出较好的配方有:(每15公斤清水中加入药 剂) 配方一:33%金毒克(30%盐酸吗啉胍和3%三氮唑核 苷)20ml、2%抗毒鹰TM(胺鲜酯和抗病毒因子) 15ml、21%过氧乙酸水剂30ml、15%糖醇锌液20ml, 混匀后喷洒全株,5-6天一次,直到病情消失。 配方二: 13%毒霸乳油(10%酰胺基酚和3%氨基寡 糖素)20ml、绿泰宝(0.05%核苷酸等水剂)30-50ml、 2%胺鲜酯水剂15ml、 15%糖醇锌液15ml,混匀后喷 洒全株,5-6天一次,直到病情消失。

蔬菜检疫性有害生物的检疫检验及控制

蔬菜检疫性有害生物的检疫检验及控制

蔬菜检疫性有害生物的检疫检验及控制蔬菜是人们日常饮食中不可或缺的食材之一,蔬菜的质量和安全问题一直备受关注。

在蔬菜生产和贸易中,常常会存在一些检疫性有害生物的问题,如害虫、病原体等,对蔬菜的产量和质量造成严重威胁。

为了确保蔬菜生产的安全和质量,国家和地区通常采取检疫检验和控制措施,以防止和减少检疫性有害生物的传播和危害。

本文将介绍蔬菜检疫性有害生物的检疫检验及控制措施,以期能够帮助相关从业人员和消费者加强对蔬菜质量安全的关注和认识。

一、蔬菜检疫性有害生物的种类蔬菜的检疫性有害生物种类繁多,包括害虫、病原体等。

在蔬菜生产和供应链中,常见的检疫性有害生物有蔬菜飞虱、蔬菜维管束锈病、白粉病等。

这些有害生物对蔬菜生长、开花、结果、产量和品质等方面造成不同程度的危害,如果不加以控制,将会对蔬菜的生产和贸易带来严重影响。

二、蔬菜检疫性有害生物的传播途径检疫性有害生物主要通过空气传播、昆虫传播、土壤传播等方式进行传播。

昆虫是检疫性有害生物的重要传播途径之一,它们在寻找食物的过程中,可能会带有病原体或虫害卵,从而传播到蔬菜植株上。

空气传播和土壤传播也是检疫性有害生物传播的重要途径,如果不加以控制,将会对蔬菜的生长和产量造成严重危害。

三、蔬菜检疫性有害生物的检疫检验为了防止和减少蔬菜检疫性有害生物的传播和危害,国家和地区通常会对蔬菜进行检疫检验。

检疫检验的主要目的是识别和排除携带有害生物的蔬菜,保障蔬菜的生产和贸易安全。

目前,常见的蔬菜检疫检验包括田间检疫和实验室检疫两种方式。

田间检疫主要是通过对蔬菜田地进行定期检查,发现和识别有害生物的危害。

这种方式主要适用于蔬菜生产的各个阶段,对害虫、病原体等有害生物进行实时监测和管控,以及及时采取相应的控制措施进行防治。

实验室检疫则是通过对蔬菜进行检疫样品的采集和实验室检测,识别和鉴定携带有害生物的蔬菜,确保其符合国家和地区的检疫标准。

实验室检疫通常由专业检验机构或者国家检疫部门负责,对检验结果负有最终责任。

蔬菜病毒病识别与综合防治

蔬菜病毒病识别与综合防治

蔬菜病毒病识别与综合防治当前,控制蔬菜病毒病的为害已成为蔬菜生产中急需解决的问题,准确无误地识别蔬菜病毒病的症状、及时有效地控制蔬菜病毒病的传播和为害,对于有效防控蔬菜病毒病是十分必要的。

标签:蔬菜;病毒病识别;综合防治病毒病与有些非侵染性病害如缺素症、药害、遗传性或生理病害以及类菌原体病害的症状很相似,多表现为褪绿、花叶、变色、黄顶、巨芽或矮小等,一般菜农在田间不容易区分,易造成误导防治目标,因此,正确识别病毒病的症状尤为重要。

一、蔬菜病毒病的症状1.病毒病的外部症状。

植株受病毒病侵害后,在外部表现的症状主要有花叶、变色、坏死、枯萎和畸形等。

有的病毒侵害寄主后只引起一种症状,如花叶或变色,有的则可能表现出多种症状,可以先后出现,也可能同时出现,或在不同条件下出现不同的症状。

(1)花叶,花叶病株的叶片,尤其是嫩叶上的色泽不匀,深浅不一,局部的深绿与浅绿色呈镶嵌状。

花叶往往是比较后期的症状,在出现花叶之前,常常还可以看到有叶脉褪色或叶脉变色的“明脉”症状,或脉带变色,稍后则叶片上可见有不同颜色的斑块或圆斑出现,这些圆斑的边缘不是很清晰,但隐约可见形成斑驳,斑驳有时可进一步发展成边缘明显的花叶。

(2)变色,变色病株上叶片的色泽均匀地改变,常见的有褪绿、变黄、变红或变紫等,变色多发生在叶片上,有时也扩展到叶鞘、茎秆、花瓣甚至果实上,形成黄化、红化的植株。

(3)环斑,环斑病毒侵害植株后在叶片或果实上产生圆环状的斑,大多是同心圆的斑或线纹,在叶脉附近发生的环斑因受叶脉限制,表现为半环或连续波纹状的环,环纹多数是褪色或淡黄色的,少数发展为坏死的环纹,形成同心环的称环斑,未封闭的或波纹状的称环纹,不成环状的称为线纹或橡叶症。

(4)坏死,坏死是叶、叶柄、茎秆或果实上组织死亡或变质(变硬或木栓化)造成的,大多数坏死是局部性的,少数坏死也可以是全株性的。

根据坏死程度和范围大小,分为枯斑、坏死斑、沿脉坏死、顶尖枯死、蚀纹或开裂、星裂状坏死等。

一套适合烤烟3种RNA病毒的RT-PCR检测方法

一套适合烤烟3种RNA病毒的RT-PCR检测方法

2021年第2期GUANGXI PLANT PROTECTION2021,Vol.34.No.2一套适合烤烟3种RNA病毒的RT-PCR检测方法祖庆学1,李宏江2,聂忠扬1,于晓飞2,张翼飞1,李昊熙2*(1.贵州省贵阳市烟草公司开阳县分公司贵阳市550300;2.贵州大学烟草学院/贵州省烟草品质研究重点实验室贵阳市550025)摘要:烤烟是贵州省的重要经济作物,但是烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)和马铃薯Y病毒(PVY)3种RNA病毒在贵州烤烟产区造成巨大损失。

3种病毒引起的症状相似性造成了田间诊断的困难。

针对贵州烟区的样品,开发了一套包含了靶向3种病毒外壳蛋白基因特异性片段的RT-PCR检测方法。

3对引物涵盖的基因片段长度分别为:TMV-120bp,CMV-240bp,PVY-660bp,退火温度均为55˚C。

通过1次PCR反应,就可以根据扩增条带的大小判断病毒的种类,还可以检测复合侵染的样品中2种病毒与3种病毒混合DNA的种类。

该方法非常适合基层检测站点快速和高效地检测大批量烟叶样品,指导后续防控工作的开展。

关键词:烤烟;烟草花叶病毒;黄瓜花叶病毒;马铃薯Y病毒;检测中图分类号:S432.4+1文章标识码:B文章编号:1003-8779(2021)02-0027-05烤烟是贵州省的一种重要经济作物,但是烤烟生产受到多种病虫害的威胁。

烟草花叶病毒(To⁃bacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucum⁃ber mosaic virus,CMV)和马铃薯Y病毒(P otato vi⁃rus Y,PVY)3种正义单链核糖核酸(+ssRNA)病毒长期困扰了贵州各个主要烟区[1-4]。

病毒病不仅降低了烤烟产量,还影响了产品的质量和分级,造成了巨大的经济损失[5]。

由于植物病毒的治疗手段非常有限,抗病毒品种的选育和早期染病植株的清除是控制病毒病的主要手段[6]。

3种病毒中,CMV和PVY主要经过蚜虫等介体昆虫进行非持续性传播,而TMV则主要依靠机械摩擦传播,因此,针对性开展的阻断传播的防控手段就不尽相同。

蔬菜病毒病识别及综合防治技术

蔬菜病毒病识别及综合防治技术

河南农业年第期N NNONGY 一、蔬菜病毒病田间主要症状(一)花叶。

叶片色泽不匀,形成深绿、淡绿、黄绿相间的斑驳状,或环状,或疱状花叶,还可细分为以下几种:1、明脉及沿叶脉变色症:早期花叶症状,叶脉的色泽较淡,透光度特别强,看起来比一般叶脉宽,随后发展为沿叶脉两侧一定宽度之间的色泽变浅或深。

2、斑驳:初期出现褪绿的块状斑或圆斑,后转变为浓淡相间的斑驳。

3、条纹、条点:沿叶脉产生,表现褪绿条纹或条点。

(二)变色。

叶片色泽全部或局部缺少叶绿素,变成黄、橙、红、紫或深绿等颜色,这个症状易与缺素症相混。

(三)畸形。

植株受害后,叶片呈现表面皱缩、蕨叶、卷曲、疤斑、耳突等症,植株上部明显矮化,节间缩短或停止生长,簇生小叶,有时果实上出现深绿相间的花斑或疱状或瘤状突起,果面凹突不平,或呈星状开裂。

(四)坏死。

叶片上呈现黑色、灰色坏死斑点或斑块,叶脉上出现黑色或褐色坏死斑点或条纹;花梗茎秆上出现深褐色枯死条纹、斑块;果实上出现褐色油浸状的坏死条纹或斑块,使果实呈星状或纵状裂开。

(五)条斑。

在茎秆、果实上呈现暗绿色、深褐色、灰色、黑色等下陷的油浸状条纹、斑点。

二、发病因素(一)种子带毒。

一些蔬菜的种子如番茄、瓜类、辣椒、菜豆等因果肉或花粉污染导致种子带毒。

(二)气候条件。

病害的发生发展受气温影响。

一般高温干旱即平均气温在20℃~28℃时,空气干燥,土壤湿度小,利于该病发生。

另外,高温干旱不仅有利于蚜虫的繁殖、有翅蚜的迁飞传毒及病毒的增殖,而且还会降低寄主的抗病性。

(三)耕作与栽培管理。

定植过早过晚,生殖期遇上蚜虫盛期,连作、低洼及缺肥田、管理粗放,杂草丛生,作物长势较弱田,或与毒源植物邻作,灭蚜不及时等都能导致该病流行。

(四)传播途径广。

主要是通过昆虫传毒,能够传播病毒的昆虫介体很多,主要是蚜虫,传毒包括禾溢管蚜、桃蚜等。

蚜虫的发生与气候有较大关系,一般高温干旱季节,蚜虫就易大发生,蔬菜病毒病随之大发生;其次是通过人为机械传毒和带毒植物随风雨自然接触、摩擦传毒或通过整枝打杈、农用工具、植苗等农事操作传毒。

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贵州蔬菜病毒病主要病毒种类检测王莉爽;陈小均;陈文;谭清群;杨学辉【摘要】采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)法对采自贵州省3个蔬菜种植区的952份疑似蔬菜病毒病样品进行黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)、番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)、蚕豆萎蔫病毒(Broad bean wilt virus,BBWV)和黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)等6种病毒毒原检测.结果检出阳性样品273份,占总样品数的28.68%,其中CMV阳性检出率最高,占总样品数的16.49%,其余5种病毒的阳性检出率依次为2.63%、2.10%、1.05%、1.58%和0.53%,CMV为贵州省蔬菜上的主要病毒种类.就单一病毒侵染蔬菜的情况分析,供试12种蔬菜均检出CMV,TuMV在茄子、白菜、萝卜和甘蓝中检出较多,而TSWV 主要在番茄和辣椒样本中检出.存在CMV+TMV、CMV+TuMV、CMV+TSWV、CMV+BBWV、TuMV+BBWV和CMV+TuMV+BBWV等6种复合侵染类型,其中CMV+TMV阳性检出率相对最高,达2.52%.城市近郊正季蔬菜区茄科和豆科蔬菜病毒侵染类型较多,十字花科病毒侵染类型最少,葫芦科在冬春喜温蔬菜区病毒侵染类型最多,表明贵州中、高海拔温凉山区比低海拔温热河谷区适于多种病毒发生.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2015(042)020【总页数】5页(P63-67)【关键词】蔬菜病毒病;种类;检测【作者】王莉爽;陈小均;陈文;谭清群;杨学辉【作者单位】贵州省植物保护研究所,贵州贵阳550006;贵州省植物保护研究所,贵州贵阳550006;贵州省植物保护研究所,贵州贵阳550006;贵州省植物保护研究所,贵州贵阳550006;贵州省植物保护研究所,贵州贵阳550006【正文语种】中文【中图分类】S432.4+1蔬菜已经成为贵州部分贫困山区的主要支柱产业和农户现金收入的主要来源。

贵州省具有低纬度、高海拔的特点,气候的区域差异和垂直差异较大,冬无严寒,夏无酷暑,无霜期长,逐渐形成了夏秋喜凉蔬菜优势区(重点构建大娄山区、乌蒙山区和苗岭山区产业带,辅以武陵山区)、冬春喜温蔬菜优势区(重点建设南北盘江、红水河河谷区、赤水河河谷区,辅以清水江、都柳江河谷区和乌江中下游河谷区)以及正季蔬菜种植区(黔中、黔北地区)。

这些地区常年种植有番茄、辣椒、豇豆、四季豆、黄瓜、南瓜、白菜和萝卜等蔬菜,然而病毒病发生普遍,且日趋严重,影响蔬菜产量、品质和价格,给农民造成经济损失。

李丽丽等对贵州织金蔬菜样品进行研究发现十字花科蔬菜病毒由芜菁花叶病毒以及该病毒与黄瓜花叶病毒和烟草普通花叶病毒复合侵染所致[1]。

报道已有广西、北疆、天津、西安等省份对十字花科蔬菜进行病毒毒原检测[2-6],也有云南、重庆、黑龙江等省份对南瓜病毒病等葫芦科蔬菜进行主要病毒病原鉴定[7-9]。

由于贵州特殊的气候条件和生态环境,以及蔬菜种植品种的多样化,以致蔬菜病毒病发生严重,症状复杂多样,防治工作难以开展。

目前,尚未有报道对贵州豆科、茄科、葫芦科和十字花科蔬菜病毒病的毒原种类进行系统研究。

为此,本研究针对贵州省不同蔬菜种植区不同科目蔬菜的病毒病病原种类进行检测,以期为贵州省蔬菜病毒病的防治、抗病育种提供理论依据。

1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 样品的采集在贵州省有代表性的蔬菜种植县市,选取1~2个乡镇,每个乡镇2块田,用对角线五点取样法,每块地至少采集茄科、豆科、葫芦科和十字花科蔬菜的疑似病毒病样品10份。

2013—2014年,分别在贵阳市近郊蔬菜产区、夏秋喜凉蔬菜产区和冬春喜温蔬菜产区的清镇、修文、安顺西秀、平坝、绥阳、遵义、大方、金沙、罗甸等9个市、县(区)采集到蔬菜疑似病毒病样品952份。

1.1.2 病毒种类检测试剂黄瓜花叶病毒(CMV)、烟草普通花叶病毒(TMV)、黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)血清抗体由浙江大学谢艳教授赠送。

蚕豆萎蔫病毒(BBWV)、番茄斑萎病毒(TSMV)和芜菁花叶病毒(TuMV)病毒的血清试剂盒购自美国Agdia公司。

1.2 试验方法参照Zhou等[10]方法,并对DAS-ELISA方法进行改良。

即在酶标板加入包被抗体100 μL/孔,4℃过夜,PBST洗板4次,每次浸泡3min;加入烟草病叶粗汁液100 μL/孔,并设阳性、阴性和空白对照,37℃放置3 h;PBST洗板4次,每次浸泡6 min,然后加入含5%脱脂奶粉的PBST封闭30 min;加单克隆抗体100 μL/孔,37℃放置 3 h。

PBST洗板后加入羊抗鼠酶标抗体100 μL/孔,37℃放置3 h,PBST洗板。

加对硝基苯磷酸盐室温显色15~30 min。

读取405 nmOD值,每份样品重复2次。

2 结果与分析2.1 不同蔬菜病毒种类检测在番茄、辣椒、茄子、豇豆、四季豆、大豆、南瓜、丝瓜、黄瓜、白菜、甘蓝和萝卜等12种蔬菜采集到952份疑似蔬菜病毒标样,经血清学检测结果表明:共有阳性样品273份,占总样品数的28.68%。

单一侵染类型中CMV能侵染所有的蔬菜种类,且阳性检出率最高,占总样品数的16.49%;其次是TMV阳性检出率较高,为2.63%;然后是TuMV、BBWV、TSWV,阳性样品数占总样品数的2.10%、1.58%和1.05%;CGMMV阳性检测率最低,仅为0.53%。

复合侵染类型中以CMV+TMV的阳性样品数较多,占总样品数的2.52%;CMV+BBWV和CMV+TuMV阳性检出率相同,为0.53%;BBWV+TuMV阳性检出率为0.32%,CMV+TSWV和CMV+BBWV+TuMV的阳性样品数相同,阳性检出率均为0.21%。

从结果可知,无论是在单一侵染类型还是复合侵染类型中,均以CMV侵染为主,因此,黄瓜花叶病毒(CMV)是侵染贵州不同科蔬菜的重要病原(表1)。

不同病毒侵染后,甘蓝是阳性检出率最高的蔬菜,为61.54%;萝卜居第2位,阳性检出率为50.00%;再次是大豆阳性检出率为42.86%;辣椒、黄瓜、南瓜、丝瓜和茄子的阳性检出率均在30%以上;番茄、豇豆、四季豆和白菜阳性检出率在20%以上。

病毒侵染类型最多的蔬菜是辣椒,能检出5种单一侵染类型和4种复合侵染类型。

其次是豇豆和番茄,能检出除CGMMV外的其他5种单一侵染类型以及CMV+BBWV和CMV+TMV这2种复合侵染类型,同时豇豆还能检测少量的BBWV+TuMV复合病毒样品。

四季豆、茄子、萝卜和白菜检出3种单一侵染类型包括CMV、TuMV、BBWV,但是茄子、萝卜和白菜无复合侵染现象,四季豆有CMV+BBWV、CMV+TMV和BBWV+TuMV 3种复合侵染类型。

南瓜、黄瓜和丝瓜能检出CMV、CGMMV和CMV+TMV,然而丝瓜还能检出TuMV。

病毒侵染类型最少的是大豆,仅检出CMV和BBWV。

由上述结果可知不同蔬菜的病毒侵染类型不一样,但是CMV能侵染12种蔬菜,TuMV能侵染9种蔬菜,BBWV侵染8种,表明这3个病毒是侵染蔬菜的主要病毒。

表1 不同蔬菜病毒种类检测结果(%)样品数量(份) CMV TMV TSWV TuMV BBWV CGMMV CMV+BBWV辣椒 253 18.58 4.35 1.19 0.40 0.79 0.79番茄 176 14.77 0.57 0.57 1.14 1.14 1.14豇豆 163 13.50 1.90 1.23四季豆 125 24.80 8.00 4.80 1.60 2.40 0.80白菜 46 10.87 2.17 4.45南瓜 42 16.67 4.764.76黄瓜 36 13.89 8.33 8.33茄子 29 13.79 10.34 3.45丝瓜 14 14.29 7.147.14甘蓝 13 30.77 30.77萝卜 8 25.00 12.50 12.50大豆 7 28.57 14.29合计952 16.49 2.63 1.05 2.10 1.58 0.53 0.53样品数量(份) CMV+TMVCMV+TSWV BBWV+TuMV CMV+TuMV CMV+BBWV+TuMV 阳性检出率辣椒 253 3.16 1.19 0.79 31.23番茄 176 0.57 0.57 20.45豇豆 163 2.45 1.23 1.23 21.47四季豆 125 4.80 23.20白菜 46 4.35 21.74南瓜 42 4.76 30.95黄瓜 36 30.56茄子 29 6.90 34.48丝瓜 14 7.14 35.71甘蓝 13 61.54萝卜 8 50.00大豆7 42.86合计 952 2.52 0.21 0.32 0.53 0.21 28.682.2 不同蔬菜种植区蔬菜病毒种类检测根据贵州省气候特点,蔬菜种植区划分为贵阳市近郊正季蔬菜区(贵阳、安顺和遵义)、夏秋喜凉蔬菜区(毕节)和冬春喜温蔬菜区(罗甸)等3类。

DAS-ELISA检测表明,近郊正季蔬菜区蔬菜病毒病的毒原种类有6种单一病毒和6种复合侵染病毒,其中侵染类型最多的是茄科蔬菜,包括5种单一病毒CMV、TMV、TuMV、TSWV、BBWV和3种复合侵染CMV+Tu MV、CMV+TSWV、CMV+TuMV+BBWV;豆科蔬菜除TuMV和CGMMV外,其余4种病毒均能侵染,有CMV+BBWV和BB WV+TuMV 2种复合侵染类型;CGMMV仅侵染葫芦科,该科蔬菜有CMV+TMV复合侵染;侵染十字花科蔬菜的病毒主要是CMV和TuMV,无复合侵染现象。

夏秋喜凉蔬菜区茄科蔬菜除不能被CGMMV侵染外,有5种单一病毒侵染类型和1种复合侵染类型(CMV+TMV);CMV、TuMV、TSWV、BBWV这4种单一病毒以及BBWV+TuMV侵染豆科蔬菜;检测出侵染葫芦科蔬菜的病毒有CMV、TMV和CGMMV,没有复合侵染情况;十字花科蔬菜也检测出3种单一病毒和1种复合侵染类型,包括CMV、TuMV、BBWV和CMV+TuMV。

冬春喜温蔬菜区茄科蔬菜单一病毒侵染类型减少为4种,复合侵染类型也与其他蔬菜种植区的茄科蔬菜不同,为CMV+TMV;豆科单一侵染和复合侵染类型均减少,单一侵染类型为CMV和TuMV,复合侵染类型为CMV+TMV;十字花科蔬菜侵染类型与夏秋喜凉蔬菜区相同。

3类蔬菜种植区蔬菜病毒病研究结果表明:茄科和豆科蔬菜病毒侵染类型较多,随着近郊正季蔬菜区、夏秋喜凉蔬菜区和冬春喜温蔬菜区气温的不同,病毒侵染类型减少,且复合侵染类型每个区均不同;葫芦科随着温度的降低,在冬春喜温蔬菜区病毒侵染类型最多;十字花科在近郊正季蔬菜区病毒侵染类型最少,夏秋喜凉蔬菜区和冬春喜温蔬菜区病毒侵染种类相同。

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