药物血浆半衰期的测定

磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定
[目的] 1.了解磺胺类药物(sulfonamides)在动物体内随时间变化的代谢规律。

2.掌握药代动力学参数的测定及计算方法。

3.了解药代动力学参数的测定及计算的临床意义。

[原理] 血浆半衰期是指血浆药物浓度下降一半所要的时间。

临床上常用药物多数药物在体内按一级动力学的规律而消除，也就是血中药物消除速率与瞬时药物浓度成正比，根据这一规律可知：药物静脉注射后，如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其时量关系常呈直线。

该直线的方程式为：t 2.303Ke logCo logCt -
= ① 药物血浆浓度半衰期（t 1/2）为：Ke
0.693t 21= ② 因此，我们只要求出药物的消除速率常数Ke ，就可以得出药物的血浆半衰期。

由公式（1）可推出t
)logC 2.303(logC Ke t 0-= ③，只要我们测出两个时间的血浆药物浓度，又知道这两个浓度变化的时间间隔，就可以求出Ke ，进一步算出血浆半衰期。

那么我们怎样才能测出任意时间的血药浓度呢？为解决这个问题，我们首先学习下面这个问题。

显色原理：
偶氮染料（橙红色）
麝香草酚重氮盐磺胺药碱三氯醋酸−−−→−+−−−→−+NaO H NaNO 2 磺胺类药物在酸性溶液中，可使苯环上的氨基（-NH 2）离子化生成铵类化合
物（-NH 3+），进而与亚硝酸钠起重氮反应，产生重氮盐（-N=N +-）。

此重氮盐在碱
性溶液中与酚类化合物如麝香草酚起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合物。

偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关。

可用光度计测出其光密度，通过与标准品光密度的比较及运算，即可推算出磺胺的浓度。

计算公式如下：
给药前测定管光密度）（给药后测定管光密度标准管光密度
标准贯浓度mg%%血浆中磺胺的浓度mg -⨯= [材料]
器材：72型分光光度计、离心机、兔手术台、手术器械一套、动脉夹、动脉插管、磅称一台、1ml 注射器三支和5ml 一支、lml 和10ml 吸管各一支、2ml 吸管5支、吸球一个、离心试管、试管架。

药品：20％磺胺嘧啶钠溶液（sodium sulfadiazine,NaSD ）、10％肝素钠溶液、0.02％磺胺嘧啶钠标准液、7.5％三氯醋酸溶液、0.5％亚硝酸钠溶液、0.5％麝香草酚溶液（用20％NaOH 配制）、20％NaOH 溶液、20％乌拉坦溶液（Urethane ）、蒸馏水。

动物：家兔，体重2kg 左右。

[方法]
1. 血药浓度的测定：
（1） 麻醉：取家兔一只（实验前禁食12小时,不禁水），称重，用20％乌
拉坦5ml ／kg 行静脉麻醉，然后固定于手术台上。

（2） 手术：可选用颈总动脉（或股动脉）。

手术区剪毛，沿正中线切开颈
部皮肤，切口约6cm 左右，钝性分离皮下组织和肌肉，找出一侧颈总动脉并分离约2～3cm 左右，在其下穿线两根，一根结扎远心端，一根备
用。

耳缘静脉注射肝素2ml 。

（3） 插管：用动脉夹夹住动脉近心端，在于两线中间的动脉上剪一“V ”
形切口，插入动脉插管，用备用线结扎牢固以备取血用。

（4） 打开动脉夹放取空白血样2ml 置于预先用1％肝素（或0.1ml 肝素稀
释10倍）浸过的离心试管中，摇匀标记待用。

然后由耳缘静脉注射20％的磺胺嘧啶钠2ml ／kg ，于给药后15分钟及 45分钟各由动脉抽血2ml ，分别置于同上试管中，摇匀待用。

（5） 用1ml 注射器抽取上述血液各0.2ml ，立即置于盛有7.5％三氯醋酸
（提供酸性条件并可沉淀血中蛋白质）5.8ml 的试管中充分摇匀，然后以 1500转／分的转速离心5分钟待用。

（6） 标准液的配制：取0.02％磺胺嘧啶钠0.2ml ，加入到7.5％三氯醋酸
5．8ml 中，摇匀待用（标准管磺胺浓度200mg/L ）。

（7） 各比色管的配制（见下表）
成分 空白管（ml ） 标准管（ml ） 测定管（ml ） 给药前 给药后15min 给药后45min
测定液 / / 1.5 1.5 1.5 标准液 / 1.5 / / / 蒸馏水 1.5 / / / / 0.5％N a N O 2 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5％麝香草酚 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
（8） 完成以上配制操作后，用7230型分光光度计进行比色，选波长520nm ，
以空白管调“0”点，读出标准管及各测定管光密度，并按以上公式计算t 1/2。

2. 药代动力学参数计算：按下列公式计算出各药代动力学参数
（1）消除速率常数：t
)logC 2.303(logC Ke t 0-= （min －1） （2）消除半衰期：t 1/2=0.693/K e （min ）
（3）表观分布容积：V d =D/C 0 （D=400mg ／kg ×xxkg ） (L)
（4）血浆清除率：CL=K e ·V d （L/min ）
［思考题］
1．测定半衰期有何意义？
2．根据V d =D ／C o ，当用药剂量400mg ／kg （D ）你能计算出零时药浓C o 及表现分布容积V d 吗？
［注意事项］
1.动脉插管后，由耳缘静脉注射肝素2ml 。

2.取血试管取血前一定要用肝素浸润；每次取血之前要先将残血放掉。

3.每吸取一个血样时，必须更换注射器；加样时注射器头不要碰到三氯醋酸液面。

4.将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀，否则易出现血凝块。

5.加亚硝酸钠和麝香草酚顺序不要混乱。

6.各吸量管注意分开使用。

7.注意各比色杯要清洗干净、擦干并匹配及吸取药液要准确。

8.离心时要注意离心管的配平。

9.注意严格按照7230操作方法进行操作。