医学检验·检查项目:载脂蛋白AⅡ_课件模板

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④免疫印迹分析
取出转移后的NC膜在洗涤液中洗3次后,置封 闭液中室温封闭3h(或37℃1h
在洗涤液中洗3次
加入1:100稀释的第一抗体并充分混匀,37℃ 温浴6h(或过夜)
用洗涤液洗5次(10min×5)甩干
加入1:500稀释的第二抗体,混匀,37℃作用 2h
洗涤同上
加入新配制的底物溶液于室温下摇动直至出现 紫色(或紫褐色)并看到背景(1~5min)时 用蒸馏水冲洗终止反应,空气干燥封于塑料袋
Marcovina等
应用SDS-1.5%agarose凝胶电泳结合 免疫印迹技术,首次报道人类至少 有35种Apo(a)异构体,此法是在 Kamboh等法基础上发展起来的一种 高分辨的分析方法。
上述两类方法有许多共同点,即首先 采用电泳技术将Apo(a)与其他载 脂蛋白分离,然后Western blotting,灵敏而特异地显示Apo (a)多态区带的位置,最后根据其 与ApoB100电泳速率比较或根据其分 子量大小而确定Apo(a)表型。
免疫印迹反应中也可选用鼠抗人Apo(a) 单克隆抗体作为一抗,用酶标兔抗鼠IgG 作为二抗。
应用酶标抗体反应作为二抗时,底物以 脂溶性4-氯-1-萘酚或联茴香胺较水溶性 DAB溶液为好
金标、I125标抗体作为二抗,通过银染或 放射自显影技术显示Apo(a)蛋白区带
将生物素标记的抗体作为二抗,通过生 物素-亲和素系统放大信号,可大大提高 检测敏感性
③电转移
取此凝胶,切下分子量蛋白带放入SDS洗脱 液中过夜,以固定凝胶大小并洗脱掉未与蛋 白结合的SDS,0.01%考马斯亮蓝G-250染色 室温1h,7%乙酸脱去背景颜色。
剩余凝胶铺在已浸过转移电泳缓冲液的NC膜 上,搭建滤纸/凝胶/NC膜/滤纸一同放在电 泳转移支架上,按层次相夹置于装满转移电 泳缓冲液的电泳槽中。120V电泳6h(30℃以 下)或4℃30V转移过夜

医学检验·检查项目:血清α2-巨球蛋白(α2-MG)_课件模板

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临床意义:
1.升高:见于肝病如急慢性肝炎、肝 硬化等,肾病综合征,糖尿病以及恶性肿 瘤等。 2.降低:见于急性肾小球肾炎、 急性胰腺炎、胃溃疡、肺气肿、慢性肝炎、 类风湿性肝炎、糖尿病、甲状腺功能亢进 症、弥散性血管内凝血(DIC)、抗纤维蛋 白溶解治疗、心脏手术、营养不良。
医学检验·各论 血清α2-巨球蛋白
(α2-Mห้องสมุดไป่ตู้) 内容课件模板
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别名: α2-聚球蛋白,α2-巨球蛋白。
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简介:
α2-巨球蛋白是血浆中分子量最大的 蛋白质,在肝细胞与单核-巨噬细胞系统 合成,其具有酶抑制剂的作用,能调节细 胞外蛋白水解,还可以刺激淋巴细胞和粒 细胞发育。测定血液中α2-巨球蛋白对诊 断肝、肾疾病有一定的意义。
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相关症状: 腹部肿块、腹水、腹痛、脱水、恶心与呕 吐、食欲异常。
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相关疾病:
慢性溃疡性结肠炎、弥漫性血管内凝血、 急性胰腺炎、糖尿病、营养不良、隐匿性 肾小球肾炎、肾病综合征、胃、十二指肠 溃疡出血、原发性巨球蛋白血症肾损害、 阻塞性肺气肿、肝硬化、弥散性血管内凝 血、小儿急性胰腺炎、小儿原发性肾病综 合征、甲亢、膜性肾小球肾炎、病毒性肝 炎、肺气肿、消化性溃疡。
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医学检验·检查项目:载脂蛋白AⅠ_课件模板

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临床意义:
降低:冠心病、糖尿病、肾病综合征、 遗传性ApoA-Ⅰ缺乏症(Tangier病)、家族 性低α-脂蛋白血症、鱼眼病、重度营养 不良、肝炎活动期、肝功能低下。
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正常值: 免疫透射比浊法:1.01~1.32g/L;
火箭免疫电泳法:1.02~1.36g/L。
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相关检查: 心电图、动态心电图(Holter监测)、心 血管造影、血糖测定、全血糖化Hb、餐后 2小时血葡萄糖(2HPG,PBG)。
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相关症状: 高血脂性血管损害、心悸伴心率异常、劳 累后感觉胸闷、胸痛伴胸闷、心悸、胸闷 憋气、孕妇胸闷气短。
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医学检验·各论 载脂蛋白AⅠ 内容课件模板
医学检验·各论:载脂蛋白A分各类脂 蛋中均含有一种和几种不同特异性载脂蛋 白。目前已经发现的载脂蛋白有20余种。 其中主要有aPOA1、AⅡ、B-100、B48、 CⅠ、CⅡ、CⅢ、D、E等。
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相关疾病:
高渗性非酮症性糖尿病昏迷、II型糖尿病、 I型糖尿病、糖尿病、心绞痛、小儿糖尿 病肾病、小儿糖尿病、冠状动脉粥样硬化 性心脏病、糖尿病乳酸性酸中毒、糖尿病 肾病、糖尿病酮症酸中毒、猝死型冠心病、 缺血性心肌病、妊娠合并糖尿病、冠心病。
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医学检验·检查项目:血清α2-巨球蛋白_课件模板

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医学检验·各论 血清α2-巨球蛋白
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别名: α2-MG。
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简介:
α2-MG是血浆中分子量最大的蛋白质, 由肝细胞与单核-巨噬细胞系统合成。半 衰期约5天,具有酶抑制剂的作用。能调 节细胞外蛋白水解,还可刺激淋巴细胞和 粒细胞发育。测定血液中α2-巨球蛋白对 诊断肝、肾疾病等有一定意义。
3.50g/L (150~350mg/dl); 女:1.75~ 4.70g/L (175~470mg/dl)。
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相关检查:
血清免疫球蛋白测定、抗甲状腺微粒体抗 体、甲状腺、甲状旁腺的超声检查、血糖 测定、全血糖化Hb、餐后2小时血葡萄糖 (2HPG,PBG)。
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临床意义:
(1)升高:肾病综合征、肝硬化、糖 尿病、急慢性肝炎。 (2)降低:肺气肿、 慢性肝炎、糖尿病、甲状腺功能亢进症、 急性肾小球肾炎、急性胰腺炎、弥散性血 管内凝血(DIC)、营养不良。
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正常值: 免疫扩散法(RID法): 男:1.50~
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相关疾病: 肾病、糖尿病酮症酸中毒、妊娠合并甲亢、 妊娠合并糖尿病。
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相关症状: 周身出汗、口干、心悸伴消瘦、腹泻、消 瘦、出汗异常、心悸。
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医学检验·检查项目:脂蛋白a(Lp-a)_课件模板

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医学检验·各论 脂蛋白a(Lp-a)
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别名: 血清脂蛋白-a。
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简介:
脂蛋白a主要是在肝脏合成,主要的 功能是阻止血管内血块溶解,促进动脉粥 样硬化形成。脂蛋白水平持续升高与心绞 痛、心肌梗死、脑溢血有密切关系。是冠 心病的独立危险因子。
医Hale Waihona Puke 检验·各论:脂蛋白a(Lp-a) >>>
临床意义:
增高:见于动脉粥样硬化性心脑血管 病、急性心肌梗死、家族性高胆固醇血症、 糖尿病、大动脉瘤及某些癌症等。 减低: 见于肝脏疾病、酗酒、摄入新霉素等药物 后。
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正常值: 10~140mmol/L(0~300mg/L)。
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相关检查: 血清脂蛋白和血清脂蛋白电泳。
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相关症状: 高血脂性血管损害、背部有隐约麻痛不适、 腰背痛、身痛、心脏杂音、心脏震颤。
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相关疾病:
动脉瘤、高血脂、心律失常、原发性心脏 肿瘤、心包肿瘤、心肌梗死、心肌梗塞并 发心室间隔穿破、心肌梗塞并发左心室室 壁瘤、心绞痛、心原性肝硬化、急性心肌 梗死、主动脉瘤、高脂蛋白血症、缺血性 心肌病、冠心病。

LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒ppt课件

LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒ppt课件
并受炎性介质的调节。 • 水解ox-LDL-C上的磷脂,生成促炎物质lyso-
PC和ox-FA,因此具有促炎症和促动脉粥样硬 化的作用 。
Lp-PLA2在粥样斑块形成中的作用
血管腔 氧化型 LDL
内膜
单核细胞 细胞因子
粘附分子
粥样斑块形成
Lp-PLA2
溶血卵磷脂 氧化脂肪酸
巨噬细胞
泡沫细胞
中膜
稳定斑块vs易损斑块组织学特征对比
是一个可用于冠心病药物干 在干预治疗中不是一个特异靶点 预治疗的特异靶点
Lp-PLA2生物变异性低
% with Elevated Biomarker % Intra-Individual CV
50% 40%
46%
50% 40%
42.6%
30% 20%
30% 20%
22.8%
10% 4%
0%
Lp-PLA2
hs-CRP
血管内皮炎症的标记物
全身性炎症的标记物
由巨噬细胞产生
全身炎症急性期由肝脏产生
在血管炎症过程的早期阶段 在心血管疾病中的具体作用不清
启动

不受其他炎症性疾病影响 在所有炎症性疾病患者中均升高
是一个可用于冠心病药物干 在干预治疗中不是一个特异靶点 预治疗的特异靶点
Lp-PLA2 vs HCY
的炎性反应标志物
内容
• 心脑血管疾病现状及研发背景 • Lp-PLA2与动脉粥样硬化的关系 • 临床研究 • 临床意义 • 康尔克Lp-PLA2定量检测试剂盒简
介 • 产品详解与注意事项
Lp-PLA2
• 脂蛋白相关磷脂酶A2,英文缩写Lp-PLA2。 • 又称血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)。 • 分子量为45KDa 。 • 由成熟的巨噬细胞和淋巴细胞合成和分泌,

血脂及血浆脂蛋白检验ppt课件

血脂及血浆脂蛋白检验ppt课件
种类:
已有很多种,主要有LDL受体、残粒受体(remnant receptor) 及清道夫受体(scavenger receptor)其它有ApoE受体(CM) HDL受体和β-VLDL受体等。
.
16
各种脂蛋白受体功能
➢LDL受体: 分布于肝细胞、动脉壁平滑肌细胞等细胞膜表面 识别结合ApoB100、E的脂蛋白如LDL、VLDL等。 合成受体内胆固醇的负反馈调节
2.胆固醇与高铁 – 硫酸试剂产生稳定的紫红色
Zak反应: Zak提出用硫酸、醋酸和Fe3+等与胆固醇作用生成紫红色化合物 来测定胆固醇,称为Zak反应。 (比L-B反应的灵敏度高,呈色稳定不需要皂 化,反应特异性差)
Ⅱa Ⅱb 同上 Ⅱb

以甘油三酯升高为主,可有轻度胆固醇升 高,VLDL明显增加。

.
30
(二)低脂蛋白血症
定义:
一般将血清TC<3.3mmol/L,或TG<0.45mmol/L,或LDL-C< 2.1mmol/L者,称为低脂蛋白血症。脂质如TC和TG同时降低或脂蛋白 如HDL、LDL和VLDL同时降低多见。
蛋 白




原点 γ β α2 α1 清蛋白



蛋-




原点
β 前β α
(CM)
.
8
(二)血浆脂蛋白的组成与结构
脂类:甘油三酯、磷脂、胆固醇、胆固醇酯 血浆脂蛋白
蛋白质:载脂蛋白
.
9
各种血浆脂蛋白的组成及功能
密度
脂 组类

蛋 白

主要生 理功能
CM 乳糜微粒
<0.95

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医学检验·各论 血脂四项
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简介:
常用的血脂检查项目有七项:胆固醇、甘 油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂 蛋白胆固醇、脂蛋白(a)、载脂蛋白AⅠ、 载脂蛋白B。 一、胆固醇(TC,CHO) 参考值: 合适水平:≤5.17mmol/L(200mg/dL) 临界范围:5.20~5.66mmol/L(201~ 219mg/
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简介: apoB可以减少冠心病发病及促进粥样斑块 的消退。
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正常值: 。
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相关检查: 血清甘油三脂、血清胆固醇与磷脂比值、 血清磷脂、高密度脂蛋白胆固醇、极低密 度脂蛋白-胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇。
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简介:
恶性肿瘤等。 五、脂蛋白(a)[Lp(a)] 参考值:10~140mmol/L(0~300mg/L) 病理性升高:≥300mg/L 临床意义:Lp(a)升高增加动脉粥样硬化 和动脉血栓形成的危险性,其浓度增加是 动脉粥样硬化性心血管疾病的一个独立的 危险因素。 六、载脂蛋白AⅠ(ap
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简介:
发生动脉粥样硬化的重要危险因素之一, 用于判断是否存在患冠心病的危险性,也 是血脂异常防治的首要指标。 升高:可见于遗传性高脂蛋白血症、甲状 腺功能低下、肾病综合征、梗阻性黄疸、 慢性肾功能衰竭、Cushing综合征等。 降低:可见于无β-脂蛋白血症、甲状腺 功能亢进、消化吸收不良、肝硬化
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相关症状: 高血脂性血管损害、心悸伴心率异常、劳 累后感觉胸闷、口干、胸痛伴胸闷、心悸、 胸闷憋气。
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相关疾病:
高渗性非酮症性糖尿病昏迷、II型糖尿病、 I型糖尿病、糖尿病、心绞痛、小儿槭糖 尿病、小儿糖尿病肾病、小儿糖尿病、冠 状动脉粥样硬化性心脏病、糖尿病乳酸性 酸中毒、糖尿病酮症酸中毒、猝死型冠心 病、缺血性心肌病、妊娠合并糖尿病、冠 心病。
医学检验·各论 载脂蛋白AⅡ 内容课件模板

医学检验·各论:载脂蛋白AⅡ >>>
简介:
载脂蛋白是血浆脂蛋白部分各类脂 蛋中均含有一种和几种不同特异性载脂蛋 白。目前已经发现的载脂蛋白有20余种。 其中主要有aPOA1、AⅡ、B-100、B48、 CⅠ、CⅡ、CⅢ、D、E等。
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临床意义:
降低:冠心病、糖尿病、肾病综合征、 遗传性ApoA-Ⅰ缺乏症(Tangier病)、家族 性低α-脂蛋白血症、鱼眼病、重度营养 不良、肝炎活动期、肝功能低下。
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正常值: 250~520mg/L。
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相关检查: 心电图、动态心电图(Holter监测)、血 糖测定、全血糖化Hb、餐后2小时血葡萄 糖(2HPG,PBG)、血葡萄糖。
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