交叉配血知识概要
交叉配血试验知识
凝
集
交叉配血的目的
交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受 血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要 目的是为了防止输血后产生溶血性反应。
尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血 不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持 最长的存活时间。
交叉配血试验方法
盐水介质配血 酶介质配血
抗球蛋白方法配血方法
阳
加
性
抗 球 蛋
离心 看结果
白
阴 性
酶介质配血方法
患 者
主 侧
次
献
侧
血
者
主次侧 均加酶
酶介质配血方法
37 ℃
阳
性
37℃
离心
水浴30分钟
看结果
阴
性
二、Rh定型
1、使用盐水介质试剂
用LIM配制的红细胞悬液，可以代 替
由生理盐水配制的红细胞悬液在盐水介 质
试剂中进行Rh定型，两者定型方法和效 果
均相同。
聚凝胺(Polybrene)配血方法
患
者
主
献
侧
次 侧
室温放置 1 分钟
主次侧均 加聚凝胺
血
者
聚凝胺(Polybrene)配血方法
阳 性
离
主次侧均
心 聚凝胺引起 红细胞非特
加重悬液 看结果
阴 性
异性凝集
SUCCESS
THANK YOU
4/10/2024
– 菠萝酶，无花果酶，木瓜酶 抗球蛋白介质配血
– 经典方法，加LISS（低离子介质溶液）的方法 聚凝胺介质配血 凝胶方法配血
盐水介质配血方法
患
者
阳
第五章 交叉配血
第五章交叉配血
第十二条受血者配血实验的血标本必须是在输血前3天之内（包括血样采集当天）采集的，超过3天的必须重新采集。
第十三条输血科要逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样，复查受血者和供血者ABO血型（正、反定型），并常规检查患者Rh（D）血型（急诊抢救患者紧急输血时Rh（D）检查可除外），正确无误后方可进行交叉配血。
配血操作按标准操作程序进行。
第十四条手术备血、有输血史、妊辰史、短期内需要接受多次输血者，收到患者血标本后，及时作抗体筛查。
第六章取血（血液的发放管理）
第十五条配血合格后，由医护人员或科室指定专门负责人员到输血科取血，病人家属不得取血。
第十六条取血与发血的双方必须查对患者姓名、性别、病案号、病房（门急症）、床号、血型、供血者姓名、血型、血液量、采血日期、有效期及配血实验结果，以及保存血的外观等，准确无误后，双方共同签字方可发出。
第十七条凡血袋有下列情形之一的，一律不发血：
1.标签破损、字迹不清；
2.血袋有破损、漏血；
3.血液中有明显凝块；、
4.血浆呈乳糜状或暗灰色；
5.血浆有明显气泡、絮状物或粗大颗粒；
6.未摇动时血浆层与红细胞的界面不清或交界面上出现溶血；
7.红细胞层呈紫红色；
8.过期或其他须查证的情况。
第十八条血液发出后，受血者和供血者的血样保存于2—6℃冰箱，至少7天，以便对输血不良反应追查原因。
第十九条血液发出后不得退回。
交叉配血试验的原理
交叉配血试验的原理
交叉配血试验是一种重要的输血前检查程序，其目的是为了确保受血者的红细胞不会因输入的血液而发生凝结或溶解，从而引发不良反应甚至危及生命。
交叉配血试验的原理基于抗原-抗体反应。
抗原是一种能够刺激免疫系统产生抗体的物质，而抗体是免疫系统针对抗原产生的特异性反应。
在交叉配血试验中，供血者和受血者的血液样本会被分别与对方的红细胞以及自身血清进行混合。
如果红细胞上存在与抗体相对应的抗原，那么抗体就会与红细胞发生凝结反应。
这种凝结反应可以肉眼观察到，也可以通过特定的仪器设备进行检测。
交叉配血试验通常包括主侧和次侧两个步骤。
主侧是将供血者的红细胞与受血者的血清进行混合，而次侧是将受血者的红细胞与供血者的血清进行混合。
如果主侧和次侧都没有发生凝结反应，那么就可以认为这两者的血液是可以相容的，可以输血。
如果主侧或次侧发生了凝结反应，那么就说明这两者的血液存在不相容的情况，不能输血。
除了检测红细胞抗原-抗体反应外，交叉配血试验还可以检测血小板抗原-抗体反应以及白细胞抗原-抗体反应。
这些检测的目的是为了防止输血后发生发热反应、溶血反应、过敏反应、细菌污染等不良反应。
总之，交叉配血试验的原理是基于抗原-抗体反应，通过检测红细胞、血小板和白细胞抗原-抗体反应来确保输血的安全性和相容性。
它是输血前检查程序中的重要环节，对于保障受血者的生命安全具有
至关重要的作用。
交叉配血的概念
交叉配血的概念
交叉配血是指将供血者和受血者的血型进行配对，确定是否兼容以进行输血的一种方法。
人类血液主要有4种类型：A型、
B型、AB型和O型，根据红细胞表面的抗原和抗体的存在与否，这四种血型可以进一步分为八种血型。
在交叉配血中，供血者和受血者的血液样本会进行实验室测试，以确定是否发生免疫反应。
这些测试包括直接交叉试验和间接交叉试验。
直接交叉试验是将供血者的红细胞与受血者的血清混合，观察是否发生凝集反应。
如果发生凝集，表示供血者与受血者的血型不兼容，不能进行输血。
间接交叉试验是将受血者的红细胞与供血者的血清混合，观察是否发生凝集反应。
如果发生凝集，表示受血者对供血者的抗体具有免疫反应，也表示供血者与受血者的血型不兼容，不能进行输血。
交叉配血的目的是减少输血相关的不良反应。
如果供血者与受血者的血型不兼容，输血时会引发免疫反应，导致输血反应并可能造成严重的并发症，甚至危及受血者的健康。
因此，交叉配血在确定输血适应症和选择适合的供血者时具有重要意义。
交叉配血原理
交叉配血是指将来自不同个体的血液混合在一起进行输血的过程。
这种方法可以在临床上用于治疗失血、贫血、手术以及其他医疗情况。
交叉配血的原理基于ABO血型系统和Rh血型系统的遗传特性。
ABO血型系统包括四种主要的血型：A型、B型、AB型和O型。
这些血型的差异源于红细胞表面的抗原。
人体对于自身血型抗原是无免疫反应的，但是如果将不匹配的血型输给接受者，可能会引发免疫反应，导致输血反应。
Rh血型系统是另一个重要的血型分类，主要关注Rh因子（D抗原）。
人可以分为Rh阳性（有Rh抗原）和Rh阴性（无Rh抗原）。
在输血过程中，如果接受者是Rh阴性，而输血源是Rh阳性，则可能引发免疫反应。
交叉配血的原理是通过在实验室中混合供血者的血液与接受者的血液，观察是否会发生凝集反应。
凝集反应表明存在免疫反应，可能导致严重的输血反应。
因此，交叉配血可以用来确定供血者和接受者之间的血型是否匹配，以确保安全的输血过程。
在进行交叉配血之前，通常会进行临床实验，包括直接凝集试验和间接凝集试验。
这些实验可以帮助确定供血者和接受者之间的血型是否相容，从而避免免疫反应的发生。
总的来说，交叉配血的原理是基于血型抗原和免疫特性，以确保输血过程的安全性和有效性。
交叉配血
表示部分溶血，凝胶管中液体呈清澈透明红色，凝胶中有残留红细胞。 PH
H 表示完全溶血，凝胶管中液体呈清澈透明红色，凝胶中无红细胞。
— 表示RBC全部沉积于胶底。
几种交叉配血方法的比较
方法
优点
缺点
盐水法
操作方便,费用低廉
只能检出不相配合完全抗体,不 能检出不相配合的不完全抗体
对罕见不规则抗体抗K敏感性低， 聚凝胺法 方便、应用最广，实用于急诊 且肝素对其有影响,易引起假阴性。
国际安全输血检查的推荐方法， 抗人球蛋白 灵敏度高、重复性好、特异性 检测卡（微 好、检测结果可较长时间保存 柱凝胶法）
费用高
24
配血注意事项
将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应，离心后观察。凝集的红细胞，被阻挡 在凝胶的上部或中央，判断凝集反应阳性；游离的红细胞，可通过凝胶间隙而沉 积在凝胶的底部，判断凝集反应阴性。
抗人球蛋白检测卡—交叉配血操作示意图
50ul 50ul
25ul血浆
25ul血浆
稀释
10ul压积红细胞＋1ml低离子介质
受血者 全血
配血注意事项
日常工作中，交叉配血，包括ABO血型正反定型、RHD血型定型、受血者血清中 不规则抗体检测最好使用两种方法进行平行检测，结果均符合才能发出报告；尤其， 在交叉配血时，盐水法、聚凝胺法或微柱凝胶法，一起使用保障输血安全。
在分析输血前血型血清学检测结果时，还要注意受血者的一些疾病状况：严重感染、 低血浆蛋白血症、肿瘤和器官移植等情况时，患者的血型抗原抗体会发生变化，尤 其在治疗前后会出现检测结果不一致。
患
者
阳
主
交叉配血实验
交叉配血实验交叉配血试验，是指受血者血清加供血者红细胞悬液；供血者血清加受血者红细胞悬液，同时进行凝集试验。
交叉配血试验包括主试验和副试验两种。
前者用受血者血清与供血者红细胞悬液作试验以发现受血者血清中是否含有与供血者红细胞反应的抗体。
又称直接配合或主侧配合；后者则用供血者血清与受血者红细胞作试验以发现供血者血清中是否有不合抗体，又称间接配合。
其目的是验证供者与受者ABO血型鉴定是否正确，防范引起溶血性输血反应。
此外，也可检出ABO血型系统的不规则凝集素以及发现ABO系统以外的其他血型抗体。
交叉配血试验有多种方式，如盐水法、胶体介质配血法、抗球蛋白法、聚凝胺法等。
输血时不仅要鉴定ABO血型和Rh血型，即使输入同型血，或受血者再次接受同一供血者的血液，都必须做交叉配血试验。
交叉配血试验，是指受血者血清加供血者红细胞悬液；供血者血清加受血者红细胞悬液，同时进行凝集试验。
交叉配血试验包括主试验和副试验两种。
前者用受血者血清与供血者红细胞悬液作试验以发现受血者血清中是否含有与供血者红细胞反应的抗体。
又称直接配合或主侧配合；后者则用供血者血清与受血者红细胞作试验以发现供血者血清中是否有不合抗体，又称间接配合。
其目的是验证供者与受者ABO血型鉴定是否正确，防范引起溶血性输血反应。
此外，也可检出ABO血型系统的不规则凝集素以及发现ABO系统以外的其他血型抗体。
交叉配血试验有多种方式，如盐水法、胶体介质配血法、抗球蛋白法、聚凝胺法等。
输血时不仅要鉴定ABO血型和Rh血型，即使输入同型血，或受血者再次接受同一供血者的血液，都必须做交叉配血试验。
中文名交叉配血试验确定能否输血观察有无凝集反应包括主试验和副试验两种快速导航正常值参考范围临床意义测定输血的相容性，在血型鉴定的基础上，通过交叉配血试验进一步证实受血者和供血者之间不存在血型不合的抗原-抗体反应，以保证受血者的输血安全。
交叉配血的两侧均无凝集反应，为配血相合，可以输血。
实验三血型鉴定(交叉配血)
盐水介质法
原理及目的
交叉配血试验是指受血者血清加供血者红细胞悬液;供血 者血清加受血者红细胞悬液，同时进行凝集试验。前者称 主试验，后者称副试验。其目的是验证供者与受者ABO血 型鉴定是否正确，防范引起溶血性输血反应。此外，也可 检出ABO血型系统的不规则凝集素以及发现ABO系统以外 的其他血型抗体。
3.分别混匀，低速离心约2 分钟，轻轻摇匀，观察结果。 4.结果判定： 同型配血，主测、次测均不凝集，表示无配血禁忌，可以
输血； 异型配血时，主测无凝集，次测凝集，无溶血，可以输给 少量。输异型血时，如次测不凝集，不可以输血，应重新 复查血型或追查其原因。
患 者
献 血 者
交叉配血试验
主侧配血用患者血清与供试剂和器材生理盐水 小试管、尖嘴滴管、离心机、试管架、显微镜等
操作步骤
1.取受血者和供血者血液各2ml，注入一清洁干燥试管内， 按常规方法分离血清。同时留数滴滴加于含少量生理盐水 的小试管内，制成5％的红细胞生理盐水悬液。注意要分 别标明供血者与受血者的血液管、血清管、红细胞悬液管 的姓名。 2.另取清洁试管2支，标明主测和次测。主测：受血者血清 1 滴加供血者红细胞悬液1滴。次测：供血者血清1滴加受 血者红细胞悬液1滴。
主
者红细胞进行试验
侧
次
次测配血
侧
供血者血清与患
者红细胞进行试验
交叉配血的要求
主侧配血要求：
绝对不可以有凝集或溶血
凝
现象。
集
次测配血要求：
供血者血清加受血者红细
胞在允许范围内，可以有 凝集现象，但不可以有溶
不
血。
凝
集
交叉配血试验结果图例
无溶血 无凝集
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
6.使用血浆标本：应排除纤维蛋白原的干扰 7.输血后标本保存：2-8℃,至少一周。
6
2018/10/26
血型
1. 红细胞悬液的配制 2. 离心力的标准 3. 离心后结果观察 4. 盐水试验 5. 正反定型结果不一致原因及处理
2018/10/26 7
1.红细胞悬液的配制
洗涤
洗涤目的: 去除RBC表面物质
①少量的血浆蛋白 ②已溶解红细胞的基质（有竞争抗体的作用） ③抗凝剂（有抗补体的作用）
至少要用大量生理盐水洗一次
浓度 2%：一般用于抗体效价的测定 5%：一般用于血型鉴定、配血试验、抗球蛋白试验 等大多数血型血清学试验 10%：一般用于测定抗体的亲和力试验
2018/10/26 14
（9） 获得性类B 由于G-杆菌作用，RBC可获得“类B”活性 （10）异常血浆蛋白 病人血浆中异常的白蛋白、球蛋白比例异 常和高浓度的FIB等能导致缗钱状形成，造成假凝集现象 （11）近期内进行大量的血浆置换治疗，影响抗体效价，造成反 定型困难。
（12）不规则抗体的产生 受检者血浆中，含有ABO血型抗体以 外的不规则抗体，如自身抗I，与试剂A、B细胞上的相应抗原起 反应。 （13）低丙种球蛋白血症 可能会因免疫球蛋白水平全面下降使 血清定型时不见凝集或仅见弱凝集反应。
（1）技术和管理错误 器材不洁 —— 假阳 试剂污染或不足 —— 假阳 标本和试剂搞错 —— 假阳 、假阴 离心过度或不足 —— 假阳 、假阴 结果记录或判断错误 —— 假阳 、假阴 漏加试剂 —— 假阴 阳性反应产生溶血现象未能识别——假阴
2018/10/26 13
（2）标准血清效价太低、亲和力不强。如抗A血清效价不高， 可将A亚型误定为O型，AB型误定为B型。 （3）红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应 不明显，误判为阴性反应。 （4）血清异常 华通胶或血清蛋白异常引起串钱状形成，影响 反定性结果 （5）红细胞致敏 在含高蛋白介质试剂中可发生凝集，产生假 阳性 （6）近期曾异型输血，病人血液标本成为不同型别的红细胞 混合物，定型时显示“混合外观凝集”现象。 （7）疾病因素导致抗原减弱 某些白血病病人ABO血型抗原 可受到抑制，检出困难。 （8）红细胞多凝集现象 RBC因遗传或获得性的表面异常，发 生多凝集现象。
有的标本延迟离心
原有凝集会变为既不凝也不溶血,难以发现ABO血型 的不配合。（多发生在O型人的血清抗体与A型、B 型或AB型红细胞反应的试验中,发生率为2%-3%.发 生机制是反应强的抗A、抗B和抗原强度强的A、B抗 原作用,补体C1在有Ca2+存在的条件下,固定到红细 胞膜上,妨碍了红细胞的凝集,进一步可能引起溶血） 解决的方法： A:血清与红细胞混合后立即离心。 B:用血浆或灭活的血清做试验 C:用EDTA盐水配制红细胞悬液, D:稀释血清
（14）药物等因素 药物、右旋糖酐等静脉注射某些造影剂可引 起红细胞聚集而类似凝集。 （15）年龄因素 如新生儿、老年人等。
11
2018/10/26
加样时先加血清再加红细胞，以避免漏加； 抗体和抗原的比例一般为2：1。
必须要做正反定型实验才能确定血型。
正定型试验有条件可加做抗AB（检测弱A、弱B ）
反定型一定要加做O细胞,（发现不规则抗体）
2018/10/26
12
5.正反定型结果不一致
原因：技术、受检红细胞或血清本身
细胞成细沙状沿试管壁流下
+ 细胞成块状或成齿状沿试管壁流下
切不可用力使劲摇试管，那样凝集颗粒会被摇散， 弱凝集则会误判为阴性。
2018/10/26 9
常用的记录符号及所示的凝集强度 4 + 3 + 2 + 1 W + + O 一个大的凝集块,背景透明,无游离细胞
数个大凝集块,背景透明,无游离细胞 许多小凝集块,肉眼可见,大小均匀,背景基本透明,有游离 细胞 很小的凝集块,肉眼可见,背景不透明,游离细胞较多,需要 微小凝集块 ,肉眼很难看清,背景混浊,要用显微镜观察 用显微镜观察 无凝集,无溶血,全部是游离细胞,要用显微镜观察
交叉配血 知识讲座
2018/10/26 1
RBC表面有丰富唾液酸，在中性环境中带负电荷，互 相分离。可通过缩短细胞间距，以及在致敏细胞上的 抗体之间搭桥使RBC凝集。 凝集一般为二个步骤
Ϋ Ϋ Ϋ Ϋ Ϋ Ϋ
抗体吸附于RBC抗原上成为致敏状态
致敏RBC凝集形成块状
2018/10/26 2
一 一
二 二
标本的采集及要求 血型 不规则抗体的筛选 交叉配血
3
三 四 四
2018/10/26
标本的采集与要求
2018/10/26
4
1.标本要新鲜:
标本要具有代表性， 能代表患者目前状况
前三个月内输血或妊娠:配血试验标本抽取<48h,
避免因回忆反应产生的抗体漏检。 新近的输血或妊娠：可引起意外抗体迅速出现,如 果对病人的输血史或人身史不明,使用的标本必须是 输血前48h内抽取的。 血量约为5ml 。
2018/10/26 8
2. 离心力的标准
不同规格离心机，力矩不同，统一离心转速，但 没有统一离心力。 离心转速换算公式： RCF = 1.118 × 10-5 × (rpm) 2× R (cm)
3. 离心后结果观察注意事项
将试管成30-45℃角拿在手上，细胞扣朝上，手腕 轻轻用力，用液体去冲细胞扣。
2.使用右旋糖酐、pvp等：
治疗前抽取标本备用,防止RBC缗钱状凝集的干扰
5
2018/10/26
3.24小时内输了12u血后：
可输注未经交叉配血的ABO、RH同型的血液,因为 原始交叉配血用的血清已不能代表患者血清的情况。
4.防止血样的稀释和溶血的产生：
溶血标本一般不使用,因为血清中游离血红蛋白可掩 盖在输血前实验中抗体反映引起的溶血
P 部分溶血 H H 完全溶血 W 混合外观 2018/10/26
10
4.盐水试验
多采用立即离心法 正确的操作是：RBC悬液加到血清后立即离心并观察结果
反应时间过长而延误离心对ABO血型系统的抗体检出影响 室温2分钟后离心 室温5分钟后离心 可能使3+～4+的凝集减弱为0+ ～ 1+,并有溶血 原有凝集可能消失,并有溶血