高中生物选修一微生物的实验室培养教案
课题1微生物的实验室培养-人教版选修1生物技术实践教案
课题1 微生物的实验室培养-人教版选修1 生物技术实践教案教学目标•了解微生物实验室培养的基本原理和方法•学习操作无菌实验的技能•熟悉使用化学试剂和实验器材的方法和注意事项教学重点学生能够熟练地进行微生物实验室培养和无菌实验操作，掌握实验过程的基本方法和注意事项。
教学难点如何正确进行微生物实验室培养和无菌实验，保证实验的准确性和安全性。
教学过程一、实验目的和原理1.实验目的：了解微生物实验室培养的基本原理和方法，掌握无菌实验操作技巧，学会使用化学试剂和实验器材。
2.实验原理：微生物实验室培养是把微生物放在适宜的环境中，使其得到营养、生长和繁殖的过程，一般有两种方法：液体培养和固体培养。
无菌实验是指在无微生物干扰和污染的条件下进行实验操作，通常需要采用灭菌和消毒等技术。
二、实验器材和试剂•实验器材：培养皿、试管、移液管、显微镜等。
•试剂：琼脂、磷酸盐缓冲液、蒸馏水、碘酒、70%酒精等。
三、实验步骤1.实验前准备：清洗试管、培养皿等实验器具，准备所需试剂和培养物。
2.培养基制备：称取适量的琼脂和磷酸盐缓冲液，加入蒸馏水，加热至琼脂完全溶解，然后进行灭菌消毒。
3.杂菌检测：将准备好的培养基倒在培养皿上，放置在恒温箱中，观察是否有杂菌的生长。
4.微生物接种：采用无菌技术，将培养物移植至培养基表面和内部，标明不同的培养条件和试验目的。
5.培养条件：培养箱中的温度、湿度和光照条件要根据不同的微生物种类进行调节和控制。
6.观察和记录：观察微生物在培养基上的生长情况和形态特征，进行记录和统计分析。
7.鉴定和鉴别：采用显微镜等检测技术，进行微生物的鉴定和鉴别，以确定其种类和特性。
四、实验注意事项1.操作过程中要注意使用无菌技术，避免微生物污染。
2.实验室要保持干净卫生，经常清洗和消毒实验器材和环境。
3.对于具有毒性的试剂，要注意正确配制和储存，避免误用和事故发生。
4.操作结束后，要清洗和消毒实验器材和实验环境，保证实验室的安全和卫生。
高中生物人教版选修1教案-课题1_微生物的实验室培养_教学设计_教案_2
教学准备1. 教学目标了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术2. 教学重点/难点无菌技术的操作3. 教学用具4. 标签教学过程微生物生存的环境和营养物质一.培养基：思考：微生物“吃”什么？碳源、氮源、水、无机盐1.基本成分：自养微生物CO2、CO32-、HCO3-无机碳源：⑴碳源有机碳源：牛肉膏、蛋白胨等异养微生物NH4＋、NO3-（为硝化细菌提供N源和能源）⑵氮源有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等注：含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源微生物生存的环境和营养物质一.培养基：碳源、氮源、水、无机盐1.基本成分：维生素、碱基等（生长因子）2.特殊营养：（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）3.pH、氧气的需求：4.种类：物理性质：液体培养基固体培养基化学成分：天然培养基合成培养基牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
5. 配制原则⑴目的明确：根据微生物的种类、培养目的选择原料自养型：不加碳型（CO2碳源）异养型：⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当加入缓冲剂⑶适宜的pH值：细菌偏碱，真菌偏酸防止外来杂菌的污染二.无菌技术：1.消毒与灭菌：强烈的理化方法，杀死所有微生物（包括芽孢、孢子）;较为温和理化方法，杀死部分有害菌体（不包括芽孢、孢子）思考请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。
如果需要，请选择合适的方法。
（1）培养细菌用的培养基与培养皿（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手2.无菌范围：操作者的手、衣着消毒实验用具灭菌实验操作过程酒精灯旁操作二.大肠杆菌的纯化培养：㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基㈡纯化大肠杆菌：1.纯化大肠杆菌的方法：平板划线法和稀释涂布平板法⑴平板划线法：划3个平板（重复实验）1个不划线（空白对照）⑵稀释涂布平板法课题成果评价（一）培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
高中生物选修1教学设计16：2.1 微生物的实验室培养教案
微生物的实验室培养教学目标1. 知识目标了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术。
2. 能力目标通过实验，培养学生动手操作能力；对实验改进和评价，培养学生批判思维、创新思维和科学探究能力。
3. 情感、态度与价值观形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。
教学重难点无菌技术的操作教学过程环节教师活动(教学内容的呈现)设计意图情境导入课件展示“果酒和果醋的发酵装置示意图”提出问题：排气口为什么是弯曲的细管？用直的可以吗？激发学习的动机。
授新课组织学生阅读教材。
补充液体培养基和固体培养基的不同点。
强调消毒和灭菌的不同点。
组织学生制备固体培养基，指导学生学会倒平板操作。
思考：平板冷凝后为什么要倒置？组织学生完成学案后，观看视频资料，完成平板划线操作。
了解培养基的概念、类型、成分。
了解无菌技术的目的和关键，常见的消毒和灭菌的方法，区分消毒和灭菌的不同点。
学会制备固体培养基。
学会平板划线操作技术。
学会对实验几个的分析与组织学生观察上一个班学生的实验结果，分析实验的失败的原因。
补充：菌种的保存。
评价。
了解菌种的保存方法。
课堂反馈在制备培养基和平板划线的实验过程中哪些步骤是无菌操作？掌握学生的学习情况。
课堂小结培养基：概念、类型、成分。
无菌技术：消毒和灭菌。
制备牛肉膏蛋白胨固体培养基。
纯化大肠杆菌。
菌种的保存。
强调课程的重点。
教学反思主要特色与创新。
充分调动学生积极性自主学习，在有限的时间内让学生在实验的实际操作中提高动手能力。
存在的问题与不足。
由于上课时间的限制，不能让所有的实验步骤都让学生完成。
人教版高中生物选修一专题2课题1微生物的实验室培养教学案含解析
人教版高中生物选修一专题2课题1微生物的实验室培养教学案含解析.微生物的实验室培养1.培养基中需含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。
2．消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
3．实验室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用紫外线或化学药剂进行消毒，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。
4．固体培养基的配制过程为：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。
5．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
6．长期保存菌种可以采用甘油管藏法。
一、培养基1．概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。
2．种类：(按物理性质分)3．营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
二、无菌技术1．获取纯净培养物的方法.消毒灭菌较为温和强烈物体表面或内部的部分微生物物体内外所有的微生物不能能(2)常用方法：[连线]三、大肠杆菌的纯化培养1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)操作步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板(2)倒平板的方法及注意事项：①请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。
②甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。
③丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。
2．纯化大肠杆菌(1)纯化原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
.(2)接种方法：①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
..(3)培养：将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37_℃恒温箱中，培养12.h和24.h后，分别观察、记录。
四、菌种的保存[连线]1．不同培养基的具体配方不同，但一般都含(..)A．碳源、磷酸盐和维生素B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素解析：选C.培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还应考虑pH、特殊营养物质及O2等条件。
2.1微生物的实验室培养 教案(人教版选修1).docx
2.1微生物的实验室培养教案（人教版选修1）•课标要求进行微牛物的分离和培养。
用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落。
•课标解读1.了解有关培养基的基础知识。
2.进行无菌技术的操作。
3.进行微牛物的培养。
•教学地位本课题介绍了最基本的微牛物技术，是开展其他两个课题的基础。
只有掌握了本课题所介绍的基本技术，才能完成本专题的其他课题。
同时，本课题小学习的无菌操作技术也有助于学习“植物组织培养技术”。
培养基的配置、微牛物的分离都是微牛物相关实验的必备操作技术。
•教法指导1.对于培养基的教学，首先介绍培养基的分类，在介绍液体培养基和固体培养基吋，教师可提供实物或图片，以加深学牛印象，并比较二者呈现不同物理状态的原因。
根据教材屮培养基配方的实例，以资料分析的形式，让学牛结合必修1屮“构成细胞的元素”这一•角度来分析培养基小为什么需要具备这些基本成分。
2.无菌技术的教学，首先应该结合学牛的牛活经验，让学牛意识到在我们H常牛活的环境屮，微牛物无处不在，在微牛物的培养过程屮，极有可能将环境屮的微牛物带入培养物屮，由此强调无菌操作的重耍性。
无菌操作贯穿整个微牛物实验屮，无论是培养基的配置、微牛物的接种，还是微牛物的培养，每--步都要注意无菌操作，熟练、规范的掌握无菌操作技术是成功培养微牛物的关键。
3.常用的消毒、灭菌的方法部分的教学，可先让学生阅读相关内容，然后建立比较表格，通过比较，理解并记忆消毒和灭菌的区别、二者的适用范围及具体操作方法。
可通过教材的旁栏思考题进行检测、巩固。
•新课导入建议专题1学习的传统发酵技术，所用的微牛物来自材料自身携带或者空气，教师可介绍工业发酵技术，所利用的微牛物是优良的菌种，而且是经过培养、纯化的菌种，然后设问：如何培养微生物？如何保证所使用的微生物屮没有混入其他微牛物？对人体健康有害的微牛物如何防止其扩散？这些问题不必给出答案，通过这些问题可引入本课题的学习。
•教学流程设计学牛课前预习：阅读教材比3 20,填写【课前自主导学】，完成“思考交流1、2”。
高中生物选修一教学设计1：微生物的实验室培养教案
课题1 微生物的实验室培养一、自主学习[学点1]基础知识1、培养基：⑴概念：按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质。
根据有无_________,可分为培养基和培养基。
⑵培养基的化学成分：一般都含有、、、四类营养成分。
⑶在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。
例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加______；培养霉菌时需要将PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH调至；培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件。
2、无菌技术⑴获得纯净培养物的关键是。
避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：①实验操作的、操作者的衣着和手进行清洁和_______。
②微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行。
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_______________附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与______________相接触。
⑵消毒和灭菌：①消毒：杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括______和_______）。
常用的消毒方法有、，也使用化学药剂进行消毒。
此外，实验室里还用或进行消毒。
②灭菌：杀死物体内外______的微生物，包括芽孢和孢子。
常用的灭菌方法有、、。
〖学点1学习情况检测〗1、不同培养基的具体配方不同，但一般都含有（）A．碳源、磷酸盐和维生素B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素2、细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（）A．接种针、手、培养基B．高压锅、手、接种针C．培养基、手、接种针D．接种针、手、高压锅3、培养基的灭菌可采用高压灭菌，其具体的方法是（）A．100℃，15分钟B．121℃，15－30分钟C．62℃，30分钟D．零下18℃，60分钟以上[学点2]实验操作1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：→ → → →倒平板2、倒平板：待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
生物：2..1《微生物的实验室培养》教案(1)(新人教版选修1)
课题1微生物地实验室培养【课程目标】了解培养基地基础知识，进行微生物培养和无菌技术地操作.【课题重点】无菌技术地操作【课题难点】无菌技术地操作基础知识一、培养基1．概念：人们按照微生物对地不同需求，配制出供其地营养基质叫培养基.可分为培养基和培养基.2．营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及地要求.3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件.〖思考1〗从细胞地化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？【补充1】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物地结构物质和分泌物，并提供能量.氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等.含有C、H、O、N地化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等.二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：(一>获得纯净培养物地关键是，具体操作如下：1．对实验操作地、操作者地和进行.2．将用于微生物培养地、和等器具进行 .3．为避免周围环境中微生物地污染，实验操作应在附近进行.4．实验操作时应避免已经灭菌处理地材料用具与相接触.(二>消毒和灭菌1．消毒是指.常用地方法有、、消毒法.2．灭菌是指.常用地方法有：、、灭菌.分别适用于那些用具？〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有地目地是什么？〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目地是什么？〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目地是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目地是防止实验操作----大肠杆菌地纯化培养：本实验所用地培养基是，本实验可分成和两个阶段进行.一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基地操作步骤是：、、、、.〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基地称量操作中，动作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌地目地是什么？〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？2．倒平板：待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行.其过程是：①在火焰旁右手拿，左手；②使锥形瓶地瓶口；③左手将培养皿，右手，立刻盖上皿盖.④待平板冷却凝固后，将平板.〖思考7〗锥形瓶地瓶口通过火焰地目地是什么？〖思考8〗倒平板地目地是什么？〖思考9〗若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？〖思考10〗配制斜面培养基作用是什么？，试管为什么要加塞棉塞？二、纯化大肠杆菌微生物接种：最常用地是法和法.另外还有穿刺接种和斜面接种等.1．平板划线法是地操作，将聚集地菌种逐步稀释分散到培养基地表面.其操作步骤是：①将在酒精灯火焰上灼烧直至.②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌地菌种试管地棉塞.③将菌种试管口通过火焰达到地目地.④将冷却地接种环伸入到.⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞.⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环，盖上皿盖，不要划破培养基.⑦灼烧接种环，冷却后从划线.重复上述过程，完成三、四、五区域内划线.注意不要将相连.⑧将平板培养.〖思考11〗取菌种前灼烧接种环地目地是什么？为什么除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环？取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目地是？最后灼烧接种环地目地是？在第1次划线后都从上次划线末端开始地目地是？2．稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列地梯度稀释，然后将进行培养.当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成地标准菌落.系列稀释操作：①取盛有mL 水地无菌试管6支，编号101、102、103、104、105、106.②用灼烧冷却地移液管吸取mL 菌液注入编号为101试管中，并吹打3次使之混匀.③从101倍液中吸取mL 菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液.依此类推.〖思考12〗系列稀释操作地注意事项是什么？〖思考13〗涂布平板操作地步骤是什么？结果分析与评价1 培养未接种培养基地作用是什么？，若有菌落形成，说明什么？2 在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态？3 培养12h 和24h 后地菌落大小？；菌落分布位置？原因？ 〖思考14〗在某培养基上出现了3种特征不同地菌落是什么原因？〖思考15〗频繁使用地菌种利用什么法保存？长期保存菌种地方法是什么？典例精析【例1】下列关于微生物营养地说法，正确地是……………………………………( >A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B．凡是碳源都能提供能量c．除水以外地无机物仅提供无机盐 D．无机氮源也能提供能量【例2】细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同地处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位地杂菌………( > A．接种针、手、培养基 B．高压锅、手、接种针C．培养基、手、接种针 D．接种针、手、高压锅【例3】以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基地叙述错误地是………………………( >A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B．将称好地牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D．待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置【例4】下面对发酵工程中灭菌地理解不正确地是A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前◇◇知识拓展3．消毒与灭菌地区别消毒是一种采用较温和地理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害地病原菌，而对被消毒地物体基本无害地措施.例如一些常用地对皮肤、水果、饮用水进行药剂消毒地方法；对啤酒、牛奶、果汁和酱油等进行消毒处理地巴氏消毒法，等等.灭菌是采用强烈地理化因素使任何物体内外部地一切微生物永远丧失其生长繁殖能力地措施.例如各种高温灭菌措施等.4．微生物地营养类型异养微生物生命活动所需要地能源，主要靠有机物氧化分解释放能量，碳源是异养微生物地主要能源物质，碳源对异养微生物来说，不仅可为机体提供构成细胞物质，而且为机体提供完成整个生理活动所需能量.某些异养微生物也可以光能作为能源，例如红螺菌，在环境中没有有机物地条件下，它可以利用光能，把环境中地CO2合成为自身有机物；在有有机物存在地条件下，可以利用有机物进行生长，其代谢类型为兼性营养型细菌.依微生物生长所需碳源地性质以及所需能源，将微生物地营养类型归纳如下：各类微生物所需碳源和能源地比较在生产实践和社会生活中，我们可以利用某些微生物碳源地特殊性来解决环境污染、粮食危机等问题.我们可以利用某些细菌、放线菌、酵母菌以石油作为碳源地原理，消除石油污染.运用某些细菌可以分解、利用氰化物、酚等有毒物质地原理处理有毒物质.研究开发以纤维素、石油、CO2等作为碳源和能源地工业微生物，缓解粮食危机.自养微生物和异养微生物类型地划分，主要依靠能否以CO2作为生长地主要或唯一碳源，而不是决定于氮源.例如异养微生物最常用地氮源是无机氮源中地铵盐和硝酸盐.【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收地微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等.【补充】培养基地配制原则：①目地要明确：根据培养地微生物种类、培养地目地等确定培养基地类型和配制量.②营养要协调：培养基中各种营养物质地浓度和比例要适宜.例如：碳氮比4∶1时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增.③pH要适宜：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性.知识拓展题<1）该培养基所含地碳源是-----------------，其功能是---------------------------.<2）该培养基所含地氮源是-----------------，其功能是---------------------------.<3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要地营养物质是---------------------------.<4）该细菌在同化作用上地代谢类型是---------------<5）该培养基用来鉴别地细菌是<）A霉菌 B大肠杆菌 C 酵母菌 D 乳酸菌基础自测一、选择题、1．下列有关培养基地叙述正确地是……( >A．培养基是为微生物地生长繁殖提供营养地基质B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见地单个细菌2.不同培养基地具体配方不同，但一般都含( >A．碳源、磷酸盐和维生素 B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐 D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素3．获得纯净培养物地关键是……………( >A．将用于微生物培养地器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 B．接种纯种细菌C．适宜环境条件下培养 D．防止外来杂菌地入侵4．下列常用地无菌操作中错误地是……( >A．用酒精擦拭双手 B．用氯气消毒水源 c．实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D．玻璃器皿(吸管、培养皿>可用酒精擦拭5．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基地步骤是( >A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板6．有关倒平板地操作错误地是…………( >A．将灭过菌地培养皿放在火焰旁地桌面上 B．使打开地锥形瓶瓶口迅速通过火焰c．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置7．有关平板划线操作正确地是…………( >A．使用已灭菌地接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种地试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞c．将沾有菌种地接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D．最后将平板倒置，放人培养箱中培养8．有关稀释涂布平板法，叙述错误地是…( >A．首先将菌液进行一系列地梯度稀释B．然后将不同稀释度地菌液分别涂布到琼脂固体培养基地表面 C．再放在适宜条件下培养 D．结果都可在培养基表面形成单个地菌落9．涂布平板操作需要用到………………( >A．接种环、滴管、酒精灯 B．接种环、移液管、酒精灯C．涂布器、移液管、酒精灯 D．涂布器、接种环、酒精灯10．将接种后地培养基和一个未接种地培养基都放入37℃恒温箱地目地是……………( >A．对比观察培养基有没有被微生物利用 B．对比分析培养基是否被杂菌污染C．没必要放人未接种地培养基 D．为了下次接种时再使用11关微生物营养物质地叙述中，正确地是A.是碳源地物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外地无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量12．作为自养生物唯一碳源地是<）A糖类 B 石油 C 二氧化碳 D 花生粉饼13．大肠杆菌地代谢类型是<）A 自养需氧 B异氧严格厌氧 C异养需氧 D 异养兼性厌氧14．菌种保藏应控制地条件是<）<1）湿度<2）低温<3）干燥<4）有光<5）隔绝空气<6）适当有氧A<1）<4）<6） B<2）<3）<6） C<1）<5）<6） D<2）<3）<5）15．下列物质中，不能用作酵母菌碳源地是<）A含碳有机物 B蛋白胨 C含碳无机物 D花生粉饼等天然物质16．平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是<）A利于大肠杆菌地接种 B防止杂菌污染C利于培养地冷却 D 防止皿盖冷却水倒流入培养基17.含C、H、O、N地大分子化合物可以作为<）A异养微生物地氮源、能源B异养微生物地碳源、氮源C自养微生物地氮源、能源、碳源 D自养微生物地氮源、能源、碳源二、非选择题18．鉴定培养基地制作是否合格地方法是：将制备好地培养基放在中保温1-2天看有无，如果没有说明制作合格，反之则不合格.19．请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌.如果需要，请选择合适地方法.(1>培养细菌用地培养基与培养皿(2>玻棒、试管、烧瓶和吸管(3>实验操作者地双手(1>、 (2>、 (3>20．19世纪中期，关系到法国经济命脉地酿造业曾一度遭受毁灭性地打击.在生产过程中，出现了葡萄酒变酸、变味地怪事.(1>根据你所掌握地知识分析导致生产失败地根源是什么?(2>由此得出研究和应用微生物地前提是防止21．在倒平板地过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间地部位，这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?22．在做第二次以及其后地划线操作时，为什么总是从上一次划线地末端开始划线?参考答案基础知识一、1.营养物质生长繁殖液体固体2水.碳源氮源无机盐 PH 特殊营养物质氧气3维生素，酸性，中性或微碱性，无氧〖思考1〗:C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质地基本元素，约占原生质总量地97％以上.二 <一）杂菌 1.空间衣着手，清洁和消毒 2.器皿接种用具，培养基，灭菌 3. 酒精灯火焰 4.周围地物品<二）1.略巴氏消酒精 2.略灼烧干热高压蒸气〖思考2〗:防止感染实验操作者.〖思考3〗避免妨碍热空气流通.〖思考4〗有利于锅内温度升高，100k Pa，121℃，15～30，零，容器中地液体暴沸，实验操作、一1计算→称量→溶化→灭菌→倒平板思考5：防止牛肉膏吸收空气中水分.防止琼脂糊底而导致烧杯破裂.〖思考6〗糖维生素和有机氮2：50，锥形瓶，拔出棉塞，迅速通过火焰，打开一条缝隙，将培养基倒入培养皿，倒过来放置〖思考7〗消灭瓶口地杂菌，防止杂菌感染培养基.〖思考8〗防止培养基冷却过程中形成地水滴落到培养基表面.〖思考9〗不能.空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基.〖思考10〗增大接种面积，保持通气并防止杂菌感染.答案.二、平板划线 .稀释涂布平板1通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线，①接种环，烧红.③，消灭试管口杂菌.④菌液中取出一环菌种.⑥，伸入平板内划3～5条平行线，⑦，第一区划线末端开始向第二区域内，，第五区地划线与第一区划线，⑧，倒置放在培养箱中〖思考11〗消灭接种环上地微生物，地目地是消灭接种环上残留菌种，防止高温杀死菌种；防止细菌污染环境和操作者.获得由单个细菌形成地标准菌落.2不同稀释度地菌液分别涂布到琼脂固体培养基地表面，①，9mL，灭菌.②，1.③，1〖思考12〗操作中试管口和移液管应在离火焰1～2cm处.整个操作过程中使用了1支移液管结果分析与评价1对照，培养基灭菌不彻底.2呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐.3大小不同；菌落分布位置相同.原因是时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌落地位置不动，但菌落数增多.〖思考14〗有培养基灭菌不彻底或杂菌感染等.〖思考15〗临时保藏法和甘油管藏法.前者利用固体斜面培养基培养后，保存在4℃冰箱中，每3～6个月转种培养一次，缺点是保存时间较短，容易发生污染和变异；后者将菌种与无菌体积等量混合后保存在－20℃冷冻箱中.【例1】解读：此题考查学生对微生物地营养和能源地理解.对异养微生物来说，含C、H、O、N地化合物既是碳源，又是氮源.CO2是光能自养细菌地碳源，但不能提供能量.CO2和N.是无机物，也是微生物地碳源和氮源.硝化细菌所利用地氮源是无机氮源氨，同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用地能源.答案：D启示：含C、H、o、N地化合物既是微生物地碳源，又是微生物地氮源；有机碳源能提供能量，无机碳源不能提供能量；无机物也可提供碳源、氮源和能源.【例2】解读：此题考查学生对无菌技术地掌握.高压蒸气灭菌锅是灭菌地一个设备，通常用于培养基地灭菌.用酒精擦拭双手是消毒地一种方法.火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物地接种工具，如接种环. 答案：C启示：微生物培养过程中地无菌操作包括消毒和灭菌两大类，分别又有各种不同地方法.对实验操作地空间、操作者地衣着和手，进行清洁和消毒；将用于微生物培养地器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌.【例3】解读：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基地步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒.牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸.待培养基冷却至50℃，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态.平板冷却几分钟后还需倒置.答案：A启示：固体培养基地制作步骤是：“计算→称量→溶化→灭菌→倒平板”顺序不能颠倒.并且在制作过程特别是倒平板时彻底做到“无菌”.【例4】解读：灭菌是微生物发酵过程地一个重要环节.A说地是灭菌地目地，因为发酵所用地菌种大多是单一地纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物<杂菌），所以是正确地；B是错误地，因为灭菌地目地是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物.C是正确地，因为与发酵有关地所有设备和物质都要灭菌；发酵所用地微生物是灭菌后专门接种地，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死.答案：B基础自测一、1．A 2．C 3．D 4．D 5．C 6．C 7．D 8．D 9．C 10．B.11D..12.C.13.D.14.B.15.C.16.D.17.B.二、18．恒温箱菌落生长，菌落生长 19(1>需要灭菌 (2>需要灭菌 (3>需要消毒20(1>导致生产失败地根源在于发酵物中混入了杂菌.(2>杂菌入侵，获得纯净地培养物.21．不能因空气中地微生物可能在皿盖与皿底之间地培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物.22．因划线后线条末端细菌地数目比线条起始处要少，每次从上一次划线地末端开始，能使细菌地数目随着划线次数地增加而逐步减少，这样最终就能得到由单个细菌繁殖而来地菌落.申明：所有资料为本人收集整理，仅限个人学习使用，勿做商业用途.。
高中生物选修1教学设计15：2.1 微生物的实验室培养教案
微生物的培养与鉴定【教学目标】知识目标1.掌握无菌操作技术2.说出培养基配制步骤及每一步操作的注意点和意义能力目标1.能进行平板划线演示操作2.能进行稀释涂布平板演示操作3.能进行倒平板演示操作情感目标培养严谨求实的科学态度【教学方法】阅读、讨论、演示操作、练习反馈【课前准备】平板划线、涂布平板、培养基配制演示操作的所有器具【教学过程】教学内容教师活动学生活动无菌操作倒平板、接种、灭菌、消毒、稀释倒平板：学生演示→学生看书找出操作中的不足→总结规律→教师演示接种（平板划线、涂布平板）：学生演示→学生看书找出操作中的不足→总结规律→教师演示灭菌（高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌）：指出各种灭菌方法的适用对象培养基经常需要灭菌的器具玻璃制品几个概念的辨析：分离和纯化：分离=纯化，从混合菌种中分离出一种菌种。
演示、找错误演示、找错误接种的方法及适用对象：涂布→计数；平板划线→分离纯化；混合涂布→厌氧菌。
混合涂布平板：在培养基凝固前将菌种与之混匀，然后倒平板（适用于较耐高温的菌种）。
计数：数出培养皿上有多少个菌落之前还要知道加入的培养液的体积，血球计数板计数也是这个道理。
培养基配制说出制作培养基的步骤教师操作演示步骤：称取各种药品全部加入烧杯后，加入适量的水进行加热→牛肉膏溶化取出滤纸→继续加热→定容→调节PH→灭菌→倒平板。
【滤纸太大（浪费、取出时带走更多的营养物质）、先将所有成分可入再加热取出滤纸（带走更多的营养物质）、稍微加热看不到漂浮的成分（琼脂没有充分融化）】回忆并说出找出错误菌种的分离与鉴定分离要搞清三个问题：何处找？：纤维素多的地方、埋些尿素等如何增加目标菌的数量？：可在取土前，如上述方法；可在取土后，通过选择培养。
如何分离？：用选择培养基。
鉴定方法：菌种指示剂现象大肠杆菌伊红-美蓝培养基黑色菌落尿素分解菌酚红指示剂培养基变红纤维素分解菌刚果红以纤维素分解菌为中心的透明圈思考回答归纳总结。
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课题1 微生物的实验室培养
【课标解读】
1、知道培养基的基础知识，进行无菌技术的操作
2、进行微生物的培养
【教学重难点】无菌技术的操作
【教学过程】
（一）引入新课
2007年7月1日，由国家标准委和卫生部联合发布的《生活饮用水卫生标准》（GB 5749-2006）强制性国家标准和13项生活饮用水卫生检验国家标准正式实施。
新标准中的饮用水水质指标由原标准的35项增至106项，增加了71项。
其中，微生物指标由2项增至6项，其中大肠杆菌要求每公升水中不得超过3个。
你用什么办法将他们找到并准确计数？
在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。
而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。
这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。
现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。
（二）进行新课
一、基础知识
1、培养基（阅读教材）
1.1概念（略）
1.2培养基的种类
(1)形态——固体和液体培养基（琼脂）
(2)成分——天然和合成培养基
(3)作用——选择和鉴别培养基
思考：1、固体培养基和液体培养基你认为哪个更适合工业生产？为什么？
2、如何区分S型细菌和R型细菌？
3、什么是菌落？
【补充】培养基的类型及其应用：（创新设计）
思考：1、硝化细菌、蓝藻与酵母菌的C源和N源有不同吗？能源呢？
2、结合细胞元素组成说明大多数培养基的组成为何有4类？一定都需要吗？
1.4培养条件——营养物质（特殊营养物质—生长因子）、PH、氧气
思考：1、微生物的营养物质就是4类吗? 牛肉膏和蛋白胨能为微生物提供哪些营养？
2、特殊营养物质是什么？试举一例。
(介绍生长因子)
3、你能将土壤中酵母菌、硝化细菌、乳酸菌、固氮菌分离出来吗？说一说最佳方案。
4、分离菌种是否一定要选择培养基？
培养乳酸杆菌时需要添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性，培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。
2、无菌技术（阅读并思考回答下列问题）
2.1意义、对象
2.2消毒与灭菌的区别
2.3消毒与灭菌的方法、适用对象
思考：1、什么是巴氏消毒法？灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌特别注意什么？
2、以下各项分别适用哪项无菌技术？简单说明理由
试管口；培养基；接种操作间；葡萄酒；培养皿；接种针（环）；口罩；
手；空气；饮用水
3、无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有什么目的？
二．实验操作（录像）
1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
程序：
计算—称量—溶化—调pH—灭菌—倒平板
思考：1、为何将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯溶化？
2、制备过程中要调节适宜的PH值，要在哪一个环节操作？为什么？
3、请阅读倒平板操作（P17）并回答讨论1—4
4、试管培养基常制成斜面的作用是什么？
2、接种（4种方法）
2．1平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。
其操作步骤是：
2.1.1目的
2.1.2平板划线操作（略）
思考：请回答P18讨论1—3
2．2稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。
当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。
2.2.1目的
2.2.2系列稀释操作：
①取盛有9mL水的无菌试管6支，编号101、102、103、104、105、106。
②用灼烧冷却的移液管吸取1mL菌液注入编号为101试管中，并吹吸3次，使之混匀。
③从101倍液中吸取1mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。
依此类推。
思考：为什么操作中试管口和移液管应在离火焰1～2cm处？整个操作过程中使用了几支移液管？
2．2.3涂布平板操作
思考：1、涂布器操作要点及原因
2、教材P19讨论
3、结果分析评价
3．1培养未接种培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。
3．2如果在培养基上观察到不同形态的菌落，请你分析原因？
3．3培养12h和24h后的菌落大小、位置相同吗？；原因是什么？。
4、课题延伸
频繁使用的菌种利用临时保藏法保存，长期保存菌种的方法是甘油管藏法。
前者利用固体斜面培养基培养后，保存在4℃冰箱中，每3～6个月转种培养一次，缺点是保存时间较短，容易发生污染和变异；后者将菌种与无菌体积等量混合后保存在－20℃冷冻箱中。
（四）课堂总结、点评。