代谢综合征大鼠模型的建立

代谢综合征大鼠模型的建立
【关键词】代谢综合征
代谢综合征（metabolic syndrome,MS）是一种涉及多种代谢异常、与心血管病紧密联系的疾病状态，其中以肥胖（超重）、血压、血糖和血脂异常四项为突出，MS患者DM风险增高5倍，CVD风险增高3倍，心血管死亡率增高2倍，总死亡率风险增高1．5倍［1］。

因此，研究代谢综合征的防治对于降低上述疾病的死亡率非常重要，而实验动物模型的建立是该研究工作的重要前提。

1 实验材料
1.1 实验动物选用离乳健康性Sprague-Dawley（SD）大鼠100只，雌雄各半，体重49～70g，普通清洁级，购自山东中医药大学实验动物中心，动物生产许可证号：SCXK（鲁）20050015。

1.2 动物饲料基础饲料为山东中医药大学实验动物中心提供普通清洁级动物饲料，高脂高热量饲料参照文献［2，3］改进，配方为：普通饲料56%，猪油10%，白糖10%，奶粉10%，蛋黄12%，豆粉2%。

白糖为山东省东方糖业有限公司生产的天园牌优级绵白糖，批号为GB1445，奶粉为内蒙古伊利实业集团股份有限公司生产的全脂甜奶粉，批号为81211F3，猪油、蛋黄、豆粉均由市场购买。

两种饲料组成及营养成分见表1。

1.3 主要试剂与仪器 Olypus Au2700全自动生化分析仪（日本东芝公司生产），奥林巴斯诊断产品有限公司提供的血糖、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇试剂盒，批号：
OSR6121。

电子天平YP600型（上海精科天平仪器厂），电子动物称（北京六一仪器厂），高速台式离心机TDL-5型（上海安亭科学仪器厂）。

2 实验方法
2.1 分组喂养离乳SD大鼠100只，随机分为2组：对照组20只（雌雄各半）给基础饲料，高脂组80只（雌雄各半）给高脂高热量饲料喂养。

大鼠实验期间均自由摄食和饮水，饲料和水每日更换一次，饲养环境清洁，自然光照，温度20～25℃，湿度50%～70%，通风良好，共喂养8周。

表1 两种饲料组成及营养成分表（略）
2.2 代谢综合征大鼠的筛选标准饲养8周后，称体重，量身长，计算Lee’s指数，公式为 3 体重（g）×103/体长（cm）。

以高脂组体重超过对照组平均体重加1.96倍标准差为模型大鼠。

2.3 血糖和血脂检测对照组和筛选后符合标准的MS模型大鼠禁食禁水12h，尾静脉取血，分离血清，全自动分析仪上检测血糖、血脂，包括血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLc）和低密度脂蛋白胆固醇（LDLc）。

用Dobiasova 等［4］的方法计算血浆致动脉硬化指数（atherogenic index of plasma，AIP）：AIP=log［TG／HDLc］。

2.4 统计学处理各组数据用均数±标准差（x±s）表示，分别对雄性模型组和雄性对照组，雌性模型组和雌性对照组进行独立样本的t检验（Independent-Samples t test），用SPSS14.0软件进行统计分析，以P＜0.05作为差异有显著性检验水准。

3 实验结果
3.1 实验动物的体重、身长、Lee’s指数比较用两种不同的饲
料喂饲动物8周后，高脂组动物体重和Lee’s指数均显著高于同性别的普食组，差异有显著性（P均<0.01），模型组动物的身长同对照组比较差异无显著性，见表2。

表2 实验动物体重、身长和Lee’s 指数比较（略）注：与雄性普食组比较，**P﹤0.01；与雌性普食组比较，△△P﹤0.01
3.2 模型筛选按照前文所述的判断标准，剔除体重达不到标准的32只大鼠，高脂高热量饲料组共筛选出符合要求的模型大鼠48只，其中雌性25只，雄性23只，雌性造模成功率62.5%，雄性造模成功率57.5%，二者之间差异无显著性。

筛选后的MS大鼠体重、Lee’s 指数及空腹血糖水平均显著高于普食对照组，P均<0.01，见表3。

3.3 血脂比较模型组大鼠血清TG、TC、LDLc水平及AIP均显著高于对照组，P值分别小于0.01、0.01、0.05、0.05，模型组大鼠血清HDLc水平略高于对照组，但差异无显著性，见表4。

表3 对照组与MS大鼠体重、Lee’s指数及血糖比较（略）注：与雄性对照组比较，**P<0.01；与雌性对照组比较，△△P<0.01表4 对照组大鼠与模型组大鼠血脂比较（略）注：与雄性对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；与雌性对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01
4 讨论
代谢综合征包括肥胖、糖尿病（或胰岛素抵抗）、血脂代谢异常和高血压等几个方面，因此现在常用的关于代谢综合征的实验动物模型，多倾向于基因模型，或者以这几个方面中的一种为主，例如以高血压为主的自发性高血压大鼠（SHR），以糖尿病为主的OLETE大鼠，
以肥胖为主的WOKW大鼠，以血脂异常为主的Prague遗传性高甘油三酯血症大鼠（HTG大鼠）。

而事实上MS的发病涉及遗传和环境因素，其中不良的生活方式导致的肥胖是MS的重要治病因素。

而上述模型大多主要涉及了遗传因素，而忽视了不良生活方式的重要影响，与人类MS的发病及进程相差较大。

本项研究采用高营养高热量饲料喂饲诱导造模，通过分析比较多种高营养高脂饲料配方，选用了如下配方：普通饲料56%，猪油10%，白糖10%，奶粉10%，蛋黄12%，豆粉2%，配制成适合啮齿类动物的颗粒饲料，经计算其蛋白质、脂肪、碳水化合物的比例为14：23：41，该配方较符合单纯性肥胖患者的饮食习惯，且猪油含量适中可避免动物摄食减少的情况发生，另外，方法操作简便，对动物损伤相对较少。

经过检验，该模型大鼠具备肥胖、高血糖、高甘油三酯血症等条件，符合代谢综合征的诊断标准，因此可以作为代谢综合征模型大鼠应用。

【参考文献】
1 Eckel RH，Grundy SM，Zimmet PZ．The metabolic syndrome．Lancet，2005，365（9468）：1415 -1428.
2 方校良，竹剑平.大黄壳聚糖片的减肥药效研究.浙江中西医结合杂志，2000，10（12）：724-725.
3 李媛，王保芝，岂春晓，等.一种新的肥胖大树模型的制备方法.河北医科大学学报，2005，26（4）：305-307.
4 Dobiasova M，Frohlich J．The plasma parameter log（TG ／HDL-C）as an atherogenic index：correlation with lipoprotein
particle size and esterification rate in apoB-lipoprotein-depleted plasma（FER（HDL））．Clin Bioc，2001，34（7）：583-588.。