HPLC法和紫外分光光度法测定葛根淀粉中葛根素含量的研究_张建辉
粉葛中淀粉含量与葛根素含量的相关性研究
中国中医药现代远程教育
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粉葛中淀粉含量与葛根素含量的相关性研究※
赵婧文 张建逵Y 魏 巍 李晓晨 李 丽 牛 蕾
（辽宁中医药大学药学院 ，辽宁 大连 116600）
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HPLC测定葛根素微乳中葛根素的含量
见表 ’ 。 (" 讨论 本方法经比较甲醇6甲醇6!- . 4 7 % 枸橼酸水溶 液等不同体系和比例流动相的色谱行为，结果发现 后者流动相条件下的葛根素峰形尖锐且对称， 其原 因可能由于葛根素含有酚羟基， 容易解离， 加入酸可 以抑制酚羟基的解离。
。目前葛根素制剂主要为
注射类制剂， 近年来有报道称葛根素注射制剂有急 性血管内溶血等严重不良反应， 已限制其应用。此 外 由 于 葛 根 素 口 服 难 以 吸 收， 生物利用度只有 =9 %%T
［ !］
， 所以市场上还没有口服制剂产品。将葛
根素制成葛根素微乳， 可以使葛根素形成纳米分散 系， 使葛根素与胃肠道的接触面积增大， 从而较明显 地提高其口服生物利用度， 为葛根素口服制剂的研 制奠定基础。笔者采用 /<-2 对葛根素微乳主要成 分葛根素进行了含量测定。 I# 仪器与试药 I9 I# 仪器# 岛津 -2C!$,U 高效液相色谱仪， <;7BAC NVNEV 2U3C!$, 系统控制器， <;7BANVNEV ?<GC3!$, <;7BANVNEV 21(C!$, 柱温箱，-2C?78WC <G, 检测器， XA7N 工作站； 3411-4* ,5!>J 电子天平。 I9 !# 试药 # 葛根素微乳及空白微乳 （ 自制） ； 葛根 素对照品 （ 中国药品生物制品检定所） ； 甲醇为色谱 纯 （ 上海振兴化工一厂） ； 其他试剂均为分析纯。 !# 方法与结果 !9 I# 色谱条件 # 色谱柱：?@ABC:DEF 6<C(G? E78C （ &9 " BB H IJ$ BB ） ； 流动相： 甲醇CI K L - 枸橼 WBN 酸水溶液 （ !J M %J ） ； 柱温： &$O ； 检测波长： !J$ NB； 流速： $9 > B8 L BAN； 进样量： !$ !8。理论板数按葛根 素峰计算， 应不低于 ! J$$ 。
不同来源的粉葛中总黄酮和葛根素的含量测定
不同来源的粉葛中总黄酮和葛根素的含量测定【摘要】目的考察不同来源粉葛中总黄酮、葛根素的含量。
方法采用紫外分光光度法（UV）测定总黄酮含量；采用高效液相色谱法（HPLC）测定葛根素含量，kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 nm，5μm)，流动相为甲醇－水（33：67），流速为1.0 ml・min-1，柱温30℃，检测波长为250 n m。
结果总黄酮含量为0.53%～1.03%，回收率为99.69%，RSD<2% (n = 6)；葛根素含量为0.21%～0.49%，回收率为96.11%，RSD<2% (n = 6)。
结论不同来源的粉葛药材中总黄酮和葛根素含量间变异较大，其中广东产粉葛，其总黄酮和葛根素含量均较高，平均质量优于广西产粉葛。
【关键词】粉葛总黄酮葛根素高效液相色谱粉葛为豆科植物甘葛藤Pueraria thomsonii Benth的干燥根，自古与野葛同作中药葛根用，具有解肌退热，生津，透疹，升阳止泻之功效［1］，临床应用广泛。
2005年版《中国药典》首次将粉葛作为分列中药材记载。
粉葛中的主要生物活性成分有葛根素等异黄酮类化合物［2］，具有降血压、扩张冠状动脉等多种生物活性，同时粉葛又富含淀粉，因此具有较高的医用和食用价值，现已开发出粉葛淀粉系列多种保健食品。
目前，粉葛的栽培面积不断扩大，并出现了许多栽培品种，因此不同来源药材之间有效生物活性成分的含量会有较显著的差异，从而影响药材质量。
广东、广西为粉葛药材的主要产地，药源丰富，本文采用比色法及高效液相色谱法对广东、广西所产的不同来源的粉葛中总黄酮及葛根素的含量进行了比较，为粉葛药材质量控制提供实验依据。
1 仪器与材料1.1 仪器P680高效液相色谱仪(戴安公司)； satorius BS 110S 精密天平；unic uv-2100紫外分光光度计（尤尼柯上海仪器有限公司）。
1.2 药材粉葛，产地：广东、广西，经广州中医药大学中药鉴定教研室鉴定，均为豆科植物甘葛藤的干燥根。
HPLC法测定颈复康颗粒剂中葛根素含量
HPLC法测定颈复康颗粒剂中葛根素含量
张雪荣;董小燕;索伟
【期刊名称】《中国药品标准》
【年(卷),期】2002(003)006
【摘要】目的:是建立可控的颈复康颗粒剂含量测定方法.方法:采用反相高效液相色谱法测定颈复康颗粒剂中葛根素的含量,以十八烷基硅烷键合硅胶为填料,甲醇:水(25:75)为流动相,检测波长为250nm.结果:该方法能理想地分离颈复康颗粒剂中的葛根素,并测定其含量.葛根素平均回收率为102.07%,精密度(RSD)为3.18%(n=5).结论:所建立的含量测定标准可行,可控.测定结果准确,能有效地反映颈复康颗粒剂的内在质量.
【总页数】3页(P56-58)
【作者】张雪荣;董小燕;索伟
【作者单位】河北承德中药集团有限责任公司,承德,067000;河北承德中药集团有限责任公司,承德,067000;河北承德中药集团有限责任公司,承德,067000
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.RP-HPLC法测定颈复康颗粒中葛根素的含量 [J], 李红芳;韩继永
2.HPLC同时测定颈复康颗粒中葛根素、芍药苷的含量 [J], 张科卫;李伟;池玉梅;崔小兵
3.HPLC同时测定颈复康颗粒中葛根素、芍药苷的含量 [J], 张科卫;李伟;池玉梅;崔小兵
4.HPLC法测定心泰颗粒剂中葛根素的含量 [J], 何维翔;冯雪梅;沙明
5.HPLC法测定葛根素葡萄糖注射液中葛根素及3′-甲氧基葛根素含量 [J], 赵晓莉;崔小兵;狄留庆
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HPLC测定益气升降汤中葛根素的含量
HPLC测定益气升降汤中葛根素的含量杨建明;曹亮;郑月霞【摘要】目的建立益气升降汤中葛根素的含量测定方法.方法采用高效液相色谱法对葛根素进行含量测定,使用C<,18>柱,流动相为甲醇-水(25:75),检测波长:254nm.结果葛根素的线性范围为40～200μg/mL,r=0.9992,平均加样回收率为98.93%,RSD=2.7%.测得益气升降汤中葛根素的含量为3.36mg/mL.结论该方法简便可靠,精密度好,分离度好,可用于益气升降汤的质量控制.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2011(009)016【总页数】2页(P12-13)【关键词】益气升降汤;葛根素;高效液相色谱法【作者】杨建明;曹亮;郑月霞【作者单位】河北北方学院基础医学院,河北,张家口,075000;河北北方学院附属第一医院,河北,张家口,075000;河北北方学院医学院药学专业2004级,河北,张家口,075000【正文语种】中文【中图分类】R284益气升降汤主要由葛根、黄芪、五味子等中药组成，具有扩张冠状动脉及脑血管作用，冠状动脉血流明显增加，降低心肌收缩功能，改善微循环作用。
临床上主要用于冠状动脉粥样硬化性心脏病、心绞痛治疗，对缺血性脑血管疾病也有较好的疗效。
葛根为益气升降汤的主要有效成分之一，其主要化学成分为异黄酮类化合物，葛根素为其代表性化合物，是药典中葛根药材和有关制剂的主要检测指标。
益气升降汤现行质量标准仅有性状的描述及检查项，尚无鉴别项及含量测定的内容，根据中药药性的配伍原则，主要为葛根，为更好地控制其内在质量，现对处方进行定性鉴别，应用高效液相色谱法测定主药葛根的有效成分葛根素的含量。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂SSI高效液相色谱仪（美国）；KQ-500B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；Sartorius BP2IID型电子分析天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；WFH-203B型三用紫外分析仪（上海精科实业有限公司）；SZ-97A自动三重纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂）；薄层层析硅胶板GF254型（青岛海洋化工厂）；葛根素对照品（中国药品生物制品检定所提供，含量测定用）；益气升降汤及阴性对照（自制）；甲醇为色谱纯，水为三重蒸馏水（药理实验室自制），其他试剂均为分析纯。
高效液相色谱法测定复方消渴滴丸中葛根素含量
高效液相色谱法测定复方消渴滴丸中葛根素含量戴薇;张锦【摘要】Objective To establish an HPLC method for the determination of assay and of puerarin in Fufangxiaoke Pills. Methods The chromatographic conditions were C18 columne quipped with a C18 column(250 mm ×4. 6 mm,5 μm), with the mobile phase of methanol : water(28 : 72),the flow rate was l.0mL/min and the detective wavelength was 250 nm, the injection volumn was 10 μL. Results The puerarin curves were linear over the concentration range of 83.68-836.8 μg/mL( RSD =0. 999 8), and th e average recovery was 99.08% for three different levels of the added amount of puerarin, RSD = 1. 09% ( n = 9). Conclusion The method is simple and reproducible. It can be used as the preparation of quality control methods.%目的建立复方消渴滴丸中葛根素的含量测定方法.方法采用高效液相色谱法,色谱柱为C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(28∶72),流速1.0 mL/min,柱温30℃,紫外检测波长250 nm,进样体积10 μL.结果葛根素质量浓度在83.68～836.8 μg/mL内与峰面积线性关系良好,r=0.9998(n=7).高、中、低3种不同质量浓度溶液的平均回收率为99.08％,RSD=1.09％(n=9).结论该方法简便易行、重复性好,可作为复方消渴滴丸的质量控制方法.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2012(021)023【总页数】2页(P19-20)【关键词】复方消渴滴丸;葛根素;高效液相色谱法【作者】戴薇;张锦【作者单位】重庆医科大学附属第二医院,重庆400010;重庆市药品检验所,重庆401121【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0复方消渴滴丸是由葛根、苦瓜、山药等药材经现代提取工艺制成的纯中药制剂，具有益气养阴、清热生津功效，临床用于治疗气阴不足所致的消渴以及2型糖尿病患者。
HPLC法测定保健食品葛枳胶囊中葛根素的含量
HPLC法测定保健食品葛枳胶囊中葛根素的含量潘丽丽;江帆【摘要】目的：建立葛枳胶囊中葛根素的含量测定方法。
方法：采用高效液相色谱法，色谱柱Diamonsil C18（5um，4．6mm×200mm），流动相为甲醇-36％乙酸-水=25：3：72，流速为0．8mL·min-1，检测波长为250nm。
结果：葛根素在0．06368～0．7005ug范围内线性关系良好，r=0．9999，平均回收率为103．39％，RSD为2．49％。
结论：该方法专属性强，准确可靠，重复性好，可用于葛枳胶囊中葛根素的质量控制与分析。
%Objective： To establish the determination method of puerarin in Gezhi capsules. Methods： HPLC method was used. The chromatographic column was Diamonsil C18 （5 um, 4. 6mm × 200 mm）. The mobile phase was methanolo36% aceticacid-water （25： 3： 72）. The flow rate was 0. 8mL . min-1 and the detection wavelength was at 250nm. Results： The linear of puerarin wasin the range of 0. 063 68 - 0. 700 5ug （ r = 0. 999 9）. The average recovery was 103.39% and RSD was 2. 49%. Conclusion： The method hasa good specificity, and it is accurate, reliable and reproducible. It can be used for the quality control of puerarin in Gezhi capsules.【期刊名称】《贵州师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2012(030)002【总页数】4页(P71-74)【关键词】葛枳胶囊;葛根素;保健食品;高效液相色谱法;含量测定【作者】潘丽丽;江帆【作者单位】贵州师范大学贵州省山地环境重点实验室贵州师范大学分析测试中心,贵州贵阳550001;贵州师范大学贵州省山地环境重点实验室贵州师范大学分析测试中心,贵州贵阳550001【正文语种】中文【中图分类】O652葛枳胶囊是开发中的保健食品，对化学性肝损伤有辅助保护功能。
HPLC法测定葛黄汤中葛根素含量
临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical 2019 年第 6 卷第 24 期2019 Vol.6 No.24180・实验研究・HPLC法测定葛黄汤中葛根素含量张艳君，吴宏辉，张海燕，刘应哲（西安医学高等专科学校，陕西西安 710309）【摘要】目的 测定葛黄汤中的葛根素含量。
方法 采用HPLC法对自行制备的葛黄汤中的葛根素含量进行测定。
结果 经HPLC法法测定所制备葛黄汤样品中的葛根素含量为0.77g·100g-1。
结论 采用HPLC法测定葛黄汤中的葛根素含量必须要正确选择波长、流动相与提取剂，进而提升检测的准确性。
【关键词】HPLC；葛黄汤；葛根素；含量测定【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8242.2019.24.180.01在传统中医当中葛黄汤是一种非常常用的中药组方，具有和胃清热止血的功效，其主要成分为葛花与黄连。
现代医学研究证明葛黄汤中葛根素的含量会对药效产生直接影响。
基于此种情况，在本文当中采用HPLC法对葛黄汤中的葛根素含量进行了测定，希望能够有效控制葛黄汤中葛根素的含量。
1 仪器与相关试剂1.1 仪器设备科捷LC600C高效液相色谱仪（南京科捷分析仪器制造有限公司），BT125D型电子天平(北京赛多利斯仪器天平有限公司)。
UV-2450紫外-可见分光光度计(日本岛津公司)。
1.2 实验试剂葛黄汤（自行制备，共计分3个批次制备）、葛根素（来源：四川康复药业；可直接使用，不需要进行二次处理）、高纯水、甲醇。
2 测定实验2.1 色谱条件设定填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：水：甲醇（3:1）；检测波长设定为260 nm。
2.2 相关溶液制备阴性样品制备：在本文的实验中阴性样品制备采用自制方式制备，主要成分为无葛根的阴性样品。
样品溶液制备：取自行制备的葛黄汤0.25 g，精密量取浓度为30%的无水乙醇100 ml，经超声溶解，补充溶解前后重量，经过滤得到样品溶液，备用。
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图 1 葛根素标准品紫外光谱图 图 3 葛根素对照品色谱图 1. 4 . 2 标 准曲 线的 绘 制 精 确吸 取 葛根 素 储备 液 0. 20, 0. 40, 0. 60, 0. 80, 1. 00, 1. 50, 2. 00 mL 分别置于 25. 00 mL 比 色管中 , 用 75% 乙醇定容 至刻度 , 混匀。以 标准 零管调 节零 点, 以 1 c m 比色杯 于 250 nm 波 长下 测定 吸光 度 , 并绘 制标 准曲线 ( 标准曲线见图 2) 。得回归方程 : C = 15. 00305 r2 = 0. 9999 [ A bs] - 0. 05399
A bs tract : K udzu R oots Starch w h ich w as d issolved by hot w ater , and set tled by ethanol absolu te, then M acro reticular resins w as used to separate and purify pu erarin from it , and extract Puerarin by U ltrav iolet Spectropho tom etry, or d eter m in e the con tent of puerarin by H PLC directly. E xperi m ents sh ow ed that the conten t of Puerarin is low in K udzu R oots S tarch , the U ltraviolet Spectrophotom etry s resu lts ism ore h igh er than HPLC, but the h igh er sam p les , tw o resu lts are close . So w e m ay use the HPLC to de ter m inate Pu erarin of th e K udzu R oots Starches , for th e con tent of the Pu erarin in w ild . Puerarin Lobata, theU ltravio let S pectrophotom et ry can sub st itu te theH PLC. K eywords : Puerarin ; U ltraviolet sp ectrophotom etry; HPLC; M acro reticu lar res ins
8]
分析柱 : C 18 反相柱 ; 柱温 : 30
;检
测波 长 : 250 nm; 进样 体积 : 20 L; 定 量方 式 : 峰 面积 ; 流 动 相 : 乙 腈 + 0. 02 m o l/L 乙 酸 铵 = 85 + 15; 流 速 : 1. 000 mL /m in 。 1. 5 . 2 标准曲线的绘制与 样品测定 精 确吸取葛根 素储备 液 0. 20, 0. 40 , 0. 60 , 0. 80 , 1. 00 , 1. 50 , 2. 00 mL 分 别置 于 25. 00 mL比色管中 , 用水定容至刻度 , 混匀 , 同时取 1 . 3 离心 后的样品液过 微孔 < 0. 45 m 滤膜 后用 高效 液相 色谱 仪测 定。回归方程为 : W = - 9. 03147 r2 = 0. 99993。 标准及样品液液色 谱图分别见图 3 、 图 4 。 10- 7 + 1. 03819 10- 10 A
1 实验材料与方法
1. 1 实 验材料 葛根素标准储备液 ( 100 公司 ; 乙腈 : 色谱纯 , 上海陆都化学 试剂厂 ; 无水乙醇 ; A B- 8( D101) 大孔树脂 : 天津市光 复精细化工研究所 ; LC- 10A 型高效液相色谱仪 : 日本岛津制作 所 ; 分析天平 : 精确到 0. 0001 g; TU - 1901 紫外分光 光度 计 : 北 京普 析通 用仪 器有 限责 任公司 ; 高速粉碎机、 高速离心机。 1. 2 主 要试剂 1. 2 . 1 葛根素标 准储备液 精密称 取葛根素标 准品 5 m g , 保 存备 用。此溶 液每 置于 50 mL 容量瓶中 , 用少 量乙 醇溶解 并加 水定容 至刻 度 , 摇匀。作为标准母液 置于 冰箱中 4 毫升相当于 100 g 葛根素。 1. 2 . 2 A B- 8( D101) 大孔树脂 可使用
作者简介 : 张建辉 ( 1982- ) , 男 , 湖 南省食品 质量监督 检测所助理 工 程师。 E m ai: l zh angjian251@ hotm ai. l com 收稿日期 : 2006 - 08- 11
通过以 下进行纯化 处理方
: 将 AB 8( D101) 型 树脂 浸泡 于 0 . 4 ~ 0. 5 倍 体积
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第 22卷第 6 期
张建辉等 : H PLC 法和紫外分光光度法测定葛根淀粉中葛根素含量的研究 2. 3 最 低检出限比较 2. 3 . 1 紫外分光光度法最 低检出限 精 确吸取一定 量的葛 根素标准溶液 , 按紫外 分光光度法连续测定 11 次 , 由紫外分 光光度计自动计算 SD, 然后按 公式 : 最 低检出 限 = 3 精 确吸取葛 根素标准 SD 1 / K (K 为标准曲线 的斜率 ) 。 经计 算得 紫外 分光 光度 法得 最低检出限为 0. 0225 g /mL。按称样 5 g 定容至 250 mL, 然 后取 5. 00 mL 离心后的样 品液 洗脱 至 100 mL 计算 , 紫 外分 光光度法的最低检出限 为 22 . 50 m g /kg 。 2. 3 . 2 HPLC 法最低检出限 精确吸取葛根 素标准溶液 , 经 g /mL,
第 22 卷第 6 期 2 0 0 6 年 1 1月
FOOD & M ACH I NERY 食 品 与 机 械
V o. l 22 , No . 6 N ov. , 2006
HPLC 法和紫外分光光度法测定 葛根淀粉中葛根素含量的研究
Comparative studies on puerarin deter m ination of kudzu roots starch by ultravio le t spectrophotometry and HPLC 张建辉
1
1
杨代明
1
1
吴廷瑞
2
2
熊恩庸
2
2
李时令
2
2
ZHANG J ia n hui
YANG D ai m ing
WU T ing rui
X IONG E n yong
L i Shi ling
(1 . 湖南省食品质量监督检测所 , 湖南 长沙
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
410002; 2. 张家界市质量技术监 督局 , 湖南 张家界
427000 )
( 1. H unan F ood Q uality Sup ervision and T es ting Sector, Changsha, H unan 410128, China; 2 . Q uad ity and T echnology Supervision Bureau of Zhangj iajie C ity, Zhangj iajie, H unan 427000, China) 摘要 : 葛根淀粉经热水溶解糊化后 , 用无水乙 醇沉降淀粉 , 然 后经大孔树脂分离 纯化葛 根素 后用紫 外分 光光 度法测 定葛 根素含量 , 或者 用 HPLC 法直 接 测 定葛 根 素含 量 。 实验 表 明 : 对葛根 素 含量 低 的 样 品 , 紫 外 分光 光 度 法 测定 结 果 较 HPLC 法偏高 , 而葛根素含量高的样品 , 两法测定结 果较为接 近 。 因此 , 对葛根淀粉中葛根素 的检测 , 宜采 用 HPLC 法 , 而 紫外分光光 度法 用 于葛 根中 葛 根素 含量 的 测定 , 可 以 替代 HPLC 法 。 关键词 : 葛根素 ; 紫外分光光度 法 ; H PLC; 大孔树脂
淀粉质量的 优劣 , 葛 根 素含 量的 高 低是 一 个很 好的 判 断标 准。目前 , 对葛根素的 测定 方法主 要有 紫外 分光光 度法、 薄 层色谱法、 高效液相色谱法和毛细管电泳法等 [ 3, 4] , 高 效液相 色谱法是最常用的方法 , 紫外分光光度法 对设备和检 测人员 素质要求较低 , 因此适用于企业内部自 主控制产 品质量。本 研究分别用 HPLC 法和紫 外分 光光 度法 测定 了葛 根淀 粉中 葛根素的含量 , 并作了优劣比较。
图 4 样品色谱图
2 结果与分析
2. 1 精 密度比较 2. 1 . 1 紫外分光 光度法 精密 度实验 吸取一定浓度的葛根
素标准溶液 , 按 1. 4 . 2 每隔 30 m in 测定一次 , 连续测定 5 次, 次 日再用同样方法连续测定 5 次, RSD 分别为 0 . 78 %和 1 . 02 %。 图 2 样品紫外光谱图 2. 1 . 2 HPLC 法精密度 实验 吸取一 定浓 度的 葛根素 标准
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食品安全与检测
( 相当于树脂体积的 2 /5~ 1 /2) 的 无水乙 醇中 , 浸泡 24 h 后 装柱 ( 高径比为 10: 1), 再以 无水乙醇以 4 mL /m in 的 流速通 过树脂层 , 洗至洗出液 1 mL 加 水 9 mL 不显 白色浑 浊为 止 , 再用 水以同 样流速 洗净乙醇 。继以 5% 的 盐酸溶 液 40 mL, 以 4 mL /m in 的流速通过 树脂柱 并浸 泡 2~ 4 h, 而后用 纯化 水以同样 流速 洗 至 流出 水 为中 性 , 继 以 5 % 氢 氧 化 钠溶 液 40 mL , 以 4 mL /m in 的流速通过树脂柱 , 并 浸泡 2~ 4 h , 而后 用纯化水以同样流速 洗至流出水为中性 , 备用。 1. 3 样品处理 称取 5. 0000 g试 样 ( 颗粒 状的 试样 须预 先粉 碎 ) , 置于 250 mL 容量瓶中 , 加 入少 许蒸 馏水 湿润 样品 后加 煮沸 的蒸 馏水接近至刻 度 , 冷却 后以蒸 馏水 定容至 刻度 , 摇 匀。准确 移取 25 . 00 mL 上述样品溶液于 50 . 00 mL 容 量瓶中 , 加无水 乙醇并定容至刻度 , 摇 匀、 静 置 , 高速离 心机 离心 10 m in ( 转 速 3 300 r/m in), 上清液备用。 1. 4 紫外分光光度法测定 1. 4 . 1 测定波长的选择 取标准 溶液 , 以 75% 乙醇为 空白 , 1 nm 处有最大 吸收。 在 200~ 400 nm 范围内扫描。在 250 标准对照品扫描图见 图 1。 1. 4 . 3 样品的分离纯化与 测定